Bacteriología

Bacteriología
El paciente, un niño de 8 años de edad con una historia
de dos días de diarrea, presentó una fuerte diarrea,
con 14 movimientos al día, que se volvió
sanguinolienta. También se quejaba de dolor al
defecar. Había vomitado una vez. Había asistido a una
barbacoa 6 días antes. Afirmaba que su madre le
había hecho comer, aunque no le gustaba, una
hamburguesa que estaba roja por dentro. El examen
físico no prsentaba gravedad excepto por una obvia
deshidratación. Los hallazgos de laboratorio más
significativos fueron un recuento de leucocitos en
sangre de 13000/mm3 con 9700 neutrófilos/mm3;
una tinción de azul de metileno de heces que
presentaba abundantes células polimorfonucleares y
prueba de sangre en heces positiva. Fue tratado y
mejoró rapidamente y fue dado de alta en 24h. El
cultivo de las heces en agar MacConkey con sorbitol
dio lugar a colonias de bacilos Gram negativos no
fermentadores del sorbitol. Una prueba adicional
confirmó el diagnóstico.
Historia clínica
 Niño
de 8 años
 Historia de dos días de diarrea (14
mov./día)
sanguinolienta
 Dolor al defecar
 Vomitó una vez
 Barbacoa 6 días antes
 Hamburguesa roja por dentro
Examen físico
 No
presenta gravedad
 Deshidratación
Pruebas complementarias
 Leucocitos
en sangre 13000/mm3
– Neutrófilos 9700/mm3
 Tinción
de Azul de metileno de
heces: ↑↑ céls.- PMN
 Sangre en heces :+
 Coproc. A. MacConkey con sorbitol:
BG- no fermentadores de sorbitol
Enterobacteriaceae





Catalasa +/Oxidasa –
Inmóviles o móviles por flagelos perítricos
Metabolismo:
– Anaeriobio facultativo
– Fermentación ác.mixta/butilen glicólica
– Fermentan glucosa
– Reducen nitratos a nitritos
Patogenicidad
– Ag O polisacáridos del LPS
– Ag H flagelos
– Ag K cápsula
Cuadro clínico: infecciones nosocomiales.
Mutualistas intestinales.
Enterobacteriaceae

Principales patógenos:
– E.coli
– Klebsiella
Diagnóstico:
– Enterobacter
•EMB (Eosine Methylene Blue Agar)
•MacConkey
– Serratia
•KIA, TSI
– Yersinia spp
– Salmonella
– Proteus
– Shigella
¿Qué microorganismos pueden
causar este cuadro patológico?
Bacillus cereus (BG+)
 Clostridium difficile
 Salmonella (BG-, no responde al tto.)
 Campylobacter jejuni
 Yersinia enterocolitica
 Aeromonas (BG-)
 Shigella
 Escherichia coli

¿Cuál es el agente etiológico más
probable?
Escherichia coli
enterohemorrágica
(ECEH) O157:H7
Datos más importantes que señalan a
este microorganismo como el agente
etiológico
 Colitis
hemorrágica
– Sangre y leucos. en heces
 Dolor
al defecar
 Ausencia de fiebre
 Ingestión de carne mal cocinada
 Perído de incubación: 3-4 días
ECEH
Bacilo G-, anaerobio facultativo
 No esporulado. Sensible a la desecación.
 Catalasa +, oxidasa  Fermetador de lactosa, no de sorbitol
 Indol +
 Ureasa –
 Sin producción de gas
 Inmóvil
 Fimbrias, plásmidos

¿Cuál es el principal factor de
virulencia?

Adhesinas
– Adhesión a céls para evitar ser arrastradas.
Son muy especializadas e incluyen:
Factores antigénicos de colonización (CFAI, CFAII,
CFAIII)
 Fimbrias de adherencia y agregación


Exotoxinas
– Tox. Shiga: también se denominan verotoxina
(Stx-1, Stx-2 para ECEH) para diferenciarlas
de la toxina de Shigella dysenteriare.
– Estimulan la expresión de citocinas
inflamatorias (TNF-α…)
¿Cómo está codificado
genéticamente?
 Las exotoxinas están codificadas en el
genoma de profagos integrados en el
cromosoma bacteriano
Elementos genéticos móviles:
- fagos
- transposones
- plásmidos
- islas de patogenicidad
 Genes
de virulencia. Codifican:
– Verotoxina (stx1 y stx2)
 Inhiben
síntesis protéica inactivando sub.
60S y producen daño celular.
– Intiminina (gen eae)
 En
la isla patogenicidad LEE.
 Adhesion de la bacteria al enterocito
 Destrucción de microvellosidades
– Enterohemolisina (Ehly)
(*): fenómeno de attaching and effacing
(*)
Además del cultivo, ¿qué otros métodos
han probado ser útiles para la detección?
 Aglutinación
– 56 serotipos, el más frecuente O157:H7
 PCR
(sondas): confirmación de la
toxina por genes del bacteriófago.
 Detección de tox. en cultivo celular ⇨
cultivo de bacts. en medio líquido:
infusión cerebro-corazón. Toxina ⇨ caldo por filtro
0,22µm ⇨ pasa toxina (no bacts). Inoculacion en céls. ⇨
si existe daño ⇨ hay tox.
Otras pruebas para identificación

