Formato de nematodos f

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I.
Título
Evaluación en la prevalencia de carga de nematodos en alpacas en el distrito
de Macusani
II. Resumen del Proyecto de Tesis
El trabajo se realizará en distrito de Macusani de la provincia de Carabaya y
en la Facultad Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional
del Altiplano con el fin de demostrar la prevalencia de nematodos en alpacas
como Objetivo general tenemos. Evaluar la prevalencia de carga de
nematodos en alpacas en el distrito de Macusani. Y como objetivo específico
tenemos Determinar la carga de nematodos por edades y sexos en el distrito
de Macusani y Aportar la información para la elaboración del calendario
sanitario de nematodos y en caso de metodología Identificación de los
animales: Las alpacas serán identificados por el número de arete (en donde
se consigna: el año de nacimiento, raza, numero correlativo de nacimiento y
mes de nacimiento), fecha de nacimiento y sexo, que se obtuvieron de los
cuadernos de parición; para facilitar el manejo se marcaron con pinturas.
Toma de muestras: La obtención de la muestra de heces en alpacas se
realizara por vía rectal, para esto se utilizara una bolsa de nylon para
obtener la muestra directamente del recto, se introdujo el dedo índice en el
ano del animal y así extraer una cantidad aproximadamente de 20g de
heces para luego ser identificadas con el Nº de arete y categoría.
Análisis de laboratorio: Las muestras se transportaron en cajas isotérmicas
de poliestireno expandido con geles refrigerantes al Laboratorio de
Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la
Universidad Nacional Altiplano Puno. El tiempo transcurrido entre la colección
de las muestras y su análisis serán entre 1 y 2 días. Las muestras fecales se
analizaran mediante la técnica Mc Máster modificado (Ueno y Gonçalves,
1998) para obtener el número de huevos por gramo de heces (HPGH) de
nematodos y de otras especies.
DISEÑO DE INVESTIGACIÓN
Selección de animales: Para el estudio se utilizara alpacas en diferentes
categorías de las cuales serán seleccionados al azar del hato de crías de
100, animales jóvenes 100, adultas 100. Una vez determinada la selección al
azar, se procederá con la recolección de muestras de heces.
Modelo estadístico: Para la interpretación de datos obtenidos se utilizara
un diseño completamente al azar.
En resultados se espera La prevalencia dela carga de nematodos en
alpacas del distrito de Macusani es de 0.5%.
III. Palabras claves (Keywords
Nematodo, alpaca, prevalencia, nematodos, huevos.
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IV. Justificación del proyecto
La producción de camélidos sudamericanos en el Perú representan en gran
magnitud el sustento económico de un gran sector de la población rural
(torres, 2008) especialmente aquellas que habitan en zonas donde el
desarrollo de la agricultura presenta limitantes, tanto por condiciones
climáticas como altitudinales (INEI, 2012).
Este escenario exige enriquecer procesos tecnológicos y renovar
conocimientos para poder generar estrategias de adaptación y prevención de
enfermedades parasitarias, especialmente las provocadas por nematodos
gastrointestinales. Una de las limitantes en el control de la nematodiasis es la
resistencia que han venido adquiriendo frente a las drogas antihelmínticas
(Kaplan, 2004).
El objetivo del presente estudio fue determinar la prevalencia parasitaria en
alpacas Huacaya de plantel, criados en pasturas naturales altoandinas, en
dos granjas comunales de la región Pasco. (torres, 2008)Los efectos más
importantes de las parasitosis de nematodos a nivel individual son la
reducción de la ingesta alimenticia, alteraciones en la digestión y absorción de
nutrientes, y las pérdidas de proteína endógena ( (Moreno, 2014).
V. Antecedentes del proyecto
ENFERMEDADES PARASITARIAS EN ALPACAS:
Las enfermedades parasitarias en las alpacas, constituyen uno de los
problemas de mayor importancia económica; ya que disminuye la cantidad y
producción de fibra, carne y leche; así la disminución láctea trae como
consecuencia a una mala nutrición de las crías, haciéndolas susceptibles a
enfermedades. Estas enfermedades se presentan de manera insidiosa y los
síntomas no son fácilmente observables, salvo que exista una gran cantidad
de parásitos (Guerrero, 1971).
