5CFE01-055 - Sociedad Española de Ciencias Forestales

5CFE01-055
2/12
La comunidad de hongos micorrícicos en un bosque de quercíneas Mediterráneo
APONTE PERALES, C.1, MARAÑÓN, T.1, GARCÍA FERNÁNDEZ, L.V.1 y GARDES,
M.2
1
Instituto de Recursos Naturales y Agrobiología de Sevilla (IRNASE) – CSIC. Avda Reina Mercedes 10, 41012 Sevilla,
España
2
UMR 5174 Evolution et Diversité Biologique, Université Toulouse III Paul Sabatier, 118 Route de Narbonne, 31062
Toulouse Cedex 4, France
Resumen
La supervivencia de las quercíneas en condiciones naturales depende de la
micorrización, una asociación simbiótica establecida entre plantas y hongos. A través de esta
relación los hongos proveen a la planta de agua, nutrientes y beneficios tales como una mayor
protección ante el estrés hídrico, los contaminantes o los agentes patógenos. Cambios en la
cubierta vegetal, en las condiciones de humedad o la aplicación de fertilizantes y pesticidas
pueden reducir las poblaciones de hongos micorrícicos, afectando a las interacciones entre
plantas y llegando a alterar la composición de la comunidad vegetal.
Este trabajo se realizó en los bosques de quercíneas del sur de la península ibérica.
Nuestro objetivo fue estudiar, mediante el uso de métodos moleculares, la diversidad y
estructura de la comunidad de hongos micorrícicos asociados a las raíces de dos especies
coexistentes en estos bosques, el alcornoque (Q. suber L.) y el quejigo moruno (Q.
canariensis Willd.), y describir la relación entre la especie huésped, las condiciones
ambientales y la composición de la comunidad fúngica.
Entre los resultados, destaca la gran diversidad de especies micorrícicas encontradas,
resultado de un elevado número de taxones raros, rasgo característico de las comunidades de
micorrizas. Las familias Thelephoraceae y Russulaceae se mostraron como las más
abundantes, taxonómicamente diversas y con mayor dispersión espacial. Un número limitado
de especies presentaron especificidad por la especie huésped mientras que el efecto de las
condiciones del medio en la composición de la comunidad de hongos micorrícicos fue
notable. La coexistencia de especies vegetales huéspedes y la heterogeneidad del medio
parecen ser factores clave para sostener la diversidad de la comunidad micorrícica.
Palabras clave
Ectomicorriza, secuenciación de ADN, especie huésped, heterogeneidad ambiental,
diversidad
1. Introducción
La simbiosis micorrícica es una relación mutualista establecida entre plantas vasculares
y hongos a través de la cual ambos organismos obtienen un beneficio principalmente
alimentario: el hongo simbionte aumenta el área de exploración de las raíces y provee a la
planta de recursos inorgánicos, como agua y nutrientes, a la vez que obtiene de esta última
energía en forma de productos fotosintetizados (SMITH & READ, 1997). La simbiosis con
hongos micorrícicos permite la captación de nutrientes desde minerales meteorizados y
sustratos orgánicos y confiere a la planta una mayor protección frente el estrés hídrico, los
contaminantes o los agentes patógenos (PÉREZ-MORENO & READ, 2001; VAN SCHOLL
et al., 2006), pudiendo llegar a generar cambios en las comunidades de plantas (PERRY et
al., 1989). En la actualidad, esta relación, desarrollada hace aproximadamente 400 millones
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de años como una adaptación a situaciones con limitación de nutrientes, está presente en la
mayoría de las plantas de los ecosistemas terrestres y es esencial para la nutrición y
supervivencia de muchas de ellas (SMITH & READ, 1997).
Entre las especies fúngicas que forman esta relación, los hongos ectomicorrícicos
(ECM) se caracterizan por sus estructuras de intercambio, llamadas micorrizas, formadas por
una cubierta miceliar que rodea las raíces cortas de la planta huésped (SMITH & READ,
1997). Se estima que alrededor de 10000 especies de hongos, principalmente Basidiomycota
y Ascomycota, y 8000 especies de plantas, pertenecientes a familias como las betuláceas,
fagáceas o pinaceas, participan en esta relación (TAYLOR & ALEXANDER, 2005), en la
que las especies de hongos ECM pueden asociarse con huéspedes de diferente especie, género
o familia a la vez que una misma planta puede ser colonizada por distintos taxones de hongos
(ROY et al., 2008).
