UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BAJA CALIFORNIA ESCUELA CIENCIAS DE LA SALUD HISTOLOGIA BASICA LABORATORIO GUÍA PRÁCTICA DE TEJIDOS BÁSICOS I A. EPITELIOS DE REVESTIMIENTO (PRÁCTICA Nº 1) MATERIAL PREPARADO POR: DR. ALONSO E COLLINS JUSTIFICACIÓN La elaboración de este material ha sido motivada por no existir un Manual de Laboratorio de Histología Veterinaria que pueda ser usado por cada estudiante durante las prácticas de esta asignatura. La enseñanza práctica adolece de la dificultad adicional de que a un profesor le es imposible dar asesoría personal a cada estudiante durante una sesión práctica de tres horas, sesión a la cual asisten más de veinte alumnos. Este material tiene por objeto facilitar, tanto el proceso de aprendizaje por parte del alumno, como el de enseñanza por parte del profesor. Esta guía, así como las que se elaboren en un futuro, deberá permitir al estudiante interpretar tridimensionalmente las observaciones bidimensionales que realice durante la práctica, así como entender los criterios de clasificación de los diferentes tejidos, utilizados en esta asignatura. SE RECOMIENDA AL ESTUDIANTE LLEVAR UN REGISTRO GRÁFICO (DIBUJOS) DE SUS OBSERVACIONES. Esto con el fin de agudizar su poder de observación y de que el estudiante elabore un atlas personalizado. Es necesario que el estudiante tenga a su disposición un cuaderno de dibujo y un lápiz bicolor (rojo-azul) OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: 1. Definir el concepto de TEJIDO. 2. Describir los componentes tisulares. 3. Definir el concepto de TEJIDO EPITELIAL. 4. Identificar diferentes tipos de tejido epitelial. 5. Observar muestras de los diferentes tipos de epitelios de revestimiento. 1) TEJIDO: Es un conjunto de células diferenciadas, de la misma naturaleza morfológica y funcional. 2) COMPONENTES TISULARES: Todos los tejidos se componen de los mismos componentes básicos, estableciéndose las diferencias más obvias en relación a la proporción de estos componentes en cada tejido en particular. Estos componentes son: 2.1. Células 2.2. Sustancia intercelular: Ocupa todo el espacio entre las células y consiste en un gel muy hidratado, de aspecto incoloro en estado fresco. Se reconocen dos componentes fundamentales: 2.2.1. Componente fibrilar: Constituido por macromoléculas polimerizadas, denominadas fibras, cuya proporción varía entre los distintos tejidos. A grandes rasgos, estas fibras se subdividen en: a. Fibras colágenas b. Fibras reticulares c. Fibras elásticas 2.2.2. Sustancia Amorfa: El segundo componente de la sustancia intercelular está constituido por una serie de moléculas complejas clasificadas como glucosaminoglicanos: queratán sulfato, condroitín sulfato y ácido hialurónico. 2.3. Líquido tisular: Es la fase líquida en la que se dispersan todas las sustancias arriba mencionadas, incluyendo electrolitos, oxígeno, CO2, nutrientes y desechos celulares. Por su composición, se sabe que proviene del paso del plasma hacia los tejidos a través de los capilares. También se le conoce como linfa cuando entra en los vasos linfáticos para retornar a la circulación. 3) Definición de tejido epitelial: El epitelio es un tejido básico compuesto por células íntimamente adosadas unas a otras en forma de capas continuas, que recubren una superficie exterior o tapizan una cavidad interna (Fawcett y Jens, 1999). 4) Características de los tejidos epiteliales: a. Poca sustancia intercelular b. No poseen vascularización propia c. Poseen fuertes y complejas uniones intercelulares d. Se sustentan en una membrana basal. e. Dependen de otros tejidos (conectivos) para su sostén físico y nutrición. 5) Funciones: Los tejidos epiteliales se dividen en dos grandes grupos: los epitelios de revestimiento y los epitelios glandulares. La función primaria de los epitelios de revestimiento es la cobertura de superficies, tanto externas como internas. Sin embargo, ello no impide a estos epitelios cumplir, en forma secundaria, con otras funciones, tales como: protección contra agentes físicos y químicos, secreción (limitada), recepción de estímulos y absorción de sustancias, entre otras. Los epitelios glandulares, que se estudiarán en la próxima práctica, están tan especializados en la secreción de sustancias, que no tienen capacidad real para cumplir con muchas otras funciones. 