MARCADORES CADIACOS Dra. Brenda Apaza C. • REGENTE LABORATORIO SSU – ORURO CORAZON ORGANO VITAL = MUSCULO ESQUELETICO CORAZON - MUSCULO ESQUELETICO ALTAS CONCENTRACIOENS DE ENZIMAS Y PROTEINAS ATP CONTRACCION MUSCULAR ENZIMAS (CATALIZADORES) Prot. Donde la Estr. 3ria. Importa para el funcionamiento, factores que afectan a la estructura terciaria como la tº, la fuerza iónica, pH pueden alterar la capacidad de catalizadora de la enzima. ENZIMAS (ACT. INTRACELULAR) Concentración de la enzima en el interior de las células, los niveles plasmáticos de enzimas, normalmente muy inferiores al 1% de los niveles celulares CAUSAS DE ELEVACION Muerte de las células que las contienen. Actuación de las fosfolipasas Permite el vertido de las macromeléculas plasmáticas Recambio celular, razón de los niveles plasmáticos enzimáticos que conocemos como valor de referencia. Aumento de síntesis celular (osteoblastos, placenta, ejercicio intenso músculos). Medicamentos que estimulas las enzimas microsomales como el etanol, agentes antiepilépticos aumentan la GGT, AST La ingestión de comida produce una liberación de fosfatasa alcalina intestinal al fluido linfático y aumentar transitoriamente los niveles plasmáticos de F Alc. Disminución de la eliminación de las mismas enzimas de la circulación (Am-Lip) CAUSAS DE DISMINUCION Inhibidores competitivos = SUCCINIL COLINA COMPITE CON LA ACTIL COLINA POR UNA COLINESTERASA Inhibidores no competitivos = DE LA CK y ALP ES EL CITRATO QUE FORMA COMPLEJOS CON EL MG Y ZN importantes como cofactores necesarios para la enzima; estos reducen la capacidad de la Enzima para convertir el sustrato en producto, disminuye la velocidad de reacción. ANALISIS POR METODOS ENZIMATICOS: DETERMINANDO LA ACTIVIDAD ENZIMATICA A TRAVEZ DE LA MEDIDA DE LA VELOCIDAD DE LA REACCION CATALIZADA POR LA ENZIMA. LOS INHIBIDORES ENZIMATICOS AFECTAR LA ACTIVIDAD ENZIMATICA, PERO NO A LA CANTIDAD DE ENZIMA PRESENTE. ALGUNAS ENZIMAS SE INACTIVAN CUANDO SE ALMACENAN MAS DE 24 HRS O SE MANTIENEN A TEMPERATURA AMBIENTE, EJEMPLO LA CK SE INACTIVA DEBIDO A LA FORMACION DE PUENTES ENTRE LOS GRUPOS SULFIDRILO DE LA ENZIMA (DISMINUYE ACTIVIDAD EN METODOS ENZIMATICOS PERO NO METODOS DE EIA) UNA VEZ QUE LAS ENZIMAS LLEGAN A LA CIRUCULACIÓN SON ESCINDIDAD POR ACCON DE LAS PROTEASAS QUE DAÑAN EL SITIO CATALITICO PERO NO AFECTAN AL SITIO RECONOCIDO POR EL AC. ((DISMINUYE ACTIVIDAD EN METODOS ENZIMATICOS PERO NO METODOS DE EIA) Por métodos de EIA: CK-MC, CERULOPLASMINA, AMILASA PANCREATICA Y LA TRISPSINA. VARIABLES IMPORTANTE PARA MEDIR LA ACTIVIDAD ENZIMATICA TEMPERATURA, no debe ser mas/menos 1ºC (por cada 10º de aumento de Tº la actividad enzimática se duplica, pero las enzimas se desnaturalizan y se vuelven inacitivas como la CK comienza a deteriorarse a 37ºC in vitro PH todas las enzimas tienen su pH optimo (que tipo de agua? LA CONCENTRACION DE SUSTRATO LA CONCENTRACION DE COFACTORES LD medida utilizando la reacción normal es habitualmente un tercio de la medida utilizando la reacción inversa. Lipasa medida en presencia de COLIPASA, presenta una actividad de 5 a 10 veces superior a la actividad de Lipasa de medida sin su cofactor. CONOCIMIENTO DEL TIPO DE REACCION QUIMICA Y OBLIGATORIO EL PRINCIPIO DE LA REACCION Reacción acoplada de OLIVER – ROSALKI donde se utiliza CK inversa, produciéndose ATP, que se usa en una segunda reacción que produce G6P ; y una tercera reacción