MacConkey
– Fermenta lactosa (+)
– Suplementado con Sorbitol (-)
EMB
(Eosine Methylene Blue Agar): halo verde
metálico

 TSI
(Triple Sugar Iron):
 E.
coli (A/A gas)
 Shigella (K/A)
 Christensen
Urea Slant:
 E.
coli (-, amarillo)
 Proteus (+, rosa)
 Galería
API20E
¿Cuál es la fuente de infección de
este microorganismos?
 Carne
de vacuno contaminada poco
cocinada
 Vegetales sin cocinar y frutas
 Leche cruda
 Ingestión de agua no cloradas y/o
contaminadas (traguito de piscina)
 Transmisión persona - persona en
familia, centros de atención infantil…
¿Cómo se extiende?
¿Cómo puede evitarse la
infección?







Cocinar bien la carne de vacuno, especialmente
la carne picada. (Tª68º)
Desarrollo de sistemas en granjas y carnicerías
evitar contacto con desechos intestinales
Irradiar la carne?
Pasteurizar la leche y productos lácteos
Proteger, purificar y clorar los abastecimientos de
aguas públicas y piscinas
Asegurar higiene adecuada en jardines infantiles:
lavado frecuente de manos con jabón
Notificación de brotes de serotipos implicados
(epidemiología)
¿Qué cuadros patológicos son
causados por este microorganismos?
 Colitis
hemorrágica (Stx-1)
– Incubación 3-4 días
– Lesiones ulcerosas hemorrágicas
Actividad necrosante de la toxina
– Duración aprox. una semana (con fiebre
escasa o nula)
Cuadros patológicos:

Síndrome hemolítico urémico
– Provocado tras la unión de Stx-1, Stx-2 o
ambas a una molécula receptora glucolipídica
(Gb3 o Gb4) que se encuentra en la superficie
de las células endoteliales renales e
intestinales.
 En
el riñón
 En
el intestino
insuficiencia renal aguda,
trombopenia.
destrucción de las
microvellosidades.
– Se da en niños (<5 a) o personas de edad
avanzada
– 2-7% de las infecciones por ECEH derivan en
esta complicación; siendo la causa más
frecuente de insuficiencia renal aguda en niños.
¿Qué terapia fue utilizada para el
tto del paciente?
 Enfermedad
autolimitante (4-9 días)
⇨ reposición de líquidos y electrolitos.
 Contraindicado
tto con antibióticos
E.coli enteroinvasor (ECEI)
 14
serogrupos
 Antígeno: Ag O; OMP plasmídico
 Infección: diarrea benigna febril; en
heces: sangre, leucos. y moco.
 Diagnóstico: test Sereny. PCR (genes
codificantes OMP).
 Invasión colón.
E.coli enterotoxigénico (ECET)
Toxina termolábil (LT) ⇨ ↑
AC y termoestable (ST) ⇨ ↑ GC. CFA ⇨
adhesión.
 Infección: Diarrea del viajero y secretora.
Enteritis autóctona.
 Diagnóstico: Detección de enterotoxinas
por látex y PCR.
 Transmisión: agua y alimentos
contaminados. Portadores asintomáticos
 Antígenos:
E.coli enteropatógeno (ECEP)
21 serotipos
 Antígenos: pili; receptor de intiminina
translocado ⇨ unión intimina ⇨ destrucción
microvellosidades
 Infección: Diarrea líquida con moco,
anorexia y vómitos. Heces no
sanguinolientas.
 Diagnóstico: cultivo E.coli
 Transmisión: Guarderías, hospitales,
persona – persona.

E.coli enteroagregativa (ECEAg)
Patrón de adherencia agregativa(AAFs)
(capacidad de aglutinarse
entre sí ~ ladrillos. Biopelícula:
↑ secreción mucosidad en intestino
delgado)
 Infección: Diarrea infantil
persistente y sanguinolienta.
 Diagnóstico: cultivo con patrón
de adherencia agregativa.
 Grupo riesgo: lactantes en
paises en vías de desarrollo.

¿Preguntas?