Hallazgos histopatológicos en botones corneales de pacientes con queratocono: comparación con índices topográficos Resumen Introducción: La topografía corneal es útil para la detección de desordenes ectasicos corneales. Sin embargo ¿los hallazgos topográficos dan idea de la patología real a nivel microestructural que esta afectando al paciente? ¿Ò tienen limitaciones en cuanto a predicción de daño a nivel estructural y por lo tanto predicción de pronóstico? Material y Métodos: Estudio observacional, transversal, descriptivo y comparativo con correlación de imagen e histología. Búsqueda de expedientes con queratoplastia penetrante realizada por queratocono y recolección de datos topográficos. Análisis de laminillas de botones corneales. Calculo de riesgo relativo, organizando datos en tablas de 2x2. Resultados: 69% tiene bowman incompleta, 69.8 % adelgazamiento estromal y riesgo relativo de 6.85 veces más posibilidad de tener leucoma. En contraste botones sin pliegues ni ruptura en Descemet con riesgo relativo de 5.37 veces mas posibilidad de no tener ruptura en presencia de leucoma corneal. Queratometrias por debajo de 55 D: menos posibilidad de tener Bowman incompleta (riesgo relativo 0.51). Discusión: se encontró relación entre ruptura de Bowman y presencia de leucoma corneal; asimismo asociación de queratometrias altas con ruptura de Bowman. Estos datos podrían situar la fisiopatología en las capas más anteriores del estroma. Ha sido reportado por microscopia confocal que ni la membrana de descemet ni el endotelio sufren daños, aquí observamos que la mayoría de cortes histológicos apoyan esta afirmación. Conclusiones: La ruptura membrana de Descemet y el endotelio probablemente no jueguen un papel determinante en la fisiopatogenia de la enfermedad. Queratometrias por encima de 55 D se asocian a grosores más delgados, presencia de leucoma corneal e histológicamente a ruptura de Bowman; este parámetro de imagen podría ser considerado una indicación para realización de queratoplastia penetrante en el ojo que lo presente Palabras clave: Histologia, botón corneal, queratocono, topografía. Abstract Introduction: Corneal topography is an useful device for detection of ectasic corneal disorders. However what topographic findings give a real idea at the microestructural level of the pathology affecting the patient? Does it have limitations in prediction of structural damage and therefore prediction of outcome? Material and methods: observational, transversal, descriptive and comparative study with correlation of image and histology.We made a search for records with penetrating queratoplasty Keratoconus and topographic data collection. Histologic analysis of corneal buttons. Computation of relative risk organizing data in 2 x 2 tables. Results: 69 % have incomplete bowman, 69.8 % stromal thinning and relative risk of 6.85 times more possibility of leucoma. In contrast buttons with no creases or break in Descemet with 5.37 relative risk times more possibility of no break in the presence of corneal leucoma. Keratometries less than 55 dioptries had less chance of having incomplete Bowman (relative risk 0.51). Discussion: we found a relationship between bowman rupture and presence of corneal; also high queratometries with bowman rupture Association leucoma. These data could place the pathophysiology in most previous levels of the stroma. It has been reported by confocal microscopy nor the Descemet membrane and the endothelium to suffer damage; here we see the majority of histological sections to support this assertion. Conclusions: Descemet membrane rupture and the endothelium probably do not play a decisive role in the physiopathogeny of disease. Keratometries in excess of 55 D are associated with shrinking , presence of leucoma and breakdown of Bowman; this image parameter could be considered an indication for realization of penetrating keratoplasty in the eye to present. Key words: histology, corneal button, keratoconus, topography. INTRODUCCIÓN Antecedentes La comprensión de la medición de parámetros normales y patológicos de la cornea es una parte integral del cuidado oftálmico. En últimos años la cirugía querato refractiva ha cobrado impulso y se ubica como una de las más realizadas a nivel mundial. La tecnología dispuesta para la detección de cambios que sugieren sospecha en la evaluación corneal es amplia: la mayoría dan información sobre curvatura, poder y forma. A este respecto, contamos con la topografía de elevación