UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO INSTITUTO DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍA ÁREA ACADÉMICA DE QUÍMICA Desinfección de agua por ionización TESIS QUE PARA OBTENER GRADO DE DOCTOR EN CIENCIAS AMBIENTALES PRESENTA: MARIANA VIRGINIA POPA Director: Dra. Rosa Icela Beltrán Hernández Co-director: Dra. Gabriela A. Vázquez Rodríguez Pachuca de Soto, Hidalgo 2015 1 UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO INSTITUTO DE CIENCIAS BÁSICAS E INGENIERÍA DIRECCIÓN M. en A. JULIO CESAR LEINES MEDECIGO DIRECTOR DE CONTROL ESCOLAR PRESENTE Por este conducto le comunico que el jurado asignado al pasante de Doctorado en Ciencias Ambientales Mariana Virginia Popa quien presenta el trabajo de titulación “Desinfección de agua por ionización” después de revisar el trabajo en reunión de sinodales ha decidido autorizar la impresión del mismo, hechas las correcciones que fueron acordadas. Se ha realizado la revalidación de estudios de doctorado de la Universidad Politécnica de Madrid aceptándose la tesis misma para titulación en esta universidad y asignaturas como servicio social. A continuación anotan las firmas de conformidad de los integrantes del jurado: PRESIDENTE: Dra. Elena María Otazo Sanchez SECRETARIO: Dra. Gabriela A. Vázquez Rodríguez VOCAL: Dra. Rosa Icela Beltrán Hernández SUPLENTE: Dr. Francisco Prieto Garcia A T EN T A M E N T E “AMOR, ORDEN Y PROGRESO” Pachuca Hidalgo 2015 director Dr. Orlando Ávila Pozos 2 Indice 1. Antecedentes p. 2 1.1 Referencia p. 2 1.2 Elección del tema p. 3 2. Generalidades sobre la ionización p. 4 2.1 Antecedentes históricos p. 4 2.2 Sistemas de ionización empleados p. 5 2.3 Resultados conseguidos p. 6 2.4 Problemas medioambientales p. 10 3 Objetivos previos de la investigación p. 11 4 Investigación bibliográfica p. 13 4.1 Centros de datos consultados p. 13 4.2 Ionización de metales p. 13 4.2.1 Eficiencia p. 13 4.2.2 Factores medio ambientales que influyen en la desinfección p. 21 4.3 Costo p. 23 4.4 Forma de actuación de los metales sobre los microorganismos p. 23 4.5 Estado en que pueden actuar los metales p. 29 4.6 Forma de desinfección p. 30 4.7 Conclusiones en relación con los objetivos propuestos p. 31 5. Objetivos finales de la investigación p. 33 6. Metodología de la investigación p. 33 6.1. Parámetros ha utilizar p.33 6.2 Técnicas analíticas p. 34 6.3 Instalaciones y plantas de ensayo p. 34 6.4 Descripción de los ensayos p. 35 7 Programación en el tiempo p 35 8. Presentación de resultados p. 36 9. Análisis de resultados p. 55 10 Conclusiones y recomendaciones p. 58 3 11. Bibliografía p. 61 Anejos p. 72 1. Resumen bibliográfico 2. Datos 2.1 Tablas de resultados p. 72 p.76 p. 76 1. ANTECEDENTES 1.1. Referencia He nacido en Bucarest, Rumania en 10 de octubre de 1968. Soy ingeniera química. El título fue ortorgado el 3.07.1992 por el Instituto Politehnic din Bucuresti, Facultatea de Chimie Industriala. He trabajado en la Academia de Arta, Facultatea de Arte Decorative, sectia Ceramica- Sticla Metal, como asistente universitario desde octubre 1992 hasta 1998. Pedí la baja en octubre de 1998 al establecer mi nueva residencia en México. He participado a los cursos de Ecotecnia, organizados por Universitatea din Bucuresti, Facultatea de Biologie, en el período de octubre de 1995 hasta julio de 1996. Me fue concedida una beca TEMPUS, en el período de febrero-julio de 1995, Incorporandome a la Universidad Complutense de Madrid, en el Instituto de Ciencias Ambientales. En 1 de julio de 1996 solicité autorización al Rectorado de la Universidad Politécnica para poder acceder a los estudios de doctorado. Fue aprobada la solicitud el 22 de julio de 1996. Entre tanto el Ministerio de Educación y Cultura ha omologado mí título como Ingeniera química con fecha de 30 de julio de 1997. Desde noviembre del 1996 he comenzado a cursar el doctorado en Universidad Politécnica de Madrid, E.T.S. de I. de Caminos, Canales y Puertos, Departaamento de Ingeniería Civil: Ordenación del Territorio, Urbanismo y Medio Ambiente, siendo dirigida y titulada porla Cátedra de Ingeniería Sanitaria y Ambiental. En el curso 1996/1997 he cursado las siguientes asignaturas de doctorado: Tratamiento físico-químico de residuos líquidos industriales (3 créditos) Residuos tóxicos y peligrosos (6 créditos) Reutilización de las aguas y lodos (3 créditos) Las asignaturas tomadas en 1997/1998 son: Procesos de tratamiento de aguas potables (3 créditos) Desinfección en la reutilización de las aguas y lodos (6 créditos) 4 Bases químicas de diseño de bioreactores (3 créditos) Análisis instrumental y control medio ambiental (6 créditos) Vertedero sanitariamente controlado (3 créditos) En los dos años de cursos he aprobado 33 créditos de cursos y 10 créditos de proyectos Con una beca de la Fundación Agustin de Bethancourt de febrero a julio de 1998, me he incorporado al equipo de investigación, en un convenio con el Canal Isabel II, en el tema”Tratamiento terciario de las aguas residuales urbanas con membranas de miscrofiltración y ultrafiltración”. El trabajo se realiza en la Catedra de Ingeniría Sanitaria. Las pruebas han sido tomadas de E.D.A.R. de Canal Isabel II, Alcala de Henares. 1.2. Elección del tema En los cursos de doctorado y en la lectura de publicaciones, he encontrado fascinante e importante, por ser esencial para la salud humana, abordar el tema de desinfección de aguas. Desde los tiempos antiguos se potabilizaba el agua con el fin de eliminar los microorganismos patógenos causantes de enfermedades. Los estudios científicos no existían en aquellos tiempos, se basaban en practicas elementares, utilizando directamente los elementos de la naturaleza; entre cuales los metales eran utilizados como herramienta básicas. Con el tiempo se han desarrollado estudios más aprofundos, con base científica adecuada. En la última década se ha descubierto que el cloro contribuye a la formación en el agua de numerosos compuestos clorados que son peligrosos para la salud. Las altas concentraciones del cloro causan irritación en los ojos, mebranas mucosas y piel, incluso pueden causar corrosión en las tuberías de aguas. Otros desinfectantes como ozono y los rayos ultravioletas, entre otras desventajas, son costosas y no tienen efecto residual. Los últimos, además de eso, necesitan niveles de turbiedad bajos. En este caso considero oportuno realizar mi tema de tesis “Desinfección de aguas por ionización”, utilizando los metales como agentes desinfectantes. He solicitado el Proyecto de Tesis doctoral a la comisión de Doctorado del Departamento de Ordenación del Territorio, Urbanismo y Medioambiente, con el título anteriormente citado, el 3 de noviembre de 1997, teniendo como Director de Tesis al Don Dr. Aurelio F. Hernández Muñoz. El día de 17 de Diciembre de 1997 fue aceptado el Título de Tesis propuesto, y nombrado Director de la misma el Don. Dr. Aurelio Hernández Muñoz. En julio de 1998 he finalizado los 32 creditos citados. 5 He presentado en I Simposium Latinoamericano de Química Cancún, Q. Roo del 22 al 26 de septiembre del 2002, Memoria en extenso-ISSN 1870-249X, yen 3 Simposium de Ingeniería en Materiales, I Simposium de Ingeniería y 70 Aniversario de la Facultad de Ingeniería Química, realizado en la Facultad de Ingeniería Química de la B.UA.P., Puebla, México del 11 al 13 de Marzo de 2009. 2.GENERALIDADES SOBRE LA IONIZACIÓN 2.1. Antecedentes históricos Los metales eran utilizados como desinfectantes, desde hace milenios, sin conocer bien sus acciones bacteriostáticas, virucidas, y su mecanismo de reacción. En los tiempos de Babilonia se utilizaba la plata para confeccionar recipientes donde se transportaba agua para el rey persa, [152]. Igual en Macedonia, en el tiempo del rey Alejandro el Magno, se transportaba agua en recipientes de plata y, los soldados se cubrían sus heridas con láminas de plata para evitar infecciones, [19]. También los romanos utilizaban vasos de cobre para tomar y almacenar agua. La desinfección de las aguas, portadores de agentes productores de enfermedades, ha contribuido a mejorar el bienestar del hombre, [67]. En la referencia [67] se menciona que Hipócrates recomendaba la ingestión del agua hervida con el propósito de evitar enfermedades. Los egipcios trataban el agua de bebida por filtración de arena, [67].El mismo autor menciona a Aristotel que cita el uso de un filtro de porcelana sin vidriar para filtrar el agua de bebida. Con el tiempo se han empezado hacerse investigaciones sobre los efectos benéficos de los metales, de forma que Nageli, [101], en 1893 ha definido el efecto “oligodinámico de los metales” utilizando cantidades muy pequeñas de plata y de sus sales, [19]. Pero quien ha descrito las propiedades oligodinámicas de la plata ha sido su precursor Raulin, [118], en 1869. Con frecuencia los metales se utilizaban más en medicina, bajo diversas formas y compuestos en cada específico. Por ejemplo, el cloruro de zinc se utilizaba para la desinfección de lavados de servicio de mesa de cristal, porcelana y metal, [40]. El sulfato de cobre se utilizaba para ropas de cama, telas, objetos manchados, pilas de cocina, tuberías de agua más o menos sucias, vasos de noche y pozos negros, [40]. Y por último el cloruro de mercurio se utilizaba en la composición de lechada de cal, [40]. 6 Actualmente se utiliza célula generadora de plata en la misión Apolo para esterilizar el agua potable. Desde el punto de vista de la garantía higiénico sanitaria, el agua potable debe satisfacer cuatro exigencias mínimas, [67]. Ausencia de microorganismos patógenos Ausencia de sustancias tóxicas radioactivas en concentraciones nocivas Ausencia de sabores y olores desagradables Ausencia de color y turbidez apreciable El cobre es conocido como algicida, pero también en concentraciones muy reducidas el mercurio y la plata. El sulfato de cobre se utiliza como fungicida para el control de las algas, [46] y otros organismos que contienen clorofila, [13, 159]. El permanganato de potasio tiene propiedades bactericidas y algicidas, actuando sobre todo tipo de algas, mientras el sulfato de cobre lo hace solamente sobre las planctónicas, [67]. La plata en general tiene una acción bactericida/bacteriostática, [152]. Cobre, latón (Zn) y estaño son capaces de destruir coliformes, staphylocococ y bacilo tifoidea en agua, [152]. Los compuestos orgánicos de plata se utilizaban como antisépticos. La combinación de nitrato de plata, tiocianato de amonio y propilen glicol se utilizan en hospitales para desinfección de suelos y paredes, y como bactericidas en filtros de aire, [59]. La plata coloidal se utiliza como bacteriostático en tratamiento de los ojos, vía respiratoria y aparato genital-urinario, [152]. Hay disposiciones oficiales que exigen el tratamiento de los ojos de recién nacidos con unas gotas de solución de nitrato de plata al 1% para prevenir la oftalmía de neonatorum, infección gonorreica de los ojos, [94]. Por primera vez en Alemania, en 1928, Krause, [152], hizo la primera instalación industrial para tratar el agua, que consistía en impregnar un material filtrante con plata metálica, a ese material con arena, se le llamaba Katadyn. Para aumentar su actividad a veces se añadió otro metal como paladium, [152]. Se han hecho investigaciones para conocer los poderes desinfectantes y el mecanismo de acción para su ulterior utilización en diversas actividades. Pero, recientemente se ve más aguda la necesidad como una alternativa a la cloración por los siguientes motivos: la formación de trihalometanos y en general de compuestos cancerígenos, [127] posible crecimiento bacteriano en las tuberías las concentraciones altas de cloro requeridas en algunas circunstancias olor e irritación de los ojos en las piscinas por las concentraciones altas de cloro 2.2 Sistemas de ionización empleados 7 Por el proceso de ionización se entiende la pérdida de un electrón en un átomo transformándolo en ion positivo. El sistema de purificación del agua utilizando resina de cambio catiónica con altas concentraciones de plata, se ha utilizado en aviones, remolques, y zonas de acampada, [77]. La plata se ioniza fácilmente por electrólisis, por lo tanto tiene aplicaciones en la desinfección del agua, [9]. En la misma referencia se afirma que la ionización de la plata está directamente relacionada con la cantidad de corriente aplicada. Las concentraciones frecuentemente utilizadas en el tratamiento de agua se encuentran entre los 0,025-0,075 ppm, [9]. La plata además de su aplicación por vía electrolítica se puede utilizar como solución de sus sales o por desorción de lechos filtrantes de arena revestida de plata o en carbono, tejidos u otros materiales revestidos de plata, que liberan el metal. Según [6 con referencia a [8] en 1932 se ha publicado en Inglaterra el primer trabajo sobre la aplicación de plata en desinfección del agua. Otros trabajos sobre el mismo tema se publicaron en Estados Unidos entre 1934 y 1936. Los norteamericanos hicieron experimentos con arena revestida de plata, y los rusos y polacos con “filtros que contenían plata metálica, con soluciones de sal de plata y electrocatinización”, procedimiento mediante cual se obtenía plata finamente dividida. Conforme el autor [6] con referencia a [120], el producto suizo, el Hyla 603 K, que contenía un material filtrante donante de plata, se caracterizaba como bactericida y no quisticida. Chambers, [26], conforme lo mencionado en bibliografía [6] afirma que el poder desinfectante lo tienen los iones y no la naturaleza física de la plata de la que dichos iones derivan. En la bibliografía [152], en contra de lo anterior, se alega que la plata metálica tiene menos efecto sobre los microorganismos que sus sales para formar complejos intermediarios, menos activos de tipo proteínaplata. El proceso donde se incluyen dos electrodos de plata se llama “Electro Katadyn”, [152]. Se pueden utilizar electrodos de otros metales con plata, y añadirse un poco de sales para mejorar el efecto. Ese último procedimiento se ha utilizado para tratamiento de aguas de piscinas. Su eficacia no ha sido totalmente demostrada, se relata en [152]. 2.3. Resultados conseguidos Se considera que el pH, muy ácido o muy básico, contribuye a la destrucción de los microorganismos, [77]. Entre otros factores que influyen el desarrollo delas 8 bacterias y la actividad del desinfectante mencionamos la temperatura y el tiempo de contacto, [77]. Christian, [36], menciona que no hay crecimiento bacteriano alrededor del metal en un medio de cultivo de bacteria, incluso después de quitar el metal esta zona se queda estéril por el metal disuelto. El mismo autor afirma que el cobre y sus aleaciones tienen efecto sobre virus y bacterias, mientras el hierro en una medida menor, señalan que el plomo y niquel no tienen efecto. Otro autor, [152], investigando con distintos metales llega a la conclusión de que el cobre, niquel zinc y mercurio tienen una baja actividad. En presencia de las sales de metales mejora la actividad de la plata, [152], investigando con distintos metales llega ala conclusión de que el cobre, latón y el estaño destruyen los coliformes, stafilococcus y bacili tiphoide en agua, pero cobalto, niquel, zinc y mercurio tienen una baja actividad. En presencia de las sales de metales mejora la actividad de la plata, [152]. José Catalán Lafuente, [77], afirma que 0,5 a 2 mg/l de KMnO 4 producen el mismo efecto que dosis de 0,025 a 0,1 mg/l de sulfato de cobre. E. Coli muere por la acción de 0,4 mg de plata por litro de agua, lo que corresponde a 2,4 10 17 iones de plata, comenta el autor en [19]. Newton y Jonson, [103], después de hacer ensayos con Entamoeba histolitica, llegaron a la conclusión de que la plata es un desinfectante que necesita mucho tiempo para hacer efecto, y que los cloruros, el amoniaco y otras materias orgánicas interferían con la eficacia del tratamiento, [6,134]. Shapiro y Hale indican que la concentración utilizada es de un orden de magnitud bajo, 20 ppm Ag, [134], aunque depende de variaciones de concentración y períodos de exposición, [6]. Chang y Baxter demostraron que una concentración de 97 ppm de iones de plata tenía la eficiencia quisticida de aproximadamente 2/3 de 10 ppm de iodo gas, [113]. En [4] se menciona el efecto bactericida de los sales de plata a una concentración de 1 ppm. El efecto oligodinámico sólo se da en diluciones fuertes, un metal de 1-2 mg en un litro de agua como también sales de metales de una dilución de 1:1.000.000, [36]. Una gran aportación a la desinfección con plata lo ha sido la de G. Sykes en 1965 con el producto Katadyn anteriormente mencionado, demostrando que los E. Coli son eliminados en dos horas con concentraciones de plata mayores de 0,5 ppm, y se necesitan 24 h para dosis de plata inferiores a 0,006 ppm, [152]. Con 20 g de plata y 180 g de arena, el Bacillus mesentericus vive más de cinco semanas, [152]. Generalmente las sales orgánicas de plata se utilizaban como antisépticos tal como nitratos, citratos, lactatos y picratos que son solubles, el clorate insoluble y 9 la proteína que es coloidal, [152]. Se constata que las sales solubles son más eficaces hacía los gram-negativos que gram-positivos, [152]. Entre compuestos anteriormente citados se prefiere el citrato de plata en la dilución de 1:600 para el Staph. Aureus y 1:4500 para la Salmonella typhi, como dosis letal en 10 min a 37 0C, [145]. Además se utiliza directamente en heridas abiertas porque no es irritante, [152]. Chang T.W. y Weinstein L., [28], admiten que 40 μM de AgNO 3 tiene una eficiencia de 99% después de 15 min. sobre HSV tipo 2. Cliver [21] ha concluido que las células de Bacillus cereus son susceptibles a plata, en cambio las esporas son totalmente resistentes, y que la resistencia de Flavobacterium sp(IIb) a la plata decrece en tiempo. Se dice que no hay grandes diferencias en efecto bactericida entre las sales de plata (acetato, nitrato y sulfato), plata producida por vía electrolítica y propionato de plata [21, 162, 103]. De acuerdo con Sprowls, [145, 152], CuCl2 es letal en 10 min. a una dilución de 1:300 para Salm. typi y a una dilución de 1:7 para Staphylococcus aureus. Comparando con lo anterior el sulfato de cobre para los mismos organismos necesita las diluciones de 1:49 y 1:5, en cambio para el nitrato 1:50 y 1:6. El mismo autor declara que la adición de CuCl2 equivalente a 10 mg/l de iones de cobre en medio de peptona o caseína no reduce las propiedades nutritivas del medio, pero calentando esas soluciones en autoclavas tiene un poder inhibitorio grande en relación con los Staphylococcus aureus. Proporciones de 1 a10.000 de sulfato de cobre inhiben muchas bacterias y mohos. Autores han analizado los efectos sobre