Las condiciones ambientales y la composición de la comunidad de huéspedes afectan a
la composición de la comunidad de hongos ECM. Las condiciones abióticas del suelo como la
humedad, la acidez o la disponibilidad de nutrientes afectan al comportamiento y asociación
de las especies simbiontes (BAUM & MAKESCHIN, 2000). Los árboles huéspedes afectan a
la composición de la comunidad de ECM al ejercer una selección directa sobre las especies de
hongos con las que establecen la simbiosis aunque, en general, la mayoría de las especies
ECM muestra una baja especificidad (MOLINA et al., 1992). Por otra parte, los árboles
también pueden influir en la comunidad de ECM mediante su capacidad para alterar las
condiciones abióticas del suelo, a través de la calidad y cantidad de hojarasca que aportan
(BOETTCHER & KALISZ, 1990). Las interacciones entre la especie huésped, las
condiciones ambientales y la comunidad de hongos ECM son complejas y todavía se conoce
poco sobre la importancia de los distintos efectos en el ensamblaje de especies (NANTEL &
NEUMANN, 1992).
Los bosques de quercíneas del sur de la península ibérica están relativamente bien
conservados, albergando un gran numero de endemismos y una alta diversidad de especies
(OJEDA et al., 2000), compatible con el uso sostenible de sus recursos (ANÓNIMO, 2005).
A pesar de que la micorrización sea esencial para la nutrición y supervivencia de los Quercus
en condiciones naturales (SMITH & READ, 1997) el número de estudios sobre comunidades
de ECM llevados a cabo en bosques de quercíneas es limitado (VALENTINE et al., 2004;
AVIS et al., 2008) y pocos de ellos se refieren a ambientes mediterráneos (RICHARD et al.,
2005).
2. Objetivos
En este trabajo se estudia la comunidad de hongos ectomicorrícicos (ECM) asociada a
las raíces de dos especies de árboles que coexisten, la perennifolia esclerófila Q. suber
(alcornoque) y la marcescente Q. canariensis (Quejigo moruno), empleando métodos
moleculares. En particular se persigue:
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1º. Describir la diversidad y estructura de la comunidad de hongos ECM en un bosque
mixto mediterráneo.
2º. Evaluar las diferencias en la composición específica de las comunidades de hongos
asociadas a las raíces de Q. suber y Q. canariensis en dos rodales forestales.
3º. Analizar la relación entre la especie huésped, las condiciones ambientales y la
distribución de la comunidad ectomicorrícica, partiendo de la hipótesis de que la diferencia en
la calidad de la hojarasca de las dos especies induce cambios en la composición de las
comunidades de hongos ECM.
3. Metodología
El área de estudio se sitúa en el Parque Natural de los Alcornocales al sur de la
península ibérica. El clima es mediterráneo subhúmedo con precipitaciones entre 600mm y
2100mm, una temperatura media anual alrededor de los 15.7º C y temperaturas estivales
moderadas que varían entre los 22º C y 26º C. El sustrato corresponde a areniscas silíceas
con afloramientos calizos sobre el que se desarrollan suelos heterogéneos aunque mayormente
ácidos o neutros y pobres en nutrientes (ANÓNIMO, 2005). El bosque de alcornocal (Q.
suber) domina la vegetación del parque y mezclándose con el quejigo moruno (Q.
canariensis) en los fondos de valle donde es localmente abundante. El sotobosque es diverso
y con abundancia de especies arbustivas como Phillyrea latifolia, Erica spp. y Pistacia
lentiscus (OJEDA et al., 2000).
En este trabajo, se han estudiado dos rodales de bosque (1ha) distantes entre sí
aproximadamente 40km. El primero, situado en la zona norte del parque, muestra una
estructura de bosque abierto (Ba) con una densidad de 219 árboles.ha-1 y un área basal de 22.1
m2.ha-1, mientras que el segundo, situado en el área sur del parque, es un bosque cerrado (Bc)
con mayor densidad (769 árboles.ha-1) y área basal (47.4 m2.ha-1) (PÉREZ-RAMOS, 2007). El
rodal de bosque abierto se localiza en una zona más elevada e interior del parque y presenta
temperaturas más extremas y mayores precipitaciones que el bosque cerrado. Los suelos
muestran un mayor contenido en nutrientes y materia orgánica en el bosque abierto
(QUILCHANO et al., 2007).