Orbscan II que combina un escaneo en hendidura con una reflexión de discos de placido; se habla de que este método de medición es favorable para entender la superficie anterior corneal, pero se ha criticado su poca confiabilidad en cuanto a la superficie posterior, sobre todo en pacientes con queratocono o postoperados de LASIK, esto se ha atribuido a perdida de transparencia y disrupción de la luz por edema en estados patológicos (1). Justificación y planteamiento del problema Los desordenes ectasicos corneales tales como queratocono o degeneración marginal pelucida se diagnostican de forma clínica en su forma manifiesta. La topografía corneal es útil en estos casos como medio de confirmación. Sin embargo ¿los hallazgos topográficos dan idea de la patología real que esta afectando al paciente? ¿Ò tienen muchas limitaciones en cuanto a predicción de daño a nivel estructural y por lo tanto predicción de pronóstico? Aunque la topografía de elevación provee muchos parámetros para el clínico en la descripción de estructura corneal, no tenemos conocimiento de algún estudio que relacione sus hallazgos con la patología estructural del padecimiento. Ha sido descrita su relación con características clínicas (2) al comparar datos normales con sospechosos, y ha sido así como se han descrito muchos índices útiles actualmente para la detección de formas frustras de queratocono. Estos índices por mencionar algunos se basan en paquimetria central mas delgada, irregularidad en 3 y 5 mm, poder corneal central en dioptrías, cantidad de astigmatismo, diferencial entre esfera de mejor ajuste anterior y posterior. Aun así no se ha podido determinar el contexto específico o algún indicador que señale una alta probabilidad de padecer queratocono basándose en los hallazgos histológicos que indiquen esta posibilidad. Uno de los índices más importantes, la paquimetria corneal, normalmente se compara con ultrasonido para la validación de sus datos, no tenemos conocimiento de algún estudio que compare la información con cortes histológicos. Generalmente se acepta una variación de 15-20 micras que puede ser influenciada por muchos factores como opacidad corneal y por lo tanto hacerlo poco confiable (al comparar con ultrasonido)2. Se ha comparado la medición por OCT de segmento anterior en una serie de casos de 6 pacientes, ahí los autores reportan un desfase de la medición histológica (atribuida a la técnica) de aproximadamente un 10% de sobre estimación. Es importante mencionar que la base fisiopatológica del queratocono no se ha dilucidado con certeza(3).Se asume que la elevación topográfica y los datos clínicos de adelgazamiento y protrusión corneal determinan su advenimiento y ha sido así como se asume también que pacientes con sospecha para desarrollar ectasias corneales son aquellos que coinciden con datos sospechosos de queratocono(4).Sin embargo no existen estudios anatomo-patológicos que describan las similitudes o diferencias entre ambos padecimientos ó que ubiquen las características específicas inherentes al queratocono y su manifestación topográfica. Existe una descripción que diferencia al queratocono y las ectasias corneales en base al reporte de 5 botones corneales en donde no se encontró disrupción de la capa de Bowman, esto se relaciona como una característica histológica básica de queratocono (5). Existen pocos estudios donde se describan las características de esta patología, en una de las series más grandes (131 botones) describen encontrar 2 hallazgos: perdida de Bowman y continuidad de la misma (6). El queratocono se ha venido identificando cada vez más como una enfermedad de etiología multifactorial, sin embargo en nuestro país no existe una revisión de la incidencia de este mal y su posible relación con algún patrón de herencia. Ha sido identificado como más probable en poblaciones remotas y aisladas(7),como generalmente pueden ser las tribus aborígenes que en su caso se han documentado en Finlandia, o Nueva Zelanda (maorí polinesios) por poner un ejemplo. Es así como surge la pregunta si en nuestro país existe alguna distribución o patrón que lleve a futura investigación sobre la posible etiología de esta enfermedad. Otro factor a discusión ha sido la edad y genero en el momento en que se presentan complicaciones suficientes como para optar por un procedimiento como una queratoplastia penetrante, existe 1 estudio (8) donde determinan que hay relación inversamente proporcional entre edad y severidad del caso, describiendo