Cladosporium y Penicillium con soluciones conteniendo 6-9% de CuSO4, siendo fungicida, bacteriostático y virucida, [152]. De acuerdo con el informe, [146] Sykes, [152], relata que las sales de hierro son letales para Salm. Thypi en 10 min. A concentraciones de 1:200 a 1:500, pero para Staph. Aureus el equivalente a 1:10 hasta 1:70. Sales de aluminium, cobalto, plomo, nikel y zinc no son efectivas a concentraciones 12% y aveces 30%. El mismo autor expone conforme al informe [53], que la mezcla de cloruro férrico y ferroso tienen efecto bactericida sobre los organismos anteriormente citados, siendo mejores los resultados que con las dos sales separadamente. Para los procesos de oxidación-reducción el iodo con mezcla equimolecular de sulfato de magnesio y hierro se comporta bien, según se justifica en la bibliografía [152] conforme a la referencia [131]. Varios autores admiten distintas concentraciones de iones de cobre para inhibir diversos organismos. Entre tales mencionamos a W.B. Hugo, [61], que demuestra una concentración de 10-3 M Cu2+ inhibitoria para levaduras y fungí (Penicillium sp., Aspergillus niger, etc), y menos de 10 -6 M Cu2+ para bacterias. El cobalto (II), niquel (II) y cobre (II) en concentraciones de 10 -6-10-5 Minhibencompletamente el crecimiento de la Chlorella vulgaris en medio inorgánico sin compuestos de 10 quelatos metálicos, referencia [61] conforme a la [33]. Hugo, [61], expone conforme a lo relatado en la bibliografía [85] que 10 -7 M Cu2+ es toxico para E. Coli pero las células pueden ser protejidas por Mg 2+ y fosfatos acumulados. En el caso de que las células hubieran sido congeladas y almacenadas no quedan protejidas contra Cu2+ de los dos compuestos anteriormente citados. Pero también señalaron que los iones de cobre, contenidos en el agua destilada del laboratorio, pueden ser tóxicos y dar un resultado falso, teniendo influencia en el efecto de congelamiento. Rosenberg B. [128], conforme relata W.B. Hugo, [61], haciendo estudios con electrodos de platinio, rodio y rutelio, añadiendo sales de estos en la solución ha llegado la conclusión de que esos inhiben el crecimiento de E. Coli. En la bibliografía [33] se especifica una concentración de 10 -6 M Cu2+ para la inactivación de Chlorella vulgaris, en tiempo que E. Coli necesita 10 -7 M Cu2+, [85]. Woiwod A.J., [159], en sus experimentos demuestra que para el mismo microorganismo, Staphylococcus aureus, el cobre en la misma cantidad pero según el compuesto necesita diversos tiempos de inactivación, de manera que para el cobre coloidal se necesita 48 h en medio de caseína y 7 días para 36 μg/ml Cu. El sulfo coloidal inhibe con 2,00 μg/l en 24 h. El sulfato de cobre destruye las algas en una concentración de 1 ppm si el agua no tiene un exceso de materia orgánica [5]. El autor afirma que en una dilución de 1: 400.000 el sulfato de cobre destruye los bacilos tifoidos en 24 h. En presencia de peptona CuCl2 tiene efecto sobre los Staphylococcus aureus en cantidades mayores de 1000 mg/l, [159]. El sulfato de cobre coloidal inhibe los Bacillos subtillis, B. polymyxa, B. cereus, B. pumilus, Brucella abortus, Br. Melitensis, Br. Bonchisepticus, Vibrio comma, Pseudomonas aeruginosa, Aerobacter aerogenes, Eschericha coli, Salmonella typhi, Shigella paradisenteriae, Proteus vulgaris, Pr. mirabilis, [159]. La concentración de Cu2+ en una solución neutra de sulfato de cobre en agua destilada es limitada de la solubilidad del producto L Cu(OH)2= 10-19, [61], de 10 -5 M y Ecu=190 mV. El magnesio reduce el efecto del Cd, Co, Ni y Zn hacia E.coli, Aspergillus niger y otros microorganismos, se relata en [152] conforme a la bibliografía [2]. Algunos autores declaran de que no es una certeza que los cambios genéticos y la fragmentación de ADN son datos de radicales hidroxilo liberados en la interacción del ion de cobre con agua oxigenada, [44]. La actividad catalítica del Cu2+ al lado de los compuestos tiol (cysteamina, cysteina y glutatión) explica como los metales producen daños en ADN y especias cromosómicas. Es sabido que solos, los iones de cobre ylos compuestos tiol no atacan las células, [44 ]. Los metales más bactericidas son las que forman complejos más estables con los grupos funcionales SH, en particular el mercurio y la plata, eficientes en concentraciones de ppm, [86]. 11 La desactivación de las enzimas, o la misma destrucción se hace complejando la función SH y así bloqueándola, el ciclo Krebs finalmente es roto y se traduce en la muerte de la bacteria, [86]. Las bacterias se protejen con sus membranas fosfolipídicas de productos químicos exteriores, por eso los agentes bactericidas son eficaces sólo cuando pasan las membranas celulares atacando después los centros vitales, [86]. Generalmente son atacadas las enzimas que intervienen en el ciclo respiratorio de las bacterias como deshidrocenación succinica, los grupos SH que son los más sensibles. El centro vital para el virus es en ADN. Las moléculas son más solubles en las membranas que los iones, por lo cual mejores bactericidas, [86]. Conforme a [86] lacinetica de acción se puede escribir de modo: lnN/N0= ΛxDXt N- número de bacterias vivas N0- número de bacterias iniciales t – tiempo D y Λ expresan la dosis lletal y el coeficiente letal específico para cada desinfectante, de ese modo el poder desinfectante se puede comparar. Se tiende a utilizar agua oxigenada producida por vía electrolítica en lugar de productos químicos, [86] 2.4 Problemas medio ambientales Para la selección de metales utilizados como desinfectante hay que tener en cuenta las repercursiones que esas le pueden tener con respeto a nuestro entorno y a los problemas de salud. En este sentido se han hecho investigaciones para determinar los efectos perjudiciados y los límites permisibles para cada caso en concreto. El límite de exposición de mercurio y sus compuestos es de 0,05 mg/m 3, [126]. Las principales molestias causadas por intoxicación con mercurio son descritas en la referencia [83]. Los compuestosalquílicos mercuriales como el cloruro de metilmercurio, cianuro de metilmercurio, hidróxido de metilmercurio, pentaclorofenato de metilmercurio, sulfonato demetilmercurio, tolueno. Cloruro de etilmercurio, tolueno son más tóxicos que el cloruro de mercúrico, y el límite de exposición es de 0,1 mg/m3, [126]. Los compuestos orgánicos (mercurochromo, metaphen, merthiolate) en los que una de las valencias del mercurio está combinado por covalencia, se han utilizado como antisépticos relativamente no irritantes y asimismo como conservantes de sueros y vacunos, 12 [31, 13, 158, 90]. Pero elmetilmercurio y el dimetilmercurio son compuestos organomercúricos muy tóxicos, [114]. Las sales de cloruro mercúrico son tóxicas en dosis de 0,05 g y mortales alrededor de 0,15 g, [17]. El mercurio en aguas debe ser inferior a 1 μg/l. En aguas contaminadas se han llegado a medir concentraciones superiores de hasta 0,4 mg/l, [114].El permanganato de potasio no produce sabores ni olores en las aguas, siendo degradado y eliminado del agua antes de su distribución, pero debido a su color, debe utilizarse en el pretratamiento. Cuando se utiliza con cloro debe hacerse antes de poner cloro para evitar la formación de clorofenoles, [77]. Los polvos de hierro, vapores de óxido de hierro, sales y vapores provocan conjuntivitis, corroditis y retinitis, [126]. El cloruro férico es muy ácido e irritante. La dosis de hierro ingerida con la dieta es de 10-20 mg/día. El hierro plasmático está ligado casi el 100% en proteínas, [126]. La sales solubles de hierro en cantidades grandes tienen efecto irritante para mucosa del aparato digestivo, [126]. La inhalación de sprays de sulfato de cobre utilizados en el tratamiento de vides puede ocasionar lesiones pulmonares, y el sulfato de cobre puede producir methamoglobinemia y hemólisis con graves alteraciones renales y hepáticos, [74]. En 1875 Galippe, [119], ha demostrado del modo más claro que el envenenamiento criminal por las sales de cobre es casi imposible. Se ha demostrado que no es perjudicial beber 1:400.000 partes de sulfato de cobre y agua un período de tiempo corto, [5]. El consumo de 400 μg/l de sulfato de cobre provoca a niveles toxicológicos cambios patológicos en hígado y riñones, [66]. La dosis mínima donde se observa algunos efectos en el hombre es de 40 μg/día, [66]. El cobre da sabor metálico, [73]. Las concentraciones admisibles de cobre son de 120 al 45 μg/l, [23,24]. Se acepta el sulfato de cobre como dos is tóxica entre 10 y 15 g cuando los vómitos no le eliminan de forma importante, [17]. En aguas naturales el cobre no suele superar 1mg/L, sobre todo en asociación con materias orgánicas coloidales, [114]. Una concentración de 3-5 mg/L, sobre todo en asociación con materias orgánicas coloidales, [114]. El nitrato de plata es extremadamente caustico para la piel húmeda y las membranas mucosas, [6]. Las soluciones acuosas del compuesto también son muy irritantes y hay que manipularlas con suma prudencia, [6]. Los “Public Health Service Drinking Water Standards”, [112], limitan la concentración de la plata en las aguas potables a 0,05 ppm. La ingestión de soluciones concentrados de nitrato de plata son causticas, [73]. La restricción de uso de los compuestos de plata se debe principalmente al temor de la argirosis, [81]. La dosis mortal de plata es de 0,6-2g, [17]. Las concentraciones de plata en el agua son mínimas entre 1 y 10 μg/L, [114]. 13 El nivel máximo de contaminantes en aguas de piscina es de 1 mg/LCu y 0,05 mg/L Ag, [70]. La EPA establece una concentración máxima de 1,3 mg/L Cu y 0,05 mg/L de Ag, [166]. 3. OBJETIVOS PREVIOS DE LA INVESTIGACIÓN Desde 1900 se ha utilizado el cloro en desinfección de agua por su gran eficacia a un espectro largo de microorganismos, y además de eso necesita una operación y mantenimiento de bajo coste y una aplicación tecnológica relativamente simple, [117]. Otros oxidantes propuestos tienen las siguientes desventajas: bióxido de cloro produce cloratos y cloritos, ozono producecetonas y aldehídos de bajo peso molecular (ex. formaldehído), bromato en las aguas ricas en bromuros, en adición de AOC (carbóno orgánico asimilable) produce monocloramina que tiene poca capacidad desinfectante, puede formar nitritos, o dicloraminas, [117], que causa una serie de grave problemas. La ozonización, como método alternativo tiene las desventajas de no tener efecto residual y un costo bastante elevado de explotación y mantenimiento de las instalaciones. La utilización de los rayos ultravioletas es restringida porque tiene aplicación a pequeños volúmenes de agua, por la turbiedad del agua, que en la mayoría de los casos es grande; otro motivo importante es que no tiene efecto residual, es difícil de establecer la eficiencia del proceso, y los costes de inversión y explotación son mucho más caros que en los métodos mencionados. Otro motivo, para pensar en otras alternativas, es la resistencia de L. pneumophila por la escasa cantidad de cloro o por la formación de biofilm que va dificultando el control de los desinfectantes convencionales, [82]. Los esfuerzos de los científicos y técnicos de resolver esa problema se concentra en los caminos que definen la combinación de dos o más agentes desinfectantes. Por lo cual considero oportuno desarollar mi tema de tesis doctoral, que tiene como título propuesto “Desinfección del agua por ionización”, buscando un sistema que solucione de manera eficiente los elementos y problemas anteriormente descritos. El método propuesto puede ser viable desde los puntos de vista técnico y económico. Los objetivos perseguidos son: 14 plantear alternativas en la desinfección de las aguas justificar la eficacia de distintos tipos de ionización optimizar un proceso para empleo en las sistemas de distribución de aguas buscar la aplicación de estos sistemas en los puntos más adecuados de las redes establecer garantías del proceso establecer las ventajas e inconvenientes del método de ionización. 4. INVESTIGACIÓN BIBLIOGRÁFICA 4.1 Centros de datos consultados Para consultar revistas novedosas se ha acudido al C.S.I.C., donde he podido ver las revistas existentes. Después de tener aprobada la tema de tésis he acudido al Gabinete de documentación Científica Centro de Documentación Europea (CEYDE) de la Universidad Politécnica de Madrid. Aquí he buscado en centros de datos internacionales los resúmenes de las revistas utilizando palabras clave: silver, cooper, electrolytically, swimming pool, virus y bacteria. He recibido 171 resúmenes, de los que tenían interés tres artículos. Utilizando la biografía de esos artículos más otros encontrados he pedido otros. Estos trabajos analizados quedan reflejados en los capítulos siguientes. Con base en ellos se realiza la investigación bibliográfica, que figura en puntos siguientes de este apartado, ordenados por objetivos previos. 4.2. Ionización de metales 4.21. Eficiencia Richards, [123], dice que 3 μg/ml de plata es necesaria para prevenir la separación de dos células hijas Pseudomonas en tiempo que 1,5 μg/ml de plata inactiva phage T 2. La concentración mínima inhibitoria para P. aeruginosa es de 50 nM/ml accionado hacía membrana celular, [125]. Moroz [97 utiliza 50-200 ppb de plata para destruir Salmonella y E. Coli. Con 0,08 mg/l de plata en más de 24 h elimina L.Pneumophila, [163]. Saccharomyces cerevisiae eliminada con una cantidad de 260 ppb de plata, [125]. 15 James [64] afirma que en concentraciones de 10-20 mg/l de plata metálica disuelta es tóxica para E. Coli y Bacillius typhosus. Berger T.J., [11], en el experimento hecho con una serie de microorganismos utiliza ánodo de plata y una corriente de 75 μA en un tiempo de 4 h para determinar la concentración mínima inhibitoria y la concentración mínima bactericida. Los resultados de los ensayos se presentan en la Tabla N 0 2.1. Tabla N02.1 CMI (μg/ml) Ag-sulfadiazina ATCC 25922 Dental A 21471 CLINICAL ATCC 27853 Ag anódico (μg/ml) CMI CMB 0,5 2,02 1,03 8,25 0,13 0,73 0,08 2,51 0,31 2,51 386 A Dental 0,08 0,12 0,51 8,25 3,13 ATCC 25923 Dental 296 0,3 0,25 0,63 0,26 8,25 10,05 Dental Dental GS-5 GS-7 ATCC 19617 Dental 0,31 1,25 0,63 0,63 0,24 1,03 10,05 10,05 10,05 10,05 0,48 8,25 Organismo Identificación Escherichia coli E. coli Providencia stuartii Proteus mirabilis Pseudomonas aeruginosa Serratia Staphylococcus albus S. aureus S. aureus Streptococcus grupo D S. mitis S. monila S. mutans S. mutans S. pyogenes S. salivarius 3,13 12,50 1,56 1,56 25 50 CMI- concentración mínima inhibitoria CMB- concentración mínima bactericida En el estudio hecho de Maeem Mahmood, [100], se determina la eficiencia de la plata con arena en relación con coliformes fecales y coliformes. Se ha utilizado 800 g de una mezcla de plata: arena de 1:1, 1.2 y 1:3 pasado encima de una rejilla de polietilena de 10, 35 y 60 μm. La plata se introduce de forma iónica como nitrato de plata. Después de estimar el efecto bactericidal se constata que lo más efectivos son las mezclas de 1:1 y 1:2 y dimensiones de arena de 35 μm, [100]. También se observa que no es muy eficiente el sistema para volúmenes mayores de 1800 l, siendo mejor para 500 L, [100]. El sistema se utiliza 7h/día con un débito de 1L/min en total 420 L/día. En este artículo se proponen otras investigaciones que midan el efecto de las siguientes variables: el tiempo de exposición, la concentración de plata, pH, temperatura, algunos constituyentes químicos del agua y la calidad de la arena, [100]. Zeming Liu y colab., [167], han hecho ensayos con el objetivo prioritario de observar que la ionización de cobre-plata es eficaz para matar L. pneumophila en la línea de recirculación de agua en hospitales. Se ve que la Legionella 16 persiste en el sistema donde hay concentraciones de cobre y plata <0,3 y <0,03 ppm ya que no penetra la película de biofilm donde están los organismos, o no tiene eficiencia directa sobre los organismos. Sin embargo, cuando hay concentraciones de >0,4 y >0,04 ppm en un hospital grande con grandes volúmenes de agua, [167]. El actual sistema tiene éxito en eliminar L. pneumophila porque se tratan sólo las líneas de recirculación de agua caliente, [167]. Los electrodos se limpian regularmente cuando se deponen sedimentos dependiendo de la calidad del agua, es muy fácil de detectar el desinfectante residual que no es afectado de altas temperaturas como el cloro y ozono, [167]. Yu Sen, [165], y sus colaboradores declaran que para inactivar L.pneumophila es necesario 0,18 mg/l Ag + para más de 24 h, que no son aceptables conforme a las normativas impuestas de EPA; para más de 5 días se utiliza 0,01-0,02 mg/l Ag+. El cobre inactiva completamente (6log 10) L. pneumophila a una concentración de 0,1 mg/L en un período de 2-5 horas, [165]. El efecto sinérgico se observa para cantidades de 0,04:0,04 mg/L de cobre y plata; en cambio, el efecto aditivo se ve para una concentración de 0,02/0,02 mg/L de cobre y plata. Para la inactivación completa de L. pneumophila en las combinaciones 0,02/0,02; 0,02/0,04; 0,04/0,02 y 0,04/0,04 mg/L requieren 8,2 h, 5,6 h, 3,6 h y 1,6 h, [165]. En el sistema de distribución de aguas no se dan las mismas condiciones, muchos factores pueden intervenir en la eficacidad de los metales, [165]. La hipótesis, en ese estudio, es de que una concentración mínima de cobre mata los microorganismos, y un suplemento no acelera el porcentaje de inactivación y la muerte de los organismos, [165]. En la bibliografía [105, 104] se habla sobre las pequeñas cantidades de cobre necesarias para sensibilizar los staphylococos, pero debe de tenerse en cuenta, así como y los factores ambientales. Jordan y Nassar, [65], admiten que una concentración de 0,2 mg/L de CuCO3 o cobre coloidal inactiva el virus Bronchitis en 2h. En cambio para la Yersina enterocolitica se obtiene una inactivación de 98% en 2 días con 1 mg/L Cu, [138]. En un estudio hecho de Matthew sobre 44 muestras de aguas potables se ha observado que la mezcla de cobre y cloro libre daña 64% de los coliformes, [91]. Para 0,05 mg/L Cu en 2 días a 4 0C se obtiene una eliminación de 90% coliformes, y después de 5 días del 99,5% coliformes, [91]. A los 7 días para esa concentración se ve un descenso, pero a 0,025 mg/l Cu después de 6 días se llega al 90% para que a los 7 días alcanza el 98%, [91]. La temperatura acelera el daño provocado por el cobre, así a 22 0C es necesario un día para alcanzar el 90% utilizando 0,05 mg/l Cu, [91]. A concentraciones de 0,007 mg/L de cobre no se detecta efecto alguno. Como resistente al ataque del cobre, se han registrado Xanthomonas campestus pv. Vesicatoria y Pseudomonas syringae, [22, 10, 147, 3, 161]. Las bacterias resistentes a la plata son Citrobacter freundi, Proteus mirabilis, Enterobacter 