Los efectos más importantes de las parasitosis de nematodos a nivel
individual son la reducción de la ingesta alimenticia, alteraciones en la
digestión y absorción de nutrientes, y las pérdidas de proteína endógena (
(Moreno, 2014).
Nematodo gastrointestinal:
Es una enfermedad parasitaria de curso generalmente subclínico, que afecta
principalmente a los animales jóvenes, caracterizada por una emaciación
progresiva, trastornos digestivos, anemia, trastornos tróficos de la piel y gran
costo en la quimioterapia (Melo, 2007).
Los géneros Lamanema y Nematodirus son fácilmente identificados, pero
cuando se detecta la presencia de huevos tipo Strongylus, debe realizarse
cultivo para poder identificarlas larvas del tercer estadio (Fernández, 1991;
Novoa y Flores, 1991). No obstante para tener una idea del grado de
parasitismo en las alpacas, se recomienda mandar muestras equivalentes al
10% de la majada, de los cuales el 5% deben ser animales en buenas
condiciones y 5% en pobres condiciones (Leguía, 1999).
Post mortem (necropsia) Indudablemente constituye la mejor alternativa para
la evaluación del estado parasitario de la majada. Consiste en el sacrificio al
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azar de 2 o 3 animales, para posteriormente evaluar sus carnes y las lesiones
anatomopatológicas, seguidamente se hace el examen del tracto
gastrointestinal a través del estimado de infección parasitaria (Rojas, 1990),
en la cual se toman muestras representativas del contenido y raspado del
abomaso e intestino, luego contar los parásitos en estas muestras y si se
desea enviar estas muestras al laboratorio se recomienda enviarlas en alcohol
al 70% o en formol al 5% (Campillo, 1999).
VI. Hipótesis del trabajo
Ho= No existe prevalencia de la carga de nematodos en alpacas del distrito
de Macusani.
Hi= Existe prevalencia de la carga de nematodos en alpacas del distrito de
Macusani.
VII. Objetivo general
Evaluar la prevalencia de carga de nematodos en alpacas en el distrito de
Macusani
VIII.
Objetivos específicos
 Demostrar la carga de nemátodos por edades y sexos en el distrito de
Macusani.
 Aportar la información para la elaboración del calendario sanitario de
nematodos.
IX. Metodología de investigación
El trabajo de investigación se realizara, en el distrito Macusani, provincia
Carabaya,
región
Puno; ubicado a 4.420 m.s.n.m., próximo a las
coordenadas 14º 8ˈ 5.68ˈˈ latitud sur y 70º 36ˈ 52.85ˈˈ longitud oeste del
meridiano de Greenwinch. con una superficie total de 43042 hectáreas
aproximadamente con preponderancia de praderas de pastos naturales y
pedregales en las partes altas.
Tamaño de muestra
Tabla 1: Número total de alpacas se muestreara para la evaluación de la
prevalencia parasitaria.
Equipo, Materiales y registros
Equipos de laboratorio
Microscopio óptico (Leica 2000)
Estereoscopio
Balanza digital
Centrifugador
Cámara fotográfica digital
Material de laboratorio
Cámaras de Mc-Máster (4 cámaras)
Láminas portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
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Probeta
Frasco graduado
Frascos de penicilina
Pipeta
Mortero
Embudo colador
Bagueta de vidrio
Solución azucarada (solución Sheather)
Material de campo para muestreo
Caja refrigerante (tecnopor)
Bolsas de polietileno
Lápiz
Mandil
Mameluco
Guantes
Cubrebocas
Botas
Collares
Marcador (Pintura)
Botas 3.3.5. Registros de manejo
Registro de parición
Libreta de parición
Cuaderno de campo
Fichas de necropsia
Fichas de evaluación de la carga parasitaria
Identificación de los animales
Las alpacas serán identificados por el número de arete (en donde se
consigna: el año de nacimiento, raza, numero correlativo de nacimiento y mes
de nacimiento), fecha de nacimiento y sexo, que se obtuvieron de los
cuadernos de parición; para facilitar el manejo se marcaron con pinturas y se
colocaron collares numerados.