En cada rodal se seleccionaron 6 individuos de Q. suber y 6 de Q. canariensis, bajo los
que se tomaron muestras de hojarasca (cuadrados de 30x30cm) y de suelo superficial (0-25
cm). Las muestras de hojarasca se secaron (70º), pesaron, molieron y sometieron a digestión
(ácido nítrico concentrado, en horno de microondas), tras lo que se determinaron varios
macronutrientes (Ca, K, P) empleando un ICP/OES. En el suelo, el pH se determinó en
suspensiones 1:2.5, el porcentaje de carbono mediante un analizador elemental, el Ca y K
asimilables en acetato amónico 1M, mediante ICP-OES, el P disponible mediante el método
Bray y Kurtz (BRAY & KURTZ, 1945) y el contenido total de P mediante digestión ácida
(agua regia) e ICP/OES. El nitrógeno en la hojarasca y el suelo se determinó por el método
Kjeldahl (SPARKS, 1996).
Para estudiar la comunidad de hongos ECM se muestrearon raíces secundarias
superficiales (0-15cm) en los 24 individuos seleccionados. Las muestras fueron
cuidadosamente lavadas y de cada una se seleccionaron 20-22 ectomicorrizas al azar,
empleando una lupa binocular. El ADN de cada micorriza se extrajo mediante un kit de
purificación PROMEGA y posteriormente las regiones ITS I y II, incluidas en la subunidad
5.8S del ARNr, se amplificaron mediante la reacción de polimerización en cadena (PCR)
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empleando los cebadores específicos para hongos ITS–1F/ITS4 (GARDES & BRUNS, 1993)
e ITS–1F/ITS4b (WHITE et al., 1990). Finalmente, los productos de la amplificación fueron
verificados mediante electroforesis, secuenciados y corregidos manualmente. La
identificación de las especies simbiontes como unidades taxonómicas operacionales (OTUs)
se realizó en dos fases: primero las secuencias de nucleótidos obtenidas para cada micorriza
se cotejaron con las almacenadas en la base de datos genéticos internacional Genbank
permitiendo su identificación a nivel de género y/o familia y en algunos casos de especie. En
una segunda fase, se analizaron los porcentajes de variación entre secuencias pertenecientes a
una misma familia/género (NEI & KUMAR, 2000). Las secuencias con una similitud superior
al 97% fueron adscritas a una misma OTU, considerada como especie genética (BLAXTER et
al., 2005). Para corroborar la correcta agrupación e identificación de las OTUs se generaron
diversos árboles filogenéticos incluyendo secuencias del Genbank como referencias externas.
Las OTUs se clasificaron en función de distintas categorías taxonómicas (división,
orden, familia y género) y del tipo de fructificación (epigea, hipogea, resupinada y asexual).
La abundancia relativa de cada categoría se calculó como el número de micorrizas
pertenecientes a cada clase con respecto al total de micorrizas identificadas. La riqueza de
especies y el índice de diversidad de Simpson se emplearon como parámetros indicadores de
la diversidad (MAGURRAN, 1988). La relación entre las variables ambientales y la
distribución de las especies simbiontes se evaluó mediante análisis de componentes
principales (PCA) y análisis de correspondencias canónicas (CCA) (TER BRAAK &
SMILAUER, 2002).
4. Resultados
Para el conjunto de 24 árboles se identificaron un total de 69 especies (OTUs) de
hongos simbiontes pertenecientes a 24 géneros y 18 familias (Tabla 1). El número de especies
raras fue muy elevado, con dos tercios de los taxones identificados presentes en un solo árbol
y el 46% de las especies formando sólo una micorriza. De las familias identificadas
Telephoraceae se mostró como el grupo más diverso con un 28% de las especies, seguida de
Russulaceae (22%) y Cortinariaceae (17%). Más de la mitad de los 24 géneros muestreados
se componían de sólo dos especies. La diversidad de especies ectomicorrícicas fue similar en
las dos quercíneas (Tabla 1), contando ambas con 18 familias y 14 géneros. Sólo 13 de las
OTUs identificadas fueron encontradas en ambas quercíneas, 29 fueron observadas
exclusivamente en Q. canariensis y 27 lo fueron en Q. suber (Figura 1).