únicamente una distribución más común en el sexo masculino, sin embargo estos factores no han sido relacionados a hallazgos histológicos y pueden ser también analizados en la población mexicana. La mayoría de reportes de la literatura a nivel mundial, posee bases de datos entre 12 y 150 ojos en los estudios realizados que correlacionan datos topográficos con clínicos y/o validación con otros aparatos. El departamento de patología, posee una base de datos de reportes de histopatología de más de 2 mil casos. Objetivo general: Describir los hallazgos histológicos en botones corneales de pacientes mexicanos diagnosticados con queratocono y asociar los mismos con índices topográficos descritos como indicadores de la enfermedad. Objetivos específicos: 1) Describir patrones demográficos de distribución de queratocono en México. 2) Descripción de características histológicas de botones corneales con queratocono. 3) Analizar factores de riesgo asociados: sexo y edad con datos histológicos y topográficos de severidad de queratocono. 4) Analizar la posible asociación entre índices topográficos que determinan un grado de queratocono y su manifestación histológica. 5) Analizar las características histológicas que identifican como queratocono a un botón y relacionarlas con datos clínicos de opacidad de medios (presencia de leucoma corneal). 6) Determinar si la clasificación actual de queratocono tiene relación con los cambios a nivel microscópicos observados en botones corneales. 7) Determinar si es útil la medición por medio de Orbscan II para valorar severidad a nivel histológico del caso. 8) Formalizar criterios desde el punto de vista de imagenología para la indicación de tratamiento quirúrgico en pacientes con queratocono. 9) Colaborar con datos de un universo de población grande en la búsqueda de patrones que sugieran investigación sobre la etiología de la enfermedad. Material y Métodos Diseño de estudio: Estudio observacional, transversal,, descriptivo y comparativo con correlación de imagen e histología. Población: pacientes mexicanos operados de queratoplastia penetrante en la institución por queratocono. Unidad de observación: botones corneales de ojos con queratocono. Obtención de población: Revisión de libros de archivo de patología en búsqueda de botones corneales con queratocono. Recolección de expedientes de pacientes con queratoplastia penetrante realizada por queratocono y recolección de datos topográficos en expedientes completos. Búsqueda y análisis de laminillas de los botones corneales. Medición de paquimetria central a nivel histológico y comparación con índice topográfico. Criterios de inclusión: expedientes completos de pacientes operados de queratocono que cuentan con reporte histopatológico de botón corneal y topografía previa a su cirugía. Criterios de exclusión: expedientes incompletos, sin topografía o sin reporte de histopatología completo. Variables Antecedentes familiares Edad Origen Queratometrias Paquimetria Astigmatismo Leucoma corneal Pliegues y/o ruptura en descemet Grosor histopatológico Independiente Tipo o dependiente variable Independiente Nominal de Unidad de Instrumento Medición de medición Interrogatorio Momento de medición Prequirurgico Independiente Independiente Dependientes Dependiente Dependiente Dependiente Dimensional Nominal Ordinal Ordinal Ordinal Nominal Años Lugar Dioptrías Micras Dioptrías Clínico Interrogatorio Interrogatorio Topografía Topografía Topografía Biomicroscopia Prequirurgico Prequirurgico Prequirurgico Prequirurgico Prequirurgico Prequirurgico Dependiente Nominal Clínico Microscopia Postquirúrgico Dependiente Ordinal Micras Microscopia Postquirúrgico Plan de Análisis estadístico: con el programa SPSS v 0.15 se realizo estadística descriptiva basada en rangos, medias y desviaciones estándar, se calculo el riesgo relativo con la fórmula para el mismo, organizando los datos en tablas de 2x2. Organización: Recursos humanos: personal de archivo y patología para búsqueda de expedientes y laminillas, autores encargados de recopilación y análisis de datos. Recursos materiales: microscopio del laboratorio de patología del hospital. Cronograma de actividades: 1) Revisión de literatura publicada en pubmed. 2) Redacción de marco teórico. 3) Revisión de libros de patología. 4) Búsqueda de expedientes. 5) Recolección de datos. 6) Búsqueda de laminillas. 