Procesos Tecnológicos

Procesos tecnológicos. Repaso unidad 1-2-3-4
UNIDAD 1
ELEMENTOS DE LABORATORIO
En el laboratorio podemos encontrar distintos
elementos de diferentes tamaños, de vidrio o de
plástico.
Existen tubos de vidrio y plástico.
Los más pequeños son los tubos de hemólisis. Tienen
un diámetro de 0.5 cm y una longitud de 10 cm. Sirven
para recoger la sangre extraída y realizar estudios de
coagulación o pruebas serologicas.
Los que le siguen en tamaño son los tubos de ensayo,
tienen 1 cm de diámetro y 10-15 cm de longitud. Sirven
para realizar los diferentes estudios que componen a
los análisis clínicos. Cuando tienen la marca PIREX o
I.V.A significa que pueden ser sometidos al calor
directo. Los demás deben ser calentados con
movimientos oscilantes ya que si es directo el
sobrecalentamiento puede ocasionar su rotura.
Los tubos de centrifuga tienen 1 cm de diámetro y 10
cm de longitud. Sirven para separar material como
materia fecal, sedimento urinario o coagulo del suero.
Están preparados para soportar la fuerza centrifuga
ejercida por la centrifuga.
Los capilares son tubos delgados, finos y pequeños
que sirven para medir el hematocrito del paciente.
Pueden venir con o sin anticoagulante. Los que tienen
presentan un borde rojo y los que no un borde azul.
Tienen sus extremos abiertos para que la sangre suba
por capilaridad, luego se cierra uno de los extremos
con plastilina, se lleva a la microcentrifuga.
Materiales volumétricos
Se utilizan para medir volúmenes de líquidos. Entre
ellos se encuentran: probeta, pipeta, matraz, balón y
erlenmeyer.
Enrasado: proceso por el cual el líquido es llevado a
volúmenes.
En la superficie del líquido se presentan curvaturas
llamadas MENISCO. El menisco puede ser cóncavo,
como el agua, o conexo como el aceite.
Para enrasar el liquido el menisco debe quedar por
arriba de la marca del volumen que queremos medir.
Pipetas
Son tubos de vidrio para medir diferentes volúmenes.
Las mas usadas tienen volúmenes de 1-2-5-10 ml.
También hay de 0,1 y 0,2 ml, llamadas pipetas
serológicas.
Las pipetas presentan en el extremo superior un color.
Por ejemplo las de 1 ml amarillo, las de 2 ml blanco, las
de 5 ml azul y las de 10 ml naranja.
Pipetas automáticas
Son pipetas que sirven para cargar una mínima
cantidad de volumen. Presenta un botón con dos
topes: el primer tope sirve para cargar la muestra y el
segundo para descargarla
Probetas graduables
Son cilindros graduados de vidrio que permiten
conocer el volumen de una muestra. Hay de 100-200250-500-1000-2000 ml. Sirven para medir el volumen
de una muestra o para preparar soluciones. Si la
muestra es superior a 2000 ml se deberá hacer la
primera medición, recoger un poco en un tubo de
ensayo, se descarta el líquido de la probeta repitiendo
la acción hasta medir todo el líquido.
Matraz
Es un recipiente de vidrio con un cuello llamado aforo.
Esta calibrado para medir siempre el mismo volumen.
Viene en volúmenes de 10-25-50-100-250-500-10002000 ml. Sirve para preparar soluciones que deben
medirse con exactitud.
Balón
Tiene el mismo uso del matraz, la diferencia es que
éste tiene fondo redondo y el del matraz es plano. Así
que se lo prefiere para calentar soluciones, debido a
su forma redonda.
Erlenmeyer
Es un recipiente de vidrio con forma triangular que
sirve para preparar soluciones. Hay de diferentes
volúmenes. No son buenos para medir volúmenes ya
que presentan mucho error.
Dispenser o dispensador
Es una bomba que permite dispensar siempre el
mismo volumen de reactivo. El volumen se gradúa
previamente evitando el uso de las pipetas. Se coloca
el reactivo ya preparado.
