Cartilla Agropecuaria

TOMA, CONSERVACIÓN Y ENVÍO DE
MUESTRAS PECUARIAS Y AGRÍCOLAS
AL CENTRO DE DIAGNÓSTICO
GOBERNACIÓN DE ANTIOQUIA
CONVENIO ICA- SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL
MEDELLÍN, 2009
La propiedad intelectual de este material pertenece a la
Gobernación de Antioquia, Secretaría de Agricultura y
Desarrollo Rural. Prohibida la reproducción total o parcial,
por cualquier medio o con cualquier propósito, sin la
autorización escrita de estos.
Segunda edición: Diciembre de 2009
Financiación de la publicación:
Convenio ICA - Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural
Diseño, diagramación e impresión
Digital Express Ltda. - Medellín
Colaboradores
Funcionarios Instituto Colombiano Agropecuario ICA
Área Pecuaria
Sandra Patricia Acevedo Garcés y
Amparo Gómez Ramírez.
Bacteriólogas Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural
Fotografías
Todas las fotografías utilizadas en la impresión de esta cartilla,
fueron aportadas por funcionarios de la Secretaría de Agricultura
y Desarrollo Rural de Antioquia
Impreso y hecho en Colombia
Medellín, 2009.
TOMA, CONSERVACIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS
PECUARIAS Y AGRÍCOLAS AL CENTRO DE DIAGNÓSTICO
Luis Alfredo Ramos Botero
Gobernador de Antioquia
Edgar Arrubla Cano
Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural
Juan Guillermo Vélez González
Director Desarrollo Rural
Nestor Yarce García
Coordinador Regional Antioquia
Instituto Colombiano Agropecuario
Cristobal Jose Díaz Anaya
Coordinador Equipo Técnico de Sanidad
Preparado por:
Francisco Javier Pabón Hernández
Médico Veterinario
Gloria Elena Guzmán Restrepo
Ingeniera Agrónoma, M. Sc
Susana Maya Bolívar
Ingeniera Agrónoma, Ph. D
Gobernación de Antioquia
Convenio ICA - Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural
Medellín, 2009
ÍNDICE
1.
Diagnóstico pecuario_____________________________________________
1.1 Factores básicos en la toma y envío de muestras al centro de diagnóstico_________
1.1.2 Calidad de la muestra________________________________________________
1.1.3 Cantidad de la muestra_ _____________________________________________
1.1.4 Tiempo en la ruta crítica de la muestra___________________________________
13
13
13
13
14
2.
Recomendaciones generales para el envío de
muestras al centro de diagnóstico_________________________________
2.1 Pruebas diagnósticas solicitadas al centro de diagnóstico_____________________
2.2 Sugerencias para toma de muestras de sangre_____________________________
2.2.1 Sugerencias para hematología_________________________________________
2.2.2 Anticoagulantes mas usados_ _________________________________________
2.2.3 Sugerencias para química sanguínea, suero o plasma________________________
2.3 Sugerencias en toma y envío de muestras para bacteriología_ _________________
2.3.1 Secrecion de oidos__________________________________________________
2.3.2 Secreciones oculares_ _______________________________________________
2.3.3 Secreciones vaginales _______________________________________________
2.3.4 Líquido cefalorraquídeo ______________________________________________
2.3.5 Liquidos diferentes al cefalorraquídeo____________________________________
2.3.6 Hemocultivos______________________________________________________
2.3.7 Urocultivos_ ______________________________________________________
2.3.8 Sugerencias en cultivo bacteriológico de leches_ ___________________________
2.4 Recuento de celulas somáticas en leche (rcs)_ _____________________________
2.5 Sugerencias en la toma y envío de muestras para un estudio parasitológico_______
2.5.1 Coprológicos_ _____________________________________________________
2.5.2 Hemoparasitos – parásitos en sangre____________________________________
2.5.3 Ectoparasitos - parásitos externos______________________________________
2.5.4 Recomendaciones para el estudio cultivo micológico en pelos__________________
2.5.5 Recomendaciones para el estudio cultivo micológico_ _______________________
2.6 Recomendaciones para el estudio de patología_____________________________
2.7 Recomendaciones para examen de citologías______________________________
2.8 Procedimiento frente a una patología (enfermedad) en un predio_______________
2.9 Equipo básico en oficinas de sanidad para la toma de muestras pecuarias_________
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30
30
32
Diagnóstico agrícola _____________________________________________
Factores básicos en la toma y envío de muestras agrícolas_ ___________________
Calidad de la muestra________________________________________________
Cantidad de la muestra ______________________________________________
Tiempo en la ruta crítica de la muestra___________________________________
Toma de diferentes tipos de muestras____________________________________
Plantas grandes____________________________________________________
Plantas pequeñas___________________________________________________
44
45
45
46
46
46
47
47
3. 3.1 3.1.1
3.1.2
3.1.3
3.2
3.2.1
3.2.2
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5
4.
4.1
4.1.1
4.1.2
4.2
4.3
4.3.1
4.4
Diagnóstico de daños causados por insectos
plagas (diagnóstico entomológico)_________________________________
Procedimiento general de diagnósticos entomológicos_______________________
Estructura afectada sin presencia del insecto causante_______________________
Área lesionada y presencia del insecto causante____________________________
Como enviar muestras que contengan insectos ____________________________
Muestra para determinar organismos benéficos en insectos_ __________________
Muestras a enviar al laboratorio________________________________________
Equipos de recolección de insectos______________________________________
48
48
49
50
50
52
52
53
5.
5.1
5.1.1
5.2
5.3
Diagnóstico de daños causados por
enfermedades (diagnóstico fitopatológico)_________________________
Diagnóstico de la enfermedad_ ________________________________________
Síntomas por causas bióticas__________________________________________
Frutos y otros tejidos frescos o suculentos:________________________________
Flores y frutillos cuajados_____________________________________________
57
57
57
58
59
6.
Toma y envío de muestras para análisis nematológico_______________ 60
7.
Síntomas por circustancias particulares del ambiente_______________ 61
8.
Instrumentos para muestreo de enfermedades_____________________ 62
9.
Muestras para determinar hongos antagónicos_____________________ 63
10.
Síntomas de presunción viral_ ____________________________________ 63
11.
Muestras para determinar daño por herbicidas_ ____________________ 64
12.
Muestras para determinar viabilidad de semillas____________________ 65
13.
Anexos_ ________________________________________________________ 66
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ÍNDICE DE TABLA
Tabla 1. Muestras para exámenes bacteriológicos______________________________ 33
Tabla 1. Muestras para exámenes bacteriológicos (continuación)__________________ 34
Tabla 1. Muestras para exámenes bacteriológicos (continuación)__________________ 35
Tabla 2. Muestras para exámenes de virología________________________________ 36
Tabla 3. Muestras para exámenes de histopatología____________________________ 37
Tabla 4. Muestra para exámenes de parasitología (parásitos internos) ______________ 37
Tabla 5. Muestras para exámenes de ectoparásitos (parásitos externos)_ ____________ 38
Tabla 6. Muestras para electrolitos (Ionogramas)______________________________ 38
Tabla 7. Muestras para exámenes de hematozoarios (parásitos en sangre)_ __________ 39
Tabla 8. Muestras para exámenes de enfermedades reproductivas_ ________________ 40
Tabla 9. Muestras de química sanguínea para enfermedades metabólicas____________ 41
Tabla 10. Muestras de biología molecular PCR (Reacción de la Polimerasa en Cadena)_ __ 41
Tabla 11. Muestras para exámenes de toxicología_ _____________________________ 42
Tabla 11. Muestras para exámenes de toxicología (continuación)___________________ 43
Tabla 12. Síntomas más comunes encontrados en plantas asociados a daños
por insectos o artrópodos_________________________________________ 55
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PRESENTACIÓN
El Centro de Diagnóstico Agropecuario Convenio Ica Secretaria de Agricultura y Desarrollo Rural,
cuenta con profesionales calificados en las diferentes áreas de la sanidad, los cuales además de
desempeñar labores de diagnóstico como un servicio a la comunidad, se encargan de apoyar la
vigilancia zoo y fitosanitaria de nuestro Departamento a través del desarrollo de campañas de
sanidad agropecuaria y proyectos de investigación aplicada en los temas de interés para nuestra
nación y los países con los cuales se quiere llegar a tener un comercio de productos de este
subsector, con miras al establecimiento y permanencia en los mercados internacionales.
Ha sido para el centro de diagnóstico agropecuario del convenio una gran preocupación el
poco uso que se da al laboratorio para el diagnóstico de enfermedades y plagas, principalmente
en el área agrícola y es su deseo motivar el uso de una herramienta tan importante como el
laboratorio para la obtención de diagnósticos acertados, con lo cual se puedan hacer manejos y
controles mas efectivos disminuyendo así los riesgos de perdidas económicas en la producción
agropecuaria en un alto porcentaje . Por esta razón el equipo técnico de este centro Agropecuario
Convenio Ica – Secretaria de Agricultura, se dio a la tarea de elaborar una cartilla en forma
ordenada, clara y práctica, con criterios precisos en lo técnico a fin de que se convierta en una
guía para los procedimientos a nivel de campo en el correcto manejo, toma, conservación y
envió del material vegetal y muestras pecuarias al centro de diagnóstico.
Se espera que esta cartilla sea un manual de procedimientos que permita a profesionales,
técnicos y productores del sector agropecuario prevenir, corregir o mitigar los impactos negativos
generados por plagas, enfermedades y sustancias nocivas de la manera mas amigable y racional
con el medio ambiente, procurando la seguridad alimentaría, obtención de productos inocuos,
la investigación y el desarrollo tecnológico, haciendo así mas eficientes las actividades agrícolas
y pecuarias de Antioquia.
EDGAR ARRUBLA CANO
Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural
Departamento de Antioquia
Medellín, octubre 2009.
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CONVENIO ICA - SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLÍN, 2009
INTRODUCCIÓN
Los servicios que brinda el Centro de Diagnóstico agrícola y pecuario del convenio ICA-SECRETARIA
DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL, dan a los profesionales del sector herramientas para
desarrollar su trabajo de asistencia técnica y asesoría a los diferentes productores. Los resultados
del laboratorio son valiosos siempre que se valide la información en campo.
Aunque la experiencia y el ojo clínico conducen a los profesionales a un diagnóstico presuntivo,
no siempre aquellos son confiables, pues las patologías pueden tener sintomatologías semejantes
que pueden llevar a diagnosticar y tratar equivocadamente la problemática, con un incremento
en los costos de producción, desmereciendo la calidad y cantidad del producto final. Por tal
motivo el uso del laboratorio es la mejor herramienta para la toma de decisiones, además, en
el Centro de Diagnóstico se tiende a la búsqueda de técnicas cada vez más rápidas, sensibles,
específicas y confiables para un correcto diagnóstico.
En el Centro de Diagnóstico se reconocen e identifican enfermedades y plagas que afectan
la producción agropecuaria, mediante la aplicación de modernos métodos y procedimientos
diagnósticos e investigación aplicada de laboratorio y de campo.
Los diagnósticos de laboratorio, permiten ir creando un historial fitosanitario y zoosanitario de
las patologías de un municipio, una región o un Departamento, enfocando estas problemáticas
desde el punto de vista de riesgo poblacional, y no individual, contribuyendo a formular los
diferentes planes, programas y proyectos a través de campañas de prevención, control y manejo
que conducen a una verdadera vigilancia epidemiológica.
El centro de diagnóstico cuenta con un equipo de profesionales altamente calificados y con
experiencia, que brindan la asesoría indispensable en estas áreas. Además garantizamos
oportunidad y calidad en los servicios brindados.
“UN DIAGNÓSTICO A TIEMPO ES MÁS EFECTIVO
Y ECONÓMICO QUE UN BUEN CONTROL”
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CONVENIO ICA - SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLÍN, 2009
1. DIAGNÓSTICO PECUARIO
1.1 FACTORES BÁSICOS EN LA TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS AL CENTRO DE
DIAGNÓSTICO
El éxito para un diagnóstico correcto y oportuno depende de tres factores:
• Calidad de la muestra
• Cantidad de la muestra
• Tiempo transcurrido en la ruta crítica 1.1.2 CALIDAD DE LA MUESTRA
La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad o aparición del problema,
para evitar contaminación, principalmente por bacterias, hongos o microorganismos del medio
ambiente.