17 cloacae y Klebisiella pneumoniae, [57]. En medio de grasa y aceite, el nitrato de plata no reacciona, [36]. El efecto de sulfato de cobre sobre el poliovirus es proporcional a las concentraciones, [156]. El cobre en concentraciones de 0,2 mg/L presente en solución como carbonato de cobre o cobre coloidal inactiva el virus bronchitis en 2 h, [66]. En la referencia [143] se hacen ensayos con diferentes materiales de cátodos y ánodos y a distintos rangos de corrientes para la inhibición de varias bacterias. A 0,4 y 4,0 μA (equivalente a 20 y 200 nA/mm 2) los electrodos de platino y acero inoxidable no tienen efecto sobre las bacterias. El ánodo de plata inhibe los microorganismos de tipo S. aureus, E. coli, P. vulgaris, P. aeruginosa, [143]. Los electrodos de plata y cobre son los únicos que mantienen un bajo potencial de 0,1 a 0,7 mV. El cátodo de oro a 4 μA inhibe S. aureus y E. coli. El ánodo de cobre es eficiente sólo para E. coli a 4,0 μA, [143]. En el ensayo anterior se especifica que para llegar a 104 S. aureus se utiliza una corriente de 40 μA con 79 μg/ml Ag + liberado del ánodo, [143]. Para obtener 108 se utiliza 7,0 μg/ml Ag +. Para E. coli basta con 5,8 μg/ml Ag + a un corriente de 4,0 μA en 4h, [143]. Generalmente en la desinfección de las piscinas se utiliza cloro, pero en cantidades grandes resulta muy molesto para los ojos. Por eso Moyasar y sus colaboradores han realizado los siguientes ensayos con plata, cobre y cloro, [99]. Los iones de cobre y plata son generados electrolíticamente en un porcentaje de 90:10 con las condiciones que debe de tener el agua, pH=7,2 y 7,4 y alcalinidad 80 y 120 mg/L. Se constata que cobre-plata, en combinación con cloro reducen el número de bacterias E. coli y Streptococcus faecalis más rápido que el cloro libre o cobre plata, y además de eso se reduce la cantidad de cloro utilizado desde 0,6-1,0 mg/L a 0,2 mg/L, [99]. En 6 minutos los Escherichia. coli se reducen a 0,12log 10 utilizando 433:43 μg/L (Cu:Ag). Utilizando 0,2 mg/L cloro libre y 460:75 μg/L la E. coli se reduce a 3,5 [log10(NT/N0)] en 0,5 min. En el caso de cloro libre se reduce a 2,8 log 10 en 0,5 min. Al final del experimento tenemos 444:73 μg/L (Cu:Ag) y 0,10 mg/L Cl2 [94]. Para S. faecalis se manifiesta una reducción a 4,0log 10 en 0,5 min con 460:75 μg/L (Cu:Ag) y o,2 mg/L cloro libre, [99]. En eso las concentraciones finales de Cu:Ag es de 44:64 μg/L y 0,09 mg/L cloro libre, [99]. Un año después Moyasar, [98], y sus colaboradores han hecho un estudio con 0,4/0,04 mg/L de cobre-plata producido por vía electrolítica con y sin 0,3 mg/L de cloro libre por un período de 4 semanas en las redes de aguas exteriores e interiores (10 L agua de grifo contaminado con bacterias y flora normal del hombre y de la urina), que son comparables con el agua de piscina, [98]. El número de coliformes totales, Pseudomona aeruginosa y de staphylococos han sido siempre inferiores a las normas de agua potable en las redes tratadas con 18 la mezcla cobre-plata y cloro libre, sólo con cloro libre en concentración de 1,0 mg/l, y sin diferencias entre número de bacterias, [98]. Inoculando Staphilococus de origen natural, después de un tratamiento con una mezcla cobre-plata y cloro libre, se han reducido a 0,03 y 1,5 log 10, [98]. Se recomienda utilizar como indicadores mejor los staphylococos que los coliformes, [98]. Landeen y colab. siembran un cultivo de L.pneumophila de 106 org/ml para ver la eficiencia de mezcla cobre-plata, generados electrolíticamente, y cloro libre, [77]. Con una relación de 90:10 se genera 0,4 mg/L de cobre a la temperatura ambiente en 18 a 25 segundos, el crecimiento de temperatura y el descenso de pH puede hacer crecer el porcentaje de generación de iones, [77]. Con una relación de 90:10 se genera 0,4 mg/L de cobre a la temperatura ambiente en 18 a 25 segundos, el crecimiento de temperatura y el descenso de pH puede hacer crecer el porcentaje de generación de iones, [77]. Con una relación de 90:10 se genera 0,4 mg/L a la temperatura ambiente en 18 a 25 segundos, el crecimiento de temperatura y el descenso de pH puede hacer crecer el porcentaje de generación de iones, [77]. Se afirma que la acumulación de fosfatos buffers interfiere en la actividad del cobre sobre los E. coli, [77]. Metiendo en la solución tiosulfato y tioglicolato de sodio se neutraliza el cloro residual y metales, lo que para la plata a incrementado su efecto con 30%, [77]. El porcentaje de inactivación se calcula con un análisis de regresión linear y se expresa de forma k=-2,3[log10(C0-CT)/T], donde Co y CT son la concentración inicial y final de las bacterias y T representa el tiempo en minutos. Se han calculado como log10(NT/N0) expresados en CFU/ml, que representa la reducción log 10 del número de bacterias en un intervalo de tiempo cualquiera. Para la inactivación de L.pneumophila con iones de cobre y plata tenemos la Tabla 2.2, [77]. Tabla N02.2 Cobre y plata (μg/L) 200 y 20 400 y 40 800 y 80 K 9,83 10-4 2,87 10-3 7.5 10-3 La inactivación de L. pneumophila con cloro y Cu:Ag se puede observar en la Tabla N0 2.3, [77]. Tabla N02.3 Cloro libre (mg/L) 0,2 0,3 Cobre y plata (μg/l) 0 400 y 40 800 y 80 0 400 y 40 800 y 80 K 1,077 1,322 2,01 1,591 2,282 2,639 Después de 1,5 min. Se tiene una reducción de 3,7 log10 para 0,4 mg/L cloro libre y 400:40 μg/L (Cu.Ag). En contraste se obtiene una reducción de 2,6log 10 para cloro libre 0,4 mg/L, y en los últimos 24 h es necesario para 400:40 μg/L 19 (Cu:Ag) a reducir 3log 10, [77]. La temperatura influye en el proceso de desinfección, lo que se puede observar en la Tabla N0 2.4, [77]. La temperatura influye en el proceso de desinfección, lo que se puede observar en la Tabla N0 2.4, [77]. Tabla N0 2.4 Cu:Ag (μg/l) 0 400:40 0 400:40 Temporatura 0C 21-23 39-40 K 1,077 1,322 1,186 2,559 En [79, 78] se hacen experimentos con diversos microorganismos presentes en piscinas frente al ataque con cloro y iones de cobre y plata obtenidos por vía electrolítica. Los resultados se presentan en la Tabla N0 2.5. Tabla N0 2.5 0 Cloro Leg 0,9029 2,1918 Staph. 2,8221 2,9853 Strep 3,7503 6,1914 E .coli 3,2166 7,3756 Pseudo 8,9275 9,7753 *Cloro, Cu:Ag+ 0 = Nivel de cloro libre es 0,2 mg/L para bacteria y 0,3 mg/Lpara MS-2 MS-2 11,2295 13,3655 *=Cu:Ag nivel de 400:40 μg/L En la Tabla N0 2.6 se representa los valores de K para L. pneumophila utilizando distintos valores de cloro libre, [79,78]. Tabla N0 2.6 Cloro Cu:Ag (400:40 μg/L) 0,1 0,3072 0,4859 Cloro libre (mg/L) 0,2 0,3 0,9029 2,2925 2,198 2,6796 0,4 4,9901 5,7860 La K para L.pneumophila a 39,50C y expuesta a 0,2 mg/L cloro libre se puede ver en la Tabla N0 2.7, [79,78]. Tabla N0 2.7 1,5643 Cu:Ag (372:49 μg/L) 1,8321 Cu: Ag (530:67 μg/L) 2,8968 El porcentaje de inactivación para los E. coli se ve en la Tabla N0 2.8, [79,78]. Tabla N0 2.8 20 Cu (391 μg/L) 0,0310 Ag (61,7 μg/L) 0,0195 Cu:Ag (530:67 μg/L) 0,03272 Se puede observar en la Tabla N0 2.9 la inactivación de los Staphylococcus en piscina simulada, [79, 78]. Tabla N0 2.9 Cloro libre (0,3 mg/L) y Cu:Ag (400:40 μg/L) 2,7536 Cloro libre (1,0 mg/L) Cu:Ag (400:40 μg/L) 1,6525 0,0009 La inactivación de estas mezclas se puede explicar por la lesión inicial de la membrana producida por cloro, para que después los iones de cobre y plata entren más fácilmente en las células donde lian los grupos sulfhidril de las proteínas y enzimas celulares, afirma [77], conforme [168]. En la referencia [164] se han realizado para determinar los Coliformes totales, Pseudomonas aeruginosa y Staphilococos aureus, después de la desinfección con una mezcla de cobre y plata, con proporciones raport 400:40 μg/L, producido por vía electrolítica, con o sin cloro libre (0,3 mg/l), ser en un período de 4 semanas en una red de distribución de agua en conductas interiores y exteriores. Los microorganismos anteriormente citados han sido siempre inferiores a las normas de agua potable en las redes tratadas con cobre, plata y cloro o sólo con 1mg/L de cloro, [164]. Después de una contaminación artificial con Staphilococcus sp. Se trata con una mezcla de cobre, plata y cloro libre, pudiendo reducir la población bacteriana a 2,4 log10 en 2 min., en cambio el cloro libre o sólo la mezcla de cobre y plata reducen la bacteria a 1,5 y 0,03log 10, [164]. En relación con los efectos negativos de cloro muchos investigadores han pensado en una sustitución con otro desinfectante como por ejemplo el iodo. En este sentido Phyle B.H., [108], hacen ensayos con cobre, plata y yodo para Ps. Cepacia. Inicialmente son 10 5 CFU/ml de bacteria y porcentaje de cobre y plata 90:10. En los ensayos con agua con contenido de fosfato la reducción de Ps. Cepacia en 5 min., con 400:40 μg/L (Cu:Ag) es de 6log 10, y en combinación con 50 ppb es de 6log 10 en 2,5 min. En aguas carbonatadas a 30 min. se obtiene la reducción 6log 10 con las mezclas de cobre, plata y cloro, [108]. La Pseudomona cepacia decrece de 4-6 log10 en 10 min. con 100:11 ppb (Cu:Ag), y para un tiempo de 2 min. con 1 log10, [108]. Introducir 200:22 ppb (Cu:Ag) en medio de R2A y 200 ppb de iodo en 10 min. Se consigue una reducción de 4log10, para un tiempo de 15min. 5,8log 10 y para 5 min. un valor de 3log 10, [108]. En medio de PC3 Pseudomonea cepacia se reduce, en tratamiento con cobre, plata e iodo a 4,5log 10 en 15 min. y 3log10 en 5min. En el mismo medio con 444:44 ppb (Cu:Ag) e iodo en 2 min. Llega a 5log 10, y en 5 min. llega a 5,8log 10, [108]. Se constata que sin iodo hay poca diferencia de resultados, [108]. José 21 Luis Sagripanti, [69], demuestra la eficiencia de los metales con agua oxigenada, los resultados se pueden ver en la Tabla 2.10. Para inactivar herpex simplex virus, Junin, T7, Φx174, Φ6 ese sistema es más eficiente que glutaraldéhida, [69]. Tabla N0 2.10 0,020 Virus ΦX 174 T7 HSV Φ6 JV Tipo de genoma ssADN (1.7) dsADN (24) dsADN (96) dsADN (9.3) ssARN D10 (mg/l) T 10 (min) Cu (II) Fe (III) Cu(II)-Pxb Fe(III) Pxc 102-103 102-103 7 >60 Gluaraldehída (10mg/L) >60 102-103 102-103 <10 <10 59 10-102 10-102 8 >60 53 102 102 22 24 >60 102-103 102-103 33 >60 14 ss y ds significan estrato simple y doble estrato Cu(II) en concentración de 1mg/L (clorura cúprica) más agua oxigenada H2O2(Px ) en concentración de 100 mg/L Fe(III) en concentración de 30mg/L (clorura férica) más agua oxigenada H2O2(Px ) en concentración de 100 mg/L D10(mg/L) la concentración necesaria para inactivar 90% del virus Un año antes Sagripanti, [68], admite que la mezcla de cobre y agua oxigenada es mejor que glutaraldehída para Junin virus, Eschericia coli y espores de Bacillus subtilis. El cobre dos y el hierro tres son menos activos para los virus que la glutaraldehída con 5 y 25 tiempos, ymás activos que el cloro, de 2 a 20 veces, [68.] Una mezcla de 1:100 cobre-agua oxigenada es más activa que glutaraldehída en unas 4,5 tiempos. Se observa que agua oxigenada acelera el efecto de cobre, [68]. F.X. Abad y colaboradores estudian la desinfección de viruses humanos en agua con cobre, plata y bajos niveles de cloro [1]. En este ensayo se elibera por vía electrolítica 700:70 μg/L (Cu:Ag). Tratando el agua con 1mg/l cloro libre se constata que no tiene efecto sobre los B40-8 y PV(poliovirus). En relación con HRV (rotavirus humano) se obtiene una reducción a 2log 10, HAV (virus hepatitis A) a 2,6log 10 y 3log10 ADV (adenovirus) en 120 min. En 30 min. corresponde una reducción de 1,8log 10 HRV, 2log10 HAV y 3,2log 10 ADV [1]. Con 0,5 mg/L de cloro libre se consigue una reducción de 1,5log 10; ADV se disminuye 2,5 log 10, B40-8 se disminuye a 3,9log 10 y en menos de 30 min PV a 4log 10 [1]. 22 En 120 min se llega a los valores para 1mg/L con p<0,5. A una adición de 700:70 μg/L (Cu:Ag) y 0,5 mg/L cloro en 30 y 120 min. se obtiene las mismas reducciones que con solo 0,5 mg/L cloro con un p<0,5 [1]. Para 0,2 mg/L de cloro libre se obtienen disminución de 1,2log 10 para HRV, 1,5log10 B40-8 y HAV, 2log10 para ADV y 3,9log10PV, a los 30 min. los valores son similares [1]. Gastar 700:70 μg/L (Cu:Ag) y 0,2 mg/L de cloro libre se llega a las siguientes descensos: 1,2log10 HRV; 1,8log 10HAV; 2log 10ADV, 3log 10B40-8 y en 30 min. para PV se consigue una reducción de 4log 10, [1]. De aquí se puede llegar a la conclusión de que la adición de 700:70 μg/L (Cu:Ag) no aumenta el porcentaje de inactivación después de exponer a 0,5 y 0,2 mg/Lde cloro libre, aunque en ocasiones se produce un nivel de inactivación similar que el obtenido con dosis altas de cloro libre. En el experimento descrito en la referencia [117] Rami Pedhazur estudia la eficiencia de plata con peróxido de hidrógeno en la eliminación de E. coli para agua potable. En la Tabla N02.11 podemos examinar las variaciones. El bajo efecto sinergetico puede ser atribuido a las condiciones de la prueba, empleando la combinación de dos desinfectantes, probablemente la formación de especies muy activas en el tiempo de permanencia de peróxido de hidrógeno puede ser la causa unida a y las multiples valencias de transición de iones metálicos (así como F2+/ Fe3+ y Cu+/Cu2+), [117]. Sí aparece que el uso de pequeñas concentraciones de plata con agua oxigenada promete una eficiencia de larga duración como un desinfectante secundario similar a la cloramina, teniendo un efecto residual de larga duración como un desinfectante secundario similar a la cloramina, teniendo un efecto residual de larga duración en las sistemas de distribución de aguas, y particularmente puede ser efectivo en el control del biofilm, [117]. El bajo efecto sinergetico se observa con grandes concentraciones y tiempos prolongados de exposición, [117]. La fórmula combinada asegura un efecto residual de desinfección, [117]. Tabla N02.11 Tiem po (min.) E coli 30 (CFU/ 60 ml) H2O2 (ppm) AgNO3 (ppb) 5 0,1 0,18 5 0,32 0,54 30 0,23 0,65 30 2,12 2,87 H2O2.AgNO (fórmula 3 combinada) 5 30 0,5 1,0 2,98 5,0 H2O2.AgNO (efecto 3 aditivo) 5 30 0,42 2,35 0,72 3,52 H2O2.AgNO (efecto 3 sinérgico) 5 30 0,08 0,63 0,28 1,48 R. Pedhazur, [106], en 1997 realiza investigaciones con agua oxigenada y nitrato de plata para inactivar E. coli. Para un tiempo de una hora 25 μg/L de nitrato de plata reducen E. coli a 0,3 log, y 50 μg/L de nitrato de plata reduce E. coli a 1log10 A concentraciones bajas de peróxido de hidrógeno (25-50 mg/L) los valores de log son proporcionales a la concentración de peróxido de hidrógeno (25-50 mg/L) y la plata. Cuando el valor del pH es grande, la reducción es menos dependiente de la concentración de plata. El efecto sinérgico de plata y 23 agua oxigenada, calculada como suma de los efectos separados comparando con el efecto de combinación, crece en función de la concentración de agua oxigenada y es menos dependiente de la concentración de plata. Combinado plata con iones de cobre, nikel, zinc y cadmio la toxicidad crece con un factor de 10, en tiempo que el agua oxigenada no tiene tanto efecto, [106]. 4.2.2. Factores medioambientales que influyen en la desinfección Shapiro y Hale en 1937 argumentan que el efecto de desinfección de la plata se hace en un tiempo largo y que los cloruros, el amoniaco y otras materias orgánicas interfieren con la eficiencia del tratamiento, [134, 6]. Chambers y colab. Han demostrado que la acción germicida de la plata está relacionada con la concentración de los iones de este metal, y que en presencia de neutralizantes ineficaces (tales como el tiosulfato sódico). La bacte riostasis puede confundirse con la acción bactericida, [6]. Igualmente la plata proporciona una acción bactericida residual intensa y de larga duración. El efecto de la plata conforme a [154] es neutralizada de aminoácidos, agua dura, fosfatos, cloro, temperatura, luz, densidad bacteriana y concentraciones de sal en el medio. El aluminio, el cobre y magnesium (100 ppm) reduce el efecto de la plata, 250 ppm de iones de plata, hacía Flavobacterium, [21]. Unos inconvenientes de aplicación de la plata son la turbiedad el color orgánico y otras materias coloidales en suspensión que absorben al iono de plata. Algunas especies biológicas como anaerobios, quistes, esporas y algas son resistentes a la acción de la plata y otros se pueden habituarse a la acción del desinfectante, [6]. La acción germicida disminuye con temperatura y valores de pH bajos, [6,14]. Los fosfatos, cloruros, sulfuros y sulfatos impiden la actividad de la plata, [6]. Cuando se utiliza cobre en recipientes, y conductos de zinc y aluminio, se debe de tener cuidado porque produce la corrosión de esos metales. Para evitar la precipitación de Cu2+ en sales insolubles se adiciona KNa-tartrato que forma complejos y mantiene el cobre soluble en rangos de 0,06-63 ppm, [168]. Los fosfatos bajan la toxicidad del cobre dos para Aerobacter aerogenes, formando fosfato de cobre (III) insoluble, [125]. Pero en la misma medida los hidróxidos metálicos, quelación de componentes de tipo ácido húmico u orgánicos reducen el efecto del cobre, [125]. El peróxido de hidrógeno es estable, bajo condiciones de pH que facilita su transporte y no se descompone. Igualmente es poco reactivo con los compuestos orgánicos asegurando una reacción residual desinfectante, [117]. La presencia de otros metales los que interfiere o interacciona, [7, 97]; pH, [155]. Estas son las concentraciones de óxido disuelto, luz y salinidad, [125], influyen sobre la actividad de cobre y plata. 24 Temperatura, alcalinidad y pH son parámetros que influyen la actividad del cobre, [91]. El pH debe de ser 7,3 para la eficacia de cloro libre y la solubidad de metales (60% de cloro existe de forma HOCl, [96]), [77]. La adsorción en los materiales de los vasos utilizados es mayor en los últimos 24 h y se presentan en la Tabla N0 2.12. Tabla N0 2.12 Pyrex Polietilene Cu 10% 2,5% Ag 15,4% 11,6% 4.3 Costo En un informe publicado por el Public Health Service de Estados Unidos en 1962 [112] se ha observado que debido a su coste relativamente elevado, características de absorción y bacteriostáticas, tiempo de reacción prolongado y otros factores, la plata no es un desinfectante demasiado útil en las aplicaciones agran escala que en piscinas. En la referencia [6] se relata que el tratamiento con plata es de 200 veces más caro que con el cloro gaseoso. En la referencia [58] se afirma que el sistema de depuración con plata vale 293,57 $ y otro más completo 5000%. Una corriente alta se requiere para el platino, oro, acero inoxidable, cobre, con una corrosión significativa de los ánodos lo que incrementa los costos; habitualmente se utiliza una corriente de 1μA/mm 2, [143]. El sistema de desinfección RMS por ionización en un contracto de 4 años vale 7,76 millones de $, [92]. En las referencias [165, 167] se afirma que la ionización es la técnica más económica comparando con otras técnicas de desinfección, una fácil instalación y mantenimiento. Además de esto tienen productos no tóxicos, y se puede garantizar la presencia de efecto residual, [167]. 