Las comunidades de hongos ECM asociados a las raíces de ambas quercíneas
estuvieron dominadas por Basidiomicetes (>90% de las micorrizas identificadas),
identificándose sólo 10 micorrizas formadas por Ascomycetes. Thelephoraceae y
Russulaceae fueron las familias más abundantes y extendidas, encontrándose en 18 y 17
árboles, respectivamente. Se observaron diferencias significativas en la abundancia de sus
poblaciones tanto entre las dos especies hospedadores, como entre los dos rodales estudiados
(Tabla 1).
Más de la mitad de las especies identificadas (56%) se clasificaron como especies con
cuerpos fructíferos epigeos mientras que el 44% de los taxones tenían carpóforos
inconspicuos (resupinados, hipogeos o asexuales). En general las poblaciones de hongos
epígeos y resupinados fueron las más abundantes aunque mostraron diferencias entre
quercíneas y rodales (Tabla 1).
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Tabla 1. Descripción de la comunidad de hongos ECM asociados a las raíces de Q. canariensis (Qc) y Q. suber (Qs) en un
rodal de bosque abierto (Ba) y de bosque cerrado (Bc). La tabla muestra para cada categoría huésped-rodal y para el total
de individuos el número de micorrizas y especies encontradas, parámetros de diversidad, la abundancia relativa de las
familias más representativas y la distribución de las micorrizas identificadas según el tipo de fructificación.
Qc -Ba Qc -Bc Qs- Ba Qs - Bc Total
115
125
104
121
465
38
57
48
70
213
20
19
21
15
46
14
16
16
10
32
Nº micorrizas muestreadas
Nº micorrizas identificadas
Nº spp que ocurren en un solo árbol
Nº spp con una sola micorriza
Diversidad
Riqueza de especies (S)
Promedio riqueza /árbol
Índice diversidad de Simpson (1-D)
22
4.0
0.954
23
4.5
0.873
25
4.8
0.954
23
6.3
0.935
69
4.9
0.965
Familias (% de micorrizas)
Thelephoraceae
Russulaceae
Cortinariaceae
Sebacinaceae
Clavulinaceae
Atheliaceae
Boletaceae
Melanogastraceae
Pluteaceae
60.5
7.9
15.8
2.6
0.0
0.0
2.6
0.0
0.0
24.6
43.9
5.3
5.3
7.0
1.7
0.0
0.0
0.0
25.0
35.4
10.4
6.2
0.0
4.2
6.2
2.1
0.0
8.6
54.3
0.0
1.4
0.0
5.7
7.1
7.1
7.1
25.8
39.0
6.6
3.8
1.9
3.3
4.2
2.8
2.3
Fructificaciones (% de micorrizas)
Epigeas
Hipogeas
Resupinadas
Asexuales
31.6
0.0
65.8
2.6
64.9
1.7
31.6
1.7
59.6
2.1
36.2
2.1
72.9
7.1
15.7
4.3
60.4
3.3
33.5
2.8
Tomentella sublilacina
Cortinarius dionysae
Amanita citrina
Russula sp.6
Melanogaster variegatus
Macowanites ammophilus
Russula cf. emetica
Xerocomus subtomentosus
Byssocorticium atrovirens
Cenococcum geophilum
Tomentella sp.4
Russula sp.2
Clavulina sp. 2
Lactarius chrysorrheus
Tomentella sp.2
Cortinarius umbrinolens
Tomentella sp.1
Tomentella sp.10
Russula sp.1
Q. canariensis
Q. suber
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
Figura 1. Abundancia relativa (%) de las especies de hongos ECM identificados. Sólo las más abundantes aparecen
representadas.
El estudio mediante PCA de la variación de las propiedades del suelo y la hojarasca
recogidos bajo los individuos seleccionados mostró una alta correlación (r>0.75) y
concentración de las variables (55% de la variabilidad) en un gradiente principal de
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acidificación y empobrecimiento en nutrientes (Ca, K, P) del suelo y la hojarasca dependiente
de los efectos de la especie huésped y el rodal. En ambos rodales los suelos y hojarasca
asociados a Q. canariensis mostraron mayores valores de pH y fertilidad que los encontrados
para Q. suber (Figura 2). Entre todas las variables ambientales estudiadas los niveles de calcio
en la hojarasca fueron los que mejor explicaron la distribución de la comunidad de hongos
ectomicorrícicos (8.4% de la varianza total de la comunidad ECM, según el primer eje del
análisis CCA, Fig. 2), si bien la acidez y los niveles de calcio en el suelo mostraron también
un efecto marginal significativo.