El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no contaminado, ni con otros productos
que permitan alterar la muestra.
Igualmente, se debe tener presente de no maltratar al animal cuando se vaya a tomar la muestra
ya que nos puede alterar los resultados, por lo tanto sujetar bien y adecuadamente el animal,
sin causarle traumas.
Cuando utilicemos medios o líquidos conservadores como glicerina tamponada, medios de
enriquecimiento y otros, no deben estar adulterados, ya que no cumplen con el objetivo de
conservar la muestra hasta su procesamiento. Además, se debe utilizar el medio adecuado para
el transporte de la muestra como refrigeración o congelación si la muestra lo requiere.
Los instrumentos para tomar las muestras como: Tubos, agujas, pinzas, tijeras, jeringas y otros,
al igual que los recipientes a usar deben ser estériles y cerrados herméticamente. La muestra
debe ser transportada al laboratorio en el menor tiempo posible, toda muestra debe ser remitida
con la mayor información posible, ya que los datos allí consignados son vitales para un buen
diagnóstico y una buena recomendación.
1.1.3 CANTIDAD DE LA MUESTRA
Muestra: Es el material biológico tomado de las lesiones que ocasiona una enfermedad, y que
permite al laboratorio identificar su causa. Esta puede ser: Fluidos corporales, sangre, suero,
semen, orina, secreciones, materia fecal, órganos y tejidos.
CONVENIO ICA - SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLÍN, 2009
13
La muestra debe ser lo más representativa en cantidad, tanto del animal como del hato (porcentaje
de animales de la finca).
En trastornos nerviosos: enviar fragmentos de cerebro y/o cerebelo.
Trastornos digestivos: fragmentos de intestinos y/o estómagos.
Trastornos respiratorios: fragmentos de pulmones y/o tráquea.
Lo anterior puede ir acompañado de otro tipo de muestra como orina, sangre, secreciones,
materia fecal y otras.
“Una muestra suficiente, reciente y limpia, tiene alta probabilidad de
diagnóstico”
1.1.4 TIEMPO EN LA RUTA CRÍTICA DE LA MUESTRA
Es el tiempo transcurrido entre la notificación del caso y la entrega de los resultados del
laboratorio, es un tiempo controlado por el hombre aumentándolo o disminuyéndolo, entre más
corto sea el tiempo se va obtener un diagnóstico correcto y oportuno.
Factores que intervienen:
•
•
•
•
•
•
Notificación del caso
Visita a la finca
Toma de muestras
Envío de muestra al laboratorio
Recibo de muestras en el laboratorio
Resultado de laboratorio
El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser útiles para el
diagnóstico.
SIGNOS Y SÍNTOMAS
Secreción vulvar en búfala
Vulvovaginitis en bovinos
Trastornos nerviosos en ternera
Diarrea en lechones
Signo nervioso en bovino
Erupciones en pezones bovino
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Hematuria enzoótica bovina
Caquexia muscular distrófica
Desprendimiento del epitelio gingival
en bovinos
Equino caquéctico
LESIONES MACROSCÓPICAS
Lesiones petequiales en riñón
Úlceras en botón en intestino
Inflamación y material purulento en
tonsilas
Áreas hemorrágicas en vejiga
Órganos cavidad abdominal
Placentitis en bovinos
15
Pulmón bovino, con lesiones granulomatosos
por tuberculosis
Bovino con úlceras en lengua
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2. RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL ENVÍO DE
MUESTRAS AL CENTRO DE DIAGNÓSTICO
• Al Laboratorio, se pueden enviar animales pequeños (especies menores) enfermos, órganos,
tejidos, secreciones, líquidos del cuerpo, parásitos y otros.
• Enviar muestras de animales recientemente fallecidos, en menos de 2 horas, ya que comienza
el proceso de autolisis en los tejidos. En especies de gran tamaño (bovinos, equinos y otros)
es preferible enviar determinadas muestras.
• Cuando el animal lleve más de dos horas de muerto y no se le ha dado refrigeración adecuada,
no deben enviarse muestras al laboratorio para el análisis microbiológico, ya que puede
haber contaminación por otros microorganismos diferentes al agente causal.
• Toda muestra que llegue al laboratorio debe ir acompañada de su respectivo protocolo
completamente identificado.
• Cuando se realicen necropsias, primero tome muestras para bacteriología, virología y
posteriormente para histología (tejidos) y luego para parasitología.
• Los animales denominados “colas” (pobre condición física) no deben ser enviados para
exámenes, excepto si son los únicos animales enfermos.
• Cuando no se tenga conocimiento sobre que muestras tomar en caso de una enfermedad, se
debe llamar al Centro de Diagnóstico preferiblemente para solicitar la asesoría e información
requerida.
• Rotule e identifique la muestra adecuadamente, no utilice tinta ni cinta que se desprenda por acción de la humedad.
• Siempre utilice instrumental y recipientes estériles, limpios y secos para microbiología, así
como para los otros tipos de muestras.
ENVÍO, TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS
16
Tejidos separados en bolsas plásticas
y tubos plásticos estériles bien
identificados
Transporte de tejidos separados
en bolsas plásticas y termo con
refrigeración y su respectivo protoloco
Transporte de tejidos en bolsa plástica
con refrigeración en caja de cartón
herméticamente cerrada y su respectivo
protocolo
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2.1 PRUEBAS DIAGNÓSTICAS SOLICITADAS AL CENTRO DE DIAGNÓSTICO
• Aislamiento e identificación del agente patógeno de las muestras tomadas del animal, como:
Bacterias, virus, hongos, parásitos y otros.
• Aumento o descenso de títulos de anticuerpos en suero de un animal como respuesta a un
estímulo inmunógeno determinado.
• Determinación de las variaciones cualitativas en muestras como orina, sangre, materia fecal
(aspecto, olor, color, otros) y cuantitativas como (densidad, pH, hemoglobina, hematocrito,
huevos por gramo), con respecto a los niveles establecidos según la especie animal.
SIGNOS DE ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
Aborto en bovinos, es de las principales manifestaciones observadas en enfermedades reproductivas por causas infecciosas y
estos se presentan generalmente después de los 45 días de gestación.
ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
Abortos y momificaciones en bovinos
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Abortos en porcinos
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2.2 SUGERENCIAS PARA TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE
La alteración de los valores en la sangre, es por lo general debido a la Hemolisis, causada por:
•
•
•
•
•
•
Jeringas, agujas o tubos húmedos.
Tubos calientes por los rayos solares.
Movimientos bruscos en la muestra tanto en la toma como el transporte.
Congelación de la muestra.
Contaminación bacteriana de la muestra.
Fricción por agujas de reducido calibre.
2.2.1 SUGERENCIAS PARA HEMATOLOGÍA
El anticoagulante de elección es el EDTA, por preservar mejor los elementos celulares por 6
horas. También se puede usar Heparina, oxalatos y citratos. El suero y el plasma no deben ser
conservados más de 6 horas en refrigeración sin ser separados de los demás componentes
sanguíneos, ya que esto trae como consecuencia alteración en los diferentes metabólicos de la
sangre y por lo tanto errores en los resultados del laboratorio.
• Desinfección de las zonas donde se va hacer la punción.
• Relación sangre - anticoagulante, es muy importante, la dosis es un miligramo del anticoagulante por 1 ml de sangre.
• Mezclar la muestra sangre-anticoagulante por inversión más o menos 10 veces y suavemente
para evitar hemólisis.
• No causar punción traumática en el animal para evitar hemólisis
TOMA, ENVÍO Y CONSERVACIÓN DE SUEROS
Inserción de la aguja en el
capuchón
Toma de sangre en bovino
con vacutainer en vena
caudal, previa desinfección
del sitio
Separación del suero
Empaque, conservación e
identificación del suero en
viales
2.2.2 ANTICOAGULANTES MAS USADOS
18
EDTA (sales de potasio o de sodio en concentración de 1mg / 1 ml de sangre), valido en todas las
especies. Heparina (0.5 Mg. por 4.5 ml de sangre), oxalatos (potasio y sodio) y citrato de sodio
al 3.8%
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ENFERMEDADES HEMOPARASITARIAS
Anaplasma en bovinos
Babesia en bovinos
Tripanosoma en bovinos
2.2.3 SUGERENCIAS PARA QUÍMICA SANGUÍNEA, SUERO O PLASMA.
• La posición adecuada y sujeción afectiva del animal son esenciales para un muestreo con
éxito, un tiempo adicional para ganar confianza del animal es generalmente de gran utilidad.
• Minimizar manejo físico humano, ya que un animal asustado, adrenalizado puede originar
resultados equivocados en varios análisis, por ejemplo, la glucosa.
• La asepsia debe realizarse en sentido contrario al crecimiento del pelo del animal y en forma
circular del centro hacia la periferia .Después de la punción el sitio debe dejarse seco, limpio
y libre de sangre, ya que cualquiera humedad o materia orgánica favorece las infecciones.
• Las técnicas y sitios de punción varían de una especie a otra, según la localización de los
vasos sanguíneos convenientes y el espesor y dureza de la capa de la piel, por ejemplo la
vena yugular, mamaria, caudal y radial ( alar) .La cantidad máxima de sangre a extraer será
la estrictamente necesaria para las pruebas, mas o menos 2 mililitros.
• La muestra debe separarse según el caso en plasma o suero, rotularse correctamente,
analizarse inmediatamente o conservarse adecuadamente refrigerada a 4 grados C, para el
posterior análisis de las diferentes pruebas bioquímicas.
TOMA DE SANGRE EN PORCINOS
Sujeción e inmovilización de porcinos en toma de sangre en la vena cava, previa desinfección del sitio
Serología: En el suero se detectan anticuerpos específicos contra determinados antígenos, para
lo cual se recomienda tomar muestras pareadas, de un mismo animal con un intervalo de 15
días entre ellas. Las muestras pueden ser 10 ml de sangre sin anticoagulante conservadas en
refrigeración o 2 ml de suero conservado en congelación para la prueba deseada.
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2.3 SUGERENCIAS EN TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA BACTERIOLOGÍA
Las muestras para estudio deben ser lo más frescas posibles, conservadas en refrigeración (no
congelar), tomadas asépticamente y antes del tratamiento con antibióticos. En caso de ser
hisopados, conservar en medio de mantenimiento.
2.3.1 SECRECIÓN DE OIDOS
Materiales: Escobillones estériles, porta objetos estériles, guantes, Solución salina estéril,
mechero y medio de transporte.
• Recolección de la muestra: La muestra se debe mantener y preservar en solución salina si se
va a enviar de inmediato al laboratorio, de lo contrario se mantiene en medio de transporte
(Stuart).
• En las secreciones y exudados la interpretación del examen directo es difícil, tanto por la
contaminación que generalmente se produce durante la obtención, como por el escaso
numero de microorganismos en la muestra, por esta razón el examen definitivo es el cultivo
y para la toma de la muestra deberán emplearse técnicas de asepsia rigurosa.
• La secreción de oído se obtiene con escobillones estériles con el cual se toma la cantidad
mayor posible de ambos oídos en caso de que esta este seca o muy escasa se impregna los
escobillones con solución salina estéril en ambos casos la muestra se toma mediante el frotis
del conducto auditivo externo sin profundizar el tímpano.
• Se hace el extendido en placa previamente desinfectada necesariamente haciéndolo en forma
circular para la coloración de Gram ya que esta es una ayuda valiosa, para observar reacción
leucocitaria, bacterias y hongos; se introducen los escobillones en medio de transporte
adecuado, es necesario tomar de ambos oídos con el fin de establecer una comparación en
el crecimiento de la flora.
• El volumen de la muestra debe ser representativo, al igual los algodones de escobillones
impregnados del material.
BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA
20
Hisopado nasal en porcinos
Hisopado traqueal en aves
Hisopados y medio de conservación para cultivo
bacteriológico o viral
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2.3.2 SECRECIONES OCULARES
Materiales: Guantes, escobillón estéril o espátula estéril, medio de transporte, placas estériles
y solución salina.
• Recolección de la muestra: La muestra para el estudio de una conjuntivitis, se obtiene
frotando con un escobillón estéril los fondos de los sacos conjuntivales o el material que se
acumula en el ángulo lagrimal.
• Las muestras de úlceras cornéales las debe obtener el médico veterinario, quien lo hace
raspando la lesión muy cuidadosamente con una espátula estéril, se debe realizar en ambos
ojos y hacer extendido en placa estéril para ambos casos.