4.4. Forma de microorganismos actuación de los metales sobre los Muchos científicos han hecho investigaciones para determinar el modo de actuación de los desinfectantes para mejorar el proceso y encontrar alternativas. En general se conocen, y están ya establcidos, los mecanismos de acción de algunos de los principales y más utilizados desinfectantes, como el cloro, ozono, 25 las radiaciones ultravioletas, etc., pero se conoce menos o nada la actuación de los metales. El mercurio deprime los mecanismos enzimáticos celulares mediante su combinación con los grupos sulfhídrilo (-SH), y por esta razón las sales solubles de mercurio son tóxicas para todas las células, [126]. Los compuestos mercuriales tienen una extraordinaria acción antibacteriana por combinarse con los grupos sulfhidril de las bacterias, el efecto es neutralizado por la adición al medio de sustancias ricas en enlace SH. El cloruro mercúrico se va combinar con (-SH), lo cual, explica de otra parte, que es muy importante como una línea de ensamblaje en una fábrica, [47]: SH Enzima S + ½ O 2 = Enzima +H2O SH S SH S Enzima +HgCl2=Enzima SH Hg +2HCl S La acción antimicrobiana de los metales y de sus compuestos se debe a la combinación del ion metálico con ciertas proteínas de la célula, inactivándolas [94]. El constituyente celular que se combina con el metal es esencial para la vida de la célula. Las sales de los metales pesados precipitan también las proteínas, y en concentraciones fuertes dichas sales pueden causar la muerte de la célula, [94]. El constituyente celular que se combina con el metal es esencial para la vida de la célula. En diluciones grandes la intervención de los metales en fisiología de la célula es más complicada, [94]. La actividad antimicrobial de los iones metálicos probablemente depende de la habilidad de combinación con grupos SH de las enzimas, [63]. Compuestos como cysteina o glutathion combinados con iones metálicos inhiben las células que pueden recuperarse. Conforme al mismo autor, [63], las altas concentraciones de iones metálicos pueden inactivar la mayor parte de las enzimas. También se afirma que la concentración de cobre inhibitoria depende de la composición del medio de crecimiento, [63]. Altas concentraciones queden ser necesaria para inhibir el crecimiento cuando el medio contiene grupos SH o sequestrando agentes que combina con cobre, [63]. El ácido ascórbico incrementa la toxicidad de Cu2+ en pequeñas concentraciones hacía Serratia maecescens. En la interacción del cobre con los microorganismos no se puede decir que el OH- generado en la interacción del ion de cobre (II) con agua oxigenada es el responsable de la fragmentación de ADN observada y, también de los cambios genéticos, [45]. 26 La actividad catalítica del ion de cobre (II) al lado de los compuestos tiol (cystamina, cisteína y glutathion) señala como actúan los metales al lado de antioxidantes que generan ADN y especies cromosómicas destruidas. Solo los iones de cobre y compuesto thiol no producen síntesis de ADN y cromosomos destruidos pero la combinación de ellos, sí, [45]. En la referencia [113] se afirma que las sales de los metales pesados provocan alteración del núcleo, actuando sobre las proteínas citoplásmicas y nuclerares, pero también junto con agua oxigenada y permanganato de potasio actúan sobre las proteínas, alterando el coloide citoplásmico y, sobre las enzimas inactivándolas. Koski y Chen, [71], declaran que no es suficiente para evaluar la eficiencia desinfectante sólo el análisis virucida, porque los microorganismos no se comportan igual con todos los desinfectantes. Es difícil de comparar los resultados de los estudios efectuados porque no se han hecho en las mismas condiciones y, además hay muchos factores que influyen el efecto de desinfección. Se trae la conclusión que las bacterias son más susceptibles al ataque con metales que los virus. Aunque los iones de plata están ligados a los iones sulfhidrilo, [27], poniendo en peligro la respiración bacteriana, tienen un efecto bacteriostático, lo que significa que los iones de plata regresan después de mucho tiempo en solución y las células de ese modo se pueden recuperar y continuar el crecimiento, [126]. Los plasmidos presentes en bacterias producen proteínas capaces de complejar los metales disminuyendo así el efecto desinfectante, [126]. La interacción entre metales y virus implica un mecanismo que no necesita un proceso metabólico y se realiza bloqueando o destruyendo las células receptoras, o inactivando el ácido nucleico dendro de la cápsula viral, [126]. Debido a la ionización de los grupos carboxil, amino, guanidyl e imidazol, se crea una superficie cargada responsable de carga negativa y pH neutro, [125]. Así los iones de cobre y plata son atraídos electrostáticamente debido a sus cargas positivas y pueden accionar en la superficie, [125]. Se sabe que las especies que no son ionizadas pasan la membrana celular y en el interior de la célula, se ionizan por el cambio de pH atacando RNA, ADN o a las enzimas, [125]. Los ligandes sintetizados de células complejan los metales extracelulares dando la posibilidad de entrar en la célula así como bien se puede observar en la figura siguiente: ML1 M+L1 + L2 síntesis celular L2 L4 27 ML2 ML2 ML4 ML3E0 bajo pH=7 L2 E0 garande, pH variable membrana celular La interacción de los iones de cobre y de plata esta influyenciada de, [125], algunos factores como: forma soluble del metal (ion complejo, ion quelate o moléculas) o la partícula (coloidal precipitado adsorbido) y la presencia de otros metales con cual interfiere o interacciona [7, 102], pH [162], concentración de oxígeno disuelto, luz salinidad. En el caso de que no interfieran otra sustancias y que el desinfectante no este combinado, existan diferencias en concentraciones y factores, son: tiempo de contacto, oncentración de desinfectante y temperatura del agua, [29]. Lund, [84], concluye que la capacidad de los iones de metales pesados para inactivar se debe al poder oxidativo, sugiriendo que hay una relación directa entre el ritmo de inactivación y el potencial oxidativo del ión. El mecanismo Fenton considera la unión entre iones metálicos y macromoléculas biológicas. Para la formación de peróxido de hidrógeno es necesario el catalizador de polímero-metal que se forma por el método Fenton, [54]. Buipolimer + Cu (II) Biopolimer-Cu (II) +O2Biopolimer –Cu (I) + O 2 Biopolimer-Cu(II) +OH + OH- Existen tres tipos posibles de mecanismos de inhibición con la plata: interferencia con el electrón de transporte, unión con el ADN, y la interacción con la membrana celular, [154]. La plata forma compuestos insolubles con aniones, grupos sulfhídricos, y muchos materiales biológicos similares las enzimas, responsables del poder desinfectante, [125]. Los mismos autores afirman que la denaturación de las proteínas es más difícil que la oxidación del complejo sulfhídrilo. Grier [51] admite que la plata compleja con un electrón cedido a los grupos conteniendo sulfo, oxígeno o nitrógeno. Conforme a la bibliografía [161] los metales pueden unir moléculas en la siguiente orden: base rico en sulfo>base nitrógeno>base oxígeno>coordinación de moléculas de agua. 28 Richards [123] habla de la disociación de moléculas de nitrato de plata y sulfadiazina de plata como motivo de actividad antimicrobial. Con baja concentración puede penetrar la célula bacteriana. Iones metálicos pueden formar con grupos fosfato un dipolo positivo, siguiendo la formación de fosfato cíclico y limpiar esas moléculas a uniones fosfodiester, [43], así como puede verse en la siguiente ecuación: 5´ BASE O 5´ 2´ O OH O BASE - ROH O +M 3´ 5´ BASE OH O O O P O P OR O- O P OR O -O O M M 5´ 5´ BASE BASE O O or O- O O P O M O P OO O M La temperatura de fusión de un polinucleotido desciende, mientras las uniones de iones metálicos debilitan los lazos de interacción de las parejas de hidrógeno, [125]. Los iones metálicos que forman enlaces cruzados icrementan la temperatura de fusión, [125]. Los iones metálicos que forman enlaces cruzados incrementan la temperatura de fusión, [125]. Los complejos plata-DNA con las bases cauzan la denaturización, [9], al desplazar los lazos de hidrógeno entre los nitrógenos adyacentes de purinas y pirimidinas, con lo cual se evita la duplicidad, [127]. El cobre, en general, se encuentra fuera de las células como Cu (II) mientras que dentro de la célula como Cu (I), así se ve en la figura anterior. Los iones de metal pueden funcionar tanto como ácidos de Lewis o bases cuando están presentes en la forma de complejos metálicos, y como consecuencia aumenta las reacciones de desplazamiento, [125]. Los metales pueden facilitar la hidrólisis o desplazamiento nucleofílico ya sea directamente a través de la polarización del sustrato y el ataque externo siguiente hecho por agente nucleofilo HO, o indirectamente mediante la generación de un nucleofilo reactivo coordinado (un agente base reactivo). Polarización directa Polarización indirecta 29 OH-/H2O o:N Y-C=O Me2+ R R Me+1-OH O Y-C=O C-O- YH + Me2+ R El metal o el óxido metálico en general esta cubierto de grupos hidroxil, [133, 149], expuestos en medio acuoso o aire húmedo y así puede soportar el ataque nucleofílico. La polarización puede probablemente ser obtenida por coordinación del grupo salido. La polarización directa del grupo carbonil o fosfonil determina la carga, dimensión, número de coordinación, y labilidad del ion metálico, [125]. Cuando las proteínas son complejadas o alteradas no pueden ejecutar su función normal. Entonces es inevitable la muerte del virus o la inactivación viral, [125]. El cobre puede atacar las enzimas respiratorias en membranas celulares de E. coli por lo cual hay un descenso de oxígeno utilizando y un incremento de la fermentación en la recuperación de los E. coli dañados, [34]. Los reemplazamientos de metales, que ocurre naturalmente en grupos de enzimas, pueden alterar la función de las enzimas, [52]. En la bibliografía [55] se anota que Me2+, los iones metálicos pueden polarizar el grupo carbonil a complejo ketonico, y están presentes en la transferencia de electrones a lazo de C-C, posibilitando una decarboxilación como se puede ver en la siguiente figura: O=C-C-CH2-C=O +M2+ O O O- O=C-C-CH2-C=O O O O- M2+ complejo ketonic O=C-C-CH2-C=O+H+ O O O M2+ complejo enolic Los metales pueden catalizar la hidrólisis de amidas y péptidos, donde están presentes los lazos carbonil, [90]. A pH grande se forman complejos deproto nados y la hidrólisis es inhibida. Los iones metálicos tienen la importancia de mantener la estructura de muchas moléculas biológicas vitales, así como ribosomas, cromosomas y tRNA, [60]. La quelación queda definida como la complejación que implica dos o más lazos entre ion metálico y ligantes, [30]. Los cationes bivalentes rompen lazos de hidrógeno en estructura de doble estrato del ADN, [125], lo que significa una flexibilidad del lazo y un descenso de temperatura de fusión. La intercalación ocurre cuando el ion metálico es situado entre dos bases en el mismo estrato o en doble estrato, estabilizando el proceso que incrementa la temperatura de fusión. La inserción se hace cuando el ion metálico une dos bases donde existe un lazo de hidrógeno entre dos nitrógenos, reemplazando el proton que va causando el crecimiento de pH del medio ambiente, [30]. Los E. coli y Y. enterocolírica, expuestos a bajos niveles de cobre, lesionan alguns de las células, [140, 141]. 30 El cobre modifica reversiblemente el ADN en solución bajo iónico, compitiendo con lazos de hidrógeno entre moléculas, [32, 88]. E las referencias [55, 157] se habla sobre el desorden que implica el cobre (II) en la estructura helicoidal de cruz y entre estratos de ADN. Los iones metálicos pueden coordinarse simultáneamente con más átomos ligados; un solo ion metálico puede unir dos fosfatos, dos bases, o el fosfato y la base. Martin y Mariam, [87], dicen que los ácidos nucleicos ofrecen muchos lugares de lazos, incluyendo N y O, OH en ribose, y cargas negativas de átomos d e oxígeno en residuos de fosfatos. Los átomos de oxígeno y nitrógeno virtuales donantes han sido propuestos como implicados en coordinación de iones metálicos. La habilidad de iones metálicos de interacción con varios ligantes puede estar influenciada por muchos factores incluyendo: basicidad, pH, competición con iones hidróxido para lugares de lazos, la naturaleza del donante y átomos metálicos, la habilidad de formar quelaciones complejos o puentes de hidrógeno, limitación cinética, y la disponibilidad de N(1) y N(7) en purines, [87]. Se ha reflejado, [35], la rotura de poliovirus RNA, dado del inactivador generado en la interacción del clorur de cobre e impurezas de fenol reactivo. Complejos de cobre II catalizan la descomposición de peróxido de hidrógeno, [125]. En referencia [56] se han propuesto dos modelos de cobre unido al ADN. De acuerdo con el modelo, el cobre estabiliza el hélix y la transición de carga, que implica la formación de complejo con cobre, actuando como un electrón aceptor, intercalado entre dos adyacentes pares G-C que actúan como electrones donantes. De acuerdo con otro modelo, el cobre destabiliza el hélix y crece el quelato entre grupos fosfato y átomo de nitrógeno como las bases. Este modelo difiere del propuesto por Zimmer y colab., [169], que han considerado la formación de quelato entre guanine y citosina en estratos opuestos . El cobre compleja G y C en G-C pares, mientras que es sólo capaz de complejar A en AT par, [125]. Complejos similares han sido sugeridos para Ag (I) y Cu(I) liando el ADN. Huff y colab., [60], relatan que la estabilización de la segunda estructura de ADN puede ser por la formación de lazos metal internucleotide. La poca concentración de Cu(II) incrementa la temperatura de fusión y la gran concentración de Cu(II) decrece la temperatura de fusión, [125], por la coordinación de ióno metálico con dos grupos donantes de electrones en nucleosidos, [56], o a lo mejor con fosfatos, [169]. El ADN es degradado por el cobre (II) en presencia de peróxido de hidrógeno a temperatura ambiente, [125]. La actividad antimicrobial de cobre se ha observado en oxidación de grupos sulfhidril y enzimas, [62], que inhiben la actividad enzimática, e interfieren con células respiratorias, [34, 35]. 4.5 Estado en que pueden actuar los metales Se específica en [19] que los E. coli mueren por la acción de 0,04 mg/L de plata, lo que corresponde a 2,4 10 17 iones de plata. Como se puede observar en las 31 referencias citadas en los capítulos anteriores aunque los metales son introducidos de diversas formas como sales, electrólisis (placas de electrodos metálicos) en el agua se encuentra de forma iónica Ag (I) y Cu(II). Pero como se pudo observar en el mecanismo de acción sobre las células se puede formar y Cu (I) que actúa desactivando bacterias y viruses. Debe observarse también que la plata coloidal libera los iones de plata en la solución acuosa, [94]. Aunque los metales actúan en forma de iones existan otras posibilidades de actuación en formas de partículas, coloidal, precipitado y adsorbido al lado de ión complejo, ión quelate o moléculas, [125]. 4.6. Forma de desinfección Generalmente las sales orgánicas de plata como nitratos, citratos, lactatos, picratos, cloruros y proteinates se utilizan como antisépticos. La plata es usada como ánodo, [143]. Los estudios cuantitativos demuestran que la mayoría de las inhibiciones tienen lugar en pocas horas y no son acompañadas de cambio de pH, [143]. Debe tenerse en cuenta de la densidad de superficie del electrodo, el electrodo de metal, los efectos de polaridad, y el carácter espacial y la corriente. En el ensayo [143] se han utilizado 20 pares de electrodos de 0,2 a 0,4 mm aplicándose una corriente de 0,4, 4,0; 40 y 400 μA. Zeming Liu, [167], utiliza una unidad de ionización compuesta de seis de electrodos (tres pares) montados en una cámara donde llega el flujo de agua, La liberación de iones es controlada automáticamente por un microprocesador. La corriente se ha ajustado con una unidad de control a 3A y 40 V. Los electrodos se limpian cada mes y cuando el amperaje baja A, o el nivel de concentración de cobre es <0,1 ppm. La célula de ionización se instala en paralelo, en la línea de recirculación de agua caliente del hospital analizado, con un caudal de 378,5 L/min, [167]. La ionización (purificación electrónica del agua) es un sistema sofisticado de dispersar iones de plata y cobre en agua, [151]. La unidad generadora de ondas consite de un control electrónico que se alimenta con un voltaje de 250 V que se convierte en corriente directa mediante un transformador de doble bobinado. La corriente directa se alimenta con un circuito electrónico, con una corriente desde el circuito electrónico hacía los ánodos de sacrificios hechos con una aleación de Ag/Cu que están distribuidos en un depósito en el cual se bombea el agua a ser tratada, [151]. Un ánodo o un par de ánodos se carga positivamente, y el otro en forma negativa. La corriente se cambia cada cierto tiempo para proporcionar tal que la plata es suficiente para acabar las cargas de baterías y otras masas proteínicas que incluyen virus, y el cobre acaba con las algas, con 32 los hongos, así como con la ruptura de una película biológica en la cual se asientan las bacterias. El control de la ionización se hace con un potenciómetro de control, [151]. Cuando el nivel de cobre sale del control, puede ajustarse atrasandolo para mantener la producción estable. La plata desvia la masa de proteína en el agua durante el proceso de deproteinado de bacteria y virus de la plata, y por eso no es válida para futuro uso. Otros factores que tienen efecto sobre la formación de iones son pH, niveles de metal en el agua, reacciones químicas que tienen lugar en el agua y el efecto de eso se mide en baja concentración de plata. La necesidad de compensación automática de cambios de conductividad en agua es evidente cuando hay diferentes tipos de agua, [151]. El sistema evita la sobreproducción de iones mientras la salida de iones es reducida sobre la creciente conductividad para asegurar que la relación como fue ajustado originalmente, debiéndose mantener, [151]. Para sistemas domésticos, industriales y comerciales, se utilizan recipientes standard de ánodos que tienen hasta 4 ánodos. Donde hay grandes cantidades de agua a tratar se pueden colocar unidades en paralelo. Los electrodos se limpian una vez al mes, [151]. 