30000
Qc-Ba
Qs-Ba
Qc-Bc
Qs-Bc
Hojarasca- Ca (ppm)
25000
20000
15000
10000
5000
-1,5
-1,0
-0,5
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
CCA Eje 1
Figura 2. Distribución de los individuos de Q. suber (Qs) y Q. canariensis (Qc) estudiados en los rodales de bosque
abierto (Ba) y bosque cerrado (Bc) en función de la composición de su comunidad de hongos ECM (según el Eje 1 del
análisis CCA) y los niveles de calcio determinados en su hojarasca (Hojarasca-Ca). Individuos próximos en el eje de
abscisas (eje 1 del CCA) mostraron mayor similitud entre sus comunidades de ECM.
5. Discusión
El número de especies de hongos ECM (69) encontrado es comparable con los hallados
en otros trabajos llevados a cabo en bosques de quercíneas, en los que la riqueza de especies
osciló entre 39 y 79 taxones identificados en 20 y 36 individuos, respectivamente (AVIS et
al., 2008; VALENTINE et al., 2004). La comunidad de hongos micorrícicos estudiada
comprende unos pocos géneros muy abundantes y muchos taxones raros, situación frecuente
en estos organismos simbiontes (DAHLBERG, 2001). Las dos familias dominantes más
diversas y extendidas fueron Telephoraceae y Russulaceae, que han sido también señaladas
como dominantes en muchos otros estudios de ECM en bosques boreales y templados de
coníferas y quercíneas (GARDES & BRUNS, 1996; RICHARD et al., 2005).
Las poblaciones de hongos ECM con fructificaciones resupinadas representaron una
importante fracción de las micorrizas identificadas (33%), mostrando abundancias máximas
en las zonas con mayor concentración de nutrientes. Es frecuente que los trabajos sobre
diversidad de ECM basados en el estudio de carpóforos ignoren los grupos con frutos
inconspicuos, tales como los hipogeos o resupinados (RICHARD et al., 2004). El uso de
técnicas moleculares ha puesto de manifiesto la importancia de estas especies de
fructificación resupinada en las comunidades de ECM (DAHLBERG, 2001).
Es notable la escasa presencia de secuencias correspondientes a taxones micorrícicos de
la península ibérica en la base de datos genéticos internacional Genbank, sólo un 30% de las
especies. Para progresar en el conocimiento de las comunidades micorrícias de los bosques
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españoles, es esencial aunar esfuerzos que permitan la recolección, identificación y
secuenciación de carpóforos. Un especial énfasis ha de ponerse en la identificación de
especies resupinadas, dado el alto grado de desconocimiento que existe sobre ellas y su
importancia en las comunidades micorrícicas.
La elevada riqueza de especies y la proporción de especies raras encontradas en nuestro
estudio impiden evaluar con precisión el grado de especificidad de las especies fúngicas con
respecto a la especie huésped. Sin embargo, estudios previos no han encontrado diferencias
entre las comunidades de huéspedes próximos filogenéticamente demostrando que, en la
mayoría de los casos, la especificidad de los hongos ECM es baja (MOLINA et al., 1992). La
presencia de taxones micorrícicos poco específicos capaces de asociarse con un amplio rango
de especies vegetales posibilita la existencia de redes miceliares de conexión interespecífica
(ROY et al., 2008), que permitirían una posible transferencia de agua, nutrientes y carbono
entre individuos (SIMARD et al., 1997; HE et al., 2006). La importancia ecológica de estos
intercambios es aún desconocida, pero podría suponer un mecanismo crítico para el
funcionamiento y regeneración de la comunidad vegetal (DAHLBERG, 2001).
Los resultados obtenidos muestran que el árbol huésped, a través de las propiedades de
su hojarasca, puede modificar las condiciones del medio e influir indirectamente en el
ensamblaje de especies ECM (CONN & DIGHTON, 2000; GARCIA et al., 2008). Los
árboles son capaces de alterar los ciclos biogeoquímicos y modificar las propiedades de los
horizontes edáficos de un modo específico mediado entre otros por las propiedades de la
hojarasca (BOETTCHER & KALISZ, 1990). La interacción entre las especies huésped de
árboles y las condiciones abióticas condicionan un gradiente de acidez y empobrecimiento de
nutrientes a lo largo del cual varían los taxones fúngicos dominantes (APONTE 2008).