6) Clasificación morfológica de los epitelios de revestimiento: existen tres criterios de clasificación, mutuamente complementarios, que se utilizan en la clasificación de estos tejidos: 6.1. En primer lugar, debe considerarse la morfología básica de las células expuestas en la superficie del epitelio. De este modo, pueden observarse epitelios conformados por: a. células planas (llamadas también escamosas o pavimentosas) b. células cúbicas o c. células cilíndricas (llamadas también prismáticas) 6.2. En segundo lugar, debe tomarse en cuenta la disposición en capas de estas células, de donde procede clasificar los epitelios como: a. Simples (dispuestos en una sola capa de células, de modo que todas contactan la membrana basal y tienen los núcleos al mismo nivel). b. Estratificados (dispuestos en dos o más capas, de las cuales solo una, formada generalmente por células madre, tiene contacto con la membrana basal. Obviamente, los núcleos evidencian la disposición en capas). c. Seudo-estratificados (todas las células contactan la membrana basal, pero al ser de altura variable, los núcleos se encuentran a diferentes niveles, dando la falsa impresión de estratificación). 6.3. Por último, debe considerarse si el epitelio sufre modificaciones estructurales, ya sea en conjunto, ya sea en las células individuales, como consecuencia de adaptaciones fisiológicas y normales a funciones distintas del simple revestimiento. En tales casos, los epitelios presentarán alguna (s) de las siguientes modificaciones: a. Queratinización (Capa gruesa de células muertas y deshidratadas, que confiere resistencia física e impermeabilidad) b. Micro-vellosidades, llamadas en microscopía óptica chapa estriada o borde en cepillo (Proyecciones apicales que aumentan la superficie de intercambio en los epitelios donde se absorben sustancias) c. Cilios móviles, llamados kinetocilios ( propios de epitelios donde se movilizan sustancias y células ) d. Cilios inmóviles, denominados estereocilios (Proyecciones poco numerosas, pero más largas que las micro-vellosidades, con funciones de secreción limitada) e. Células caliciformes (células del mismo epitelio, modificadas para segregar localmente mucosustancias). A partir de estos criterios de clasificación, utilizados siempre en conjunto, se ha establecido la existencia de los siguientes epitelios, los cuales pueden ser ubicados en la FIGURA Nº 1: A. EPITELIO PLANO SIMPLE: reviste las cavidades del corazón y los vasos sanguíneos. También cubre la superficie de los órganos torácicos y abdominales. B. EPITELIO CÚBICO SIMPLE: Se ubica en los folículos tiroideos y en los túbulos renales. C. EPITELIO CILÍNDRICO SIMPLE: Se encuentra muy extendido a todo lo largo del tracto gastrointestinal, y en algunas porciones del aparato genital femenino (oviductos). C.1. INTERMITENTEMENTE CILIADO: oviductos C.2. CON BORDE EN CEPILLO Y CÉLULAS CALICIFORMES: intestino C.3. SIN MODIFICACIONES: estómago, vesícula biliar. EPITELIO SEUDOESTRATIFICADO CILÍNDRICO D.1. CON CILIOS INMÓVILES (ESTEREOCILIOS) epidídimo D.2. INTERMITENTEMENTE CILIADO: conducto deferente E. CON CILIOS MÓVILES (KINETOCILIOS) Y CÉLULAS CALICIFORMES: tracto respiratorio F. EPITELIO TRANCISIONAL O POLIMORFO: Vías urinarias EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO H. NO QUERATINIZADO: Mucosas expuestas, tales como la bucal, vaginal, conjuntiva ocular I. QUERATINIZADO: Epidermis EPITELIO CÚBICO ESTRATIFICADO: Conductos glandulares G. EPITELIO CILÍNDRICO ESTRATIFICADO: Uretra membranosa, Conductos glandulares. NOTA: LA NUMERACIÓN USADA REFLEJA LO MOSTRADO POR LA FIGURA Nº 1, MIENTRAS QUE EL ORDEN EN QUE SE PRESENTAN EN EL ESQUEMA PREVIO, INDICA UN PATRÓN DE COMPLEJIDAD CRECIENTE EN LA ESTRUCTURA DE ESTOS EPITELIOS. Figura Nº 1.- LOCALIZACIÓN DE LOS DIFERENTES EPITELIOS DE REVESTIMIENTO: Ver la explicación en el texto (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 2.- EPITELIO PLANO SIMPLE: A. Se observa un vaso sanguíneo, del cual se ha ampliado una porción, mostrada en B. B1: Núcleo prominente de célula endotelial. B2 las células están engranadas entre sí. B3 zona ocluyente. B5 microvellosidades. B6 vesículas de secreción. B7 caveolas pinocíticas. B8 mitocondrias. B9 retículo endoplásmico rugoso. B10 aparato de Golgi. B11 y B13 membrana basal. B12 Tejido conectivo. B14 células musculares lisas (Tomado de Krstic´,1989) Figura Nº 3.- EPITELIO CÚBICO SIMPLE: A. Modelo de la nefrona, indicando la porción tubular de donde se obtuvo la imagen en B. B1. Núcleo en posición apical. B2. Invaginaciones basales de la membrana plasmática. B3. Membrana basal. (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 4.