Toma de muestras
La obtención de la muestra de heces en alpacas se realizara por vía rectal,
para esto se utilizó una bolsa de nylon para obtener la muestra directamente
del recto, se introdujo el dedo índice en el ano del animal y así extraer
una cantidad aproximadamente de 20g de heces
para luego ser
identificadas con el Nº de arete y categoría. Posteriormente cada
muestra fue numerada cuidadosamente y llenada de información con
datos precisos en el cuaderno de anotes de recolección, posteriormente
estas muestras fueron trasladados al laboratorio en un envase de
plastoformo refrigerada. El horario de recolección de las muestras se
realizara en horas 7:00 a.m.
Análisis de laboratorio
Las muestras se transportaron en cajas isotérmicas de poliestireno expandido
con geles refrigerantes al Laboratorio de Parasitología de la Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Altiplano Puno.
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El tiempo transcurrido entre la colección de las muestras y su análisis serán
entre 1 y 2 días. Las muestras fecales se analizaran mediante la técnica
McMáster modificado (Ueno y Gonçalves, 1998) para obtener el número de
huevos por gramo de heces (HPGH) de nematodos y de otras especies.
Metodología para el análisis de muestras
Método de Flotación.
(Rojas, 1990) Revela el método Cualitativo más conocido como el método
de Flotación registra la presencia y ausencia de huevos de parásitos, es
de particular interés para casos de diagnóstico individuales. (Guerrero, 1971).
Indica que el método de flotación de huevos de parásitos tienen una densidad
mayor al agua y por consecuencia se precipitan en el agua, pero cuando las
heces son suspendidas en un líquido con un peso específico mayor a
los huevos, estos flotaran hasta la superficie, a través del método de
flotación se mezcla las heces con una solución que tiene una densidad
intermedia entre las densidades de los huevos y el material fecal de tal
manera los huevos se concentran en la superficie.
(Rojas, 1990) Método de Mc-Máster segunda modificación. Método
cuantitativo que se utilizó para la determinación del número de ooquistes por
gramo de heces (OPG) y número de huevos por gramo de heces (HPG).
Procedimiento:
 En una balanza digital, se pesó 2 g de heces (muestra).
 Luego se trasladó a un mortero en donde se homogenizó en 28 mL de
solución azucarada de Sheather; estableciéndose un volumen total de 30 mL.
 Se filtró el homogenizado a través de un tamiz, en tubos de ensayo Falcón
de 50 mL.
 Luego se homogenizó el filtrado con bagueta de vidrio y con una pipeta, se
llenó a la cámara de Mc-Máster.
 Se esperó por 3 a 5 minutos para que los huevos se ubiquen en la cara
inferior de la lámina superior de la cámara.
 Se llevó al microscopio, en donde se efectuó el conteo dentro del recuadro
de lectura (que está demarcada por líneas). La lectura se realizó a un
aumento de 10x. 34.
Interpretación del contaje de huevos u ooquistes
El volumen total es: 30 mL (2g de heces en 28 mL de solución de Sheather).
La capacidad de la cámara de Mc Máster es de 0.15 mL. Interpretación:
VARIABLE DE ESTUDIO.
Determinación cuantitativa de parasitosis Los nematodos en heces en
alpaca.
.
Número de Casos Positivos
Prevalencia
(Pr)
=
-----------------------------x
100
.
Número de Animales en estudio
Si en: 30 mL _____________ 2 g de heces
15 mL _____________ X = 1 g de heces
Si en: 15 mL _____________ 1 g de heces
0.15 mL ____________ X
X = 0.01 g de heces
Entonces: 0.15 mL representa la centésima parte de 15 mL
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g representa la centésima parte de 1 g de heces
Finalmente el factor de corrección para cada área de lectura fue 100; pero
cuando la lectura se realizó en las 2 áreas el factor fue de 50.
También se puede utilizar la fórmula siguiente:
HPG u OPG = (N° de huevos en 1° área) + (N° de huevos en 2° área) x 100 /
2
HPG u OPG = (N° de huevos en 1° área) + (N° de huevos en 2° área) x 50
Identificación de Huevos
Se realizara en los diferentes grupos el examen coproparasitológico con sus
registros.
Que nos sirviera
para la identificación de huevos de parásitos de
nemátodo en el momento de la observación microscópica,
para
identificar los diferentes huevos de parásitos de cada grupo del hato
estudiado.