La acidez del suelo, muy relacionada con los niveles de calcio contenidos en el suelo y
la hojarasca, se mostró como uno de los factores más influyentes en la composición de la
comunidad ectomicorrícica. Otros estudios han constatado que los cambios en los valores de
pH pueden alterar el crecimiento, la densidad del micelio y el potencial de colonización
(ERLAND & SODERSTROM, 1990) y las capacidades enzimáticas (COURTY et al., 2005),
afectando a la capacidad competitiva de las especies micorrícicas y dando lugar a cambios en
su abundancia relativa en la comunidad (MCAFEE & FORTIN, 1987).
Estudios previos han mostrado que la hojarasca y los suelos enriquecidos limitan la
colonización de ECM, afectan a la longitud de las hifas y alteran la composición de la
comunidad (CONN & DIGHTON, 2000; TOLJANDER et al., 2006). La micorrización es una
adaptación a situaciones con limitación de nutrientes fundamentada en un intercambio trófico
bidireccional. En suelos enriquecidos, donde la planta disfruta de una mayor disponibilidad de
recursos, la transferencia de carbohidratos al hongo simbionte podría verse limitada
(WALLENDA & KOTTKE, 1998), afectando al crecimiento y mantenimiento del micelio y a
la producción de frutos. Especies con capacidades saprófitas como las tomenteloides
(KÕLJALG, 1996) son capaces de obtener carbono de la materia orgánica en descomposición
disminuyendo su dependencia del aporte de carbohidratos del fitobionte. En ambientes
enriquecidos, estas especies se encontrarían en ventaja competitiva aumentando su
abundancia relativa (KOIDE et al., 2005) y generando un cambio en la composición de la
comunidad.
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6. Conclusiones
1. La comunidad de hongos ECM presente en las raíces de Q. suber y Q. canariensis en
un bosque mediterráneo está formada por una alta diversidad de especies y está estructurada
en pocos taxones abundantes y gran cantidad de especies raras.
2. Russulaceae y Telephoraceae fueron los grupos con mayor abundancia, ocurrencia y
diversidad taxonómica. La importante proporción de especies resupinadas encontradas en la
comunidad de hongos micorrícicos pone de manifiesto la relevancia del empleo de técnicas
moleculares en estos estudios y la necesidad de ampliar el conocimiento acerca de este grupo
fúngico.
3. La baja especificidad de los taxones micorrícicos observada en nuestro estudio podría
indicar la existencia de una red miceliar de conexión entre especies vegetales que favorecería
la transferencia de recursos entre individuos.
4. La especie de árbol huésped influye de forma indirecta sobre la composición de la
comunidad de ECM a través de su capacidad para modificar las condiciones abióticas del
medio. Como resultado de la interacción entre el árbol huésped y las características abióticas
se genera una heterogeneidad ambiental que contribuye a mantener la elevada riqueza
taxonómica de la comunidad de hongos ECM.
7. Agradecimientos
Agradecemos a la Consejería de Medio Ambiente y a Marco Antonio Tena, Director del
Parque Natural de Los Alcornocales por los medios y el apoyo prestado para llevar a cabo
este trabajo así como a Ana Pozuelo, Maria Navarro, Eduardo Gutiérrez, Sophie Manzi y
Juliet Rochet por su colaboración en los trabajos de campo y laboratorio. Este estudio esta
financiado por una beca FPI-MEC otorgada a C.A., los proyectos de Investigación Nacional
Dinamed (CGL2005-5830-C03-019) e Interbos (CGL2008-4503-C03-01) concedidos por el
Ministerio de Educación y Ciencia y los fondos Europeos FEDER. Esta investigación forma
parte de la red Globimed de cambio global y biodiversidad en los ecosistemas mediterráneos
(www.globimed.net).
8. Bibliografía
ANÓNIMO; 2005. PORN / PRUG / PDS Parque Natural Los Alcornocales. Junta de
Andalucía, Consejería de Medio Ambiente. Sevilla, España
APONTE, C.; 2008. Diversidad y estructura de la comunidad de hongos micorrícicos en un
bosque de quercíneas Mediterráneo. Diploma de Estudios Avanzados. Dpto. Biología Vegetal
y Ecología. Universidad de Sevilla
AVIS, P. G.; MUELLER, G. M.; LUSSENHOP, J.; 2008. Ectomycorrhizal fungal
communities in two North American oak forests respond to nitrogen addition. New Phytol.