7) Medición de grosor. Resultados Presentamos resultados de los datos recabados de la búsqueda de 200 expedientes que comprenden los años 2001, 2002, y 2003 de los libros del laboratorio de patología oftálmica. El total de expedientes completos fue de 69, mismos que cuentan con laminilla histológica del botón corneal y topografía previa para su análisis. Se encontraron los siguientes datos demográficos: Sexo Masculino Femenino Total Frecuencia 40 29 69 Porcentaje 58 42 100 En esta tabla notamos que la mayoría de la población con queratocono que ha sido operada en el hospital es del sexo masculino, se encontró que la mayoría de la población es joven agrupando el 92.7% menores de 49 años. Edad Frecuencia Porcentaje 0- 21 años 21-49 años 49-69 Mas de 70 años Total 23 41 2 3 69 33.3 59.4 2.9 4.3 100 La población con queratocono tuvo origen principalmente en la ciudad de México, el estado del mismo nombre y Guanajuato. Origen DF EDO MEX GTO GRO Frecuencia 32 11 8 3 Porcentaje 46.4 15.9 11.6 4.3 PUEBLA QUERETARO MICHOACAN HIDALGO MORELOS CAMPECHE DURANGO AGUASCALIENTES JALISCO TOTAL 2 2 4 2 1 1 1 1 1 69 2.9 2.9 5.8 2.9 1.4 1.4 1.4 1.4 1.4 100 Fue recopilada la transparencia del botón corneal en la última visita encontrándose 93.1% de los pacientes con adecuada evolución. El 89.9% de los pacientes no reportaron algún antecedente familiar de queratocono o ceguera en la familia. Ahora bien, los datos topográficos recabados en esta población fueron los siguientes: Queratometrias máximas simuladas Menos de 48 D Menos de 53 D Menos de 55 D Mas de 55 D Total Frecuencia Porcentaje 6 14 9 40 69 8.7 20.3 13 58.2 100 Para su estudio se dividieron los valores queratometricos de acuerdo a los criterios de Rabinowitz modificados haciendo así mas fácil su análisis y recopilación. Nótese que la mayoría de los pacientes se ubican en queratometria mayora 55 D, lo cual concuerda de acuerdo a los criterios con grado IV, sin embargo llama la atención que un alto porcentaje de pacientes fue operado con queratometrias por debajo de 53 D (29.1%). El valor paquimetrico estuvo por debajo de 400 micras en 89.8% de la población, encontrándose solo un 10.2% con valores por encima de este rango, lo cual habla de la relación existente entre queratometrias altas y paquimetria delgada. La irregularidad de la zona de 3 y 5 mm estuvo por encima de 3 D en el 97% de los pacientes, este parámetro es el que mas se repite en la población. En cuanto al astigmatismo pre quirúrgico la mayoría de los pacientes se encontró en un rango menor a 8 dioptrías, una tercera parte de los pacientes se encontró con astigmatismo menor a 5 dioptrías lo cual llama la atención ya que probablemente este parámetro no sea tan importante para la decisión quirúrgica en un paciente con queratocono. Astigmatismo Menos de 5 5a8D Frecuencia 25 23 Porcentaje 36.2 33.3 8 a 10 D Mas de 10 Total 10 11 69 14.4 15.9 100 Los datos histopatológicos recabados fueron: si la capa de Bowman estaba o no completa, si había ruptura o pliegues en Descemet, depósitos de hierro en epitelio o adelgazamiento estromal, estos datos se han descrito previamente como características de queratocono. Se encontró que un 69% de los botones cornales no tiene Bowman completa, 69.8 % del total de botones con adelgazamiento estromal. En contraste encontramos 85.2% de pacientes sin pliegues ni ruptura en Descemet. El 69% de los pacientes presentan leucoma corneal. Se calculó el riesgo relativo para correlacionar los valores con la siguiente formula: RR= A (A + B) / C (C+D). Este es la relación de la incidencia en personas con el factor de riesgo con la incidencia de personas sin este factor Cuando el valor resultante es menor de 1 se considera un factor protector y cuando es mayor de uno es factor de riesgo. Por ejemplo el siguiente resultado se interpreta que los pacientes con Bowman incompleta tienen 6.85 veces mas riesgo relativo de tener leucoma que de no tenerlo. Bowman incompleta Bowman completa Total 42 B 6 48 A Sin Leucoma 14 D 7 21 C Total 56 13 69 RR= 42(42 + 6) / 14 (14+7) RR=2016/294 RR=6.85 Leucoma corneal Leucoma corneal Sin leucoma Total Sin Ruptura de Descemet 40 17 57 Con ruptura Total 8 4 12 48 21 69 En esta tabla de riesgo observamos que el hecho de no tener ruptura en membrana de Descemet no influye para la presencia o no de leucoma ya que encontramos un riesgo relativo de 5.37 veces más de posibilidad de no tener ruptura de Descemet en presencia de leucoma corneal. Adelgazamiento estromal histológico No adelgazamiento estromal histológico Total Grosor menor a 400 micras 33 Más de 400 micras Total 13 46 12 11 23 45 