Universidad Central De Venezuela Facultad de Ciencias Escuela de Biología Departamento de Zoología Parasitología General (1620) Semestre II-2013 Prof. Cristina Sanoja (Coordinadora) COLORACIÓN DE SAFRANINA PARA Cryptosporidium sp. SOLUCIONES: Solución diaria de Hematoxilina de hierro. Solución Fast Green 0,001%: “Fast Green” FCF……... 0,01 gr H2O destilada………...... 100 ml Solución de ácido acético al 1%: Acido Acético Glacial…..1 ml H2O destilada…………..99ml Solución de Safranina O al 0,1%: Safranina………………..0,1gr H2O destilada…………..100ml PROCEDIMIENTO: 1.Teñir con solución diaria de hematoxilina de hierro durante 7 min. 2.Lavar con agua destilada corriente por 10 min. 3.Teñir con solución FCF durante 3 min. 4.Enjuagar rápidamente con la solución de ácido acético máximo durante 10 a 15 segundos. 5.Teñir con solución de safranina O por 5 min. 6.Observar al microscopio: los quistes de Cryptosporidium se colorean de rojo en contraste con el fondo verde de la preparación. Los núcleos de los esporozoitos se tiñen de morado, aunque difícilmente se pueden observar. 1 CICLO DE VIDA DE Cryptosporidium sp. 2 3 CICLO DE VIDA DE Cyclospora cayetanensis Infected people shed unsporulated (non-infective; immature) Cyclospora cayetanensisoocysts in their stool; immature oocysts usually require at least 1 week under favorable laboratory conditions to sporulate (become infective). An unsporulated oocyst, with undifferentiated cytoplasm, is shown (far left), next to a sporulating oocyst that contains two immature sporocysts (A). An oocyst that was mechanically ruptured has released one of its two sporocysts (B). One free sporocyst is shown as well 4 as two free sporozoites, the infective stage of the parasite (C). Credit: CDC/DPDM. RELACION DE TAMAÑO 5