FICHA DE CONSTRUCCIÓN DEL MARCO TEÓRICO 1. DATOS GENERALES Estudiantes Camarena Salinas, Echevarría Tovar, Meza Huayta, Pando Melchor Tema de investigación Propagación in vitro del Sphagnum magellanicum Palabras claves Propagación de musgo, In vitro, musgo, sphagnum magellanicum 2. ANTECEDENTES DE INVESTIGACIÓN Variables Revisión de investigaciones realizadas Medio de cultivo Los tratamientos empleando las auxinas y citoquininas obtuvieron El porcentaje de sobrevivencia promedio durante el experimento fue de 79,2%, como efecto de sustancias reguladoras, obtuvieron en los polos y extremos de los polos (Villanueva, Ávila, Mansilla, Abades, & Cáceres, 2013) Propagación in vitro El cultivo in vitro las especies fueron iniciados a partir de las esporas de esporofitos inmaduros. En la cultura protonema secundaria de Eurhynchium praelongum,la regeneración espontánea se produjo con éxito. Las culturas protonema de Aloina aloides, Brachythecium velutinum y Purpureus ceratodon revertido a la cultura caulonema donde se produjo la formación de yemas (M. Sabovljevic, Bijelovic, Dragicevic, & Ecología, 2003). En este estudio que se hizo se han observado filamentos similares en P. thwaitesii tras el contacto de gametóforos con sustrato sólido, mientras que los rizoides verdaderos en todo momento, la longitud de los gametofitos de B. plumosum surge al colocarlos horizontalmente en un medio de cultivo. El subcultivo de P. thwaitesii dio lugar a una nueva población al pasar a través de las etapas cloronémica y caulonemal, mientras que B. plumosum directamente se regeneran en nuevos gametofitos pasando por la etapa protonema (Awasthi, Nath, & Asthana, 2013). Para el artículo de (Tacoronte, León, Olivo, & Vielma, 2009) obtuvieron una respuesta satisfactoria bajo la esterilización de las cápsulas cerradas, propiciando la germinación, sino se emplea la esterilización la contaminación del cultivo es determinante para no producir la germinación de esporas en caso de los gametofitos se requirió el uso de papel filtro húmedo en las cajas Petri para así evitar la contaminación por bacterias. En la mayoría de especies de musgo se alcanzó la germinación esperada a los 25 días, a los 3 meses observaron numerosas rizoides y continuo crecimiento. En el artículo de (García, Gómez, Avonce, Zarazúa, & Barrera, 2016) se obtuvo excelentes resultados en la germinación con el cultivo de esporas en el medio de cultivo líquido y solido BDC, obteniendo la germinación de los mugos. Emplearon el cultivo in vitro es esencial para el uso de briofitas en la investigación celular, del desarrollo y molecular el descubrimiento de nuevos caracteres para la sistemática, la conservación de taxones raros y la comprensión de la importancia funcional de la asociación de hongos y cianobacterias en la briofitas y hepáticas (Duckett, et al., 2004). Establecieron cultivos axenicos y clonales para producir grandes cantidades de biomasa de cinco especies de Sphagnum en condiciones de laboratorios estandarizados se demuestra que los cultivos escalables in vitro mejoran la disponibilidad de especies de interés para la investigación y la aplicación, así como también representa un recurso importante para estudios futuros (Beike et al., 2015). Las primeras células protonemáticas surgieron entre el cuadragésimo y el quincuagésimo día, y los nuevos gametófitos surgieron aproximadamente cuarenta y cinco días después, caracterizando una fase prolongada del protonema. La intensidad luminosa influenció en el desarrollo protonemático y en el surgimiento de los botones gametofíticos, pero el pH no fue un factor limitante para el cultivo in vitro del musgo Octoblepharum albidum Hedw (André, 2010). Con el fin de desarrollar un plan de protección a esa especie, se elaboraron los requisitos de preservación ex situ de las Entosthodon hungarius. Las condiciones para el cultivo axénico in vitro se establecieron y los parámetros ideales de crecimiento se alcanzaron para conseguir gametófitos completamente desarrollados, listos para ser reintroducidos en sus áreas nativas y en otras áreas potencialmente nativas, donde esa especie ya fue reportada (M. S. Sabovljevic et al., 2012). 3. FUNDAMENTOS TEÓRICOS Principio, ley o teoría Fisiología del cultivo in vitro Totipotencia Crecimiento y desarrollo Fundamento La micropropagación es una técnica, desarrollada para la producción en masa de plantas, que ha sido utilizada con éxito desde los años 60. La principal ventaja de esta técnica estriba en la multiplicación rápida de material. En la mayor parte de los procedimientos empleados actualmente no se hace referencia al control efectivo del desarrollo de las plantas in vitro. Sin embargo, las tasas de crecimiento, desarrollo y muchas de las características fisiológicas y morfológicas de las plantas formadas in vitro están influenciadas por el ambiente físico, químico y gaseoso de los recipientes (Cañal, Rodríguez, Fernández, Sánchez, & Majada, 2001). El principio de totipotencia, que indica que cualquier célula vegetal contiene una copia íntegra del material genético de la planta a la que pertenece sin importar su función o posición en ella, y por lo tanto tiene el potencial para regenerar una nueva planta completa (“Revista Digital Universitaria,” n.d.). En investigaciones desarrolladas sobre el tema de diferenciación celular, Gottlieb Haberlandt en 1898 aisló células y tejidos de plantas superiores y las colocó en soluciones nutritivas para su crecimiento y estudio, dando origen de esta manera a la técnica de cultivo de células y tejidos vegetales. Así, Haberlandt fue el pionero en el cultivo in vitro de células vegetales completamente diferenciadas, habiendo reportado sus estudios y resultados en 1902 (“Revista Digital Universitaria,” n.d.). El crecimiento y desarrollo de las células, tanto individual como colectivamente, a su vez está dirigido por una variedad de señales ya sean las hormonas, la luz, la temperatura, la gravedad, depredación de insectos, las enfermedades, e incluso la posición de algunas células con respecto a otras células. Definido el crecimiento como aumento irreversible de la masa de protoplasma, este incremento puede conseguirse mediante dos procesos claramente diferenciados: división celular y elongación celular (Marami, 2014). 4. BASES CONCEPTUALES Variables Definición conceptual Medio de cultivo Propagación in vitro 5. HIPÓTESIS Problema general ¿Cuál es el efecto del medio de cultivo con auxinas y citoquininas para la propagación in vitro del Sphagnum magellanicum? Hipótesis general Las fitohormonas (auxinas y citoquininas) permiten, en el proceso de regeneración en menor tiempo de lo normalmente necesita la especie, esto debido a las fitohormonas agregadas a los medios de cultivo de tipo de concentración que cuenta cada tratamiento, influye acelerando la propagación in vitro de caulidio y filidios del Sphagnum magellanicum Problema específico 1 ¿Cuáles son los efectos de las auxinas en la fase de multiplicación Hipótesis específica 1 Problema específico 2 Hipótesis específica 2 ¿Cuáles son los efectos de las auxinas en la fase de enraizamiento?