Centrífuga
Sirve para separar fases de un sistema. Por ejemplo
materia fecal, sedimento urinario o suero coagulo
sanguíneo. La fuerza centrifuga hace que los
materiales mas pesados se depositen en el fondo del
tubo y los mas livianos queden en el sobrenadante. La
centrifuga tiene una velocidad que varia de las 5005000 RPM. Siempre se debe usar la velocidad óptima
según lo que se quiera separar. Por ejemplo para
separar sedimentos de orina se usa 3500-4000 RPM.
Microcentrífuga
Tiene el mismo uso que la centrifuga, solo que la
microcentrífuga centrifuga nada mas que los
capilares. Alcanza 12000 RPM.
Baño maría
Sirve para mantener el agua a una temperatura
determinada. En las reacciones químicas que ocurren
en los análisis clínicos la temperatura del agua debe
mantenerse a 37ºC, ya que es la temperatura
fisiológica.
Microscopio
Sirve para ver aumentadas las imágenes y así estudiar
las estructuras celulares.
Espectrofotómetro
Sirve para medir la intensidad de color. En las
reacciones químicas el color es proporcional al
metabolito en estudio, así que a mayor color mayor
concentración.
Extracciones
Las extracciones se realizan con distintos elementos
que son los siguientes.
Jeringas
Deben ser descartables. Vienen en volúmenes de 2,55-10-20 ml. Las de 10 ml son las más usadas.
Agujas
También deben ser descartables. El calibre que deben
tener es 25/08 o 21 g1. Si el calibre es menor se corre
el riesgo de que la sangre se hemolice.
Lancetas
Son instrumentos de metal que sirven para pinchar.
Presentan un tope que impide seguir introduciéndola.
Se utiliza para hacer la prueba de coagulación,
también llamada tiempo de sangría.
Otros elementos
Otros elementos que podemos encontrar en el
laboratorio son las pinzas para tubos, los cubre
objetos, los porta objetos, papel de filtro y
anticoagulantes
Anticoagulantes
Impiden que la sangre coagule. Se usan diferentes
anticoagulantes dependiendo del estudio que se
realice. Esta la heparina (no interfiere en las
reacciones químicas), el edta y la mezcla de wintrobe
que permiten obtener sangre entera y realizar el
hemograma. También se utilizan anticoagulantes
como el citrato de sodio y fluoruro de sodio. El primero
sirve para pruebas de coagulación y
eritosedimentación. El fluoruro de sodio es un
inhibidor enzimático que sirve para realizar el dopaje
de glucosa. En este proceso se frena la glucólisis
(consumo de glucosa por parte de los glóbulos rojos y
blancos), así se obtiene un valor más exacto de la
glucemia.
Nomenclatura
Son términos y terminaciones que indican con que
material se debe trabajar o que patología presenta el
paciente.
EMIA
Son los estudios que se deben realizar en sangre. Por
ejemplo: glucemia, creatininemia, uremia y uricemia.
URIA
Son los estudios que deben realizarse en orina. Por
ejemplo: glucosuria, creatininuria y uricosuria.
Hemólisis
Es la rotura de los glóbulos donde se libera
hemoglobina. La sangre hemolizada no debe utilizarse
para realizar análisis, ya que el color que presenta
interfiere en el resultado final.
Plasma
Es la parte líquida de la sangre ya extraída, de color
amarillo. Tiene intactas a todas las proteínas que
interfieren en el proceso de coagulación.
Suero
Es la parte líquida de la sangre ya extraída que no
posee a las proteínas del proceso de coagulación
porque se consumieron.
Leucopenia
Disminución de los glóbulos blancos por debajo de su
valor normal. Por ejemplo 4000 ml3 de sangre podría
ser una infección viral.
Leucocitosis
Aumento de los glóbulos blancos por arriba de su
valor normal. Por ejemplo: 1000 ml3 de sangre podría
ser una infección bacteriana.
Glucólisis
Consumo de la glucosa por parte de las células
Diurésis
Es el volumen de orina emitido en un tiempo
determinado (2-12-24 horas).
Sangre entera
Es la sangre extraída con anticoagulante y sus
elementos no fueron separados.
Balanza
Es un instrumento de medición del cual dependen los
resultados analíticos. Tiene una presición que va
desde 0,1 microgramo a 0,1 miligramo.