que produce NADH que es el indicador de la reacción. OJO otras reacciones pueden generar ATP, ó se encuentra en los eritrocitos por ejemplo PATOLOGIAS MAS FRECUENTES DE LAS MUSCULATURA CARDIACA FALLA CARDIACA (OMS) DOLOR TORAXICO FALLAS EN EL ELECTROCARDIOGRAMA ALTERACION EN LA CONCENTRACION DE MARCADORES CARDIACOS ENZIMAS: CK, LD, AST PROTEINAS: MIOGLOBINA TROPONINA BNP NT pro BNP Almacenamiento de E en los tejidos principalmente en el músculo. CONTRACCION: CREATINA FOSFATO + ADP Creatina + ATP DESCANSO: ATP + CREATINA CREATINA FOSFATO + ADP. CK (bioquímica y fisiología) CK dímero de unidades catalíticas PM: 40 kDa C = cerebro (B = brain) M = músculo CEREBRO Y MUSCULO LISO; dominante CK BB pero no atraviesa la B.H. Músculo Esquelético CK MB; 0% En las fibras de tipo 1 CK total: 1% en la fibras de tipo 2 CK total 2-6 % En el corazón :CK MC 15 – 20 % su distribución no es uniforme existe mayor concentración en el lado derecho que el izquierdo RANGOS DE REFERENCIA: cantidad de masa muscular, edad, sexo, raza (africanos 30% mas q los europeos), actividad muscular. Los valores pueden variar según la condiciones de cada laboratorio • CK TOTAL Varones 10-80U/L 15-130U/L 24-195U/L Mujeres 10-70U/L 15-110U/L 24-170U/L • CK MC CK-MB 10 U/L 16 U/L 25 U/L IAM IAM 1>10-20% Miocarditis CK (bioquímica y fisiología) • • • • Métaloenzima (Zn) Ruta glucolítica Citoplasma de todas las células y de tejidos del cuerpo Tetrámero formado por dos unidades activas C de corazón M de músculo con PM 134 KDa . Sin importancia la diferencia entre sexo Con la edad mayor a 65 años suele elevarse Ejercicios aumentos de 25 % Hemólisis leve es muy significativo Contacto con coágulos puede elevar resultados. E L E V A D O • Hb 2-3hrs • Pico máximo 7-10hrs • Normalidad 24hrs Después IAM Miocarditis • Muy inespecíficas. • LD, AST junto a la CK • Muy elevado en A. megaloblasticas, hemolíticas, tumores malignos avanzados, sepsis. • Enzima transferasa • La AST es citoplasmática y mitocondrial. Esta en hígado, miocardio, músculo esquelético, riñones, cerebro y páncreas • Infarto agudo de miocardio Se eleva a las 8hrs Pico máximo a las 36hrs Normalidad 3-4días • Insuficiencia cardiaca • Hemoproteína que se une al O2, presente en: Daño liberación Hb • Hb 2-3hrs • Pico máximo 7-10hrs • Normalidad 24hrs Después IAM Miocarditis En el musculo estriado y musculo cardiaco Función Contracción muscular Troponina C (fijadora de calcio) contracción Troponina I (inhibidora de la interacción actinamiosina) relajación Troponina T (fijadora de tropomiosina) • Troponinas 2-3hrs • Pico máximo 12-16hrs • Elevados 4-9 días incluso hasta 14 dias Después • MEDICIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA. • medida de la velocidad de la reacción • Como las enzimas son proteínas se puede medir por técnicas de inmuno ensayo, electroforesis, estos miden la cantidad de enzima. PARA TOMAR EN CUENTA • Inhibidores enzimáticos solo afectan a la A.E. pero no la cantidad de enzima. • Inestables debido a la formación de puentes entre los grupos sulfidrilo de la enzima. • Las deficiencias congénitas. • Una vez q las enzimas llegan a la circulación normalmente son escindidas por accion de las proteasas. UI .- cantidad de E que cataliza la conversión de un micromol de sustrato en producto por minuto 1 kat.- cantidad de UE cataliza la conversión de un mol de sustrato en producto por segundo. 1 UI = 16.7 nkat.