179 (2):472-483
BAUM, C.; MAKESCHIN, F.; 2000. Effects of nitrogen and phosphorus fertilization on
mycorrhizal formation of two poplar clones (Populus trichocarpa and P. tremula x
tremuloides). J. Plant Nutr. Soil Sc. 163 (5):491-497
10/12
BLAXTER, M.; MANN, J.; CHAPMAN, T.; THOMAS, F.; WHITTON, C.; FLOYD, R.;
ABEBE, E.; 2005. Defining operational taxonomic units using DNA barcode data. Phil.
Trans. R. Soc. B 360 (1462):1935-1943
BOETTCHER, S. E.; KALISZ, P. J.; 1990. Single-Tree Influence on Soil Properties in the
Mountains of Eastern Kentucky. Ecology 71 (4):1365-1372
BRAY, R. H.; KURTZ L. T.; 1945. Determination of total organic and available form of
phosphorus in soil. Soil Sci. 59: 39-45.
CONN, C.; DIGHTON, J.; 2000. Litter quality influences on decomposition, ectomycorrhizal
community structure and mycorrhizal root surface acid phosphatase activity. Soil Biol.
Biochem. 32 (4):489-496
COURTY, P.-E.; PRITSCH, K.; SCHLOTER, M.; HARTMANN, A.; GARBAYE, J.; 2005.
Activity profiling of ectomycorrhiza communities in two forest soils using multiple enzymatic
tests. New Phytol. 167 (1):309-319
DAHLBERG, A.; 2001. Community ecology of ectomycorrhizal fungi: an advancing
interdisciplinary field. New Phytol. 150 (3):555-562
ERLAND, S.; SODERSTROM, B.; 1990. Effects of liming on ectomycorrhizal fungi
infecting Pinus sylvestris L. I. Mycorrhizal infection in limed humus in the laboratory and
isolation of fungi from mycorrhizal roots. New Phytol. 115 (4):675-682
GARCÍA, L. V.; APONTE, C.; POZUELOS, A.; FLORIDO, M.; GUTIÉRREZ, E.; PÉREZRAMOS, I.; MARAÑÓN, T.; 2008. Relación entre la composición de las hojas, desfronde,
hojarasca y suelo en un bosque mixto de Quercus suber L. y Q. canariensis Willd. Cuadernos
de la SECF 25:201-207
GARDES, M.; BRUNS, T. D.; 1996. Community structure of ectomycorrhizal fungi in a
Pinus muricata forest: above- and below-ground views. Can. J. Bot. 74:1572-1583
GARDES, M.; BRUNS, T. D.; 1993. ITS primers with enhanced specificity for
basidiomycetes--application to the identification of mycorrhizae and rusts. Mol. Ecol. 2:113118
HE, X. H.; BLEDSOE, C. S.; ZASOSKI, R. J.; SOUTHWORTH, D.; HORWATH, W. R.;
2006. Rapid nitrogen transfer from ectomycorrhizal pines to adjacent ectomycorrhizal and
arbuscular mycorrhizal plants in a California oak woodland. New Phytol. 170 (1):143-151
KOIDE, R. T.; XU, B.; SHARDA, J.; LEKBERG, Y.; OSTIGUY, N.; 2005. Evidence of
species interactions within an ectomycorrhizal fungal community. New Phytol. 165 (1):305316
KÕLJALG, U.; 1996. Tomentella (Basidiomycota) and related genera in temperate Eurasia.
Synopsis Fungoforum 9, Oslo, Fungiflora
MAGURRAN, A. E.; 1988. Ecological diversity and its measurment. University Press.
Cambridge, R.U.
11/12
MOLINA, R.; MASSICOTTE, H.; TRAPPE, J. M.; 1992. Specificity phenomena in
mycorrhizal symbioses: Community-ecological consequences and practical implications. En:
A. M.F.(eds.): Mycorrhizal functioning: an integrative plant-fungal process. 357-423.
Chapman; Hall. New York
NANTEL, P.; NEUMANN, P.; 1992. Ecology of ectomycorrhizal-basidiomycete
communities on a local vegetation gradient. Ecology 73 (1):33-117
NEI, M.; KUMAR, S.; 2000. Molecular evolution and phylogenetics. Oxford University
Press. 333. New York
OJEDA, F.; MARAÑÓN, T.; ARROYO, J.; 2000. Plant diversity patterns in the Aljibe
Mountains (S. Spain): a comprehensive account. Biodivers. Conserv. 9 (9):1323-1343
PÉREZ-MORENO, J.; READ, D. J.; 2001. Nutrient transfer from soil nematodes to plants: a
direct pathway provided by the mycorrhizal mycelial network. Plant Cell Environ. 24
(11):1219-1226
PÉREZ-RAMOS, I. M.; 2007. Factores que condicionan la regeneración natural de especies
leñosas en un bosque mediterráneo del sur de la Península Ibérica. Tesis Doctoral.