Los factores físicos son los puntos más importantes a
tener en cuenta, ya que no se pueden eliminar las
interacciones con el medio ambiente.
Otros puntos importantes son:
Localización de la balanza
 Sala de medir: Debe tener una entrada y pocas
ventanas. Así se evitan las corrientes de aire y la
luz directa.
 Condiciones de la mesada: Debe estar firme en el
piso así hay un mínimo número de vibraciones.
Tiene que ser rígida y situarse en lugares sólidos
como los rincones.
 Condiciones ambientales: No debe haber luz solar
directa, tampoco hacer mediciones cerca de
fuentes de calor o de viento, y tampoco cerca de
la puerta.
Cuidados operacionales
 Cuidados básicos: Verificar la nivelación de la
balanza y siempre debe estar conectada al
toma corriente. También debe estar siempre
encendida para mantener el equilibrio térmico
de los circuitos.
 Para pesar: Se debe utilizar un frasco del
menor tamaño posible. Éste y su contenido
deben estar a temperatura ambiente. Nunca
hay que agarrar el frasco directamente con las
manos al poner o sacar de la balanza. El frasco
debe situarse en el medio del plato.
 Siempre verificar que la lectura sea cero si no
se debe tarar la balanza hasta llevarla a cero.
 Se debe calibrar la balanza cuando se usa por
primera vez o si se cambia de lugar.
 Mantenimiento: el plato de medida siempre
debe mantenerse limpio.
Influencia física sobre las pesadas
Cuando en la lectura hay variaciones de más o de
menos, o si esta errada se debe a las influencias
físicas como la temperatura, variaciones de masa
por humedad por desecamiento, causas
electroestáticas y presencia de campos
magnéticos.
Balanza granataria y analítica de platos
Estos tipos de balanzas presentan una aguja
llamada fiel que marca el medio de la balanza. Si no
esta en el medio hay que nivelarlo.
Vienen con pesas de 10-50-100 gr. Y chapas de 1050-100-200 ml.
Es importante que tengamos otras consideraciones
con estas balanzas:
 No hay que tocar ninguna pieza directamente
con las manos
 No deben estar expuestas a corrientes de aire,
luz solar directa o fuentes de calor.
 La base debe ser rígida y aislada de
vibraciones.
 Lo que se pesa de be estar sobre un papel de
filtro y no directamente sobre los platos.
 Si presenta campana debe mantenerse
cerrada, salvo para poner o sacar cosas.
 Si alguna pieza se ensucia con una sustancia
química limpiar inmediatamente.
 No tocar las pesas directamente con las manos
sino con las pinzas provistas.
UNIDAD 2
SISTEMAS HOMOGÉNEOS Y HETEROGÉNEOS
Sistema heterogéneo
Es el sistema en el cual se distinguen diferentes
partes. Están constituidos por dos o más fases. Por
ejemplo: el agua y aceite, agua y arena, azúcar y
harina.
Fases de un sistema
Es la parte homogénea de un sistema, separada por
límites físicos. Por ejemplo el sistema heterogéneo
agua y arena: tiene dos fases, una es el agua y la otra
es la arena.
Sistema homogéneo
Es el sistema en el cual sus propiedades físicas y
químicas son iguales en todos sus puntos. Por
ejemplo: agua y alcohol, sal disuelta en agua.
Los sistemas homogéneos se clasifican en sustancias
puras y soluciones.
Sustancias puras
Son aquellas formadas por una sola sustancia y que
poseen propiedades específicas. Por ejemplo el agua.
Soluciones
Son sistemas homogéneos que pueden separarse en
sus componentes primarios (sustancias puras).
Fraccionamiento del sistema
Es cundo se separa el sistema homogéneo en dos o
mas sustancias puras.
Fraccionamiento de un sistema homogéneo
Destilación
Es el proceso por el cual se transforma agua en vapor
que luego se condensa por enfriamiento.
Según la solución con la que se trabaja se emplea la
destilación simple o destilación fraccionada.
Destilación simple
Sirve para separar un disolvente de las sustancias
sólidas disueltas en él.
Se usa para obtener, por ejemplo, agua destilada.