- EPITELIO CILÍNDRICO SIMPLE: obsérvese un túbulo colector renal (9), conectado a una nefrona (de 4 a 8): 10. Células cilíndricas. 11. Membrana basal. 12. espacio intercelular dilatado (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 5.- EPITELIO CILÍNDRICO SIMPLE CON CHAPA ESTRIADA Y CÉLULAS CALICIFORMES: A. Vellosidad intestinal. B. Porción ampliada. B1. complejos de unión. B2 espacios intercelulares dilatados, para favorecer la absorción. B3 microvellosidades. B4 célula caliciforme. B5 gránulos de mucina. B6 membrana basal. B7 capilares. B8 tejido conectivo. (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 6.- EPITELIO CILÍNDRICO SIMPLE INTERMITENTEMENTE CILIADO: Trompa uterina humana. 1. Célula ciliada 2. Kinetocilios 3. raíces ciliares intra-citoplasmáticas 4. células cilíndricas no ciliadas. Obsérvese que poseen microvellosidades y gránulos de secreción (5). (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 7.- EPITELIO CILÍNDRICO SEUDOESTRATIFICADO CON CILIOS INMÓVILES: A. Conducto del epidídimo. 1. espermatozoides; B. Recuadro ampliado de A: 1. membrana basal. 2. células basales. 3. células cilíndricas maduras 4. núcleo. 5. Aparato de Golgi. 6. gránulos de secreción. 7. retículo endoplásmico rugoso. 8. estereocilios. (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 8.- EPITELIO CILÍNDRICO SEUDOESTRATIFICADO CON CILIOS MÓVILES Y CÉLULAS CALICIFORMES: Tracto respiratorio. 1. células basales. 2. células de sostén. 3. células maduras con kinetocilios. 4.kinetocilios. 5. kinetosomas o cuerpos basales. 6. células caliciformes. 7.gránulos de secreción llenos de mucina. 8. célula paracrina. 9. membrana basal. (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 9.- EPITELIO POLIMORFO O TRANCISIONAL (cúbico seudoestratificado): Vías urinarias. 1. membrana basal. 2. células basales. 3. células medias “en raqueta”. 4. células superficiales. Estas suelen ser mono o binucleadas. 5. la zona apical de las células superficiales muestra apariencia arrugada y citoplasma denso, condensado. (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 10.- EPITELIO POLIMORFO O TRANCISIONAL: La figura 10-A muestra el aspecto de este epitelio durante los períodos de relajación vesical (vejiga vacía), mientras que la figura 10-B muestra el aspecto del mismo epitelio durante el estado de distensión (vejiga llena). Como se ve, sea cual sea el estado, todas las células asientan sobre la membrana basal. El nombre de epitelio polimorfo se ha conservado en la nomenclatura en parte por tradición, y en parte para reflejar el cambio de aspecto que sufre bajo el microscopio óptico. (Tomado de Krstic´, 1989) Figura Nº 11.- EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO, NO QUERATINIZADO: Epitelio corneal externo. A. Estructura básica de la córnea: 1. epitelio externo. 2. endotelio. 3. estroma corneal. B. 1. Membrana de Bowman. 2. tonofilamentos de las células epiteliales. C. Estrato basal. D. Estrato medio. E. Estrato superficial. Flecha: micropliegues (Tomado de Krstic´, 1989) 8 2 3 10 11 9 Figura Nº 12.- EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO QUERATINIZADO: Epidermis. A. Estrato basal; B. Estrato espinoso; C. Estrato granuloso; D. Estrato lúcido; E. Estrato córneo. 1. células basales; 2. Pies radiculares; 4. Tejido conectivo sub-epidérmico; 4. gránulos de melanina; 5. Prolongaciones citoplasmáticas; 6. tonofilamentos; 7. queratohialina; 8. escamas de queratina, 9. Fibras nerviosas amielínicas; 10. Canales intercelulares; 11. melanocitos. (Tomado de Krstic´, 1989) A continuación, el estudiante procederá a observar las preparaciones microscópicas disponibles, a fin de identificar los diferentes epitelios de revestimiento explicados por el docente y mostrados en estas páginas. CUESTIONARIO DE AUTOEVALUACIÓN 1. ¿Qué funciones cumple un epitelio de revestimiento dotado de chapa estriada y células caliciformes? 2. ¿Qué funciones NO cumple un epitelio dotado de kinetocilios y células caliciformes? 3. ¿Cómo justificaría Ud. el que un epitelio sea clasificado como seudoestratificado? 4. ¿Qué tipo de protección ofrece la Queratinización de la epidermis? 5. ¿Qué tipo de protección ofrece la secreción de las células caliciformes a nivel intestinal? 6. ¿Qué tipo de protección ofrece la secreción de las células caliciformes a nivel de vías respiratorias? 7. Investigue los siguientes conceptos: Complejo de unión, membrana basal, cuerpos pinocíticas. basales ciliares, hemidesmosomas, caveolas