4.7. Conclusiones en relación con los objetivos propuestos Como se puede observar en los capítulos anteriores el mercurio es muy tóxico para utilizarse como desinfectante de cantidades grandes de agua. Por eso es preferible optar por otras variantes que incluyen permanganato de potasio, agua oxigenada y los metales pesados que en los límites impuestos no perjudican la salud. G. Sykes, [152], en 1965 demuestra que los E. coli son eliminados en dos horas con concentraciones de plata mayores de 0,5 ppm de plata, y se necesitan 24 h para dosis menores de 0,006 ppm, [152]. Pero, 0,5 ppm es una concentracióngrande en los límites admisibles para la salud humana, o un tiempo de 24 horas es mucho mayor. Por lo tanto no es aconsejable utilizarse sólo la plata. Un compuesto orgánico preferible en el caso de utilización de la plata en forma de sal es el citrato de plata que no es irritante, como no sean hecho investigaciones profundas, en condiciones comparablessobre la eficacia de otros sales, no se puede decir cuál es lo mejor, [151]. Como ejemplo este compuesto tiene la siguiente eficacia : dilución de 1:600 para Staph. Aureus y 1:4500 para Salm typhi, como dosis letal en 10 min. a 37 0C, [151]. Como se puede observar en el ejemplo de la referencia [99] se obtienen buenos resultados en la desinfección con 0,2 mg/l cloro libre y 460:75 μg/l de cobre y plata liberados electrolíticamente, de forma que E. coli se reduce 3,5 log 10 en 0,5 33 min teniendo en cuenta los factores ambientales. En las mismas condiciones para los S. faecalis se logra una reducción de 4log10 en 0,5 min. con un consumo mayor de plata y cloro. En referencia [78] se demuestra que los E. coli son atacados más por el cobre, en la mezcla cobre y plata, lo que justifica porque siempre se utiliza una cantidad mayor de plata, además de tener en cuenta lo admisible para la salud humana. La temperatura aumenta la reducción de L. pneumophila, utilizando 0,4 mg/l de cloro libre y 400:40 (Cu:Ag) ppb se obtiene una disminución de L. pneumophila de 5,786 mayor que 2,6796 obtenida con 0,3 mg/L de cloro libre y 400:40 (Cu:Ag). La combinación de los metales, cobre y plata, con iodo disminuye el tiempo necesario para obtener la misma reducción de los Ps. Cepacia. La pseudomona cepacia descrece de 4-6 log10 en 10 min. con 100:11 ppb (Cu_Ag), y para un tiempo de 2 min. con 1 log 10, [108]. En el mismo medio con 444:44 ppb (Cu:Ag) e iodo en 2 min. llega a 5 log 10 y en 5 min llega a 5,8log 10 [108]. Se constata que sin iodo hay poca diferencia de resultados, por lo tanto no es muy conveniente utilizarlo. Los metales actúan sobre las bacterias y virus en forma iónica, por lo tanto se puede emplear como sales, u obtenidos por vía electrolítica. De forma electrolítica es relativamente económica comparando con la utilización de sus sales de esos, pero tiene como inconveniente el cambio de los electrodos de plata y cobre consumidos y también se necesita limpieza frecuente. También se pueden añadir sales para mejorar los efectos. Los filtros de arena revestida con plata y cobre serán también una buena alternativa pero se necesita una limpieza frecuente. En este caso se puede adicionar el cloro antes o después del filtro, cómo también agua oxigenada. Para incorporar permanganato de potasio debe de tenerse en cuenta que es mejor antes de cloración e igualmente de la filtración para eliminar el color. Como se puede observar, en los estudios investigados, la utilización de la mezcla cobre/plata y/o cloro sólo tienen eficiencia hacía los microorganismos patógenos. Por lo tanto es una buena línea de investigación, teniendo en cuenta que es muy novedoso, y con muchas posibilidades de aplicaciones y de combinaciones de distintos desinfectantes que tienen un buen poder desinfectante sin ser tóxicos para el ser humano. Generalmente los estudios donde se utiliza la mezcla cobre:plata y cloro se han efectuado con unos tiempos de contacto de desinfección cortas, de 5-30 min. No se han estudiado los efectos de los sales de metales, incorporado en la solución, que conteniendo los electrodos de cobre y plata, pueden actuar sobre los microorganismos con o sin cloro libre. Igualmente se puede estudiarse el efecto del peróxido de hidrógeno como el tercer desinfectante. Tampoco se habla mucho de ensayos hechos con permanganato de potasio , electrodos de cobre/plata y/o sus sales con o sin cloro. Los experimentos que se han hecho sobre las redes de distribución de agua no son muy sugestivas, y sin 34 muchas alternativas propuestas, tanto sobre compuestos utilizados como el lugar de aplicación en las redes de distribución. La mayoría de los ensayos son hechos en laboratorio con distintos medios de cultivos que contienen compuestos, que pueden alterar los efectos de los desinfectantes (como peptona) y con agua bi- y tridistilada, en lugar de agua potable en las condiciones reales, donde hay bastantes factores que influyen el proceso. Otro campo de investigación es averiguar el mecanismo real de desinfección de los metales solos o en combinación con otros desinfectantes. 5. OBJETIVOS FINALES DE LA INVESTIGACIÓN 1. Diferenciar los desinfectantes posibles a utilizar con base en la garantía de desinfección sin afectar a la salud del hombre y los ecosistemas 2. Determinar dosis de desinfección 3. Posibles alternativas en la desinfección 3.1Alternativas de desinfectantes únicos, aislados o combinados 3.2Alternativas dosis-tiempo de contacto 3.3Alternativas en las instalaciones de incorporación de elemento desinfectante. 4. Elementos a considerar que presentan interferencias en los procesos de desinfección 5. Optimizar un proceso para empleo en las sistemas de distribución de aguas 6. Buscar la aplicación de estos sistemas en los puntos más adecuados de las redes 7. Establecer garantías del proceso 8. Establecer las ventajas e inconvenientes del método de ionización 6. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN 6.1. Parámetros ha utilizar Finalmente los elementos de desinfección que se van ha utilizar son: cobre, plata en forma metálica o sales de estos, y cloro. Se analiza el agua de una depuradora residual urbana pasada por un filtro de arena de 0,7 mm con altura de 60 cm o por un papel filtro para la determinación de sólidos disueltos. Se determinan los parámetros específicos del agua Primero se deposita en un contenedor de plata y se determina la concentración de microorganismos en función del tiempo y temperatura. Después se mete una barra incandescente de plata en el agua y se mide a dos y 24 horas, los microorganismos. 35 Se hacen ensayos con nitrato de plata determinándose la variación de los microorganismos en tiempo. Se utiliza electrodos de plata y cobre para la desinfección del agua. Se deposita en un contenedor de cobre y se determina la concentración de microorganismos en función del tiempo y temperatura. Después se mete una barra incandescente de cobre en el agua y se mide a dos y 24 horas, los microorganismos. Se hacen ensayos con sulfato de cobre determinándose la variación de los microorganismos en tiempo. Se utiliza sulfato de cobre con agua oxigenada, o permanganato potásico, o dicromato potásico, determinándose la variación de microorganismos en tiempo. La última combinación es de cobre, plata y cloro Los microorganismos que deben de determinarse son. Coliformes fecales Coliformes totales Germenes totales Thiobaccilus thioparus 6.2. Técnicas analíticas Los ensayos se han realizado conforme alas técnicas normalizadas y publicadas en APHA, AWWA, WPCF, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater U.S.A. (Métodos normalizados para el análisis del agua y aguas residuales 19ª Edición U.S.A.), 1995. Para la determinación de cloro libre se ha utilizado el método de campo con el equipo Aquality yespectrofotómetro DR/2010 de HACH. Para cálculos de química computacional se ha utilizado el programa Gaussian 03 y visualización Gauss View 03. Se han utilizado microscopia de fuerza atómica y rayos X para determinar las características de los electrodos, Atomic Absorption Spectrophotometer (Hitachi, halow cathode lamp) y soluciones estándar de AgNO 3 y CuSO4 como se han descrito en Métodos Oficiales de Análisis (AOAC, 1984). Las ecuaciones de regresión linear han sido calculadas con soluciones estándar para concentraciones y absorbancia, y con un coeficiente de correlación de 0,997 o mayor para cada experimento. El cloro libre se ha determinado utilizando N, Ndietil–p-fenilen diamina método (DPD). Para determinar nitritos y nitrógeno espectrofotómetro DR/2010 de HACH. amoniacal se ha utilizado el 6.3. Instalaciones y plantas de ensayo 36 Se han utilizado muestras de agua residual urbana de la depuradora del Instituto Tecnológico de Monterrey de Pachuca y depuradora de agua residual urbana de la U.A.E.H. de Pachuca. Se han utilizado electrodos de mezcla de cobre y plata en relación 90:10 de dimensiones de A = 1200 mm 2 y 10 mm grosor. La corriente utilizada fue de 0,2 mA. 6.4. Descripción de los ensayos Se ha utilizado para todas las determinaciones de las características del agua bidistilada preparada en los laboratorios de la U.A.E.H.. Se ha hecho un análisis estadístico par todas las determinaciones relatándose en este trabajo datos estadísticos. Las muestras han sido analizadas conforme las normativas vigentes, los microorganismos, DBO, DQO y oxígeno disuelto en los primeros 24 horas de la toma de muestra. Se han empleado micropipetas de capacidad de μg hasta 10 ml. Se han preparado los medios de cultivos previamente a la toma de muestra conforme a los estándares para método por tubos y caja para Thiobacilus Thioparus. Se han leído las cajas en una lupa de resolución x 100 veces. Todas las sustancias se han preparado una semana antes de toma de muestra.Todos los materiales y agua han sido esterilizados en autoclave. Se ha utilizado una solución de 5% de hipoclorito de sodio. La solución de cobre:plata se ha almacenado en vasos de polietilene lavados previamente con ácido. Para la determinación de adsorción iónica se han empleado vasos Pyrex. Para neutralizar el efecto de cloro y cobre y plata y poder determinar a los tiempos convenientes los resultados se ha utilizado como inhibidores 10% de ácido tioglicólico (TG) y 15% tiosulfato de sodio (10 ml de solución a un litro de muestra). La temperatura del agua es de 21 a 24 0C con pH de 7-7,5. Se ha utilizado programa estadístico (CoStat Statistical Software, 1986, Co Hort Software, Berkeley, CA) utilizado para calcular el testo Student-Newman-Keuls para determinar intervalo de confianza significativo.El coeficiente de inactivación K= -2,3(log10(CO-CT)/T donde C0 y CT son concentraciones bacteriales iniciales y finales, y T representa tiempo (en minutos). Se ha calculado log 10(NT/N0) donde N0 es el numero inicial de bacterias CFU/ml y NTes el número de bacterias a tiempo T en CFU/ml. La EPA ha establecido la cantidad máxima admisible para cobre y plata en agua potable entre 1000 y 50 μg/l. 37 Se han determinado las concentraciones iniciales de microorganismos y se ha determindo ser incontables motivo por cual se han realizado varias diliciones tomando yen cuenta que en agua potable la concentración es alrededor de 10 6 CFU/ml. 7. PROGRAMACIÓN EN EL TIEMPO Todos los ensayos se han realizado durante un año. ACTIVIDADES P1 Actividades y Definición de objetivos Investigación bibliográfica Conclusiones previas y adopción de objetivos finales Metodología de ensayos, descripción de los equipos experimentales, metodología analítica, concreción de cada unidad de ensayo, el plan de acción Desarrollo de ensayos, análisis de resultados Conclusiones Análisis crítico de la tésis. P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 P11 P12 P13 P14 8. PRESENTACIÓN DE LOS RESULTADOS La concentración de cloro libre puede ser afectada por luz, temperatura, material orgánico y composición química del agua. Tabla N0. 1. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 A B C D E -1,01 -1,01 0,1 -0,1 -1,02 -1,5 -1,5 0,3 -0,12 -1,5 -1,8 -1,8 0,4 -0,18 -1,8 38 P15 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas -2,7 -2,7 -0,5 -0,23 -2,7 -2,9 -2,9 -0,7 -0,35 -2,9 -2,9 -2,9 -1,05 -0,71 -2,9 Tabla No. 2. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,1 -1,5 -0,32 -0,24 -1,88 -1,8 -1,7 -0,057 -0,3 -2,3 -2,1 -2,85 -0,1 -0,39 -2,78 -2,8 -3,05 -0,13 -0,43 -3,01 -3,05 -3,29 -0,15 -0,48 -3,06 -3,05 -3,29 -0,2 -0,55 -3,06 Tabla No. 3. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,01 -1,03 -0,05 -0,07 -1,2 -1,2 -1,6 -0,08 -0,1 -1,8 -1,9 -2,1 -0,12 -0,13 -2,0 -2,11 -2,48 -0,26 -0,18 -2,3 -2,18 -2,56 -0,34 -0,2 -2,9 -2,18 -2,56 -0,48 -0,28 -2,9 Tabla No 4 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas A B C D E -2,3 -1,5 -1,8 -2,3 -1,5 -1,0 -2 -1,2 -0,83 -2,2 -1,26 -1,2 -2,3 -1,3 -1,4 39 K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas -0,9 -0,6 -0,5 -0,6 -0,1 -0,3 -2,9 -0,21 0,51 -0,63 -0,4 -0,55 -0,37 -3,2 -0,63 Tabla No. 5. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -1,85 -0,70 1,8 0,34 -0,45 -0,8 -0,94 -0,76 -2,3 -2,32 -1,8 -1,85 -1,37 -0,8 -0,9 -2,44 -1,54 -0,66 -0,65 0,32 -1,87 -1,1 -0,89 -0,43 0,34 -0,65 -1,32 0,09 -0,089 -1,35 Tabla No. 6. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -2,4 -2,3 -1,73 -1,5 1,8 -2,0 -0,68 -0,3 -0,4 0,45 -0,45 -2,1 -0,97 -1,2 1,25 0,43 -1,23 -1,68 -2,17 2,2 -2,55 -1,9 -1,34 -0,84 -0,64 -1,2 0,57 1,6 2,3 -0,45 Tabla N0. 7. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,2 -1,02 0,13 -0,16 -1,04 -1,55 -1,6 0,36 -0,17 -1,62 -1,85 -1,86 0,48 -0,20 -2 -2,78 -2,78 -0,57 -0,29 -3,0 -3,1 -3,1 -0,8 -0,40 -3,1 -3,1 -3,0 -1,059 -0,81 -3,1 40 Tabla No. 8. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,6 -1,9 -0,38 -0,29 -1,98 -1,9 -1,97 -0,067 -0,4 -2,8 -2,4 -2,98 -0,2 -0,41 -2,89 -2,9 -3,09 -0,17 -0,49 -3,09 -3,15 -3,39 -0,17 -0,50 -3,1 -3,09 -3,45 -0,3 -0,59 -3,09 Tabla No. 9. Resultados para las bacterias ThiobacillusThioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,08 -1,09 -0,09 -0,10 -1,5 -1,4 -1,8 -0,1 -0,2 -1,9 -1,7 -2,4 -0,19 -0,18 -2,3 -2,19 -2,52 -0,28 -0,21 -2,9 -2,28 -2,76 -0,44 -0,3 -3,01 -2,21 -2,62 -0,53 -0,34 -3,00 Tabla No 10 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas -3.5K a 24 horas y 30 A B C D E -2,40 -1,77 -1,22 -0,7 -0,51 -2,19 -1,67 -0,90 -0,5 -0,51 -2,17 -1,63 -0,79 -0,1 -0,2 -2,26 -1,48 -1,02 3 0,19 -2,40 -1,77 -1,22 0,49 -0,51 41 minutos K a 25 horas 0,2 -0,53 -0,37 -3 -0,53 Tabla No. 11. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -1,9 -0,60 1,6 0,14 0,23 -0,06 -0,81 -0,63 -3 -2,7 -2,2 -1,68 -1,16 -0,9 -0,5 -2,09 -1,49 -0,78 0,62 0,12 -1,84 -1,22 -0,61 0,98 0,23 0,31 1,26 0,07 -0,058 -1,17 Tabla No. 12. Resultados para las bacterias ThiobacillusThioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -2,59 -2,1 -1,55 1,4 1,2 -1,93 -0,57 -0,26 0,4 0,3 -0,34 -1,7 0,84 1,05 1,15 0,32 0,92 1,6 2,12 2,09 -2,34 -1,74 -1,21 0,72 -0,51 1,12 0,25 1,46 2,03 -0,23 Figura 1 Electrodo de cobre:plata 10:1 después de ensayos. a) 20KV y x3700 veces b) 15V y x500 veces 42 c) 15 V y x300 veces Tabla No. 13. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log10 (NT/N0) a 1 horas log10 (NT/N0) a 2 horas log10 (NT/N0) a 4 horas log10 (NT/N0) a 6 horas log10 (NT/N0) a 10 horas L+log10 (NT/N0) a 14 horas A B C D E -0,13 -0,13 0,031 -0,02 -0,14 -0,25 -0,25 0,04 -0,03 -0,24 -0,46 -0,46 0,052 -0,04 -0,45 -0,71 -0,71 0,1 -0,05 -0,70 -1,38 -1,38 0,2 -0,11 -1,37 -1,65 -1,65 0,35 -0,16 -1,64 Tabla No. 14. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log10 (NT/N0) a 1 horas log10 (NT/N0) 2 horas log10 (NT/N0) a 4 horas log10 (NT/N0) a 6 horas log10 (NT/N0) a 10 horas log10 (NT/N0) a 14 horas A B C D E 0,15 0,67 0,047 -0,016 0,2 -0,55 0,17 0,02 -0,047 -0,1 -1,25 -0,33 -0,01 -0,022 -0,3 -1,32 -0,83 -0,032 -0,055 -0,9 -1,45 -1,33 -0,065 -0,085 -1,5 -1,95 -1,85 -0,1 -0,11 -1,9 Tabla No. 15. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) A B C D E 43 log10(NT/N0) a 1 horas log10 (NT/N0) a 2 horas log10 (NT/N0) a 4 horas log10 (NT/N0) a 6 horas log10 (NT/N0) a 10 horas log10 (NT/N0) a 14 horas 1,28 0,04 0,0025 -0,006 -0,2 0,68 -0,26 0,005 -0,008 -0,4 0,28 -0,52 0,08 -0,024 -0,6 -0,32 -0,76 -0,022 -0,54 -1,0 -1,12 -1,29 -0,065 -0,085 -1,5 -1,6 -1,85 -0,1 -0,115 -1,9 Tabla No 16 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 1horas K a 2 horas K a 4horas K a 6 horas K a 10 horas K a 14 horas A B C D E -3,31 -4,39 -3,61 -3,05 -2,37 -1,53 -5,1 -4,29 -3,42 -2,95 -2,24 -1,36 -5,04 -4,29 -3,41 -2,94 -2,22 -1,27 -5,08 -4,27 -3,44 -2,96 -2,26 -1,45 -1,23 -4,3 -3,51 -1,32 -2,37 -1,4 Tabla No. 17. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 1 horas K a 2 horas K a 4horas K a 6 horas K a 10 horas K a 14 horas A B C D E -4,78 -4,03 -3,20 -1,1 -1,75 -1,15 -3,14 -2,33 -1,42 -0,89 -0,2 1,09 -4,96 -4,16 -3,27 -1,2 -2,06 -1,48 -4,16 -4,03 -1,38 -1,1 -1,94 -1,20 -4,71 -3,81 -3,03 -1,07 -1,65 -1,02 Tabla No. 18. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 1 horas K a 2 horas K a 4 horas K a 6 horas K a 10 horas K a 14 horas A B C D E -4,79 -4,08 -3,33 -2,88 -2,32 -1,87 -4,2 -3,50 -2,73 -2,23 -1,62 -1,06 -3,32 -2,53 -1,62 -0,93 -0,01 0,52 -3,00 -2,17 -1,13 -0,16 -0,63 1,19 -3,28 -3,2 -1,58 -2,55 -2,01 -1,53 Tabla N0. 19. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) A B C D E 44 log(NT/N0) horas log(NT/N0) horas log(NT/N0) horas log(NT/N0) horas log(NT/N0) horas y minutos log(NT/N0) horas a 8 -0,38 -0,38 -0,048 0,035 -0,28 a 12 -0,65 -0,68 -0,62 -0,045 -0,58 a 18 -0,82 -0,88 0,14 -0,62 -0,81 a 24 -1,02 -1,22 0,18 -0,98 -1,25 a 24 30 -1,34 -1,24 0,30 -0,15 -1,57 a 25 -2,6 -2,6 -0,46 -0,33 -2,6 Tabla No. 20. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -0,89 0,22 0,025 -0,034 -0,2 -1,3 -0,61 -0,02 -0,033 -0,55 -1,42 -1,03 -0,043 -0,068 -1,1 -1,38 -1,28 -0,057 -0,079 -1,4 -1,86 -1,78 -0,09 -0,08 -1,8 -2,6 -3,0 -0,12 -0.41 -2,9 Tabla No. 21. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E 0,44 -0,35 0,006 -0,0016 -0,5 0,30 -0,64 0,012 -0,39 -0,8 -0,27 -0,80 -0,032 -0,061 -1,3 -1,1 -1,17 -0,06 -0,079 -1,4 -1,5 -1,78 -0,08 -0,10 -1,8 -2,3 -2,46 -0,21 -0,16 -2,0 Tabla No 22 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. 45 K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 3horas K a 5 horas K a 7 horas K a 9 horas K a 13 horas K a 23 horas A B C D E -3,94 -2,72 -2,97 -2,39 -1,97 -1,97 -3,79 -2,53 -2,83 -2,36 -1,19 -1,19 -3,79 -2,68 -2,45 -2,34 0,4 -0,40 -3,79 -3,02 -2,47 -2,39 1,02 -1,02 -3,85 -2,66 -2,96 -2,51 -1,66 -1,66 Tabla No. 23. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 3horas K a 5 horas K a 7 horas K a 9 horas K a 13 horas K a 23 horas A B C D E -3,56 -3,19 -2,56 -1,75 -1,15 -1,15 -1,83 -1,42 -2,3 -0,20 1,09 1,09 -3,71 -3,27 -2,79 -2,06 -1,48 -1,48 -3,55 -3,16 -2,55 -0,37 -1,2 -1,2 -3,36 -3,03 -2,46 -1,65 -1,022 -1,02 Tabla No. 24. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 3horas K a 5 horas K a 7 horas K a 9 horas K a 13 horas K a 23 horas A B C D E -4,08 -2,9 -2,88 -2,32 -1,87 -1,87 -3,5 -2,74 -2,4 -1,62 -1,06 -1,06 -2,53 -1,62 -0,93 -0,01 0,52 0,52 -2,17 -1,13 -0,93 0,63 1,19 1,19 -2,51 -1,58 -2,55 -2,01 -1,53 -1,53 Calculos realizados Para coliformes fecales y totales a T=1470 minutos x= 2438,49 K= -0.51 x= 1820,20 K= -0,2 x= 1216,52 K= 0,19 x= 2438,49 K= -0.51 Para T= 1500 minutos x= 1216,52 K= 0,2 46 x= 2559 K=-0,53 x= 2178 K= -0,37 x= 1986,7 K=-3.05 x= 2559 K=-0,53 Germenes totales Para T= 1470 minutos x= 1159,1 K= 0,23 x= 99,3 K= -2,7 x= 2438,5 K=-0,5 x= 1309,5 K=0,12 x= 1159,1 K=0,23 Para T=1500 x= 1092 K=0,31 x=1897 K=1,26 x=2559,5 K= -0,07 x= 2680 K=-0,58 x=4877 K=-1,17 Thiobacilus thioparus Para T= 1470 minutos x= 443,7 K= 1,2 x= 1089,2 K= 0,3 x= 464,6 K= 1,15 x= 18076 K= 2,09 x= 2438,5 K= -0,51 Para T= 1500 minutos x= 487,6 K= 1,12 x= 377,6 K= 0,25 x= 3,452 K= 1,46 x= 198,67 K= 2,03 x= 1897 K= -0,23 47 Coloformes fecales y totales Para T= 1080 minutos x= 3679 K= .1,22 x= 2670 K= -0,90 x= 2387 K= -0,79 x= 3012 K= -1,02 Para T= 720 minutos x= 4224 K= -1,77 x= 3826 K= -1,67 x= 3687 K= -1,63 x=3960 K= -1,48 X= 4224 K= -1,77 Para T= 480 minutos x= 5354 K= -2,440 x= 4325 K= -2,19 x= 4210 K= -2,17 x= 4618 K=-2,26 x= 5354 K= -2,40 Germenes totales Para T= 1080 minutos x= 2224 K= 1,6 x= 250 K= -0,63 x= 3454 K= -1,16 x= 2356 K= -0,78 x= 1987 K0 -0,61 Para T= 720 minutos x= 2898 K= -0,60 x= 320 K= 0,81 x= 3899 K= -1,68 x= 3210 K= -1,49 48 x= 2452 K= -1,22 Para T= 480 x= 3243 K= -1,9 x= 483 K= -0,006 x= 4452 K= -2,2 x= 3929 K= -2,099 x= 2985 K= -1,84 Thiobacilus Thioparus Para T= 1080 minutos x= 5123 K= -1,55 x= 1987 K= -0,26 x= 464,6 K= 0,84 x= 220 x= 3621 K= 1,6 K= -1,21 Para T= 720 minutos x= 5898 K= -2,1 x= 2689 K= -0,57 x= 532 K= -1,7 x= 290 K= 0,92 x= 4102 K= -1,74 Para T= 480 minutos x= 6432 K=-2,59 x=3345 K= -1,93 x= 681 K= -0,34 x=348 K= 0,32 x=4988 K= -2,34 Coliformes fecales y totales Para T= 840 minutos x= 3882 K= -1,53 x= 3284 K= -1,36 49 x= 2992 K= -1,27 x= 3573 K= -1,45 x= 3412 K= -1,4 Para T= 600 minutos x= 6454 K= -2,37 x= 5670 K= -2,24 x= 5520 K= -2,22 x= 5774 K= -2,26 x= 6429 K= -2,37 Para T= 360 minutos x= 7592 K= -3.05 x= 6889 K= -2,95 x= 6820 K= -2,94 x= 6992 K= -2,96 x= 7513 K= -1,32 Para T= 240 minutos x= 8902 K= -3,61 x= 7354 K= -3,42 x= 7300 K= -3,41 x= 7512 K= -3,44 x=8022 K= -3,51 Para T= 120 minutos x= 9755 K= -4,39 x= 8824 K= -4,29 x= 8789 K= -4,29 x= 8613 K=-4,27 x= 9013 K= -4,3 Para T= 60 minutos x= 1654 K= -3,31 x= 9988 K= -5,1 50 x= 9287 K= -5,04 x= 9722 K= -5,08 x= 1014 K= -1,23 Germenes totales Para T= 840 minutos x= 2645 K= -1,15 x= 282 K= 1,09 x= 3688 K= -1,48 x= 2789 K= -1,20 x= 2337 K= -1,02 Para T= 600 minutos x=3455 K= -1,75 x= 734 K= -0,20 x= 4703 K= -0,20 x= 4182 K= -1,94 x= 3137 K= -1,65 Para T= 360 minutos x= 4670 K= -1,1 x= 882 K= -0,89 x= 5890 K= -1,2 x= 4623 K= -1,1 x= 4211 K= -1,07 Para T= 240 minutos x= 5892 K=-3,2 x= 994 K=-1,42 x= 6344 K= -3,27 x= 5711 K= -1,38 x= 4998 K= -3,03 Para T= 120 minutos x= 6798 K= 4,03 51 x= 1243 k= -2,33 x= 7740 K= -4,16 x= 6813 K= -4,03 x= 5422 K= -3,81 Para T= 60 minutos x= 7223 K= -4,78 x= 1398 K= -3,14 x= 8602 K= -4,69 x= 7232 K= -4,16 x= 6723 K= -4,71 Thiobacilus thioparus Para T= 840 minutos x= 5482 K= -1,87 x= 2432 K= -1,06 x= 498 K= 0,52 x= 255 K= 1,19 x= 3882 K= -1,53 Para T= 600 minutos x= 6112 K= -2,32 x= 3039 K= -1,62 x=608 K= -0,01 x=318 K= -0,63 x= 4506 K= -2,01 Para T= 360 minutos x= 6422 K= -2,88 x= 3387 K= -2,23 x= 909 K= -0,93 x= 423 K= -0,16 x= 4601 K= -2,55 Para T= 240 minutos 52 x= 6757 K= -3.33 x= 3692 K= -2,73 x= 1210 K= -1,62 x= 744 K= -1,13 x= 1172 K0 -1,58 Para T= 120 minutos x= 7100 K= -4,08 x= 3999 K= -3,50 x= 1512 K= -2,53 x= 1054 K= -2,17 x= 1484 k= -3,2 Para T= 60 minutos x= 7242 K= -4,79 x= 4010 K= -4,20 x= 1668 K= -3,32 x= 1212 K= -3,00 x= 1605 K= -3,28 Coliformes fecales y totales Para T= 180 minutos x= 9342 T= -3,94 x= 8018 T= -3,79 x= 8032 T= -3,79 x= 8024 T= -3,79 x= 8532 T= -3,85 Para T= 300 minutos x= 6888 T= -2,72 x= 3788 T= -2,53 x= 6561 T= -2,68 x= 6142 T= -3,02 x= 6429 T= -2,66 53 Para T= 420 minutos x= 8247 K= -2,97 x= 7122 K= -2,83 x= 7060 K= -2,45 x= 7252 K= -2,47 x= 8116 K= -2,96 Para T= 540 minutos x= 6602 K= -2,39 x= 5739 K= -2,36 x= 5642 K= -2,34 x= 5888 K= -2,39 x= 6632 K= -2,51 Para T= 780 minutos x= 5622 K= -1,97 x= 1587 K= -1, 19 x=523 K= 0,40 x= 282 K= 1,02 x= 4122 K= -1,66 Para T= 1380 x= 9947 K= -1,97 x= 4577 K= -1,19 x= 925 K= -0,40 x= 499 K=-1,02 x= 7293 K= -1,66 Para T= 180 minutos x= 6345 K= -3,56 x= 1119 K= -1,83 x= 7359 K= -3,71 x= 6262 K= -3,55 x= 5210 K= -3,36 54 Germenes totales x= 7365 K= -3,19 x= 1243 K= -1,42 x= 7930 K= -3,27 x= 7139 K= -3,16 x= 6248 K= -3,03 Para T= 420 minutos x= 5448 K= -2,56 x= 1029 K= -2,30 x= 6872 K= -2,79 x= 5394 K= -2,55 x= 4913 K= -2,56 Para T= 540 minutos x= 3109 K= -1,75 x = 4233 K= -2,06 x= 374 K= -0,37 x= 2823 K= -1,65 x= 2456 K= -1,15 x= 262 K= 1,09 x= 3425 K= -1,48 x= 2590 K= -1,20 x= 2170 K= -1,022 Germenes totales Para T= 1380 x= 4345 T= -1,15 x= 463 K= 1,09 x= 6059 K= -1,48 x= 4582 K= -1,20 x= 3839 K= -1,02 Thiobacilus thioparus 55 Para T= 180 minutos x= 10650 K= -4,08 x= 5999 K= -3,50 x= 2273 K= -2,53 x= 1581 K= -2,17 x= 2226 K= -2,51 Para T= 300 minutos x= 8446 K= -2,90 x= 4615 K= -2,74 x= 1513 K= -1,62 x= 930 K= - 1,13 x= 1465 K= -1,58 Para T= 420 minutos x= 7492 K= -2,88 x= 3952 K= -2,4 x= 1061 K= -0,93 x= 494 K= -0,93 x= 5368 K= -2,55 Para T= 540 minutos x= 5501 K= -2,32 x= 2735 K= -1,62 x= 547 K= -0,01 x= 286 K= 0,63 x= 4056 K= -2,01 Para 780 minutos x= 5090 K= -1,87 x= 2258 K= 1,06 x= 462 K= 0,52 x= 237 K= 1.19 x= 3605 K= -1,53 56 Para T=1380 minutos x= 9013 K= -1,87 x= 3995 K= -1,06 x= 818 K= 0,52 x= 419 K= 1,19 x= 6378 K= -1,53 9. ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS Con bara de cobre y de plata no se han obtenido buenos resultados a 2 h y 24 horas siendo cobre algicida y reduciéndose los microorganismos en 20-40%. Los parámetros físico-químicos: Demanda química de oxígeno (DQO) 278-420 mg/L; Demanda bioquímica de oxígeno (DBO) 129-143 mg/l; sólidos suspendidos 20-24 mg/L; nitritos 0,03 mg/L sulfatos 117-148 mg/L; cloruros 6079 mg/L, nitrógenoamoniacal 30-40 mg/L. Se mostraran los valores log 10(NT/N0) para distintos tiempos de tratamiento y distintas dosis de desinfectantes. Para la muestra A se ha utilizado 0,2 mg/L de cloro libre y la mezcla Cu2+:Ag+ de 2:0,4 mg/L; para la muestra B se ha utilizado 0,3 mg/l de cloro libre, Cu2+:Ag+ de 1,4:0,3 mg/L, para la muestra C se ha utilizado Cu2+:Ag+ de 0,3:0,04 mg/L; para la muestra D se ha utilizado Cu2+:Ag+ 0,4:0,03 mg/L y, para la muestra E se ha utilizado 0,4 mg/L de cloro libre, Cu2+:Ag+ 1,4:0,03 mg/L. Como se observa en las tablas 1,2 y 3 analizando todas las muestras el número de horas es importante en tomar en cuenta los resultados de modo que mayor tiempo implica una mayor desinfección con resultados de log 10(NT/N0) entre -2,28 hasta -3,29. Para las muestras C y D donde no se ha utilizado cloro se observa un menor efecto con diferencia de casi 1 o 2 en los resultados. Comparando entre B y E los resultados son casi similares con 0.1 mg/L más de cloro. Un efecto favorable para desinfección con cloro, cobre y plata se ve en Tabla 2 para gérmenes totales y un menor efecto para Thiobacillus Thioparus en la Tabla 3 con valores máximos de -2,18 y -2,56. De todos modos a 25 horas se obtuvieron resultados muy buenos de reducción de agentes patógenos en un 100%. El tiempo y los resultados obtenidos son influenciados por la presencia de amoniaco y otras materias orgánicas que interfieren tomando en cuenta los resultados obtenidos y descritos anteriormente de los parámetros f ísicoquímicos. Las materias coloidales en suspensión absorben iono de plata motivo 57 por cual se ha observado unos bajos rendimientos a poco tiempo de ensayo y en las muestra con 0,3 de plata. De mismo modo fosfatos, cloruros, sulfuros y sulfatos impiden actividad de la plata. Cuando se utiliza cobre en recipientes, y conductos de cinc, aluminio, se debe tener cuidado porque produce la corrosión de esos metales. Para evitar la precipitación de Cu2+ en sales insolubles se adiciona KNa -tartrato que forma complejos y mantiene el cobre soluble en rangos de 0,06-0,63 ppm. Los hidróxidos metálicos, quelación de componentes de tipo ácido húmico u orgánicos reducen el efecto del cobre. Las concentraciones de óxido disuelto, luz y salinidad influyen sobre la actividad de cobre y plata. El pH debe ser ≤7.3 para la eficacia de cloro libre y la solubilidad de metales. Temperatura, alcalinidad y pH son parámetros que influyen en la actividad del cobre. En las tablas 4,5 y 6 se observan las mismas conclusiones de antes, los valore de k oscilan entre -1,3 y 3,75 para los mejores resultados. En las Tablas 7,8 y 9 se muestran los valores del log 10(NT/N0) para distintos tiempos de tratamiento y distintas dosis de desinfectantes. Para la muestra A se ha utilizado 0,2 mg/L de cloro libre y la mezcla Cu2+: Ag de 2:0,4 mg/L; Para la muestra B sea utilizado 0,3 mg/L de cloro libre, Cu2+: Ag+ de 1.4:0.3 mg/L; para la muestra C se ha utilizado Cu2+: Ag+ de 0,3:0,04 mg/L; para la muestra D se ha utilizado Cu2+:Ag+ 0,4:0,03 mg/L y, para la muestra E se ha utilizado 0,4 mg/L de cloro libre, Cu2+:Ag+ 1,4:0,03 mg/L y electrodo de cobre : plata 10:1. En la Figura 1 se muestran por microscopia electrónica el electrodo de cobre – plata. En la parte oscura se observan diferentes concentraciones de 1:3, 5:1 y 6.14:1, teniendo Fm3m (225) y a =3.615. También de los datos se ha observado presencia de oxígeno en 7,94%, Si de 1,14%; 4,59% y 0,87 % como 5,55% y 0,36%. La presencia de oxígeno demuestra la reactividad de cobre y plata en la superficie. Analizando las tablas 7,8 y 9 de todas las muestras el número de horas es importante en tomar en cuenta, de modo que mayor tiempo implica una mayor desinfección con resultados de log 10(NT/N0) entre –3 y 1. Par las muestras C y D donde no se ha utilizado cloro se observa un menor efecto con diferencia de casi 3 o 2 en los resultados. Comparando entre B y E los resultados son casi similares con 0.1 mg/L más de cloro. Un efecto favorable para desinfección con cloro, cobre y plata se ve en Tabla 8 para gérmenes totales y un menor efecto para ThiobacillusThioparus en la Tabla 9 con valores máximos de 2,09. De todos modos a 25 horas se obtuvieron resultados muy buenos de reducción de agentes patógenos en un 100%. El tiempo y los resultados obtenidos son influenciados por la presencia de amoniaco y otras materias orgánicas que interfieren tomando en cuenda los resultados obtenidos y descritos anteriormente de los parámetros físico-químicos. Las materias coloidales en suspensión absorben iono de plata motivo por cual se ha observado unos bajos rendimientos a poco tiempo de ensayo y en las muestra con 0,3 de plata. De mismo modo fosfatos, cloruros, sulfuros y sulfatos, materia orgánica impiden la 58 actividad de la plata. Cuando se utiliza cobre en recipientes, y conductos de cinc, aluminio, se debe tener cuidado porque produce la corrosión de esos metales. Para evitar la precipitación de Cu2+ en sales insolubles se adiciona KNa -tartrato que forma complejos y mantiene el cobre soluble en rangos de 0,06 -0,63 ppm. Los hidróxidos metálicos, quelación de componentes de tipo ácido húmico u orgánicos reducen el efecto del cobre. Las concentraciones de óxido disuelto, luz y salinidad influyen sobre la actividad de cobre y plata. El pH debe ser ≤7.3 para la eficacia de cloro libre y la solubilidad de metales. Temperatura, alcalinidad y pH son parámetros que influyen en la actividad del cobre. En las tablas 10,11 y 12 se observan las mismas conclusiones de antes, los valore de k oscilan entre -1,3 y 3,75 para los mejor resultados. En las Tablas 13, 14 y 15 se muestran los valores del log 10(NT/N0) para distintos tiempos de tratamiento y distintas dosis de desinfectantes. Para la muestra A se ha utilizado 0,2 mg/L de cloro libre y la mezcla Cu2+: Ag+ de 2:0,4 mg/L; Para la muestra B sea utilizado 0,3 mg/L de cloro libre, Cu2+: Ag+ de 1,4:0,3 mg/L; para la muestra C se ha utilizado Cu2+: Ag+ de 0,3:0,04 mg/L; para la muestra D se ha utilizado Cu2+:Ag+ 0,4:0,03 mg/L y, para la muestra E se ha utilizado 0,4 mg/L de cloro libre, Cu2+:Ag+ 1,4:0,03 mg/L. En la Tabla No. 13 para las muestras con cobre y plata C y D, se obtuvieron una reducción de -0,031, -002 log 10, 0,35 y -0,16 log 10, observándose la poca actividad de cobre con plata. En cambio para la muestra E se obtuvo el valor de -1.64log10 para 14 horas siendo semejantes los valores con las muestras A y B. Para gérmenes totales se obtuvieron mejor resultados que con coliformes, tabla No.2. de 1,85-1,9 log10. Se observa en la tabla No. 3 para T. Thioparus que los valores son menores que para coliformes y bacterias totales dando de entender que es aconsejable emplear más cantidad de cobre y plata para obtener mejores reducciones. En las tablas 16, 17 y 18 se describe la variación del coeficiente de K que toma en cuenta y el tiempo de reacción como importante obteniéndose valores entre 1,15 y -1,87 como máximos. El tiempo y los resultados obtenidos son influenciados por la presencia de amoniaco y otras materias orgánicas que interfieren tomando en cuenta los resultados obtenidos y descritos anteriormente de los parámetros físicoquímicos. Las materias coloidales en suspensión absorben iono de plata motivo por cual se ha observado unos bajos rendimientos a poco tiempo de ensayo y en las muestra con 0.3 de plata. Igual los fosfatos, cloruros, sulfuros y sulfatos impiden actividad de la plata. Los hidróxidos metálicos, quelación de componentes de tipo ácido húmico u orgánicos reducen el efecto del cobre. Las concentraciones de óxido disuelto, luz y salinidad influyen sobre la actividad de cobre y plata. El pH debe ser ≤7.3 para la eficacia de cloro libre y la solubilidad de metales. Temperatura, alcalinidad y pH son parámetros que influyen en la actividad del cobre. 59 En las Tablas 19, 20 y 21 se muestran los valores del log 10(NT/N0) para distintos tiempos de tratamiento y distintas dosis de desinfectantes. Para la muestra A se ha utilizado 0,2 mg/L de cloro libre y la mezcla Cu2+: Ag+ de 2:0.4 mg/L; Para la muestra B sea utilizado 0,3 mg/L de cloro libre, Cu2+: Ag+ de 1,4:0,3 mg/L; para la muestra C se ha utilizado Cu2+: Ag+ de 0,3:0,04 mg/L; para la muestra D se ha utilizado Cu2+:Ag+ 0,4:0,03 mg/L y, para la muestra E se ha utilizado 0,4 mg/L de cloro libre, Cu2+:Ag+ 1,4:0,03 mg/L. En la Tabla 19 para muestra A se obtienen reducciones mayores para 23h de 2.6log comparando con 3h obteniéndose 0.38log, los valores para muestra B y E son casi iguales con la muestra A, en cambio se ve que sin cloro los metales tienen un menor efecto bactericida, con valores de 0.46log y -0.33log de reducción.En la Tabla 20 para gérmenes totales hy para muestra A mayor reducción que los coliformes fecales y totalesy muecho menor reducción cuando se utiliza Cu:Ag.Thiobacilis Thioparus presenta, Tabla 21, una mayor resistencia a estos desinfectantes., siendo máximo valor de -2.46log. De todos modos a 23 horas se obtuvieron resultados muy buenos de reducción de agentes patógenos en un 98%. El tiempo y los resultados obtenidos son influenciados por la presencia de amoniaco y otras materias orgánicas que interfieren tomando en cuenda los resultados obtenidos y descritos anteriormente de los parámetros físico químicos. Las materias coloidales en suspensión absorben iono de plata motivo por cual se ha observado unos bajos rendimientos a poco tiempo de ensayo. De mismo modo fosfatos, cloruros, sulfuros y sulfatos impiden actividad de la plata por este motivo se han observado en todas las tablas unas pequeñas diferencias para log. Los hidróxidos metálicos, quelación de componentes de tipo ácido húmico u orgánicos reducen el efecto del cobre. Las concentraciones de óxido disuelto, luz y salinidad influyen sobre la actividad de cobre y plata. El pH debe ser ≤7.3 para la eficacia de cloro libre y la solubilidad de metales. Temperatura, alcalinidad y pH son parámetros que influyen en la actividad del cobre. En las tablas 22, 23 y 24 se observan las mismas conclusiones de antes.Los valore de k oscilan entre -3,86 - -3,94 para coliformes fecales y totales a 3 h, 2,53 y -2,72 para 5 h,-2,45 y -2,96 para 7 h, -2,33 y -2,51 para 9 horas,-1,19 y 1,02 para 13 h y, -0,40 y 1,97 para 23 horas. Mayor valor para K significa mayor reducción de microorganismos. 10. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES Como sea descrito anteriormente el método propuesto resulta ser eficiente apara 25 horas en la desinfección de aguas residuales urbanas tratadas, encontrando 60 buena respuesta en la eliminación de las bacterias: coliformes fecales y totales, gérmenes totales y Thiobacillus Thioparus. Además de esto el método es sugerido por su bajo costo, de instalaciones fáciles de aplicar y para el agua que posteriormente se puede utilizar en industria, tuberías de hospitales etc. Se encontró que la mezcla de iones de Cu-Ag en combinación con bajos niveles de cloro libre presenta la misma eficiencia que si se empleara solamente cloro libre en altas concentraciones. Utilizando los electrodos de cobre con plata resulta más económico que empleando sales de metales. El método propuesto resulta ser suficientemente eficiente para 14 horas en la desinfección de aguas residuales urbanas tratadas, encontrando buena respuesta en la eliminación de las bacterias: coliformes fecales y totales, gérmenes totales y Thiobacillus Thioparus. Se recomienda utilizar tiempos mayores de 14 horas para una mejor desinfección. También se recomienda a utilizarse el método para tratamientos de agua en industria. Después de los demás tratamientos primario y secundario, dependiendo de situación, posteriormente se puede utilizar en industria, o como riego. Se recomienda hacer ensayos con electrodos y sales de cobre y plata para un mejor resultado. Se recomienda utilizarse en futuros ensayos la unidad Electronic Pool Purity Unit model UTP2; Tarn-Pure USA, Las Vegas New y se recomienda alcalinidad entre 80 y 120 mg/l. Tomando en cuenta las instalaciones propuestas para recirculación de agua caliente en hospitales y para piscinas y agua potable en la literatura se han encontrado desventajas de acumulación de sedimentos y la limpieza frecuente de electrodos propongo otro tipo de instalación de electrodos de la siguiente figura: 61 En esta instalación de 4 electrodos de cobre:plata dispuestos en par en paralelo se utiliza 0,5 A y 32 V aproximadamente y no esta en el circuito de las aguas. Tiene un panel de control y regularización de voltaje y corriente y es acoplada con apoyo del panel de control con el depósito de la solución de hipoclorito de sodio. El agua del recipiente donde están los electrodos es agua del grifo para una mejor electrólisis por presencia de sales y se inyecta en la depuradora antes de salida del agua al rio o cauce deversor, en un estanque construido para tratamiento terciario de las aguas de la depuradora. Se genera cobre:plata en porcentaje de 90:10. Asimismo del deposito de hipoclorito de sodio la solución se injecta en el mismo lugar que el anterior. Los electrodos tienen la dimensión de 180x50 mm2 y de grosor 30 mm. La ventaja es de generar los iones metálicos sin que sean afectados los electrodos por la composición de las aguas residuales tratadas, pH, alcalinidad, sólidos en suspensión y se evita la frecuente limpieza de los electrodos. Se puede además controlar la cantidad de iones generada en la solución y variar la corriente y voltaje en función de las necesidades. Adicionalmente se puede utilizar otro recipiente donde se prepara la solución de sales de cobre y plata inyectandola en el mismo estanque de tratamiento terciario. 