 Agua destilada: se coloca el agua en un balón con
un tubo lateral con un refrigerante. Se tapa el
balón con un termómetro. Cuando el agua hierve
a 100ºC los vapores se condensan en el
refrigerante. El líquido destilado es recogido en
un vaso de precipitado o en un erlenmeyer. La
operación termina cuando queda un cuarto de
líquido inicial.
Destilación fraccionada
Es para separar dos o más líquidos con distintos
puntos de ebullición
Cristalización
Es para separar soluciones sobresaturadas a
temperatura ambiente.
 Solución sobresaturada: El exceso de soluto no
se puede disolver.
 Solución saturada: es donde el sotuto y el
disolvente se mantienen en equilibrio.
Si el exceso de soluto se calienta se forma un sistema
meta estable hasta llegar a un sistema homogéneo.
Por enfriamiento el soluto forma cristales en el fondo
del recipiente. Si se produce rápido se forman
cristales pequeños, si se produce rápido tendrán un
tamaño mayor.
Fraccionamiento de un sistema heterogéneo
Solubilización
Es cuando se separa a un sólido de otro. Por ejemplo:
agua, sal y arena. La sal se disuelve en el agua, por
otro método se separa la arena.
Filtración
Es para separar una fase líquida de una sólida
filtrando la solución. Se emplea un papel de filtro. Las
partículas en suspensión son retenidas en él mientras
que el líquido atraviesa los poros del filtro.
Decantación
Separa un líquido de un sólido mediante su diferencia
de densidad. Se utiliza una ampolla de decantación
que hace que el soluto o líquido más denso decante
primero hacia el fondo y el líquido de menor densidad
se quede en la parte superior.
Centrifugación
Se usa para separar fases mediante la fuerza
centrífuga que ejerce la centrífuga.
Levigación
Es el arrastre por una corriente de agua. Arrastra las
partículas más livianas dejando las más pesadas.
Tamización
Se emplea un tamiz que retiene a las partículas más
grandes dejando pasar a las más finas.
Sublimación
Es cuando se pasa del estado sólido al gaseoso sin
pasar por el líquido. Cuando se enfría se solidifica de
nuevo.
UNIDAD 3
SOLUCIONES
Una solución es una mezcla homogénea de dos o más
componentes, que pueden ser líquidos, sólidos o
gaseosos.
Una solución liquida se forma cuando se disuelve en el
otra sustancia líquida, sólida o gaseosa.
Cuando el disolvente es agua hablamos de una
solución acuosa.
 Soluto: es lo que disolvemos en la solución
 Solvente: es el líquido que disuelve al soluto
Las soluciones tienen una concentración determinada
según los gramos de soluto disueltos en un
determinado volumen de solvente.
Concentraciones
Las concentraciones se pueden expresar como:
% P/V (peso en volumen)
Se usa cuando se disuelve un sólido en un líquido. Por
ejemplo el cloruro de sodio al 10% P/V: se disuelven 10
gr de cloruro de sodio en 100 ml de agua.
% V/V (volumen en volumen)
Se usa cuando se mezclan dos líquidos. Por ejemplo:
solución al 10% V/V de etanol. Se mezclan 10 ml de
etanol con 90 ml de agua.
% P/P (peso en peso)
Se puede aplicar en los casos anteriores. Por ejemplo:
una solución de glicerina al 20% P/P en agua. Disuelvo
20 gr de glicerina en agua hasta tener un peso final de
100 gr.
Soluciones molares (M)
Es cuando los gramos de soluto se expresan en moles
y están disueltos en la solución en 1 litro de solvente.
Un mol equivale al peso molecular (suma de los pesos
atómicos).
Equivalente gramo o peso equivalente (P eq)
Cantidad de un elemento que es capas de combinarse
con 8 gr de oxígeno y 1 gr de hidrógeno.
Peso equivalente de un ácido
Se divide el peso molecular por cantidad de átomos de
hidrógeno
Peso equivalente de una base
Se divide el peso molecular por el número de grupos
hidróxidos.
Peso equivalente de una sal
Se divide el peso molecular por el número de cargas
positivas del catión o de cargas negativas del anión.