• El volumen de la muestra debe ser representativo, el algodón del escobillón impregnado del
material; la muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte (Stuart).
2.3.3 SECRECIONES VAGINALES
Materiales: Especulo estéril, escobillones estériles, porta objetos estériles, medio de transporte
y guantes.
• Recolección de la muestra: Se debe realizar un lavado estricto de los genitales externos
con agua y jabón, secando en lo posible con toallas desechables. Realizar desinfección con
alcohol yodado y alcohol antiséptico (3 veces cada uno). Se introduce el especulo estéril
para proceder a la toma de la muestra con un escobillón estéril el cual se introducirá por
todo el centro hasta llegar al cérvix tratando de no tocar las paredes, se saca el escobillón
con la muestra, se hace el extendido para la coloración de Gram y se coloca en el medio de
transporte adecuado.
• En caso de sospechar hongos o tricomonas colocar una muestra en solución salina estéril
para la realización del directo.
• La muestra se debe preservar y mantener en el medio de transporte adecuado.
• El volumen de la muestra debe ser representativo.
2.3.4 LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
Materiales: Jeringa estéril, tubos estériles tapa rosca, algodón estéril y alcohol.
• Recolección de la muestra: La punción lumbar realizada por el médico veterinario se debe
llevar a cabo bajo condiciones asépticas estrictas para evitar introducir al canal raquídeo
bacterias, también para prevenir la contaminación de la muestra. La muestra se recoge en
tubos estériles tapa rosca para evitar la pérdida del liquido o contaminación, por ningún
motivo se debe utilizar tubos tapa de algodón, es necesario desinfectar rigurosamente el área
que se va a puncionar.
CONVENIO ICA - SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLÍN, 2009
21
• Esta muestra es necesario enviarla de inmediato al laboratorio. Ya que algunas bacterias que
no sobreviven con el almacenamiento prolongado o cambios bruscos de temperatura.
• El volumen de la muestra debe ser representativo, aproximadamente de 3 a 4 mililitros.
2.3.5 LÍQUIDOS DIFERENTES AL CEFALORRAQUÍDEO
Materiales: Alcohol antiséptico y yodo, jeringa estéril, algodones estériles.
• Recolección de la muestra: La aspiración percutánea de líquido como pleural, peritoneal,
sinovial debe ser realizada asépticamente con desinfección previa, jeringas y agujas estériles
la mayor cantidad de líquido debe ser remitida al laboratorio. Debe agregarse heparina
estéril en caso de grandes volúmenes de líquido pleural y peritoneal (0.5 centímetros por 100
mililitros de muestra para prevenir los coágulos que atrapen los microorganismos).
• La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio. El volumen de la muestra debe
ser representativo, aproximadamente 3-4 ml.
Recolección de semen en toro
2.3.6 HEMOCULTIVOS
Materiales: Alcohol yodado y antiséptico, jeringa estéril, mechero, algodones estériles y frascos
con el medio de cultivo.
22
• Recolección de la muestra: Después de haber sujetado al paciente y haber seleccionado
cuidadosamente el sitio de punción, debe hacerse una asepsia cuidadosa de la piel para
reducir la incidencia de contaminación del hemocultivo. La piel debe de desinfectarse y
luego con alcohol por 3 veces del centro a la periferia. Las tapas de caucho de los frascos
que contienen el medio de cultivo mas el anticoagulante que potencialmente pueden estar
contaminadas, deben de desinfectarse con una solución de yodo y el exceso de sustancia
descontamínate debe removerse antes de tomar la muestra. En todos los casos debe actuar
el antiséptico durante un minuto, una vez que se ha descontaminado el sitio de la punción
no debe tocarse nuevamente con el dedo a menos que este haya sido desinfectado de igual
manera o que se usen guantes estériles para hacer la punción.
CONVENIO ICA - SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL - MEDELLÍN, 2009
• La muestra debe tomarse con una jeringa de 5 ml, para pequeñas especies y de 10 ml para
grandes especies, aunque es preferible hacerlo directamente por medio de un aditamento
especial con el cual pueden tomarse directamente en el frasco con el medio de cultivo.
• Los recipientes en que se toman las muestras directamente, deben colocarse por debajo del
sitio de la punción, para evitar el reflujo de la sangre. La aguja se introduce directamente en
la vena, si esta se pierde o hay que efectuar una segunda punción debe usarse una nueva
aguja o un nuevo equipo para la toma de la muestra, estas precauciones deben tenerse en
cuenta para reducir el riesgo de contaminación de la muestra con flora normal de la piel. Las
muestras deben mezclarse cuidadosamente e inmediatamente enviarla al laboratorio.
2.3.7 UROCULTIVOS
Materiales: Sondas estériles, catéteres estériles, guantes, frascos estériles de boca ancha y
alcohol yodado y antiséptico.
• Recolección de la muestra: En general todos los animales para la toma hay que realizar un
lavado riguroso de los genitales externos con el fin de remover los organismos contaminantes,
se debe utilizar jabón y abundante agua limpia.
• En grandes especies la muestra de orina se puede recolectar por micción limpia y debe ser
de la mitad del chorro de la orina, la muestra se debe tomar en un frasco estéril el cual no
se debe destapar hasta el momento de la toma de la muestra, no tocar la boca de este y
tomarla directamente en el frasco con una cantidad apropiada para el procedimiento de esta,
enviar inmediatamente al laboratorio de lo contrario se debe refrigerar. Otros métodos muy
utilizados en pequeños animales son la utilización de sondas catéter y punción vesical, siendo
esta ultima la más utilizada. Después de localizar la vejiga lavar y desinfectar, puncionar con
jeringa estéril y tomar aproximadamente 5 ml, y enviarla al laboratorio.
• El catéter es considerado uno de los mejores métodos pero no se ha tenido en cuenta que
este puede introducir infecciones. La muestra por ningún motivo debe ser guardada en
nevera ya que los cambios de temperatura afectan la viabilidad de los microorganismos.
• No recoger muestras del suelo porque estas llevan consigo bacterias contaminantes que se
encuentran allí y pueden llevar a un diagnóstico errado.
• La muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte adecuado, se debe
procesar inmediatamente llegue al laboratorio.
2.3.8 SUGERENCIAS EN CULTIVO BACTERIOLÓGICO DE LECHES
Materiales: Alcohol yodado y antiséptico, tubos estériles con preservativo y nevera.
• Recolección de la muestra: Se lavan cuidadosamente los pezones con agua y jabón, se
desinfectan con alcohol yodado y antiséptico cada pezón, se eliminan los primeros chorros
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23
y se recolecta la muestra de cada cuarto individual en tubos estériles que contenga el
preservativo.
• La muestra se debe preservar y mantener refrigerada mientras llega al laboratorio.
• Se debe tomar aproximadamente 10 ml de cada pezón.
Toma de muestra de leche en bovino
2.4 RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS EN LECHE (RCS).
Materiales: Tubos estériles secos y nevera.
• Recolección de la muestra: Se lavan cuidadosamente los pezones con agua y jabón, se
secan y se desinfectan con alcohol yodado luego se debe limpiar el extremo del pezón con
una torunda de algodón empapada de alcohol al 70% ejerciendo presión sobre el esfínter
externo para asegurar la salida de la suciedad y sustancias céreas por el orificio.
• L a muestra debe llegar al laboratorio antes de las 2 horas, si no es posible se debe refrigerar
hasta su procesamiento.
• También en las primeras 24 horas de la toma de la muestra se puede agregar formalina lo
que impedirá la lisis de las células.
• Existe una variación en los recuentos celulares según el momento del ordeño, las muestras
más útiles son las obtenidas inmediatamente antes del ordeño del atardecer.
• Si las muestras se obtienen de un solo pezón bastara unos 30 ml de leche aproximadamente.
2.5 SUGERENCIAS EN LA TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA UN ESTUDIO
PARASITOLÓGICO
Éste análisis comprende: Endoparásitos, Ectoparásitos y Hemoparásitos.
24
2.5.1 COPROLÓGICOS
Con guante o funda plástica introducir la mano en el recto del animal y estimular mediante
masajes el esfínter anal.
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Recolección de material fecal en bovino a través del recto
• Cuando se haya obtenido la cantidad suficiente de materia fecal de 20 a 40 gramos, el
guante es reversado hacia adentro.
• Si la muestra tardara más de 2 horas en llegar al laboratorio, pasar una parte de la muestra
a un recipiente con formalina al 10% y otra sin formalina, ni refrigeración, especialmente
cuando se desea investigar parásitos pulmonares (identificación de larvas) y coccidias.
• Si la muestra puede llegar al laboratorio en menos de 2 horas, cerrar el guante o la funda.
• Identificar y enviar la muestra refrigerada.
• Cuando se quiera evaluar el estado de infestación de un grupo de animales, deben tomarse
muestras por edades. En este caso, se recolectaran pequeñas muestras de heces tomadas al azar.
2.5.2 HEMOPARÁSITOS – PARÁSITOS EN SANGRE
Enfermedad hemoparasitaria (Anaplasma) en bovinos
Enfermedad hemoparasitaria (Babesia) en bovinos
• El sitio de punción debe estar limpio; esto incluye, recorte de pelo, desinfección con solución
yodada por 2 veces y finalmente limpiar con alcohol.
• Tomar la muestra preferiblemente en estado febril y antes de tratamiento.
• La mejor muestra es de sangre capilar (Cola u oreja).
• Las placas para el extendido de sangre deben ser nuevas, libres de rayas y grasas.
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25
• Los extendidos deben ser muy delgados para que los glóbulos rojos queden separados y
facilite la observación de los hemoparásitos
• Los frotis deben protegerse de las moscas y rayos solares.
• Una vez secados los extendidos se envuelven en papel absorbente o papel higiénico en placas
separadas y se envían al laboratorio.
• Se recomienda recoger sangre con EDTA como anticoagulante a concentración de 1 mgrs/
ml de sangre, esto con el fin de hacerle el hematocrito y conocer el estado de deshidratación
del animal.
• También puede hacerse un montaje en fresco y hacer micro hematocrito para observar
tripanosomas en movimiento.
• Rotular correctamente la muestra.
HEMOPARÁSITOS EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA
2.5.3 ECTOPARÁSITOS - PARÁSITOS EXTERNOS.
• Utilizando una gasa impregnada en glicerina y sostenida por una pinza, limpiar la zona,
separando las costras poco adheridas y las escamas que se encuentren sobre o alrededor de
la lesión que se va a investigar.
• Colocar una gota de glicerina o aceite mineral sobre un portaobjetos.
• Hacer un doblez en la piel del animal a nivel del área sospechosa.
26
• Con la hoja de un bisturí raspar la parte superior del doblez varias veces hasta lograr algo de
sangrado en la zona.
• Transferir el material raspado a la gota de aceite o glicerina colocada sobre el portaobjeto.
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• Colocar una laminilla (Cubre objeto) sobre el material a observar, y enviar al laboratorio.
• Tener en cuenta que los raspados se deben hacer cerca de los bordes de las lesiones activas,
evitando incluir costras secas, pelos o lanas.
2.5.4 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO CULTIVO MICOLÓGICO EN PELOS
Materiales: Pinzas estériles, papel de aluminio nuevo, guantes, formato de laboratorio, tijeras,
cajas de Pietri y mechero.
• Recolección de la muestra: Después de sujetar al paciente para dicha toma, observe
cuidadosamente la zona afectada y encontrará que algunos de los pelos se encuentra partidos,
carentes de brillo, seleccione algunos de ellos y con la ayuda de una pinza arránquelos si se
trata de pelos que están infectados en todo su recorrido, seleccione la zona más infectada y
con una pinza arranque algunos de ellos, tome la muestra en papel aluminio, caja de Petri,
séllela con esparadrapo o cinta de enmascarar y envíela al laboratorio.
• La muestra se debe mantener y preservar bien sellada y en un lugar libre de humedad y seco.
• La cantidad de la muestra debe ser representativa de acuerdo al examen solicitado.
• Para la identificación se debe utilizar formatos especificando los datos correspondientes,
es muy importante saber si el paciente ha estado en tratamiento con algún antibiótico
local o sistémico, ya que este puede inhibir el desarrollo fúngico, por lo tanto es necesario
suspenderlo 5 días antes de solicitar el servicio al laboratorio.