62 11. Bibiografía 1. Abad F.X., Pintó R.M., Diez J.M., Bosch A., 1994, Disinfection of human enteric viruses in wáter by cooper and silver in combination with low levels of chlorine. Applied and environmental microbiology, vol.60, 7, 2377-2383. 2. Abelson P.H. and Aldouse, Elaime, J. Bat., 60, 1950, 401. 3. Adaskavey J. E. and Hine R.B., 1985, Copper tolerance and zinc sensitivity of Mexiicaan Strains of xanthomonas campestris pv. Vesicatoria, casual agent of bacterial spot of pepper, Plant Dis., 9, 993. 4. Alejandro Divo, 1971, Microbiología Médica, Nueva Editorial interamericana. 5. Alice L. Smith, 1980, Fundamentos de microbiología, UNAS ediciones Universidad de Navarra, S. A. Pamplona. 6. American Water Works Association, 1975, Control de calidad y tratamiento del agua, Instituto de Estudios de Administración local, 182-185, Madrid. 63 7. Bbich H., Stotzky G., 1980, Environmental factores that influence the toxicity of heavy metal and gaseous pollutants to microorganismos, CRC Crit. Rev. Microbiol., 8 (2), 99. 8. Baker, M.N., 1948, “The Quest for pure wáter”, Lancaster Press, Inc., Lancaster, Pa. 9. Barton J.K., Lippard S.J., 1980, Heavy metal interaction with nucleic acids, in Nucleic Acid-Metal Interactions, Spiro T.G., de, John Wiley &Sons, New York, 33. 10. Bender c.l., Cookesey D.A., 1986, Indigenous plasmids in Pseudomonas syringae pv. Tomato and Xanthomonas campestris pv. Vesicatoria in tomato and pepper sedes, Phytopathology, 72, 1143. 11. Berger T.J., Spadaro J.A., Chapin S.E., Becker, 1976, Electrically Generated Silver Ions: Quantitative Effects on bacterial and mammalian cells, Antimicrobial agents and chemotherapy, 357-359, 2, 2. 12 Bitton G., Freihofer V., 1978, Influence of extracelular polysaccharrides on the toxicity of copper and cadmium towards Klebsiella aerogenes, Microbial Ecology, 4, 119-125. 13. Bob A. Freeman, 1986, Ph. D. Microbiología de Burrows Emalsa S.A. Hilarión Eslova. 14. Brown M.R.W., Anderson R.A., 1968, The bactericidal effect of silver ion son Pseudomonas aerruginosa, J. Pharm. Pharmac, 20, suppl., 15-35. 15. Buffle J., 1984, Natural organic matter and metal organic interactions in aquatic systems, In Metal Ions in Biological Systems, Siegel H., de Marcel Dekker, New York, 18, 165. 16. Butler M., Medlen A.R., Taylor G.R., 1985, Electrofocusing of viruses and sensitivity to disinfection, Water Sci Technol., 17, 201. 17. Buzzo A., Soria M.F., 1960, Toxicología, López Libreros Editores SRL. 18. Carr a.s.a, Wodkowski T.J., Rosenkronz H.S., 1974, Silver sulfadiazine in vitro antibacterial activity, Antimicrobial Agents Chemother, 6:498-500. 19. Castro Martínez Elena, 1980, Manual de Ingeniería ambiental, Escuela de Organización Industrial, D.L., Madrid, 177, 3. 20. Clarke N.A., 1983, Disinfection of drinking wáter, swimming pool wáter, and treted sewage effluents, In Disinfection, Sterilization and Preservation, Edited by S.S. Block Lea & Febiger, Philadelpha, 524-541. 21. Cliver D.O., Foell W. K., Goepfert J.M., 1971, Biocidal eeffects of silver, Final Technical Report Contract Nas. 9-9300, University of Wisconsin, Madison, February. 64 22. Cookesey D.A., 1987, Characterización of a copper resistent plasmid conserved in copper-resistant strains of Pseudomonas syninyae pv. Tomato, Appl. Environ. Microbiol., 53, 454. 23. Curtis D. Kassen, 1995, Toxicology, Mc. Graw Hill. 24. Curtis D., Kassen Ph. D., Mary O. Andur, Ph. D. John Doull, M.D., 1986, Toxicology, Mamillan Publishing Company, p.612. 25. Chambers Cecil W., Charles M. Proctor, Paul Kabler W., 1962, Bactericidal Effect of Low Concentrationas of Silver, J. AWWA, 54:208. 26. Chambers Cecil W., Leslie a. Chambers, Paul Kabler W., 1953, New Colloidal Silver Disinfectant : Effect of Environmental Factor son Bactericidal Action, Ind. Eng. Chem., 45:2569. 27: Chang S.L., 1970, Modern Concept of desinfection, in Proc. Natl. Special Conf. Disinfection, American Society of Civil Engineers, New York, 635. 28. Chang T.W., Weistein L., 1975, In vitroactivity of silver sulfadiazine against Herpesvirus hominis, J. Infect. Dis, 132, 79. 29. Chick H., 1913, Factors conditioning the velocity of disinfection, Chem. Ads., 7, 2273. 30. Daune M., 1974, Interactions of metal ions with nucleic acids, in Metal Ions In Biological Systems, vol.3, Sigel H., De., Marcel Dekker, New York 2. 31. Davis B.D., Dulbeco R., Eisen H.N., Ginsburg H.S., 1984, Tratado de microbiología, 3ra edición Salvat Editores, S.A. 32. Davydorva S.L., 1979, Macromoleculas of biological interest in complex formation, in metal ions in Biological Systems, Sigel H., De., Mercel Dekker, New York, 8, 183. 33. Den Dooren de Jorg, L.E. Antonio van Leeuwenhoek, 1965, 31, 301-313. 34. Domek M.J., Le Chevalier M.W., Camerun S.C. &Mc Feter G.A., 1984, Evidence for the role of cooper in injury process of coliform bacteria in drinking wáter, Applied and Environmental Microbiology, 48, 289-293. 35. Domek M.J., Robbinson J.E., Anderson M.E. &Mc Feter G.A., 1987, Metabolism of Escherichia coli injured by copper, Canadian Journal of Microbiology, 33, 57-62. 36. Dr. M. Christian, 1911, Disinfection, Leipzig, G. J. Goeschensche Verlagshandlung. 37. Dubes G.R., Al-Moslih M.Y., 1980, Effect of inactivator(s) formed from copper and phenol impurity(ies) on the sedimentation rate of transfective poliovirion RNA, Arch Virol., 66, 45. 38. Dy Chdala G.R., Chlorine and chlorine compounds, In S.S. Block, Disinfection, sterilization and preservation, Lea & Febiger, Philadelphia, 1983. 65 39. Edebo L., Singh M.P., Hoglund S., Inactivation of some coliphages with copper-thiol complexes, J. Gen. Virol., 1, 567, 1967. 40. Editorial Catolica toledana: Desinfección y Desinsectación, Selecciones Científicas, 1929. 41. Ehrlich H.L. and Fox, S.Y.. Appl. Microbiol., 15, 135-139, 1967. 42 Eichhorn G.L., Clark P., Interactions of metal iono with polinucleotides and related compounds. The unwinding and rewinding of DNA stronds under the influence el Copper (II) ion, Proc. Natl. Acad. SCI, USA, 53,586, 1965. 43. Eichhorn G.L., Berger N.A., BUTZOW J.J., Clark P., Heim J., Pitha J., Richardson C., Rifkind S.M., Shin Y., Tarien E., Some effects of metal ion son the structure and function of nucleic acids, in Metal Ions in Biological Systems, Dhar S.K., De. Plenum Press, New York, vol. 40, 43,1973. 44. Fawcett W. M. D., James W. Newberne D.V.M., Workshopon Cellular and Molecular Toxicology Pharmaceutical Manufactures Association Foundation, Inc., 1979. 45. Faecett W., James M.D., Newberne James W. Workshop on Cellular and Molecular Toxicology. Pharmaceutical Manufactures. Association Foundation, Inc., 496, 1979. 46. Friedman B.A., Dugan P.R., Concentration and accumulation of metallic ions by the bacterium Zoogloea. Dev. Ind. Microbiol., 9, 381-387, 1968. 47. Frobisher Hinsdill Grobter, Godhert, Fundamentals of microbiology, W. B. Sauders Company, 1974. 48. Gardiner R. E., Hobbs N.J., Jeffery J., Hydrogen peroxide a real alternative to chlorine in wáter treatment, In Water Chlorination Jolly, R.L., de., Ann Arbor Science Pub. Ann Arbor, 405, 1983. 49. Gerba C.P., UNPUBLICHED DATA. 50 Gerrard J. Tortore, Berdell R. Funkel, Christine L. Case, Microbiology, The Benjamen, Cumings Publishing Company, INC., 1989. 51. Grier N., Silver and compounds, in Disinfection Sterilization and Preservation, Block S.S., De, Lea & Febiger, Philadelphia, 375, 1983. 52. Grimmel M., Ziirre R., Koch, G. Fluorescense spectophotometric study of structural alterations in the capsid of poliovirus, Arch. Virol., 78, 191, 1983. 53. Guest H.L., Salle A.J., 1942, Proc Soc. exp. Biol., N.Y., 51, 272. 54. Hatano M., Nozawa T., Catalytic activity of poly-L, alpha-aminoacid metal ion complexes, new aproches to enzime models, in Metal Iones in Biological Systems, vol. 5, SIGL H., De., Marcel Dekker, New York, 1976, 246. 66 55 Hay R.W., Metal ion-catalysed decarboxilation of biological interest in Metal Ions in Biological Systems, vol. 5, Sigel H., De., Marcel Dekker, New York, 127, 1976. 56. Hay R.W., Morris P.J., Metal ion promoted hydrolysis in Metal Ions in Biological Systems, vol. 5, Sigel H., De., Marcel Dekker, New York, 173, 1976. 57. Hendy A.Y., Stewart Y.O., Silver resistent Enterobacteriaceae from hospital patients, Can. J. Microbiol., 25, 915, 1979. 58. htttp://www.fwimall.com/carperonefw/h2opure ntm 59. Hudson P.B., Sanger G., Edith. E.J. Amer. Med. Ass., N0 169, 549,1959. 60. Huff J.W., Sastry K.S., Gordon M.P., Wacker W.E.C., The action of metal ion son tabacco mosaic virus ribonucleica cid, Biochemistry, 3, 501, 1964. 61. Hugo B. Inhibition and destruction of the Microbial Cell, Academic Press London New York, 1971. 62. Hugo W.B.&Russell A.D., Types of antimicrobial agents. In Principales and Practices of Disinfection, Preservation and Sterilisation de Russell A.D., Hugo W.B. & Agliffe G.A.J., Oxford, Blackell. 63. Hutchinson D.W., Metal chelators as potential antiviral agents, Antiviral Res., 5, 193, 1985. 64. James G.V., Water Treatment, 4 th de., CRC Press, Cleveland, OH., 38, 1971. 65. Jordan F.T., Nassar T.J., The influence of copper on the survival of infectious bronchitis vaccine virus in wáter, Vet Rec., 89, 609, 1971. 66. José Antonio Pérez López, Miguel Espigares García. Estudio sanitario del agua. Universidad de Granada, 1995. 67. José Catalan Lafuente, 1981, Química del agua, Talleres Gráficos Alonso S.A. 68. José Luis Sagripanti. Metal-based formulations with high microbicidal activity. Applied and environmental micribiology, sept., vol. 58, N09, 3157-3162, 1992. 69. José Luis Sagripanti, Licia B. Roustson, David Lytle. Virus Inactivation by Copper or Iron Ions Alone and in the presence of peroxide Applied and Environmental microbiology, 1993, 59, 12, 4374-4376. 70. Kosarek L.J., Removal of varius toxic heavy metals and cyanide from water by membrane proesses, In W.J. Cooper, Chemestry in water reuse, vol.1, AnnArbor Science Publishers, Inc., Ann Arbor. Mich., 1981. 71. Koski T.A., CAHEN j.h.s., Methods of testing virucides, in Disinfection, Sterilization and Preservation, Blok S.S., De Les&Febiger, Philadelphia, 116, 1977. 67 72. Kutz S.M., Landeen L.K., Yahya M.T., Gerba C.P., Microbiological evaluation of copper: silver disinfection units. Proceedings of the Third Conference on Progress in Chemical Disinfection, Binghamton, April 1988. 73. Ladron J. de Guevara, Moya Preyo V., Mc. Graw- Hill Interamericana de España, Toxicología médica clínica y laboral, 1995. 74. Ladron J. de Guevara, V. Moya Pueyo. Toxicología Médica. Interamericana Mc. Graw Hill, 1980. 75. Lawrence C.A., Block S.S., Disinfection, sterilization and preservation, in disinfection, sterilization and Preservation, Block S.S., Disinfection, sterilization and preservation, in disinfection, sterilization and Preservation, Block S.S., De., Lea&Febiger, Philadelphia, 1968. 76. Le Chevalier M.W., Cawthon, Rmon G.L., Mechanisms of bacterial survival in chlorinated drinking wáter, Wat. Sci. Tech. 20, 145, 1988. 77. Lee K. Landeen, Moyeser T.Yahya, Charles P.Gerba, Efficacy of Copper and Silver ions and redduced levels of free chlorine in Inactivation of Legionella pneumophila, Applied and environmental microbiology, Dec., 3045-3050, 5,12,1989. 78. Lee K. Landeen, Moyasar TYahya, Susan M. Kutz, Charles P. Gerba, Microbiological evaluation of copper:silver disinfection units for use in Swimming pools. Water Science and Technology, 1989, 21, 3, 267-270. 79. Lee K. Landeen, Moyasar T. Yahya, Susan M. Kutz, Charles P. Gerba, Units for use in swimming pools, Water Microbiology, 1989, 21, 3, 267-270. 80. Liu Z. Stout J. E., TedscoL., Boldin M., Hwang C., Diven W.F., Yu V.L., Controlled evaluation of copper-silver ionization in eradicating Legionella from a hospital wáter distribution system, J. Infections Diseas, 169, 919-922, 1994. 81. Lorenzo Vilas. Apuntes de microbiología, Editorial S.A.E.T.A., Madrid, 1975. 82. Lorian V. Antibiotics in Laboratory Medicine, Williams&Wilkins, Naltimore, 539-545, 1991. 83. Luis Marruecos, Santiago Nogué, Joan Nolla. Toxicología clínica, SprongerVerlag Ibérica, S.A. Barcelona, 1993. 84. Lund E. The significance of oxidation in chemical inactivation of pooliovirus, Arch. Ges. Virusforsch, 12, 648, 1963. 85. Mac Leod R.E., Kuo S.C., Gelinas R.J., 1967, 93, 969-970. 86 Martin Guy, 1982, Point sur l¨épuration et le traitment des effluents, vol I, 146. 87. Martin R.B. y Marian Y.H.., Interaction between metal ions and nucleic bases, nucleosides, and nucleotides in solution, in Metal Iones in Biological Systems, Sigel H., De., Mercel Dekker, New York, 57, 8, 1979. 68 88. Martin R.B., Bioinorganic chemistry of metal ion toxicity, in Metal ions in Biological Sytems, Sigel H., De., Marcel Dekner, New York vol 3, 21, 1986. 89. Martin R.B., Acid-catalyzed ester hydrolysis, J.AM. Chem. Soc., 89, 25001, 1967. 90. Matilla V., A. Pumarola, J. Bravo Oliva, R. Gomez Lus y colab. Microbiología y parasitología, Maro- Ediciones Publicaciones, 1980. 91. Matthew J. Domek, Mark W. Lechevallier, Susan C. Cameron, Gordon A., McFeters. Evidence for the Role of Copper in the process of coliform bacteria in drinking wáter. Applied and environmental microbiology, 48, N02, 289-293, 1984. 92. Mayor Reireid, E.S. Garvey, Electronic wáter treatment:gelting the control right, Water Environment International, 1996, 5, 38, 30-32. 93. McCoy E.C., Rosenkranz H.S., Silver sulfsdiazine lack of mutagenic activity, Chmotherapy, 24, 87, 1978. 94. Michael Pelczar J., Roger D. Reid, Microbiologia, Libros MC. Graw-Hill, 1966. 95. Modak S., Fox C.L.; Synergestic action of silver sulfadiazine and sodium piperacillin on resistent Pseudomonas aeruginosa in vitro and in experimental burn wound infections, J. Trauma, 25, 27, 1985. 96. Montgomery Engineers Inc., Water Treatment Principales and Design, WileyInterscience, New York, 268-270, 1985. 97. Moroz O.G., Kul`skii L.A., Prokuryakova N.B., Rudenko A.V.; Florensova K.M. Susceptibility of organismos which cause intestinal infections to removal by silver Khim., Technol. Chiev, 2, 273, 1980. 98. Moyasar T. Yahya, Lee K. Landeen, Maria C. Messina, Susan M.Kutz, Richard Schulze, Charles P. Gerba, Desinfection of bacteria in wáter systems by using electrolytically generated copper:silver and reduced levels of free chlorine. Canadian Journal of Microbiology, 36, 2, 1989, 109-116, 1989. 99. Moyasar T. Yayha, Susan M. Keutz, Lee K. Landeen, Charles P. Gerba, Swimming Pool Desinfection, Journal of Environmental Health, 51, 5, 1989, 282285, 1989. 100. Naeem Mahmood S., Sitwat Naeem, Naima Baset, Tanzil Haider Usmani, Microbial evaluation of silver coated impregnated sand for purification of contaminated wáter. Environmental Technology, 14, 151-157, 1993. 101. Nageli, Carl von: Uber ologodinamischen Erscheirungen in lebeden Zellen, Scheiz Natur Ges., 33:1, 1893. 102 Netzer A., Huyehes D.E., Adsorption of copper lead and cobalt by activate d carbón Water Res., 18, 927, 1984. 103. Newton W.L., Jones M.F. Effextiveness of silver ions against cysts of Entamoeba histolytica, J. Am. Water Works Assoc., 41, 1027, 1949. 69 104. O¨Meara, R.A.Q. and Macsween J. C.J. Path. Bact., 43, 373, 1936. 105. O´Meara, R.A.Q. and Macsween J.C.J. Path. Bact., 44, 225, 1937. 106. Pedhazur, Shuval H.Y., Ulitzur S., Silver and hydrogen peroxide as potential drinking wáter. Disinfectants, Their bactericidal effeccts and posible, modes of action, Wat. Sci. Tech., 35, 11-12, 87-93, 1997. 107. Petrewig H.G., Parmocology and toxicology pf heavy metals silver, Pharmacol. Ther., 1, 127, 1976. 108. Phyle B.H., Broadaway S.C., G.A. McFeters, Efficacy of copper and silver ions with iodine in the inactivation of Pseudomonas cepacia, Journal of applied bacteriology, vol. 72, p.71-79. 109. Pierce G.E., Grim J.J., Reiber E.E., Microbial evaluation of activated carbón and silver impregnated filters for use in potable wáter systems. Dev. Ind. Microbiol., 20, 455-461, 1978. 110. Plastouryou M., Hoffman M.R., Transformation and fate of organic esters in layered-flow systems the role of trace metal catalysis, Environ. Sci. Technol., 18, 756, 1984. 111. Prased D., Henry J.G., King A., Coliform inactivation in sludge by copper sulfate, Can. J. Civ. Eng., 20, 814-819, 1993. 112. Public Health Service U.S.:Drinking Water Standards, U.S. Government Printing Office, Washington, D.C., USPHS Pub N0 96, 1962. 113. Pumarola A., Rodríguez A. Torres, J.A. García, Microbiología y Parassitología Medica, Masson Salvat Medicina, 1987. 114. Rafael Marin Galvin, Química, microbiología, tratamiento y control analítico de aguas, Universidad de Córdoba, 1996. 115. Rahn R.O., Landry L.C., Setlow J.K., Ultraviolet irradiation of nucleic acids complexed with heavy atoms. Influence of Ag + and Hg2+ on the sensitivity of phage and of transforming DNA to ultraviolet radiation, Photochem. Photobiol., 18, 39, 1973. 116. Rahn R.O., Landry L.C., Ultraviolet irradiation of nucleic acids complexed with Ag, Photochem. Photobiol., 18, 29, 1973. 117. Rami Pedahzur, Osadia Lev, Badri Fattal, Hillel Y. Shuval The interaction of silver ions and hidrogen peroxide in the inactivation of E. coli, A preliminary evaluation of a new long acting residual drinking wáter disinfectant, Wat. Sci. Tech., vol. 31, N0 5-6, p. 123-129, 1995. 118. Raulin, J. Chemistry of Vegetation, Sci. Nat., 11:93, 1869. 119. René Fabre, René Truhaut, Compendio de Toxicología Imprenta Universitaria, Tomo II, 1962. 120. Renn Charles, A reexamination of Oligodinamic Desinfection. 70 121. Ricketts C.R., Mechanism of prophylaxis by silver compound against infection of burns, Br., Med. J., 2, 444, 1970. 