Normalidad (N)
Contiene el peso equivalente de una sustancia por litro
de solución.
UNIDAD 4
EL MICROSCOPIO ÓPTICO Y OTROS
El microscopio óptico consta de tres partes que son la
mecánica, la eléctrica y la óptica.
 Parte mecánica: en esta parte se encuentra un
revólver giratorio con tres objetivos de una
platina donde se colocan los preparados.
 Parte eléctrica: se encuentra el pie o base que
contiene una lámpara que ilumina al preparado.
 Parte óptica: que tiene una base y el brazo
(soportes). Posee tres sistemas de lentes: el
condensador que proyecta una luz sobre el
preparado, tiene un diafragma que controla esa
cantidad de luz; los objetivos proyectan una
imagen aumentada del preparado y presentan
aumentos de 5x, 10x, 40x y 100x; por último están
los oculares que se ubican en el cabezal y siguen
aumentando la imagen, con aumentos de 5x y 10x.
La ampliación total se da por la combinación de
lentes: se multiplican el aumento del objetivo por
el del ocular.
Límite de resolución
Es la capacidad de separar detalles y es la mínima
distancia que debe haber entre dos puntos para que
se puedan individualizar.
Objetivos
Tienen grabados diferentes datos, como el aumento,
la abertura numérica (límite de resolución) y el grosor
del cubre objetos (mm).
El aumento de 10x sirve para enfocar la muestra con
mayor presición, para recuento de leucocitos y para
test de Graham. El de 40x sirve para ver sedimentos
urinarios, formas leucositarias y parasitológicos. El de
100x para tinciones de Graham o pap. Los dos últimos
aumentos sirven también para ver preparados teñidos
y se usa aceite de inmersión (para visualizar
correctamente el preparado).
Manejo y uso del microscopio
1. se baja toda la platina
2. se coloca el preparado en la platina con el
diafragma cerrado.
3. se enfoca con el objetivo de 10x. y se sube la
platina con el tornillo macro, hasta ver algún
elemento del preparado.
4. cambiar al objetivo deseado con el tornillo micro.
Empleo del objetivo de inmersión
1. bajar toda la platina
2. abrir todo el diafragma hasta que se vea el círculo
de luz donde se colocará el aceite.
3. girar el revólver hasta el objetivo de inmersión y
dejarlo entre éste y el de 40x.
4. colocar una gota de aceite de inmersión en el
círculo de luz
5. enfocar con el objetivo de 100x
6. subir la platina de a poco hasta que el objetivo
toque la gota de aceite de inmersión
7. ajustar el objetivo con el tornillo micro
Mantenimiento y precauciones
1. si no se usa el microscopio por un periodo
prolongado se debe cubrir con una funda que no
deje pelusa. Así también se evita que se junte
polvo.
2. si el objetivo de inmersión se ensucia con el
aceite se debe limpiar rápidamente con un paño
suave. Si el aceite esta pegado limpiar con un
paño con xilol (no abusar de estos alcoholes ya
que puede aflojar el pegamento del objetivo)
3. si cuesta mover la platina aceitar los engranajes
sin forzarla. Si sigue así llamar a un técnico.
Otros tipos de microscopios
Microscopio de campo oscuro
El preparado es iluminado por una oblicua mediante
un condensador especial. Los objetos quedan
iluminados sobre un fondo negro. Se utilizan en
bacteriología para la detección de bacterias como el
treponema pallidium (sífilis).
Microscopio de luz fluorescente
Es casi igual al óptico, la diferencia es que este tiene
una luz ultravioleta dejando a los elementos del
preparado fluorescentes. Se utiliza en inmunología.
Microscopio electrónico
Usa un haz de electrones para visualizar un objeto. Su
límite de resolución es menor al del óptico. Tiene un
aumento 170 veces mayor que el óptico. Sus partes
son:
 cañón de electrones: expulsa al haz de electrones
y generando el aumento de la imagen.
 Lentes magnéticas: crea campos magnéticos que
dirigen y enfocan al haz de electrones.
 Sistema de vacío: evita que los electrones
choquen con las moléculas de aire.
 Placa fotográfica: se ubica atrás del objetivo y
registra la imagen aumentada.