• De la recolección y transporte adecuado de las muestras depende el éxito del proceso y
confiabilidad de los resultados.
2.5.5 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO CULTIVO MICOLÓGICO
• Materiales purulentos de lesiones cerradas: Algodón estéril, jeringas y agujas estériles,
guantes estériles, alcohol yodado, tubo tapa rosca estériles.
• Recolección de la muestra: De este tipo de lesiones es aconsejable que sea el médico
veterinario quien haga la punción. Después de sujetar el paciente para la toma de la muestra
limpie cuidadosamente la zona afectada y su periferia con algodón empapado de alcohol
yodado por tres veces, con la ayuda de una jeringa estéril puncione el absceso y extraiga la
cantidad necesaria del material, coloque el material en un tubo de ensayo estéril tapa rosca
preferiblemente, o en una jeringa haciendo uso del tapón.
• La muestra se debe mantener y preservar bien sellada en un lugar libre de humedad y seco
o en la jeringa haciendo uso del tapón envíela al laboratorio inmediatamente por no tener
medio de transporte.
• El volumen de la muestra es de 1 a 2 ml de material aproximadamente.
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27
• Material purulento de lesiones abiertas: Escobillones estériles, tubos tapa rosca con
solución salina, agua destilada y guantes.
• Recolección de la muestra: Estas lesiones pueden ser fistulas y úlceras entre otras. Para
obtener la muestra limpie la zona afectada con agua destilada estéril, nunca use alcohol
yodado porque este lesiona los tejidos y afecta los resultados de los cultivos.
• Después de sujetar el paciente prosiga con un escobillón y de un sitio poco expuesto al
ambiente, tome la muestra impregnando completamente el algodón con la misma, ponga el
escobillón en un tubo tapa rosca que contenga solución salina estéril, la cual debe tapar por
completo la parte del escobillón que contiene la muestra.
• El volumen de la muestra es algodón del escobillón completamente impregnado del material.
2.6 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO DE PATOLOGÍA
Diagnóstico integral, comprende: Necropsia, histopatología y aislamiento bacteriológico. La
muestra se considera cada especie bovino, equino, ovino, felino o porcino (mayor de 6 meses),
o un grupo de animales (3 porcinos menores de 6 meses o 10 aves) de la misma edad y alojadas
en el mismo galpón, preferiblemente animales vivos.
VIROLOGÍA
Cerebro hemorrágico en bovio y signos nerviosos. Conservar un fragmento en refrigeración y otro en formol al 10%
Selección del especímen: Los siguientes son los parámetros para una adecuada remisión de
los tejidos.
• Seleccione los tejidos con lesiones y muestras de órganos que tengan lesiones, si no hay
evidencia de lesiones, seleccionar tejidos, órganos y sistemas que den cuenta de los signos
clínicos del animal.
• Si no hay lesiones macroscópicas, ni signos de una enfermedad especifica, se toma la muestra
de varios órganos
• Ocasionalmente se envía el animal completo de especies menores y vivos para patología.
28
• Una muestra inapropiada bien sea por mala fijación, mala escogencia en las muestras que se
envían, lisis en los órganos no permite llegar a un diagnostico correcto.
• Manipulación de los tejidos: La manipulación de los tejidos debe ser cuidadoso y delicado.
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• Fijación de los tejidos en formol al 10%.
• Es importante incluir partes normales del órgano enviado.
• El alcohol no es un sustituto del formol como tampoco lo son el agua o la congelación.
• Los fragmentos enviados deben tener un espesor máximo de 0.5 centímetros.
• La relación tejido formol es de 10 a 1.
• Los recipientes deben ser de boca ancha y en lo posible plásticos.
• Empacar las muestras con el formol lo más pronto posible después de la remoción.
• Colocar los especímenes de diferentes sitios anatómicos en frascos separados y con el fijador
adecuado.
• Marcar cada frasco con la relación del sitio anatómico de la muestra.
• Hacer una lista de las muestras enviadas y descripción de cada una (Forma, color, aspecto,
tamaño y otros).
• Consistencia, tamaño, distribución de las lesiones y relación con el sitio anatómico.
• Llenar el formato con la reseña completa, se requiere de la información esencial y pertinente
de una manera concisa.
Cabeza de bovino con médula
Tallo cerebral con médula
oblonga
Obex con tallo encefálico
Médula oblonga en formalina
al 10%
TRANSPORTE, ENVÍO Y CONSERVACIÓN DE TEJIDOS
29
Transporte y conservación de tejidos separados en refrigeración y formol al 10% para identificación de patógenos y lesiones,
se adjunta protocolos
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2.7 RECOMENDACIONES PARA EXAMEN DE CITOLOGÍA
Se realiza a partir de improntas de tejido o extendido de líquidos corporales en laminas portaobjetos para estudios preliminares de lesiones tisulares y observación de agentes infecciosos.
• Envió: Pueden fijarse de dos maneras: Fijador líquido que puede ser alcohol absoluto,
isopropanol, etanol o alcohol al 96%.
• Fijación al aire.
• Marcar las placas por el sitio donde se hizo el extendido.
• Diligenciar muy bien la historia clínica.
Resultados:
Los informes de patología son leídos por patólogos veterinarios y en ellos se incluye:
Descripción.
Diagnostico.
Notas o comentarios.
Notas: El procesamiento de las muestras en el laboratorio de patología una vez estén fijados los
especímenes es largo por lo cual los resultados pueden entregarse en un lapso de 4 a 10 días
hábiles.
El tiempo máximo para la entrega de resultados de citología es de 48 horas.
2.8 PROCEDIMIENTO FRENTE A UNA PATOLOGÍA (ENFERMEDAD) EN UN PREDIO
• Notificación
Puede ser realizada por: el propietario, un tercero o vigilancia oficial
Se debe recolectar la mayor información posible del predio.
• Preparación del material
Prepare el material y equipo para la atención del caso.
• Visita a la finca:
30
Comience diligenciando el protocolo del caso a atender, “trate de definir el origen del problema
y los riesgos de difusión” según la información recolectada.
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• Examen clínico de los animales.
Comience inspeccionando los animales sanos o aparentemente sanos, observe síntomas y signos
clínicos de todos los animales y obtenga un “DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO”, de lo que está
sucediendo en la finca.
Si el caso lo amerita y si es posible continúe con los siguientes pasos.
• Toma de muestras
Tome muestras recientes, suficientes y adecuadas según el número de animales afectados o
un porcentaje de los animales del hato.
• Limpieza y desinfección
Limpie y desinfecte antes y después de la toma de la muestra los elementos, equipo y lugar
donde se tomo la muestra. Cambie la ropa utilizada en el procedimiento
• Envío de muestras al laboratorio.
o
o
o
o
Use recipientes y medios de conservación adecuada.
Rotule cada muestra
Anexe el protocolo, o la información del caso.
Confirme con el laboratorio si las muestras llegaron y en qué estado.
• Diagnóstico del laboratorio
Los resultados reportados en el laboratorio, son una herramienta fundamental para la toma de
decisiones.
• Vigilancia y seguimiento epidemiológico.
Consiste en recolectar la mayor información concerniente a la presentación de la enfermedad y
sus análisis para la toma de acciones en su prevención, control o erradicación. Es una herramienta
básica para la planificación del hato.
Ante un caso proceda de la siguiente forma:
• Identifique las fuentes de infección Biológicas (insectos, roedores y otros) y mecánicas
(vehículos, agujas, utensilios en general).
• Priorice los factores de riesgo que facilitaron su presentación.
• Determine el área de riesgo focal (finca o predio) y peri focal (predios alrededor donde se
presento la enfermedad).
• Plantee recomendaciones para la prevención, control y erradicación de la enfermedad.
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31
SIEMPRE REALIZAR EL DIAGNÓSTICO DE CUALQUIER
ENFERMEDAD,
EN FORMA POBLACIONAL
2.9 EQUIPO BÁSICO EN OFICINAS DE SANIDAD PARA LA TOMA DE MUESTRAS
PECUARIAS.
32
• Balde
Bolsas plásticas
• Botas
Cepillo de cerdas
• Cinta elástica
Cinta indicadora de pH
• Cinta para rotular (Enmascarar).
Desinfectante
• Formol
Frascos de boca ancha
• Guantes de caucho
Glicerina tamponada
• Hisopos
Jeringas desechables
• Mangas desechables
Nariguera
• Pinzas de disección
Portaobjetos
• Protocolos
Soga o lazo
• Termómetro
Termos plásticos
• Tijeras
Toallas desechables
• Tubos vacutainer (Tubos al vacio) con y sin anticoagulante
Observación: Es importante estar verificando el estado de los instrumentos y medios de
conservación para la toma de las muestras.
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Carbón Bacteridiano ó
Ántrax
Recipiente esteril.
Antes de las 24 horas
Recipiente con
Tioglicolato.
CONSERVACIÓN
Refrigeración
--Refrigeración
No haber tenido
tratamientos con
antibióticos en los 8 días
anteriores.
--No hacer necropsia.
(Zoonosis).
---
Muestras por separado de
cada tejido
Lavado y desinfección
de área donde se va a
puncionar. No congelar
OBSERVACIONES
---
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Recipiente: Frasco, tubo estéril o cuando se especifique se puede usar bolsa plástica estéril.
Mastitis
Impregnar tiza, algodón,
o material absorbente
Recipiente estéril
limpio con sangre o
líquido de orificios
naturales.
Enviar oreja desde la base. Bolsa plástica
Leche del cuarto (s)
afectado(s).
Líquidos de tejidos de los
músculos afectados.
Carbón Sintomático
Recipientes estériles
Jeringas o Recipiente
estéril
MEDIO
Septicemia ó
Bacteriemia
MUESTRA (S)
Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLÓGICOS
Sangre con
Anticoagulante (EDTA)
Hemocultivo.
Fragmentos de órganos:
(bazo, hígado, Riñones,
ganglios linfáticos
ENFERMEDAD
33
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Recipiente estéril
Recipiente estéril
NOTA: El laboratorio prefiere preparar los extendidos a partir de los tejidos enviados
Enviar 100 mililitros de
agua
Uro cultivo.
Enviar 20-30 mililitros
de orina, tomar por
sonda ó punción vesical.
Recipiente estéril con medio
BHI
Recipiente estéril.
Semen.
Secreciones vaginales
Tubos con medio nutritivo
Caryblair ó Tioglicolato.
Recipiente o bolsa plástica
estéril.
MEDIO
Hisopos estériles.
Materia fecal para
Coprocultivo.
MUESTRA (S)
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
CONSERVACIÓN
OBSERVACIONES
Tomar muestras de
diferentes sitios.
Enviar inmediatamente.
Enviar inmediatamente.
Previo lavado con agua y
jabón de las zonas.
Previo lavado de la zona
vaginal
Previo lavado del área
prepucial.
No tomar muestras del
suelo.
Tomar directamente del
recto.
Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLÓGICOS
Enfermedades Hídricas
Problemas Renales
Infertilidad
Enteritis
ENFERMEDAD
34
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Recipiente ó bolsa
plástica estéril
Raspado de la mucosa
intestinal
Secreciones líquidas
Paratuberculosis
Exudado - trasudado
Recipiente estéril
Recipiente estéril
Fragmentos de: pulmón,
bazo, hígado, sangre con
anticoagulante
Secreciones, leche.
Recipiente con ácido
bórico al 1%.
Recipiente estéril
Exudado del área
afectada (Herida)
Ganglios tracto
respiratorio mesentéricos
y/o mamarios.
Recipiente estéril
Recipiente estéril
MEDIO
Ganglios linfáticos
mesentéricos, bazo,
pulmón e hígado
sangre, leche y orina
Fragmentos de: Encéfalo,
hígado, riñón Bazo. Carne.
MUESTRA (S)
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
CONSERVACIÓN
OBSERVACIONES
Previo lavado rectal
Precaución Zoonosis
Transporte inmediato
Precaución Zoonosis
Precaución Zoonosis
Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLÓGICOS
Pasteurelosis
Tuberculosis
Tétano
Salmonelosis
Listeriosis
ENFERMEDAD
35
Recipiente hermético (bolsa Refrigeración plástica)
Congelación
Cerebro entero o la
cabeza del animal que
murió.
Congelación
Jeringa
Liquido vesicular.
Transporte inmediato
Precaución de bioseguridad.
Zoonosis.
Transporte inmediato
Transporte inmediato
Transportar
Inmediatamente.