DISEÑO DE INVESTIGACIÓN
Selección de animales
Para el estudio se utilizara alpacas en diferentes categorías de las cuales
serán seleccionados al azar del hato de crías, animales jóvenes, adultas. Una
vez determinada la selección al azar, se procederá con la recolección de
muestras de heces.
Tabla 1. Distribución de animales para el estudio por edades y sexo.
Total
de Por edades
Machos
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animales
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Crías
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Animales
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jóvenes
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Adultos
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Fuente: Elaboración propia.
MODELO ESTADÍSTICO
Para la γijk = Carga parasitaria observada en la i-ésima edad y en el jésimo sexo del k-ésimo alpacas
i = Cría, prepuber, adulto
j =Macho, hembra
k =1…n
μ = La media general
αi = Efecto fijo dela i-ésima edad
βj = Efecto fijo del j-ésimo sexo
θij = Interacción dela i-ésima edad con elj-ésimo sexo
εijk = Efecto aleatorio de los residuales de la i-ésima edad con el jésimo sexo del k- ésimo alpacas. ˜NIID (O,Ɠe²)
Ecuación de la prevalencia
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P = Prevalencia
PM = Población muestral
PT = Población total
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393
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433
434
435
436
437
438
Response to artificial and subsequent natural infection with Haemonchus
contortus in Red Maasai and Dower ewes. Vet Parasitol 6: 275- 282. doi:
10.1016/S0304-4017(96)01129-6
XI. Uso de los resultados y contribuciones del proyecto
La prevalencia dela carga de nematodos en alpacas del distrito de Macusani
se espera la cantidad de 0.5%.de prevalencias.
La carga de nematodos por edades y sexos en el distrito de Macusani se
espera 0.6%.
La información será importante para la elaboración de del calendario sanitario
de nematodos
XII. Impactos esperados
i. Impactos en Ciencia y Tecnología
Ayuda en cuanto al estudio de los nematodos en las alpacas porque
da a conocer a los diferentes criadores los resultados obtenidos y así
aportar los conocimientos a la comunidad como trabajo de
investigación.
ii. Impactos económicos
Los nematodos tienen un alto impacto económico, por causar un daño
a la crianza de camélidos en una pérdida de altos porcentajes en caso
de ingreso económico de pequeños criadores de alpacas.
iii. Impactos sociales
Los nematodos también pueden infectar a otros animales como llama,
vicuña, oveja, vacuno y entre otras especies.
iv. Impactos ambientales
Los nematodos edatificos constituyen un grupo de invertebrados de
elevada importancia ecológica que presentan atributos que les
convierte en valiosas herramientas como indicadores biológicos y
ecológicos.
XIII. Recursos necesarios
Animales de diferentes edades, microscopio,
impresora, papel A4, y entre otros
agua, laboratorio, laptop,
XIV. Localización del proyecto (indicar donde se llevará a cabo el proyecto)
El proyecto se llevara en el distrito de Macusani Provincia de Carabaya y
también el trabajo se realizará en el laboratorio de parasitología de la facultad
de Medicina Veterinaria y Zootecnia en la Universidad Nacional del Altiplano
Puno.
XV. Cronograma de actividades
Actividad
Trimestres
9
J A S O N D E F M A M J
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
Formulación del proyecto
Aprobación del proyecto
Socialización
Muestreo
Ejecución del proyecto
Procesamiento de muestras
Procesamiento de datos
Redacción de reporte
Presentación de peyper
Sustentación
439
440
441
442
XVI. Presupuesto
Descripción
Papel A4
Cuaderno
Lapicero
lápiz
Unidad
medida
Millar
Unidad
Unidad
Unidad
Laptop
Unidad
Impresora
Unidad
Frascos
Unidad
Guantes
Caja
Laminas porta Caja
objetos
Laminas
Caja
cubre objetos
Persona
Unidad
Viajes
Viáticos
Costo total
de Costo Unitario Cantidad
(S/.)
20.00
1
1.00
1
1.00
2
1.00
2
2000.00
1500.00
4.00
15.00
150.00
1
1
300
1
6
150.00
6
Costo
total
(S/.)
20.00
1.00
2.00
2.00
2000.00
1500.00
1200.00
15.00
900.00
500.00
100.00
150.00
3
10
20
900.00
1500.00
1000.00
3000.00
12040.oo
443
10