24 69 Arriba observamos un riesgo relativo de 5.5 veces mas de encontrar un grosor menor a 400 micras y presentar adelgazamiento estromal a nivel histológico. Queratometrias debajo de 55 Queratometrias por encima de 55 Total Riesgo Relativo: 0.51 Bowman incompleta 22 Bowman completa 10 Total 32 34 3 37 56 13 69 En esta tabla encontramos un factor protector al ver que queratometrias por debajo de 55 D tienen menos posibilidad de tener Bowman incompleta. Edad menor de 21 años Mayor de 21 años Total Riesgo relativo : 2.28 Leucoma corneal 20 Sin leucoma 6 Total 26 28 48 15 21 43 69 A menor edad observamos que hay un riesgo 2.28 veces mayor de presentar leucoma corneal previo a la cirugía. Discusión Los pacientes con queratocono del hospital en su mayoría corresponden al género masculino, lo cual concuerda con el artículo publicado por Ertan en 2008 donde expone que el 62.2% corresponde al mismo sexo en una población de 482 ojos: esto habla de alguna relación de género con la etiología de la enfermedad. Al ser éste un hospital de concentración llama la atención la baja incidencia de pacientes que no acudieron de otros estados. El alto porcentaje de pacientes con adecuada evolución hasta su ultimo seguimiento habla del buen pronóstico que en general tienen los pacientes operados de queratoplastia penetrante por queratocono; únicamente el 10% del total de ojos analizados hasta este momento se han encontrado con opacidad debida a rechazo corneal, esto puede deberse a situaciones tales como el hecho de que la mayoría de los pacientes transplantados son jóvenes, lo cual también hace inferir que el queratocono es una enfermedad rápidamente incapacitante. Como se vio en los resultados casi todos los ojos correspondían a personas menores a 49 años. Otro dato a discutir es que muy pocos pacientes refirieron algún antecedente familiar, esto concuerda con datos descritos por Rabinowitz desde 1992 donde encuentra antecedentes familiares en 6-10% de los pacientes, a pesar de eso hay varios factores que hacen pensar en algún patrón de herencia, por ejemplo la bilateralidad del padecimiento, el hecho de que hay reportes en gemelos y su ocurrencia en algunas familias reportadas en 2 o 3 generaciones (9) . Casi un 30% de los pacientes pre quirúrgicos tiene queratometrias por debajo de 55 D, rango que actualmente puede ser considerado adecuado para la realización de otras técnicas terapéuticas tales como anillos intraestromales (si los medios son transparentes), en el cálculo de riesgo relativo se encontró como factor protector para perdida de Bowman a nivel histológico este rango por debajo de 55, de esta manera se encuentra que este dato topográfico es útil para valorar la severidad del cuadro a nivel micro estructural. Se encontró también que más de la mitad de los ojos presentaban leucoma corneal previo a su cirugía y esto se asocio a queratometrias por encima de 55 D, lo cual ubica a más de la mitad de pacientes en Grado IV de queratocono. La relación existente entre grosor paquimétrico y queratometrias hace pensar que cuando se encuentran en este grado (II o III) son candidatos todavía para realizar estos procedimientos alternativos, que no estaban disponibles cuando se realizaron estas queratoplastias (hace 7-9 años). Todos los pacientes evaluados con topografía mostraron índices de irregularidad en rangos anormales, todos se encontraron con paquimetría muy por debajo de valores aceptados como normales, y la mayoría correspondieron con impresión histológica de adelgazamiento estromal. Ahora bien hablando de los datos histológicos, se comprobó el adelgazamiento estromal y queratometrias elevadas que corresponde con los datos clínicos que tiene el queratocono, sin embargo llama la atención la ausencia de ruptura o pliegues en Descemet en la mayoría de los pacientes, esto se comprobó con el riesgo relativo de 5.37 veces posibilidad de presentar leucoma corneal a pesar de no tener rota Descemet; esto puede ser atribuido a que muchos de ellos no fueron operados durante la presencia de hidrops, pero también indica que es probable que las capas más profundas de la cornea tengan un papel secundario en la fisiopatogenia de la enfermedad. Un dato interesante fue que se encontró una relación entre ruptura de capa de Bowman y presencia de leucoma corneal (riesgo relativo de 6.85 veces mas posibilidad de tener leucoma si Bowman esta incompleta); asimismo la asociación de queratometrias altas con ruptura de Bowman. No existen reportes en la