Buscar títulos de
Anticuerpos. Historia de
vacunación.
Evitar hemólisis
OBSERVACIONES
NOTA: En general para enfermedades virales enviar: Sangre, cerebro, ganglios linfáticos, hígado, bazo, tonsilas o amígdalas, riñón, pulmón;
siempre por separado y congelado. Igualmente se puede usar el medio de Hanks, glicerina tamponada más antibióticos.
IBR: Rinotraquitis Infecciosa Bovina, D.V.B: Diarrea Viral Bovina y E.E.V: Encefalitis Equina Venezolana
Rabia bovina
Enfermedades
vesiculares
Recipiente estéril con
Refrigeración o
glicerina tamponada o
congelación.
Solución saturada de azúcar
Epitelio mamario, padal
y/o lingual.
Refrigeración o
Congelación.
Tejidos, líquidos con
antibióticos (Penicilina y/o Recipiente estéril
Estreptomicina).
Aislamiento de Virus
CONSERVACIÓN
Refrigeración o
Congelación (Sueros).
MEDIO
10 mililitros de sangre sin
Recipiente estéril
Anticoagulante (Suero).
MUESTRA (S)
Tabla 2. MUESTRAS PARA EXAMENES DE VIROLOGÍA
Leucosis, IBR, DVB,
EEV, Neosporosis y
otras.
ENFERMEDAD
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10 gramos de papiloma
Bolsa plástica ó frasco
Frascos de boca ancha
Órgano(s), tejido sano y
afectado
Sin preservativos
Formol tamponado al 10%
y cubrir toda la muestra.
CONSERVACIÓN
Muestras individuales
Corte de 1 a 2 cm de
espesor.
OBSERVACIONES
10 gramos de materia
fecal.
10 gramos de materia
fecal fresca
Parásitos Pulmonares
y Protozoarios
(Balantidium), Coccidia.
MUESTRA (S)
Parásitos
Gastrointestinales y
Fasciola Hepática.
ENFERMEDAD
OBSERVACIONES
Refrigeración o adicionar
Tomar del recto.
1 ml de formol al 10%.
CONSERVACIÓN
Frascos o bolsas Plásticas No utilizar refrigeración ni Tomar del recto. Transporte
limpias y secas.
preservativos
inmediato.
Frascos, bolsas plásticas
limpias y secas.
MEDIO
Tabla 4. MUESTRAS PARA EXAMENES DE PARASITOLOGÍA (PARÁSITOS INTERNOS)
Papilomas ó Verrugas
(Autovacunas)
Alteración Patológica
(Neoplasias ó Tumores).
MEDIO
MUESTRA (S)
Tabla 3. MUESTRAS PARA EXAMENES DE HISTOPATOLOGÍA
ENFERMEDAD
37
Papel o porta objetos
Raspado de piel, folículos
pilosos (pelos).
Dermatofitos (Hongos).
No usar preservativos
Adicionar 1-2 ml de
glicerina o aceite.
CONSERVACIÓN
Raspado del área
periférica de la lesión.
Tapar herméticamente
OBSERVACIONES
Ionogramas calcio, sodio,
potasio y pH
ITEM
Suero ó plasma
MUESTRA (S)
Frasco estéril
MEDIO
Refrigeración
CONSERVACIÓN
OBSERVACIONES
Transporte inmediato
Tabla 6. MUESTRA PARA ELECTROLITOS (IONOGRAMAS)
NOTA: Para análisis de productos garrapaticidas, enviar garrapatas vivas en frasco tapado y con orificios en la tapa y para la identificación o
clasificación, enviar en recipientes con alcohol etílico al 70%.
Frasco estéril de boca ancha.
MEDIO
Raspado profundo de la piel.
MUESTRA (S)
Sarna
ENFERMEDAD
Tabla 5. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ECTOPARÁSITOS (PARÁSITOS EXTERNOS)
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Hemograma Completo
Babesia
Anaplasma y Tripanosoma
ENFERMEDAD
MEDIO
Sangre con
anticoagulante EDTA.
10 ml de sangre sin
anticoagulante. (Suero).
Tubos estériles
Tubos estériles
Frotis de sangre periférica Extendidos
(oreja -cola) y sangre con delgados en
anticoagulante (EDTA).
portaobjetos.
MUESTRA (S)
Refrigeración. No
congelación.
Congelación del suero
No refrigeración,
transporte en seco ó
fijar placas con alcohol
metílico por 3 minutos.
CONSERVACIÓN
Transporte inmediato. Validar
parámetros con la clínica del
animal.
Prueba de Elisa para cada
hemoparásito.
Preferiblemente animal en estado
febril y sin tratamientos.
OBSERVACIONES
Tabla 7. MUESTRAS PARA EXAMENES DE HEMATOZOARIOS (PARASITOS EN SANGRE)
39
Brucelosis, Leucosis I.B.R,
D.V.B,
10 mls. Sangre sin
Leptospirosis
anticoagulante (sueros)
Anemia Infecciosa Equina,
Neospora y otras.
Tubos estériles secos
Frasco oscuro estéril
Refrigeración.
Esmegma prepucial.
(raspado prepucial).
Campilobacter (Vibrio
Foetus)
MEDIO
Lavado prepucial con
Frasco oscuro estéril.
100 ml. de solución salina
No refrigerar.
fisiológica.
MUESTRA (S)
Tricomoniasis
ENFERMEDAD
Refrigeración
Estimular micción antes
de la toma.
Enviar inmediatamente
Previo a la toma haber
estado en descanso sexual
por 8 días.
100 ml. solución
salina fisiológica con
Tioglicolato.
Refrigeración
Buscar títulos de
anticuerpos en animales
no vacunados.
Historia de vacunaciones
Evitar hemólisis
Buen lavado.
Estimular micción antes
de la toma
Enviar inmediatamente
Descanso sexual por 8
días, previo a la toma
OBSERVACIONES
Solución salina
fisiológica o Ringer
lactato. No refrigerar y
evitar rayos solares.
CONSERVACIÓN
Tabla 8. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
40
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10 ml de sangre sin
anticoagulante ó (Suero)
Enzimas:
ALT ó GPT
AST ó GOT
ALP, Glucosa, Urea,
Colesterol total,
Creatinina, Proteínas
Séricas Totales, Albumina,
Bilirrubina Total.
Frascos estériles
MEDIO
Refrigeración
CONSERVACIÓN
Anexar historia clínica.
Tener en cuenta estado
fisiológico del animal.
Transporte inmediato
Medición de los niveles
en sangre de estos
parámetros.
Separar sueros para evitar
degradación.
OBSERVACIONES
Genotipificación de la
Kappa Caseína
ITEM
2 Pajillas o ampolletas
Frasco estéril
Sangre con anticoagulante (EDTA)
MEDIO
Semen
MUESTRA (S)
Refrigeración
Congelación
CONSERVACIÓN
Determinación de la
presencia del Gen AA,
AB, BB.
OBSERVACIONES
Tabla 10. MUESTRAS DE BIOLOGIA MOLECULAR PCR (Reacción de la Polimerasa en
Cadena)
ALT o GPT: Alamina aminotransferasa o Transaminasa glutamico pirúvica, AST o GOT: Aspartato aminotransferasa o transaminasa
oxaloacetica, ALP: Fosfatasa alcalina
MUESTRA (S)
PRUEBA
Tabla 9. MUESTRAS DE QUÍMICA SANGUÍNEA PARA ENFERMEDADES METABÓLICAS
41
Refrigeración
Refrigeración
Frasco estéril
Orina, hígado y riñón.
Pelo, contenido gástrico, orina
Frasco estéril
y riñón.
Alimento, contenido ruminal.
Plomo
Talio
Cianuro
Refrigeración
Refrigeración
OBSERVACIÓN: En tejidos se debe enviar por separado una cantidad no inferior a 100 gramos.
Frasco estéril
Frasco estéril
Hígado y riñón.
Mercurio
Congelación o
refrigeración
Frasco estéril
Alimento, contenido
estomacal, hígado, riñón y
orina.
Refrigeración
CONSERVACIÓN
Urea
MEDIO
Frasco estéril
MUESTRA (S)
Sangre con anticoagulante,
orina, hígado, riñón, lavado
gástrico.
ITEM
Tabla 11. MUESTRAS PARA EXÁMENES DE TOXICOLOGÍA
Fosforados Orgánicos y Carbamatos
42
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Todas estas muestras
deben empacarse
por separado y
transportarse de
inmediato.
OBSERVACIONES
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Frasco estéril
Frasco estéril
Alimento, hígado y riñones.
Sangre con anticoagulante (EDTA), suero, orina,
contenido ruminal.
Cerebro, suero.
Mico toxinas
Amoníaco
Colinesterasa
Frasco estéril
Frasco estéril
Sangre sin anticoagulante, hígado, contenido gástrico.
Clorados
Warfarinas
MEDIO
Frasco estéril
MUESTRA (S)
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
Refrigeración
CONSERVACIÓN
OBSERVACIONES
Todas estas muestras
deben empacarse por
separado y transportarse
de inmediato.
Tabla 11. MUESTRAS PARA EXÁMENES DE TOXICOLOGÍA
Contendo estomacal, Sangre, orina, cérebro, Grasa
mesentérica e hígado.
ITEM
43
3. DIAGNÓSTICO AGRÍCOLA
44
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3.1 FACTORES BÁSICOS EN LA TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS AGRÍCOLAS
El éxito en el manejo de una plaga o enfermedad depende de su identificación correcta y
oportuna; por lo tanto, cuando no se define a tiempo y correctamente el agente causal de un
problema fitosanitario, se pierde tiempo en su manejo y se aumentan los costos de producción
en los cultivos. Por lo cual toda muestra debe cumplir con unos requisitos mininos que son:
1. Calidad de la muestra
2. Cantidad de la muestra
3. Tiempo en la ruta crítica de la muestra
3.1.1 CALIDAD DE LA MUESTRA
La muestra debe ser fresca y seleccionada de plantas o de las estructuras de estas que presenten
la afección en diferentes estados de evolución.
La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad o aparición del problema,
para evitar contaminación, principalmente por bacterias, hongos o insectos secundarios.
El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no contaminado, ni con otros productos
que permitan alterar la muestra.
Al enviar una muestra, se debe proteger para que no se reseque o dañe por calor, no es posible
hacer diagnósticos correctos sobre muestras marchitas, maltratadas o en estado avanzado de
descomposición, esto conduce a diagnósticos erróneos.
Tome las muestras a media mañana o media tarde cuando la intensidad del sol no sea muy
fuerte, evite tomar muestras inmediatamente después de una lluvia o de aplicar algún producto
por vía foliar.
Toda muestra debe ser remitida con la mayor información posible, ya que los datos allí
consignados son vitales para un buen diagnóstico y una buena recomendación.
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45
3.1.2 CANTIDAD DE LA MUESTRA
La cantidad necesaria es variable según el tipo y fracción del cultivo de que se trate.
Muestra: Es el material biológico tomado de las lesiones que ocasiona una enfermedad o plaga,
que permite al laboratorio identificar su causa.
La muestra vegetal puede estar constituida por hojas, frutos, tallos, raíces, si las plantas son
de gran tamaño se toma parte del tejido afectado del órgano correspondiente y si son plantas
pequeñas en lo posible enviar la planta completa y varias de ellas en las que se pueda observar
diferentes estados de avance de la enfermedad o plaga.
La muestra, debe estar constituida de tejidos u órganos tanto de las partes sanas como de las
enfermas.
Tome un número suficiente de plantas que sean representativas del lote en estudio. Traslade la
muestra al laboratorio el mismo día que la tome, de lo contrario manténgala en refrigeración
para evitar que el tejido se deteriore ó se formen hongos, es recomendable que se manejen las
muestras en bolsas de papel.
Comuníquese al laboratorio antes de muestrear o Consulte la guía respectiva.
3.1.3 TIEMPO EN LA RUTA CRÍTICA DE LA MUESTRA
Es el tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y la entrega de los resultados del laboratorio.
Es un tiempo controlado por el hombre, aumentándolo o disminuyéndolo, entre más corta sea
esta ruta se obtendrá un diagnóstico mas oportuno y eficiente para el manejo del problema
fitosanitario.
