PROGRAMACIÓN PARA EL CULTIVO POR LOTE Y ALIMENTADO 3BM2

PROGRAMACIÓN PARA EL CULTIVO POR LOTE.
Coordinadores: M. en I. Agustín Altamirano ; Ing. José León Rangel Ramírez
Día
Lunes
9
febrero
Hora
17:00
pm
Meta
Preparación
de inoculo
Actividades previa
Preparar 80 mL de
medio de cultivo (de
acuerdo al manual
de prácticas) y
agregar 40 mL a
matraces de 125 mL.
Esterilizar (15 min a
15 psi).
Enfriar.
Martes
10
febrero
7:00
am
Inoculación
de
reactor
Preparar 320 mL de
medio de cultivo (de
acuerdo al manual
de prácticas) y
agregar al reactor de
tanque agitado de
500 mL.
Preparar el reactor
para esterilizarlo,
colocándole
mangueras y filtros.
Esterilizar el reactor
conteniendo el
medio de cultivo.
Hacer una tabla (en
hoja de 90 x 120 cm)
con los siguientes
títulos de columna:
fecha, hora, t (h), As,
x (g/l), s (g/l).
Traer jeringa estéril
de 5 mL.
Preparar 18 tubos
ependorf y
etiquetarlos para
cada muestra.
Martes 7:00
10
8:30
febrero 10:00
11:30
13:00
14:30
16:00
Obtención de
datos de
crecimiento
celular y
consumo de
sustratos
Actividades
Hacer por duplicado lo
siguiente:
En condiciones
asépticas, agregar 5
mL de medio estéril
(contenido en el
Matraz de 125 mL) al
tubo que contiene la
cepa, hacer
suspensión y regresar
al matraz.
Incubar a 30°C y 100
rpm, durante 19 h.
Fijar las condiciones
de operación del
reactor (aireación 1
vvm y 300 rpm).
En condiciones
asépticas, agregar el
inoculo producido (en
los dos matraces de
125 Ml) al reactor.
Tomar 3 mL de
muestra cada 1.5 h.
leer absorbancia a 540
nm y determinar
concentración celular.
Centrifugar 1mL de
medio a 5000 rpm
durante 10 min.
Decantar el liquido
clarificado a un tubo
ependorf y mantener
en refrigeración, para
posteriormente
determinar
concentración de
glucosa.
Alumnos
1 - Pereyra
2 - Espinoza
3 - Mercado
4 - Reza
5 - Llanos
7:00
1 – Sánchez H.
2 - González
3 - Trejo
4 - Rocha
5 - Ponce
7:00
8:30
12345-
García
Beltrán
Hernández
Salinas L.
Ponce
10:00 todos
11:30 todos
13:00
12345-
Ortega
Alcántara
Enríquez
Márquez
Ponce
14:30
12345-
Pérez
Beltrán
Enríquez
Cuéllar
Llanos
16:00 Muestra y Cambio
1- Pereyra
2- González
3- Trejo
4- Reza
5- Encino
LOTE ALIMENTADO.
Día
Hora
Meta
10
febrero
16:00
Inicio del
cultivo por
lote
alimentado
Martes
10
febrero
16:00
17:00
18:00
19:00
20:00
21:00
22:00
Obtención
de datos de
crecimiento
celular y
consumo de
sustrato
Actividades
previa
Preparar bomba
peristáltica
calibrándola a un
flujo de 0.18 L/h.
preparar 1.2 L de
medio de cultivo
( de acuerdo al
manual de
practicas) en un
recipiente con
las mangueras
apropiadas y
esterilizar.
Haber realizado
un cultivo por
lotes.
Hacer una tabla
(en hoja de 90 x
120 cm) con los
siguientes títulos
de columna:
fecha, hora, t(h),
Δv(L), V(L), As,
x(g/L), s(g/L), xV
(g), sV(g).
Traer jeringa
estéril de 5 mL.
Preparar 16
Actividades
Alumnos
En condiciones
asépticas conectar las
mangueras de
alimentación del medio
de cultivo.
Iniciar la alimentación
del medio de cultivo con
un flujo de 0.18 L/h.
16:00
Tomar 3 mL de muestra
cada 1.0 h. leer
absorbancia a 540 nm y
determinar
concentración celular.
Centrifugar 1 mL de
medio a 5000 rpm
durante 10 min.
Decantar el líquido
clarificado a un tubo
ependorf y mantener en
refrigeración, para
16:00
17:00
1- Pérez
2- Sánchez
3- Trejo
4Rocha
5- Araujo
18:00 ,
1- Sánchez H.
2- Espinoza
3- Hernández
4- Salinas
5- Encino
19:00
tubos ependorf y
etiquetarlos para
cada muestra.
posteriormente
determinar
concentración de
glucosa.
1234520:00
1234521:00
1234522:00
12345-
Miér.
11
febrero
Equipo 3
Equipo 1
Equipo 2
Equipo 5
Equipo 4
7:00
am
Esterilización
y lavado
Preparación del
reactor y
materiales
Esterilizar a 15 psi
durante 15 min enfriar y
lavar.
Caracterización de la bomba peristáltica (8:30h)
DNS (8:30)
Reactor, preparación y acondicionamiento (1:30h)
Preparación de medio de cultivo (13:00)
Esterilización (15:00)
García
Alcántara
Montoya
Reza
Araujo
Pereyra
Beltrán
Montoya
Cuéllar
Encino
Ortega
Sánchez
Mercado
Márquez
Araujo
Ortega
Sánchez
Mercado
Reza
Encino
Un integrante de cada equipo
1- García
2- González
3- Hernández
4- Márquez
5- Ponce