INVESTIGACIÓN TOXICOLÓGICA OBJETIVOS Conocer, los procedimientos físicos y químicos empleados para la separación, extracción e identificación de tóxicos. Conocer la instrumentación analítica de mayor utilidad en toxicología. FUNDAMENTO La investigación toxicológica es el conjunto de procesos analíticos, para la determinación cualitativa y cuantitativa de los tóxicos, tanto en el vivo como en el cadáver, con el fin de permitir el diagnóstico de la intoxicación. IMPORTANCIA DEL ANÁLISIS TOXICOLÓGICO En el área clínica: Diagnostico y pronóstico de una intoxicación. Evolución del tratamiento. PROCESO DE ANÁLISIS TOXICOLÓGICO Proceso de separación Proceso de extracción Identificación MÉTODOS Análisis cualitativo Análisis cuantitativo 1. Procesos de separación de tóxicos Las muestras son sometidas a diferentes procesos como: Físicos (radiaciones caloríficas) Químicos (agentes precipitantes u oxidantes) Biológicos (enzimas proteolíticas) 2. Proceso de extracción Aislar el tóxico de los demás componentes de la muestra para posteriormente identificarlo. Puede realizarse por procedimientos Físicos como la extracción liquido – liquido (ELL), 3. Identificación y cuantificación 1) 2) Métodos clásicos (reacciones de coloración) Métodos instrumentales 1) Métodos clásicos Se basan en diferentes tipos de reacciones químicas de los grupos funcionales presentes en las moléculas o analitos que se supone es el agente causal de la intoxicación. 2. Métodos instrumentales Cromatografías Espectroscopias de absorción molecular Espectroscopias de absorción atómica Espectrometría de masas CROMATOGRAFÍA Empleadas exclusivamente para separación de mezclas complejas de tóxicos volátiles y tóxicos solubles. CROMATOGRAFÍA CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA CCF Se utiliza una placa recubierta con una fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor kte a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá por capilaridad por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de esta produciendo «manchas» de los componentes Cromatografía liquida de alta resolución HPLC Identificación de tóxicos que son solubles, comparando los tiempos de retención con los de patrones analíticos. Cromatografía de gases GC Identificación de tóxicos que son volátiles, comparando los tiempos de retención con los de patrones analíticos. ESPECTROSCOPIA Espectroscopias de absorción molecular Espectroscopias de absorción atómica Espectroscopia de absorción molecular En la UV VISIBLE, la absorción de la radiación de una longitud de onda está relacionada con la concentración. Espectroscopia de absorción molecular INFRARROJA brinda información referente a los grupos funcionales y características estructurales de la molécula (toxico), necesarias para su identificación. Espectroscopias de absorción atómica Tiene exclusiva aplicación en la determinación de tóxicos metálicos, empleándose para la búsqueda de los elementos del sistema periódico. Espectrometría de masas Brinda información referente al peso molecular y la estructura química del toxico, convirtiéndose en el método que permite aseverar la identidad de un compuesto químico.