Factores que intervienen:
Detección del problema
Toma de muestras
Envío de muestra al laboratorio
Recibo de muestras en el laboratorio
Proceso de muestra en el laboratorio
Resultado de laboratorio
El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que puedan ser útiles para el
diagnóstico y recomendación
3.2 TOMA DE DIFERENTES TIPOS DE MUESTRAS
46
Debido a la gran diversidad de síntomas que se pueden presentar a nivel de campo en los
diferentes cultivos, se hace necesario realizar muestreos diferenciales, los cuales son planteados
a continuación.
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La parte a muestrear depende del cultivo y etapa de desarrollo del mismo.
3.2.1 PLANTAS GRANDES
Por su gran tamaño, se hace necesario enviar las partes afectadas que sean más
representativas
• Raíces
Se debe enviar cuando se sospeche daño por nemátodos, hongos del suelo, bacterias o por
insectos que atacan raíces. La sintomatología se puede presentar como quemazón en las puntas
de las hojas, defoliación, marchitez, clorosis, enanismo, agallas, nódulos o presencia de insectos
a nivel de raíz. Envié la muestra acompañada de raicillas, enviar suelo y los insectos que se
encuentren presentes en frascos con suelo.
• Hojas
Cuando se observen manchas foliares, deformación de las hojas, engrosamiento de venas, agallas,
aclaramiento de venas, ampollas, clorosis, corte de hojas, raspaduras y perforaciones.
• Flores, yemas y ramas
Presencia de superbrotamientos, estrangulamiento de tallos o ramas, cáncer o callosidades,
perforaciones, caída de estructuras.
• Frutos tubérculos y bulbos
Presencia de manchas, pudriciones, roñas y perforaciones. Este material se debe dejar secar, se
recomienda no recoger los frutos del suelo, se prefiere material de la planta que presente la
sintomatología.
3.2.2 PLANTAS PEQUEÑAS
Lo ideal es colectar la planta completa, seleccionando dos o tres plantas para su envío al laboratorio.
Se debe guardar en una bolsa plástica, envolviendo la parte aérea en papel absorbente, para que
en el transporte no se contamine con el suelo.
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4. DIAGNÓSTICO DE DAÑOS CAUSADOS POR INSECTOS
PLAGAS (DIAGNÓSTICO ENTOMOLÓGICO)
Consiste en determinar el insecto que por su comportamiento o sus hábitos causa un daño
directo o indirecto en la producción (calidad o cantidad) de una especie vegetal de interés para
el hombre.
Luego de que se ha identificado el insecto que esta causando el daño se procede a dar las
recomendaciones, que consisten en seleccionar los diferentes componentes de manejo que se
deben realizar para disminuir la incidencia de éstos en el cultivo.
Una adecuada recomendación se fundamenta no solo en la identificación del insecto sino que es
necesario el análisis de las condiciones en que se presenta el problema, en especial el manejo del
cultivo y las interacciones planta - insecto - organismos benéficos - condiciones agroclimáticas,
es decir, se requiere de un análisis integral que conlleva a un acertado juicio sobre la causa del
problema y los factores que lo favorecen.
Es de suma importancia tener presente que para tomar la decisión del envió de una muestra al
laboratorio, no se debe esperar hasta que todo el cultivo presente los síntomas del deterioro,
dado que en estos casos se logra realizar la determinación del causante del daño pero es muy
complicado recuperar los cultivos o plantaciones.
4.1 PROCEDIMIENTO GENERAL DE DIAGNÓSTICOS ENTOMOLÓGICOS
Cuando un cultivo presenta daños causados por insectos es necesario realizar una observación
detallada de las estructuras vegetales, esto debido a algunas características especiales de los
insectos como:
a. Tamaño pequeño (que en muchos casos es imperceptible al ojo humano).
b. Capacidad de movimiento.
c. Diferentes estrategias de defensa (que van desde quedarse quietos, huir de la planta al sentir
peligro o inclusive camuflarse o sea parecerse a las estructuras de la planta que están
consumiendo).
d. Hábitos nocturnos o diurnos.
e. Alimentarse de estructuras vegetales internas o a nivel radical.
48
Estas características hacen que los insectos, que están causando el daño puedan pasar
desapercibidos o no se encuentren en el tejido al momento de tomar la muestra. Por esto en
un laboratorio de diagnóstico vegetal se presentan dos tipos de situaciones con las muestras
entomológicas enviadas, la primera, cuando el insecto causante del daño se encuentra presente
y la segunda cuando el daño se observa pero el insecto causante no se encuentra.
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4.1.1 ESTRUCTURA AFECTADA SIN PRESENCIA DEL INSECTO CAUSANTE
Este es un tipo de muestra común. Para obviar esta situación se sugiere recoger todo material
representativo del problema en el campo.
Para el caso de plantas de PORTE BAJO (plantas pequeñas) enviar de 2 a 3 plantas completas
y para plantas de gran tamaño enviar las estructuras o partes de la planta que muestren los
síntomas más característicos en los diversos estados de desarrollo del problema.
Es básico realizar una observación detenida de las plantas para tratar de buscar y capturar
los insectos asociados al problema, para esto se puede entrar al cultivo y quedarse un tiempo
quieto, para que los insectos reinicien su actividad, igualmente sacudir fuertemente la planta
colocando en la parte baja de la misma una hoja blanca grande, una carpeta o algo similar que
facilite la recolección de los insectos que caigan para su envío al laboratorio.
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4.1.2 ÁREA LESIONADA Y PRESENCIA DEL INSECTO CAUSANTE
Es la muestra ideal dado que a través de la determinación o identificación del insecto se establece
el agente causal del problema. En este caso, se debe procurar enviar el mayor número de insectos
adultos o larvas (gusanos) y la parte de la planta que presenta la lesión.
4.2 COMO ENVIAR MUESTRAS QUE CONTENGAN INSECTOS
• Adultos
Se deben depositar en frascos con alcohol comercial al 70%, el recipiente debe quedar lleno, bien
tapado y sellado con cinta. Los insectos guardados en alcohol, pueden quedar en un lugar fresco
por varios días. Pero debemos tener presente que entre más rápido se envíen al laboratorio con
toda la información, más pronto se obtendrán los resultados y las recomendaciones del caso.
• Las mariposas, polillas o insectos de cuerpo delicado no se deben depositar en frascos con
alcohol ni manipular demasiado, para éstos se trabaja en empaques transitorios que consiste
en hojas de papel, cartulina o papel mantequilla, dobladas en forma de triangulo. En cada
una coloque un solo ejemplar.
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• Larvas (gusanos) y ninfas.
Depositar en frascos con alcohol al 70%. Si el número de larvas o ninfas es alto, se deposita
una parte en un frasco con alcohol y el resto en otro frasco con el substrato o material de
donde se encontró. Esto permite hacerles a los insectos vivos un seguimiento en cámaras de
cría, encontrándose en muchos casos sus enemigos naturales ya sean parasitoides u hongos
entomopatógenos.
Para recolectar muestras de insectos que atacan frutos como por ejemplo moscas, recoja las
frutas puede constatar la presencia de larvas, pero evite enviar las frutas partidas. Puede observar
primero las frutas caídas que posean larvas de mayor tamaño y próximas a empupar, estas frutas
se depositan en bolsas o frascos con un poco de aserrín, suelo o papel.
Cuando las frutas tienen tejidos suculentos (muy acuosos) deposite una buena cantidad de
aserrín o papel para evitar que los jugos de la fruta produzcan encharcamiento en la bolsa o frasco.
• Pupas
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Se depositan en frascos con aserrín y con sustrato o material (tierra u hojarascas) de donde se
encontró. No las deposite en alcohol porque se necesitan vivos para hacerles seguimiento en
cámaras de cría, hasta obtener adultos, los cuales pueden ser identificados mas fácilmente.
4.3 MUESTRA PARA DETERMINAR ORGANISMOS BENÉFICOS EN INSECTOS
Los insectos están en continua relación con todo lo que los rodea, presentándose una gran
cantidad de interrelaciones que regulan sus poblaciones como factores abióticos y bióticos.
Los factores bióticos como hongos, bacterias, virus, parasitoides, depredadores, etc, pueden ser
algunas veces detectados en el campo por algunas sintomatologías típicas que presentan y
pueden llegar a constituirse en herramientas para el manejo de los insectos plagas.
CARACTERÍSTICAS A NIVEL DE CAMPO
Manifestaciones visibles:
o Estructuras extrañas (crecimiento micelial o esporulaciones) sobre el cuerpo del insecto,
insectos muertos momificados, muerte con flacidez en los tejidos y olores fétidos.
o Cambio en el comportamiento común de los insectos: como dificultades en el vuelo,
movimientos lentos, disminución de las posturas, disminución y suspensión de la
alimentación.
4.3.1 MUESTRAS A ENVIAR AL LABORATORIO
Se debe recolectar la mayor cantidad de insectos, tanto los que se sospecha están enfermos o
tienen los síntomas y signos específicos como los que están aparentemente sanos.
52
Este material se debe enviar al laboratorio en el medio donde se encontró (suelo, hojas, troncos,
etc.) o en frascos con tul o una tapa perforada, que garanticen la llegada de los insectos vivos al
laboratorio, se deben transportar lo más rápido posible. Si los insectos se encuentran muertos se
envían en frascos sin adicionar ninguna sustancia.
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• Número de especímenes a enviar
El número ideal es de 10 especímenes.
• Horas de recolecta
Depende de la actividad particular de cada insecto (hábitos) de manera muy general para los
insectos diurnos a partir de la 10 de la mañana y para los de hábitos crepusculares y nocturnos
a partir de la 6 de la tarde.
Sin embargo hay que tener en cuenta que las condiciones ambientales como lluvias, vientos
excesivos, granizadas, bajas temperaturas, entre otros, pueden reducir la actividad de muchos
insectos, lo que hace difícil visualizarlos y recolectarlos.
4.4 EQUIPOS DE RECOLECCIÓN DE INSECTOS
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
o
Red entomológica o jamas (insectos que saltan o vuelan)
Bolsas plásticas claras para facilitar ver los insectos capturados.
Frascos letales u otros materiales letales (alcohol, agua caliente, acetato de etilo)
Frasco aspirador o de succión
Carpeta de recolección (hojas de papel, cartulina, costales, etc) se utiliza para los insectos
que se encuentran en árboles y arbustos en vez de utilizar la jama, se utiliza por comodidad.
Esta consiste en un retazo de lona o tela de 50 x 60 cms aproximadamente de color blanco.
Este debe tener dos ejes diagonales de soporte que pueden ser varillas de alambre o madera;
se coloca debajo de la rama con el objeto de que los insectos caigan. Por último se realiza la
recolección manual o con el tubo aspirador, según el caso.
Cribas o angeo (Esto sirve para insectos que viven dentro del suelo o deambulan por la
superficie)
Trampa de caída
Embudo de berlese
Trampa de luz
Cebos trampas
Trampas específicas
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• Instrumentos de muestreo
• Empaques transitorios: estos se utilizan cuando se trata de recolecciones o muestras
muy abundantes, son los adecuados para guardar mariposas o libélulas.
• Palas de jardinería: esta es muy útil para captura de insectos subterráneos
• Pinzas: más usado en laboratorio o para manipular insectos que pueden causar picaduras
o mordeduras.
• Papel absorbente
• Bolsas plásticas
• Tijeras podadoras o machete
• Lápiz para el marcado de la muestra
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Tabla 12. SÍNTOMAS MÁS COMUNES ENCONTRADOS
EN PLANTAS ASOCIADOS A DAÑOS POR INSECTOS O
ARTRÓPODOS.
SÍNTOMAS
AGENTE
CAUSAL
ESTRUCTURA
VEGETAL
DONDE SE
UBICA
TOMA DE MUESTRA
OBSERVACIONES
Agallas
Ácaros
Salta hojas
Larvas de
moscas
Hojas
Tallos
Raíces
Nódulos y
agallas en
raíces
Gusanos
Perlas de
Tierra
Raíz y suelo
alrededor de
estas.
Torcimiento
Ácaros
Thrips
Moscas
Hojas,
Recolectar
todas
las En el formulario enfatice
Ramas Tallos, estructuras
con
la labores culturales, factores
Cogollos
sintomatología más típica.
ambientales y de manejo
Edema
Insectos
Tallos
Frutos
Recolectar
las
estructuras
sintomatología
Frutos
Se
deben
recolectar
muchos frutos con esta
No tome muestras en avanzado
sintomatología. No se
estado de descomposición.
recomienda recoger las
muestras del suelo.