literatura de los cuales tengamos conocimiento que asocien esta entidad. Quizás podría explicarse por la rigidez que presenta la cornea en sus porciones más superficiales y la dificultad de cicatrización estromal. Generalmente se asocia la presencia de leucoma corneal a un antecedente de hidrops y por lo tanto a un grado avanzado de la patología, que podría explicar la alteración en capa de Bowman; es así como este dato podría situar a la enfermedad como una entidad circunscrita principalmente a las capas más anteriores del estroma. Ha sido reportado en series de casos menores a ésta, por microscopia confocal (10) , que ni la capa de Descemet ni el endotelio sufren daños, en nuestro estudio se observa que la mayoría de cortes histológicos apoyan esta afirmación. Es necesario más investigación al respecto (papel de capa de Bowman y estroma anterior en el avance de queratocono), el trabajo aporta este hallazgo como eslabón en busca de una etiología. En cuanto a la medición de los botones corneales y su correspondencia con los datos topográficos se ha encontrado una tendencia a ser compatibles, lo cual habla de la confiabilidad de la topografía corneal como instrumento de medición. Como uno de los sesgos del estudio debemos admitir que la paquimetría corneal es únicamente una estimación de las zonas mas delgadas, y probablemente el sitio donde se realizo el corte histológico no corresponda con la misma zona medida por la paquimetría, sin embargo en la técnica que utilizan en el laboratorio para el corte y preparación de estas muestras, siempre se toma como referencia el centro de la cornea, y se midió la misma a todo lo largo de este sector (es decir de meridiano 12 a 6); en la recopilación de datos se registro únicamente esta zona como medida de espesor corneal. Es importante resaltar a su vez que la estimación de adelgazamiento estromal se realiza de manera subjetiva al observar el corte histológico en su totalidad, y este indicador se comparo con la estimación de micras de topografía con rangos amplios de medición pero en todos los casos patológicos (menos de 400 micras, entre 200 y 400 micras y menor a 200 micras). La presencia de leucoma corneal no estuvo relacionada a un peor pronóstico en casi todos los ojos evaluados (riesgo relativo de 110 veces más de estar botón transparente a pesar de tener leucoma corneal previo), por lo cual no debe considerarse un factor de riesgo de fracaso del injerto. Conclusiones Los pacientes operados de queratoplastia penetrante por queratocono en ésta población mexicana son jóvenes. Su distribución y severidad se asocia más al sexo masculino y la presencia de leucoma corneal se asocia a menor edad, lo cual habla de la rapidez de avance de los casos. Se encontró una relación entre ruptura de Bowman y presencia de leucoma corneal, además de queratometrias elevadas (por encima de 55 d) en los mismos ojos. La ruptura membrana de Descemet y el endotelio probablemente no jueguen un papel determinante en la fisiopatogenia de la enfermedad. Queratometrias por encima de 55 D se asocian a grosores mas delgados, presencia de leucoma corneal e histológicamente a ruptura de Bowman, por lo cual este parámetro de imagen podría ser considerado una indicación para realización de queratoplastia penetrante en el ojo que lo presente. Es así como los valores de la topografía corneal pueden tomarse como validos para determinar la indicación de cirugía en un paciente, por supuesto apoyándola en los datos clínicos y evaluación integral del mismo. Es necesaria la realización de investigación experimental para dilucidar el papel de capa de Bowman y estroma anterior en la fisiopatogenia del queratocono, y del remodelamiento y cicatrización de las capas superficiales de la cornea, al asociarse a la presencia de leucomas. Casi todos los botones corneales injertados en pacientes con queratocono permanecen transparentes, tienen casi nulas recurrencias y buen pronostico en cuanto a posibilidad de rechazo del injerto. Por su atención, gracias. Bibliografía 1) Sonmez B, Minh-Phuong Doan,D. Rex Hamilton. Identification of scanning slit-beam topographic parameters important in Distinguishing normal from keratoconic Corneal morphologic features Am J Ophthalmol 2007; 143:401–408. 2) Swartz T, Marten L, Ming W. Measuring the cornea: the latest developments in Corneal topography. Current Opinion in Ophthalmology 2007, 18:325–333 3) Bourges J, Savoldelli M, Dighiero P. 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