Universidad de Sevilla
PERRY, D. A.; MARGOLIS, H.; CHOQUETTE, C.; MOLINA, R.; TRAPPE, J. M.; 1989.
Ectomycorrhizal mediation of competition between coniferous tree species. New Phytol. 112
(4):501-511
QUILCHANO, C.; MARAÑÓN, T.; PÉREZ-RAMOS, I. M.; NOEJOVICH, L.;
VALLADARES, F.; ZAVALA, M. A.; 2007. Patterns and ecological consequences of abiotic
heterogeneity in a managed cork oak forest of Southern Spain. Ecol. Res.
RICHARD, F.; MILLOT, S.; GARDES, M. & SELOSSE, M. A.; 2005. Diversity and
specificity of ectomycorrhizal fungi retrieved from an old-growth Mediterranean forest
dominated by Quercus ilex. New Phytol. 166 (3):1011-1023
RICHARD, F.; MOREAU, P. A.; SELOSSE, M. A.; GARDES, M.; 2004. Diversity and
fruiting patterns of ectomycorrhizal and saprobic fungi in an old-growth Mediterranean forest
dominated by Quercus ilex L. Can. J. Bot.-Rev. Can. Bot. 82 (12):1711-1729
ROY, M.; DUBOIS, M.-P.; PROFFIT, M.; VINCENOT, L.; DESMARAIS, E.; SELOSSE,
M.-A.; 2008. Evidence from population genetics that the ectomycorrhizal basidiomycete
Laccaria amethystina is an actual multihost symbiont. Mol. Ecol. 17 (12):2825-2838
SIMARD, S.; PERRY, D.; JONES, M.; MYROLD, D.; DURALL, D.; MOLINA, R.; 1997.
Net transfer of carbon between ectomycorrhizal tree species in the field Nature 388
(6642):579-582
SMITH, S. E.; READ, D. J.; 1997. Mycorrhizal Symbiosis Academic Press. 605. San Diego
SPARKS, D. L.; 1996. Methods of Soil Analysis. Part 3. Chemical Methods Soil Science
Society of America and American Society of Agronomy. Madison, Wisconsin, USA
12/12
TAYLOR, A. F. S.; ALEXANDER, I. A. N.; 2005. The ectomycorrhizal symbiosis: life in the
real world. Mycologist 19 (3):102-112
TER BRAAK, C. J. F.; SMILAUER, P.; 2002. CANOCO Reference manual and CanoDraw
for Windows User´s guide: Software for Canonical Community Ordination (version 4.5).
Microcomputer Power. 500. Ithaca, NY, USA
TOLJANDER, J. F.; EBERHARDT, U.; TOLJANDER, Y. K.; PAUL, L. R.; TAYLOR, A. F.
S.; 2006. Species composition of an ectomycorrhizal fungal community along a local nutrient
gradient in a boreal forest. New Phytol. 170 (4):873-884
VALENTINE, L.; FIEDLER, T.; HART, A.; PETERSEN, C.; BERNINGHAUSEN, H.;
SOUTHWORTH, D.; 2004. Diversity of ectomycorrhizas associated with Quercus garryana
in southern Oregon. Can. J. Bot. 82 (1):123-135
VAN SCHOLL, L.; SMITS, M. M.; HOFFLAND, E.; 2006. Ectomycorrhizal weathering of
the soil minerals muscovite and hornblende. New Phytol. 171 (4):805-814
WALLENDA, T.; KOTTKE, I.; 1998. Nitrogen deposition and ectomycorrhizas. New Phytol.
139 (1):161-168
WHITE, T. J.; BRUNS, T.; LEE, S.; TAYLOR., J. W.; 1990. Amplification and direct
sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. En: M. A. Innis, D. H.
Gelfand, J. J. Sninsky and T. J. W. A.(eds.): PCR Protocols: A Guide to Methods and
Applications. 315-322. cademic Press, Inc. New York