Larvas de
cucarrones
Perlas de
tierra
Larvas de
Mariposas
Raíces
Tallos
Ramas
Hojas
Si las plantas son de gran
tamaño, se seleccionan las
partes de tallo, frutos o
raíces afectadas. La muestra
se debe acompañar con
partes de las plantas sanas
y enfermas.
Si son plantas pequeñas,
se seleccionan dos o tres
plantas completas.
Tenga presente que este tipo
de síntoma, puede obedecer a
afecciones en las raíces o en la
base del tallo.
Por lo cual debe revisar la
presencia de lesiones o agallas
que puedan tener la raíz, el
tronco o las ramas.
Esta sintomatología se observa
generalmente cuando el
problema ha avanzado mucho.
Parches, calvas
en potreros
Chinches,
chizas o
morrongos
y saltahojas
Hojas
Cuello de
raíz
Hojas
realizar
observación detenida
Se requiere el uso de jama o
red entomológica. Revisar el
sistema de raíces.
Clorosis o
pigmentaciones
foliares
Ácaros
Thrips
Chinches
Deficiencia
nutricional
Hojas
Envolver en papel absorbente
Por lo general son insectos de
y luego meter en bolsas
tamaño pequeño.
plásticas
Roña
Marchitez
Muerte
repentina
Ácaros
Estas se envían envueltas en
Recolectar hojas, tallos y
papel absorbente y en una
raíces con sintomatología
bolsa plástica.
Los insectos que se encuentren
se empacan en frascos con
alcohol y si son numerosos
se envían en el sustrato o
estructura afectada.
Recolectar raíces y suelo
toda Enfatice humedad del suelo,
con condiciones ambientales y de
manejo
una
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SÍNTOMAS
ESTRUCTURA
VEGETAL
DONDE SE
UBICA
TOMA DE MUESTRA
OBSERVACIONES
Ácaros,
Thrips
y otros
insectos
Hojas
Estas se envían envueltas en
Resaltar prácticas culturales, y
papel absorbente y en una
condiciones climáticas
bolsa plástica.
Estructuras
perforadas
Gusanos
Termitas
Tubérculos
Tallos
Ramas
Frutos
La muestra se envía igual que
las de muerte repentina.
Se recomienda no recoger los
Resaltar prácticas culturales
frutos del suelo, se prefiere
material del árbol que
presente la sintomatología
Plantas
cortadas a ras
de suelo
Gusanos
Tallos
Plantas pequeñas
Raíces
Tallos
Ramas
Hojas
En
plantas
pequeñas
recolecte una o dos plantas
con diferente estado de
desarrollo del problema.
Plantas de porte alto
recolecte
una
porción
de cada estructura envíe
muestra de las diferentes
partes de la planta (raíz,
ramas, hojas)
Hojas
encrespadas o
torcidas
56
AGENTE
CAUSAL
La mayoría de los insectos que
causan este problema son de
hábitos nocturnos
Empaque por separado la raíz
y el suelo de tallos, ramas y
hojas.
Defoliaciones
Larvas de
mariposas
Larvas de
cucarrones
Flores
abortadas
Muerte del
cogollo
Polinización
deficiente
Larvas de
moscas
Condiciones
ambientales
extremas
Flores
Estas se envían envueltas en
papel absorbente y en una
bolsa plástica.
Se envían flores, cogollos y
Especifique
condiciones
ramas
climáticas de la zona (lluvias,
veranos prolongados, vientos
fuertes)
Hojas con
agujeros
pegadas
tatuadas o con
minas
Cucarrones
pequeños
a menudo
de colores
brillantes.
Gusanos
Hormigas
Grillos
Chinches
Hojas
Estas se envían envueltas
en papel absorbente y en
una bolsa plástica.
Algunos de los insectos
causantes se pueden quedar
quietos o camuflarse con el
tejido vegetal.
Estos síntomas pueden ser causados por otros organismos como hongos, bacterias, micoplasma,
virus, nematodos o problemas abióticos ver diagnóstico de daños causados por enfermedades.
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5. DIAGNÓSTICO DE DAÑOS CAUSADOS POR
ENFERMEDADES (DIAGNÓSTICO FITOPATOLÓGICO)
5.1 DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD
A continuación se presentan una serie de síntomas típicos, para los cuales se determinan algunos
de sus agentes causales en orden de importancia.
Entre paréntesis se indica como clave la primera letra de las siguientes causas:
Hongo(H), Bacteria(B), Micoplasma(M), Virus(V), Nematodo(N) y Abiótica(A).
5.1.1 SÍNTOMAS POR CAUSAS BIÓTICAS
• MANCHAS FOLIARES (royas, oidiosis, mildius, sarna, antracnosis, tizones, etc.)
Cloróticas (A,B,H,M,V), oscuras (H,N), mosaicos(V), traslúcidas (B), venales (V,H), intervenales
(H,B,V,A), redondas (H,B), angulares (H,B), alargadas (H,N), corchosas (V), necróticas (H,B,V),
gomosas (V), pústulas (H), y chancros (H,B). Ocurren en necrosis terminal (H,B,A): destruyen la
punta de crecimiento en tallo, tubérculo o raíz y matan un órgano como la flor, órganos sexuales
y frutos.
En este caso colecte al menos 15 hojas representativas de todos los estadíos de infección. Para
plantas con hojas pequeñas, corte una rama con sus hojas intactas. Empaque en papel toalla
y luego en bolsa plástica sellada. Para las hojas muy suculentas limpie el exceso de humedad y
empáquelas individualmente en doble papel toalla seco y colóquelas en una bolsa de plástico.
Adjunte información sobre aplicación de pesticidas y condiciones ambientales que precedieron
la toma de la muestra.
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• MARCHITEZ, MUERTE REGRESIVA, PUDRICIONES RADICULARES Y DEFOLIACIÓN,
TAPONAMIENTOS VASCULARES, AMARILLEZ (H,B,M,A):
Las sustancias producidas o inducidas por determinados patógenos, reducen la translocación en
el xilema (marchitez) o en el floema (tuberización aérea, malnutrición subterránea). Otros factores
causantes de esta sintomatología pueden ser el exceso de agua, sales solubles, sequía o toxicidad.
En este caso colecte toda la planta, de ser posible, con raíz y suelo. Extraiga las plantas herbáceas
cuidadosamente del suelo, de tal forma que las raíces se mantengan intactas con su rizósfera
(suelo alrededor de las raíces), Coloque las raíces con su rizósfera en una bolsa plástica; y
empaque la parte aérea con papel toalla y bolsa plástica sellada.
En el caso de plantas perennes colecte un manojo generoso de las raíces alimenticias (las más
delgadas) con su rizósfera y empaque en una bolsa plástica sellada; incluya además raíces largas
que muestren pudrición con suelo.
En este caso colecte además varias ramas o ramillas con follaje mostrando un rango de síntomas,
empaque con papel toalla y bolsa plástica sellada. Describa correctamente la sintomatología
observada como decoloración de raíces, chancros, etc.
• PUDRICIÓN (B,H): La desintegración de tejidos ocurre por acción de patógenos. Mas común en órganos de reserva
(frutos, raíces, tubérculos)
5.2 FRUTOS Y OTROS TEJIDOS FRESCOS O SUCULENTOS:
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Evitar empacar frutos u otros órganos frescos mostrando estados avanzados de pudrición.
Seleccione muestras con estados tempranos de la infección o daño. Limpie el exceso de humedad
y envuelva los frutos o vegetales individualmente en doble papel toalla seco y colóquelo en una
bolsa de plástico.
Envíe el material en un empaque a prueba de choque (nevera de icopor y papel toalla de relleno).
Para evitar la maceración de los tejidos.
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5.3 FLORES Y FRUTILLOS CUAJADOS:
Colecte buena cantidad de flores y frutillos con pedúnculos y ramas, empaque en papel toalla y
luego en bolsa plástica sellada, evite que la muestra esté húmeda.
• CRECIMIENTO ANORMAL:
Se hace evidente en las formas de hipertrofia, hiperplasia, fasciación, epinastia, distorsión
abscisión prematura (B,H,N,V)
• CHANCROS Y AGALLAS:
Seleccionar ramas o ramillas con agallas jóvenes. Cortar ramas sanas y afectadas. Colocar
las muestras sin humedad en un papel grueso sellado o en un envase hermético, no en bolsa
plástica.
Colecte el suelo circundante al pie de la planta y empaque en una bolsa plástica sellada.
• CARBONES EN ESPIGAS, MAZORCAS, TUBÉRCULOS:
Colecte varias espigas (cereales, pastos, forrajes, caña de azúcar, etc.) y frutos (mazorcas de
maíz, tubérculos de papa, etc.) y envuélvalos individualmente en papel toalla y luego en bolsa de
plástico selladas. Empaque la muestra en el sitio de infección del cultivo dado que este patógeno
se distribuye fácilmente y contamina el resto del cultivo.
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6. TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS
NEMATOLÓGICO
En cualquier ambiente que los nematodos se encuentren, su distribución es irregular. Debido a
su poca movilidad, se encuentran localizados en ciertas zonas de un campo. Como no es posible
examinar todo el ambiente en que los nematodos se encuentran y muchas veces no se sabe en
qué zonas están, es necesario hacer un muestreo según la finalidad que se persiga:
• Con fines de diagnosis:
Se realiza cuando se observan los síntomas en el campo, a fin de relacionar la sintomatología
con la densidad poblacional de nemátodos.
• Muestreo de Cultivos anuales
Con un barreno o una palita se toman tres muestras por parche o zona afectada. La primera
muestra se toma dentro del parche; la segunda en el límite entre el parche y las plantas sanas; y
la tercera fuera del parche donde crecen plantas aparentemente sanas.
• Muestreo de Cultivos perennes (frutales):
En árboles se deben tomar muestras alrededor del árbol, justo en la proyección de la copa, las
que luego se mezclan. A veces es recomendable muestrear árboles con diferentes grados de la
enfermedad.
• Con fines de determinación de la densidad media
Se realiza para determinar la población de nemátodos presentes en el campo. Los resultados se
utilizan para decidir las medidas de control a implementar.
Se recomiendan tomar muestras de 30 puntos por hectárea, quitar la capa superficial del suelo,
luego se toma la submuestra hasta una profundidad entre 0 – 30 cm. las que se juntan en un
balde. No tome muestras en las calles ni de plantas muertas y evite el efecto de borde (orillas
del cultivo).
• NODULACIONES:
Colecte suelo y los tejidos con diferentes grados de síntomas, empaque conjuntamente en bolsa
plástica sellada.
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7. SÍNTOMAS POR CIRCUSTANCIAS PARTICULARES DEL
AMBIENTE
Los factores del ambiente no biótico (temperatura, humedad, toxicidad, deficiencias nutricionales
etc.), pueden afectar las plantas directamente o predisponerlas al ataque de agentes causantes
de enfermedades.
• CAUSAS ABIÓTICAS
Las enfermedades pueden resultar de temperaturas inapropiadas, exceso o falta de agua o
nutrientes, toxicidad por residuos de cultivos anteriores o productos químicos aplicados a estos,
toxicidad ambiental y hasta la caída de un rayo.
La distribución de la enfermedad en un campo puede ser la clave de algunas de éstas.
Deficiencia de calcio
Estrés hídrico
Daño por granizo
Recolecte: todos los detalles de la afección, especifique humedad del suelo y las condiciones
ambientales precedentes, anote la distribución de la sintomatología en la planta y en el campo,
así como las labores culturales realizadas (aplicaciones de plaguicidas, herbicidas, fertilizantes etc.).
• FACTORES DE PREDISPOSICIÓN
Los factores ambientales que favorecen la incidencia y afección por los patógenos son
temperaturas y humedades desfavorables a la planta y favorables al patógeno; deficiencias
nutricionales o excesos de fertilización favorables para el crecimiento de patógenos; acumulación
de sustancias metabólicas en condiciones de almacenaje; carencia de oxígeno (por exceso de
agua); carencia o exceso de radiación solar; efecto residual de herbicidas usados para otros
cultivos no susceptibles; prácticas culturales inapropiadas (daño a la deshierba, riegos o podas
inoportunas y suelos compactos).
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61
• SIGNOS DEL PATÓGENO
Algunos patógenos son reconocidos a simple vista sobre las plantas afectadas. El aspecto
algodonoso o pulverulento de otros, los delata. Los picnídios de algunos hongos, en cambio, son
apenas perceptibles, pero con una lupa de 10X se observa su presencia. Las hembras de algunos
nemátodos forman quistes o agallas característicos en ciertos cultivos, que pueden ser reconocidos
a simple vista por los especialistas. Las bacterias pueden formar exudados característicos, pero
los micoplasmas y virus, solo se pueden ver con equipos especializados. Cuando las causas del
daño fitopatológico no pueden determinarse en forma directa, es necesario seguir una serie de
técnicas de laboratorio que nos permitan llegar a la conclusión del diagnóstico.
Carbón del maíz
Monilia en cacao
Roya
Escoba de bruja
Por lo anteriormente expuesto, cada sintomatología de campo requiere de un material vegetal y
de unas técnicas de diagnóstico especificas.
8. INSTRUMENTOS PARA MUESTREO DE ENFERMEDADES
Se requiere:
o
o
o
o
o
o
62
Papel absorbente, el cual puede remplazarse por hojas de papel periódico
Bolsas plásticas en lo posible de color oscuro
Tijeras podadoras o machete para tomar el trozo de la planta a enviar
Cinta de enmascarar
Lapicero para el marcado de la muestra
Nevera de icopor con hielo seco o en su defecto con bolsas con agua congeladas aisladas
de la muestra para evitar que esta se queme por el frío, o se moje al descongelarse, tener
a la mano el protocolo para consignar la información, o en su defecto una hojas en blanco
donde se recopile los datos mas relevantes.
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9. MUESTRAS PARA DETERMINAR HONGOS
ANTAGÓNICOS
Para el diagnóstico de hongos antagónicos, se recomienda observar en el cultivo que esta siendo
afectado, las plantas que aparentemente se encuentran más sanas o que muestren tolerancia a
la enfermedad, de estas se debe tomar en diferentes partes una cantidad de aproximadamente
500 gramos del suelo que esta alrededor de las raíces, el cual se empaca y envía al laboratorio,
para que los hongos sean diagnosticados, aislados y repicados masivamente.
Trichoderma sp
Beauveria bassiana
10. SÍNTOMAS DE PRESUNCIÓN VIRAL
DEFORMACIÓN DE HOJAS, MOSAICO, ACLARACIÓN DE VENAS, MANCHAS ANILLADAS,
ENANISMOS.
Colecte tres o cuatro hojas del cogollo (hojas más jóvenes) y otras dos o tres con la expresión de
los síntomas representativos, las hojas deben ir envueltas en papel aluminio o papel toalla y con
bolsa plástica sellada. Si el envío va tardar más de un día debe enviarse refrigerado evitando a
toda costa que la muestra se moje, en caso de que el envío se haga el mismo día puede enviarse
las hojas en un sobre de Manila.
El mantenimiento de muestras frescas es esencial para el diagnóstico de virus.
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Virus en papa
Virus en tomate
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11. MUESTRAS PARA DETERMINAR DAÑO POR
HERBICIDAS
Este tipo de diagnóstico se realiza en laboratorios especializados, y necesita ser especifico en la
demanda del servicio o sea tener claro de cual grupo de herbicida se sospecha.
La visita del técnico, en este caso es importante dado que realiza una observación integrada de
la problemática como el estado del cultivo, área afectada, estado de las malezas, revisión de la
sintomatología, tanto en el cultivo como en las malezas de hoja ancha.
Cuando se toman este tipo de muestras se deben hacer observaciones a nivel de campo que
pueden ayudar al diagnóstico como son: encrespamiento de hojas nuevas, engrosamiento de
venas, la lamina foliar aparece encorvada hacia arriba o hacia abajo, observar si la sintomatología
es generalizada o en focos, si los potreros cercanos están quemados o no, si la sintomatología es
mas fuerte en las orillas del cultivo, si las malezas dentro del cultivo se encuentran afectadas.
Aclarar si la toxicidad es por una aplicación o por la utilización de abono orgánico no madurado
y con residuos de herbicidas.
Para el diagnóstico se debe recolectar material de planta severa, mediana y levemente afectadas
y enviar material suficiente de hojas, tallos a fin de determinar el producto que causó la
toxicidad.
Fototoxicidad
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12. MUESTRAS PARA DETERMINAR VIABILIDAD DE
SEMILLAS
Las semillas son las estructuras responsables de perpetuar la especie, éstas se encuentran
biológicamente en reposo, contienen un embrión con actividad metabólica.
Poseen la facultad de germinar, emerger y dar origen a plantas sanas y vigorosas. Para lo cual
deben estar intactos sus componentes, de manera que le permitan mantenerla no solo viva, sino
con altos índices de vitalidad.
La semilla tiene 3 partes básicas: el embrión, tejidos de reserva alimenticia y la cubierta. La cual
va siendo modificada durante el desarrollo, en la madurez presenta una apariencia característica,
generalmente seca, endurecida, engrosada y de color café. La envoltura proporciona a la semilla
protección mecánica para el embrión, haciendo posible manejar la semilla sin dañarla, pudiendo
así ser almacenada por períodos considerables de tiempo.
La viabilidad es la capacidad de la semilla para conservarse viva y germinar.
La prueba estándar para determinar la viabilidad es la prueba rápida de TZC (tetrazolio) que es
un compuesto orgánico que en contacto con las partes vivas de la semilla colorea los tejidos de
rojo, siendo esta una reacción enzimática.
La cantidad de muestra a enviar es de más o menos 100 gramos de semilla. La prueba tiene una
duración de 18 a 24 horas. Esta prueba no diferencia semillas vivas de semillas latentes.
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13. ANEXOS
No.
SERVICIO NACIONAL DE DIAGNÓSTICO VETERINARIO
FORMATO ÚNICO DE RECEPCIÓN DE MUESTRAS
USO DIAGNÓSTICO
Y PROCESAMIENTO
1. OFICINA RECEPTORIA
FECHA DE RECEPCIÓN:
D
M
A
2. IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN
PROPIETARIO:
PREDIO:
MUNICIPIO:
VEREDA:
TELÉFONO:
DEPARTAMENTO:
MED. VETERINARIO:
TELÉFONO:
3. MOTIVOS DE SOLICITUD
Diagnóstico
Movilización
Cuarentena
Compraventa
Otro
Cuál
4. TPO DE EXPLOTACIÓN
BOVINOS
AVES
PORCINOS
OVINOS-CAPRINOS OTRA ESPECIE
Leche
Comercial postura
Comercial cría
Labor
Comercial
Carne
Comercial engorde
Comercial engorde
Deporte
Urbano
Doble propósito
Comercial reproducción
Comercial completo
Paso fino
Rural
Raza:
Comercial postura engorde
Urbano
Raza:
Raza:
Traspatio
Rural
Raza:
Raza:
5. NOTIFICACIÓN
Predios vecinos afectados
Cuál
6. CRONOLOGÍA
Día
SÍ
CUÁNTOS
7. SINTOMATOLOGÍA
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EQUINOS
NO
Primer enfermo
Notificación
Primera visita Méd. Vet.
8. LESIONES EN LA NECROPSIA
9. DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO:
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Mes
Año
10. IDENTIFICACIÓN - MANEJO
Identif.
Sexo
Edad
meses Vacunas y fecha (mes y año)
SISTEMA DE ALIMENTACIÓN:
TRATAMIENTO:
11. TOMA DE MUESTRAS
Tipo de muestra:
Día
Lugar y nombre laboratorio de envío:
Año
TOMA
ENVÍO
Sexo:
Edad:
Mes
12. POBLACIÓN
POBLACIÓN
ESPECIE
Enfermos Muertos(1)
ESPECIE
Total
Terneros (as)< 1 año
Hembras 1-2 años
Hembras>2 años
Machos 1-2 años
Machos>2 años
TOTAL
P Lactantes<2 meses
O
R Machos 2-6 meses
C Hembras 2-6 meses
I
N Machos>6 meses
O
S Hembras>6 meses
TOTAL
OVI-CAPRINOS
EQUINOS
<4 semanas
A 4-7semanas
V 8-22semanas
E
S >22 semanas
TOTAL
C
A
N
I
N
O
S
B
O
V
I
N
O
S
F
E
L
I
N
O
S
S
I
L
V
E
S
T
R
E
POBLACIÓN
Enfermos Muertos(1)
Total
Hembras 1-2 años
Hembras>2 años
Machos 1-2 años
Machos>2 años
TOTAL
Hembras 1-2 años
Hembras>2 años
Machos 1-2 años
Machos>2 años
TOTAL
Hembras 1-2 años
Hembras>2 años
Machos 1-2 años
Machos>2 años
TOTAL
OTROS
(1) Los muertos se consideran que enfermaron, inclúyalos en los enfermos.
13. PRUEBAS SOLICITADAS
VIROLOGÍA
TOXICOLOGÍA / QUÍMICA
PARASITOLOGÍA
BACTERIOLOGÍA
HISTOPATOLOGÍA
14. RESULTADOS
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DIAGNÓSTICO VEGETAL
INFORMACIÓN QUE DEBE ACOMPAÑAR SU MUESTRA
Muestra
Fecha
Seccional: ANTIOQUIA
1. INFORMACIÓN GENERAL
1.1 Interesado:
1.2 Ciudad:
Análisis
1.3 FAX:
1.4 Teléfono:
1.5 Patológico
1.6 Entomológico
DIRECCIÓN:
2. INFORMACIÓN FINCA
2.1 Nombre de la finca:
2.2 Vereda:
2.3 Municipio:
2.4 Departamento:
PROPIETARIO:
2.5 Altitud msnm:
TEMPERATURA MEDIA:
TEXTURA DEL SUELO
PESADA
MEDIA
LIVIANA
3. INFORMACIÓN CONDICIONES CLIMÁTICAS UNA SEMANA ANTERIOR A LOS
PRIMEROS SÍNTOMAS
3.1 Vientos
Escasos
Normales
Fuertes
3.2 Lluviosidad
Alta
Media
Baja
3.3 Humedad Relativa
Alta
Media
Baja
4. INFORMACIÓN SOBRE EL CULTIVO AFECTADO
4.1 Nacional
4.2 Material importado
4.3 Especie/Cultivo
4.2.1 Procedencia
(país de origen)
4.4 Área cultivada
4.2.2 Firma
4.5 Variedad
4.6 Edad
PROCEDENCIA DE LA SEMILLA
4.7 Estado de desarrollo del cultivo: (marcar con x)
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4.7.1 Semilla
4.7.2 Semillero o vivero
4.7.5 Producción
4.7.6 Poscosecha
DENSIDAD DE SIEMBRA
4.7.3 Vegetativo
PLANTAS / ha
4.7.4 Floración
Kg / ha
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5. INFORMACIÓN DE LA PARTE AFECTADA (indique con X)
EXTENSIÓN CULTIVADA
EXTENSIÓN AFECTADA
5.1 Semilla
5.2 Raíz
5.3 Tallo
5.4 Hojas
5.5 Ramas
5.6 Flores
5.7 Frutos
5.8 Bulbos
5.9 Tubérculo
Otro
Cuales:
6. INFORMACIÓN SOBRE APARIENCIA GENERAL (Solo para muestras fitopatológicas)
(Indique con X)
6.1 Marchitez
6.2 Con áreas muertas
6.3 Amarillamiento
6.4 Quemazón
6.5 Enanismo
6.6 Pudrición
6.7 Manchas
Otro
Cuales:
7. INFORMACIÓN DAÑOS (Solo para muestras entomológicas) (Indique con X)
Estado:
7.1 Adulto
7.2 Larva
7.3 Ninfa
7.4 Otros
Cuales
7.5 Barrenador
7.6 Raspador
7.7 Minador
7.8 Chupador
Cuales
7.9 Comedor de follaje
Otros
Cuales:
8. INFORMACIÓN DAÑOS (Indique con X)
Distribución:
8.1 General
8.2 Por Zonas
8.3 Plantas aisladas
8.4 Pendiente
8.5 Plano
8.6 Zonas altas
8.7 Zonas bajas
8.8 Zonas húmedas
Severidad:
8.9 Alta
8.10 Media
8.11 Baja
9. AGROQUÍMICOS APLICADOS (fungicidas, insecticidas, herbicidas, fertilizantes, etc.)
NOMBRE
DOSIS
FRECUENCIA DE APLICACIÓN
10. RESULTADOS
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