122. Richard H., Schreiber J.P., Duane M., Interactions of metallic ions with DNA, DNA mechanism in the presence of Cu (II), Bioplymers, 12, 1, 1973. 123. Richards R.M.E., Antimicrobial action of silver nitrate, Microbios, 31, 83, 1981. 124. Rifkind J.M.E., Antimicrobial action of silver nitrate, Microbios, 31, 83, 1981. 125. Robert B. Thurman, Charles P. Gerba, The moleular mechanisms of copper and silver ion disinfection of bacteria and viruses. Critical Reviews in Environmental Control, vol. 18, issue 4, 1989. 126. Robert B. Thurman, Charles P. Gerba. The molecular mechanisms of copper and silver ion disinfection of bacteria and viruses. Criteecal Reviews in Environmental Control, vol. 18, issue 4, 1989. 127. Rook J.J., Formation of haloforms during chlorination of natural waters, J. Wter Treat. Examen., 23, 134, 1974. 128. Rosenberg B., Renshav E., Vnacamp L., Hartwik L., Drobnik J.J. Bact., N0 93, 716-722, 1967. 129. Rosenkronz H.S., and Carr H.S., Silver sulfadiazine effect on the growth and metabolism of baccteri, Antimicrob. Agents Chemother, 2, 367-372, 1972. 130. Russell A.D., Hugo W.B., Antimicrobial activity and action of silver, Prog. Med. Chem., 31, 351, 1994. 131. Salle a.j., 1945, Proc Soc exp. Biol. N.Y, 55, 26. 132. Samuni A., Chevion M., Gzapslei, Rols of copper and superoxide anion radicals in the radiation-induced inactivation of T7 bacteriophage, Radiat. Rez, 99, p. 562-572, 1984. 133. Schindler P.W., Sorface complexation, in metal ions in biological systems, vol. 18, Sigel H., De., Marcel Dekker, New York, 105, 1984. 134. Shapiro Robert y Frank E. Hale, An Investigation of the Katadyn Treatment of Water with Particular Reference to Swimming Pools, J. New Engl. Water Wks. Assoc., 51:113, 1937. 135. Shimizu F., Shimizer Y., Kumargai K., Specific inactivation of Herpes Simplex, Antimicrobial, Agents, Chemother, 10, 57, 1976. 136. Shinohara K., Nonaka M.Nishiyama K., Specific inactivation of Herpes Simplex, Antimicrobial, Agents, Chemother, 10,57, 1976. 137. Sillen L.G., and Martell A.E., Stability Constants of Metal-Ion Complexes. The Chemical Society, London, 1964. 71 138. Singh A., Le Chevallier M. W., McFetersG.A., Reduced virulence of Yersina enterocilitica by copper induced injury, Appl Environ. Microbiol., 50, 406, 1985. 139. Singh A., McFeters G.A., Assessment, of in vivo revival, growyh, and pathogenicity of Escherichia coli strains after copper and chlorine induced injury, Appl. Environ. Microbiol., 52, 832, 1986. 140. Singh A., McFeters G.A., Recovery, growth and production of heat stable enterotoxin by Escherichi coli after copper induced injury, Appl. Environ. Microbiol., 51, 738, 1986. 141. Singh A., McFeters G.A., Survival and virulence of copper and chlorine stressed Yersinia enterocolitica in experimentally infected mice, Appl. Environ. Microbiol., 53, 1768, 1987. 142. Slawson R.M., Lee H., Trevors J.T.., Bacterial interactions with silver, Biology of Metal, 3, 151-154, 1990. 143. Spadaro J.A., Berger T.J., Barranco S.D., CAHAPIN s.e., Becker R.O., Antibacterial effects of silver electrodes with weak direct current antimicrobial agents and chemotherapy, American Society for Microbiology, 637-642, 6, 5, 1974. 144. Speck W.T., Driscoll J.R., Polin R.A., Rosenkranz, H.S., Bacterial colonization in the newborn, effect of cord care, Pediatrics, 10, 335, 1976. 145. Sprowls J.B. and Poe C.F., J. AMER. Pharm. Ass 32, 41, 1934ª. 146. Sprowls J.B. and Poe C.F., J. Amer. Pharm. Ass. 32, 33, 1934b 147. Stall R.E., Loschke D.C., Jons J.B. Linkage of copper resistance and a virulence loción a self transmisible plasmid in Xanthomonas campestris pv. Vesicatoria, Phytopathology, 76, 240, 1986. 148. Stevens A.A., Slocum C.J., Seeger D.R., Robeck G.C., Chlorination of organics in drinking wáter, J. Amer. Water Works Assoc., 68, 615, 1976. 149. Stumm W., Morgan J.J., The solid solution interface, in Aquatic Chemistry, An Introduction Emphasizing Chemical Equilibria in Natural Water, 2 end de., John Wiley&Sons, New York, 1981. 150. Sundberg R.J., Martin R.B., Interactions of histeine and other imidazole derivatives with transition metal ions in chemical and biological systems, Chem. Rev., 74, 471, 1974. 151. Syd Garvey, Electronic wáter purification, Energy World, 220, 10-12, 1994. 152. Sykes G., E.&F.N. Spon LTD, Disinfection and Sterilisation, 419-426, 1965. 153. The Science of the total environment, Esevior Science Publishers, 120, 1992. 154. Tilton R.C., Rosenberg B., Reversal of the silver inhibition of microorganisms by agar. Appl. Environ. Microbiol., 1978. 72 155. Tobin R.S., Smith D.K., Lyndsay J.A., Effects of activated carbón and bacteriostatic filters on microbiological quality of drinking wáter, Appl. Environ. Microbiol., 1981, 41, 646-651. 156. Totsuka A., Ohtaki K., The effecys of amino acids and metal son the infectivity of poliovirus ribonucleica cid, Jpn. J. Microbiol, 1974, 18, 107. 157. Ueda K., Morita J., Yamashita K., Komano T., Inactivation of bacteriophaage Φ 174 by mitomicin C in the presence of sodium hydrosulfite and cupric ions, Chem. Biol. Interact., 29, 145, 1980. 158. William Burrows, Tratado de Microbiología Interamericana, 1974. 159. Woiwod A.J., The inhibition of bacterial grown by coloidal heavy-metal sulphides and by coloidal sulphur. The Journal General Microbiology, 10, 59, 1954. 160. Wood J.M., Evolutionary aspects of metals con transport through cell membrane, In Metal Ions In Biological System, Edited by H. Sigel, Marcel Dekker, New York, 18, 223-237, 1984. 161. Wood J.M., Microbiological strategies in resistence to metal ion toxicity, in metal ions in biological systems, 18, Sigel H., De., Marcel Dekker, New York, 334, 1984. 162. Wuhrmann K., Zobrist F., Investigations into the bactericidal action of silver in wáter, Sweiz, Hydrol., 20, 218, 1958. 163. Yahya M.T., Landeen L.K., Kutz S.M, Gerba C.P., Inactivation of Legionella pneumophila by exposure to copper:silver ions and reduced levels of free chlorine, Water Pollution Control Federation Specially Conference, Chicago, IL., In WPCF Speciality Conference Series, Alexandria, Virginia, WPCF, 82-95, 1989. 164. Yahya M.T., Landen L.K., Kutz S.M., Gerba C.P., Messina M.C., Schultze R., Disinfection of bacteria in wáter systems by using electrolytically generated copper:silver ions and reduced levels of free chlorine. Canadadian Journal of Microbiology, 36, 109, 116, 1990. 165. Yu-Sen E. Lin, Radisav D. Vidic, Janet E. Stout Victor L. Yu. Individual and combined effects of copper and silver ion son inactivation of Legionella Pneumophila, Wat. Res. Vol.30, N08, 1905-1913, 1996. 166. Zachary L., Heggers J.P., Robson M.C., Leach A.K., Berta M., The use of topical antimicrobial, combined with biobrane in burn wound infections, J. Trauma., 1982, 22, 833. 167. Zeming Liu, Janet E. Stout, Lou Tedesco, Marcie Boldin, Charles Hwwang, Warren F. Diver, Victor L., Controlled Evaluation of Copper- Silver ionization in eradicating Legionella pneumophila froma Hospital wáter distribution system, Concise communication J/D, 169, 1994. 73 168. Zevenhuizen L.P.T.M., Dolfing J., Eshuis E.J., Ineke J. ScholtenKoerselmen, Inhibitory effects of copper on bacteria related to the free ion concentration, Microbial Ecology, 5, 1139-1146, 1979. 169. Zimmer C., Luck G., Frietsche H., Triebel H., DNA –cooper (II) complex and the DNA conformation, Bioplimers, 10, 441, 1971. ANEJOS 1. Resumen bibliográfico En la tabla N0 4 se presenta en resúmen bibliográfico. Tabla N0 4 Compuestos utilizados Valores de desinfe-cción Plata, [19] (μg/l) 400 E. coli Plata , [134] (μg/l) Plata, [4](μg/l) 20.000 E. histolytica 1000 Bactericida LÍMITES ADMISIBLES EN ECOSITEMAS Aguas potables Nivel guía Conc. Observaciones máxim a admisi ble 10 Si en caso excepcional, se hiciere un uso no sistemático de la plata para el tratamiento de las aguas se podrá admitir un valor tolerable de 80 μg/l 74 Plata [152] (μg/l) Plata iónica, [28] como AgNO3 (μg/l) >500 <60 4320 2480 Plata ionica, [163] (μg/l) Plata ionica, [125] (μg/l) Plata, [64] (μg/l) Plata anodica, [11] (μg/l) 80 E. coli en 2h E. coli en 24 h 99% de Herpes Simplex Virus tipo1 en 15 min. 69% Herpes Simplex Virus tipo2 en 15 min. L. pneumophila en 24 h 260 S. cerevisae 10 E. coli, Bacilus typhosus 2,02-8,25 2,51 0,26 0,11 10,05 Plata ionica, [165] (μg/l) 180 80 10-20 Plata anodica, [143] (μg/l) 0,4-4,0 μA 4 μA y 7000 5800 30 E.coli en 4h P. aeruginosa en 4h S. aureus en 4 h S. aureus en 15-30 min Streptococcus grupo D en 4h L. pneumophila en 1h L. pneumophila en 24 h L.pneumophila en más de 5 días S. aureus, E. coli, Proteus vulgaris, Proteus aeruginosa en 4h E.coli se reduce 3 ordenes en 4h E. coli reduc. De 2,12 en 30 min. y 3,52 en 60 min. Plata ionica, [117] como AgNO3 (μg/l) Plata ionica, [106] como AgNO3 (μg/l) 25 50 E. coli reduc. De 0,3 en 1h E. coli reduc. De 1 en 1h Compuestos utilizados Valores de desinfe-cción Cobre forma iónica, [61] como CuSO4 (μg/l) 64000 64 6,4 Inh. Levadura y fungi (Penicillium sp., Asp. Niger, etc.) Inh. Bacterias E.coli Cobalto, nikel, cobre y [85], forma iónica, [61] (μg/l) Cobre como CuSO4 [5] 59, 59, 64 Inh. Chlorella vulgaris 1000 Algas LÍMITES ADMISIBLES EN ECOSITEMAS Aguas potables Nivel guía Conc. Observaciones máxim a admisi ble 100 10 Si en caso excepcional, se A la salida de las hiciere un uso no sistemático instalaciones de de la plata para el bombeo y/o de tratamiento de las aguas se preparación y de podrá admitir un valor sus dependencias tolerable de 80 μg/l 3000 Después de doce horas de estancamiento en la canalización y en el punto de puesta a disposición del consumidor 75 (μg/l) Cobre forma ionica, [165] (μg/l) Cobre forma ionica, [138] (μg/l] Cobre y plata electrolíticame nte, [167] (μg/l) Nitrato de plata con arena, [100] Cobre y plata electrolíticame nte, [165] (μg/l) Plata, cobre cobre platinium, acero inoxidable ánodos y cátodos, [143] Cobre y plata electrolíticame nte, [99] (μg/l) Cobre y plata electrolíticame nte, [98] (μg/l) Compuestos utilizados Cobre y plata electrolíticame nte, [77] (μg/l) Cobre y plata electrolíticame nte, [108] (μg/l) Cobre y plata electrolíticame nte más cloro libre [99] (μg/l) Cobre y plata electrolíticame nte y cloro 100 L. pneumophila en 2-5 h 100 Yersina enterocolítica en 2 días >400 y >40 Legionella pneumophila desaparece tiempo de dos meses 1:1 1.” 800 g mezcla 40 y 40 Coliformes, Coliforme s faecales (encima de reja de 35 μm) 40 y 20 40-400 μA 433 y 43 Legionella pneumophila en 1,6 h Legionela pneumophila en 3,6 h S. aureus, E. coli, P. vulgaris y P.aeruginosa E. colireduc. 0,12 en 6 min 400 y 40 Coliformes totales, P. aeruginosa y Estaphilococos, en redes de distribución de agua en 4 semanas, inf. a las normas Valores de desinfe-cción 400 y 40 Legionela pneumophila reduc. 0,7% con 0,00287 400:40 Pseudomana cepacia reduc. 6 en 5 min. 460:75 y 200 E. coli reduc 3,5 en 0,5 min. Enterococcus (Streptococcus) faecalis reduc. 4,0 en 0,5 min. 400:40 Y 300 Coliformes totales, P. aeruginosa y Estaphilococos en redes LÍMITES ADMISIBLES EN ECOSITEMAS Aguas potables Nivel guía Conc. Observaciones máxim a admisi ble 10 Si en caso excepcional, se hiciere un uso no sistemático de la plata para el tratamiento de las aguas se podrá admitir un valor tolerable de 80 μg/l 76 libre, [98] (μg/l) Cobre y plata electrolíticame nte y cloro libre, [77] (μg/l) 400:40 y 300 800:80 y 300 Cobre y plata 400:40 y electrolíticame 200 nte y cloro libre, [79, 78] (μg/l) 400:40 y 300 Cobre y plata 400:40 y electrolíticame 50 nte y cloro [108] (μg/l) Cobre y plata 700: 70 electrolíticame y 1000 nte y cloro [1] (μg/l) 700:70 y 500 700:70 y 200 Cloro libre [77] 300 (μg/l) de distribución de agua en 4 semanas, inferiores a las normas Legionella pneumophila reduc. 99,47% con 2,282 en 1,5 min. Legionella pneumophila reduc. 99,8 % con 2,639 en 1,5 min. Legionela pneumophila reduc. 2,1918 en 7 min., S. aureus reduc. 2,98 E. coli reduc 7375 en 1 min. Virus MS-2 reduc. 3,3655 P. cepacia reduc. 6 en 2,5 min. en aguas carbonatadas P. cepacia reduc. 6 en 30 min. Rotavirus Humano 8HRV) reduc. 2 en 120 min. Virus hepatitis AA (HAV) reduc. 2,6 en 120 min Adenovirus (ADV) o poliovirus (PV) reduc. 2,6 en 120 min. Tiene una variación de p<0,5, que lo anterior Tiene una variación de p<0,5 que lo anterior L. pneumophila reduc. 1,59 un rendimiento de 91,63% Compuestos utilizados Valores de desinfe-cción Cloro libre [79, 78] (μg/l) 200 300 Cloro [1] (μg/l) 500 LÍMITES ADMISIBLES EN ECOSITEMAS Aguas potables Nivel guía Conc. Observaciones máxim a admisi ble 10 Si en caso excepcional, se hiciere un uso no sistemático de la plata para el tratamiento de las aguas se podrá admitir un valor tolerable de 80 μg/l L. pneumophila reduc. 0,9029 S. aureus reduc. 2,8221 E. coli reduc. 3,2166 Virus MS-2 reduc. 11,2295 Rotavirus Humano (HRV) REDUC. 1,5 en 30 min. Adenovirus (ADV) reduc. 2,6 en 30 min. Poliovirus (PV) reduc. 4 en 30 min. Tiene una variación de p<0,5 que lo anterior para 120 min. 77 1000 200 Nitrato de plata con agua oxigenada, [117] (μg/l) Plata electrolíticamen te con cloro libre [151] (μg/l) Cobre forma iónica de sal y cloro libre en 44 muestras de aguas potables, [91] (μg/l) 30 Rotavirus Humanoa (HEV) reduc. 1,2 en 30 min. Adenovirus 8ADV) reduc. 2 en 30 min Poliovirus (PV) reduc. 4 en 30 min. B40-8 y HAV reduc.1,5 en 30 min. Eschericia coli redu. 2,35 en 30 min. y 3,52 en 60 min. 40 y 400 L. pneumophila reduc. 10 en 2 min. 25 y 150 E. coli reduc. 90% en 6 días E. coli reduc. 90%en 2 días 50 y 150 1. Datos 1.1.1.Tablas de resultados Tabla N0. 1. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,01 -1,01 0,1 -0,1 -1,02 -1,5 -1,5 0,3 -0,12 -1,5 -1,8 -1,8 0,4 -0,18 -1,8 -2,7 -2,7 -0,5 -0,23 -2,7 -2,9 -2,9 -0,7 -0,35 -2,9 -2,9 -2,9 -1,05 -0,71 -2,9 78 Tabla No. 2. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,1 -1,5 -0,32 -0,24 -1,88 -1,8 -1,7 -0,057 -0,3 -2,3 -2,1 -2,85 -0,1 -0,39 -2,78 -2,8 -3,05 -0,13 -0,43 -3,01 -3,05 -3,29 -0,15 -0,48 -3,06 -3,05 -3,29 -0,2 -0,55 -3,06 Tabla No. 3. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,01 -1,03 -0,05 -0,07 -1,2 -1,2 -1,6 -0,08 -0,1 -1,8 -1,9 -2,1 -0,12 -0,13 -2,0 -2,11 -2,48 -0,26 -0,18 -2,3 -2,18 -2,56 -0,34 -0,2 -2,9 -2,18 -2,56 -0,48 -0,28 -2,9 Tabla No 4 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] A B C D E 79 K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas -2,3 -1,5 -1,8 -0,9 -0,6 -2,3 -1,5 -1,0 -0,5 -0,6 -2 -1,2 -0,83 -0,1 -0,3 -2,2 -1,26 -1,2 -2,9 -0,21 -2,3 -1,3 -1,4 0,51 -0,63 -0,4 -0,55 -0,37 -3,2 -0,63 Tabla No. 5. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -1,85 -0,70 1,8 0,34 -0,45 -0,8 -0,94 -0,76 -2,3 -2,32 -1,8 -1,85 -1,37 -0,8 -0,9 -2,44 -1,54 -0,66 -0,65 0,32 -1,87 -1,1 -0,89 -0,43 0,34 -0,65 -1,32 0,09 -0,089 -1,35 Tabla No. 6. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -2,4 -2,3 -1,73 -1,5 1,8 -2,0 -0,68 -0,3 -0,4 0,45 -0,45 -2,1 -0,97 -1,2 1,25 0,43 -1,23 -1,68 -2,17 2,2 -2,55 -1,9 -1,34 -0,84 -0,64 -1,2 0,57 1,6 2,3 -0,45 Tabla N0. 7. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 A B C D E -1,2 -1,02 0,13 -0,16 -1,04 -1,55 -1,6 0,36 -0,17 -1,62 -1,85 -1,86 0,48 -0,20 -2 -2,78 -2,78 -0,57 -0,29 -3,0 80 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas -3,1 -3,1 -0,8 -0,40 -3,1 -3,1 -3,0 -1,059 -0,81 -3,1 Tabla No. 8. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,6 -1,9 -0,38 -0,29 -1,98 -1,9 -1,97 -0,067 -0,4 -2,8 -2,4 -2,98 -0,2 -0,41 -2,89 -2,9 -3,09 -0,17 -0,49 -3,09 -3,15 -3,39 -0,17 -0,50 -3,1 -3,09 -3,45 -0,3 -0,59 -3,09 Tabla No. 9. Resultados para las bacterias ThiobacillusThioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log(NT/N0) a 8 horas log(NT/N0) a 12 horas log(NT/N0) a 18 horas log(NT/N0) a 24 horas log(NT/N0) a 24 horas y 30 minutos log(NT/N0) a 25 horas A B C D E -1,08 -1,09 -0,09 -0,10 -1,5 -1,4 -1,8 -0,1 -0,2 -1,9 -1,7 -2,4 -0,19 -0,18 -2,3 -2,19 -2,52 -0,28 -0,21 -2,9 -2,28 -2,76 -0,44 -0,3 -3,01 -2,21 -2,62 -0,53 -0,34 -3,00 Tabla No 10 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas A B C D E -2,40 -1,77 -2,19 -1,67 -2,17 -1,63 -2,26 -1,48 -2,40 -1,77 81 K a 18 horas K a 24 horas -3.5K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas -1,22 -0,7 -0,51 -0,90 -0,5 -0,51 -0,79 -0,1 -0,2 -1,02 3 0,19 -1,22 0,49 -0,51 0,2 -0,53 -0,37 -3 -0,53 Tabla No. 11. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a 24 horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -1,9 -0,60 1,6 0,14 0,23 -0,06 -0,81 -0,63 -3 -2,7 -2,2 -1,68 -1,16 -0,9 -0,5 -2,09 -1,49 -0,78 0,62 0,12 -1,84 -1,22 -0,61 0,98 0,23 0,31 1,26 0,07 -0,058 -1,17 Tabla No. 12. Resultados para las bacterias ThiobacillusThioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 8 horas K a 12 horas K a 18 horas K a 24 horas K a horas y 30 minutos K a 25 horas A B C D E -2,59 -2,1 -1,55 1,4 1,2 -1,93 -0,57 -0,26 0,4 0,3 -0,34 -1,7 0,84 1,05 1,15 0,32 0,92 1,6 2,12 2,09 -2,34 -1,74 -1,21 0,72 -0,51 1,12 0,25 1,46 2,03 -0,23 Tabla No. 13. Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log10 (NT/N0) a 1 horas log10 (NT/N0) a 2 horas log10 (NT/N0) a 4 horas A B C D E -0,13 -0,13 0,031 -0,02 -0,14 -0,25 -0,25 0,04 -0,03 -0,24 -0,46 -0,46 0,052 -0,04 -0,45 82 log10 (NT/N0) a 6 horas log10 (NT/N0) a 10 horas L+log10 (NT/N0) a 14 horas -0,71 -0,71 0,1 -0,05 -0,70 -1,38 -1,38 0,2 -0,11 -1,37 -1,65 -1,65 0,35 -0,16 -1,64 Tabla No. 14. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log10 (NT/N0) a 1 horas log10 (NT/N0) 2 horas log10 (NT/N0) a 4 horas log10 (NT/N0) a 6 horas log10 (NT/N0) a 10 horas log10 (NT/N0) a 14 horas A B C D E 0,15 0,67 0,047 -0,016 0,2 -0,55 0,17 0,02 -0,047 -0,1 -1,25 -0,33 -0,01 -0,022 -0,3 -1,32 -0,83 -0,032 -0,055 -0,9 -1,45 -1,33 -0,065 -0,085 -1,5 -1,95 -1,85 -0,1 -0,11 -1,9 Tabla No. 15. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. Muestra (NMP/100mL) log10(NT/N0) a 1 horas log10 (NT/N0) a 2 horas log10 (NT/N0) a 4 horas log10 (NT/N0) a 6 horas log10 (NT/N0) a 10 horas log10 (NT/N0) a 14 horas A B C D E 1,28 0,04 0,0025 -0,006 -0,2 0,68 -0,26 0,005 -0,008 -0,4 0,28 -0,52 0,08 -0,024 -0,6 -0,32 -0,76 -0,022 -0,54 -1,0 -1,12 -1,29 -0,065 -0,085 -1,5 -1,6 -1,85 -0,1 -0,115 -1,9 Tabla No 16 Resultados para coliformes fecales y totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 1horas K a 2 horas A B C D E -3,31 -4,39 -5,1 -4,29 -5,04 -4,29 -5,08 -4,27 -1,23 -4,3 83 K a 4horas K a 6 horas K a 10 horas K a 14 horas -3,61 -3,05 -2,37 -1,53 -3,42 -2,95 -2,24 -1,36 -3,41 -2,94 -2,22 -1,27 -3,44 -2,96 -2,26 -1,45 -3,51 -1,32 -2,37 -1,4 Tabla No. 17. Resultados para gérmenes totales después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 1 horas K a 2 horas K a 4horas K a 6 horas K a 10 horas K a 14 horas A B C D E -4,78 -4,03 -3,20 -1,1 -1,75 -1,15 -3,14 -2,33 -1,42 -0,89 -0,2 1,09 -4,96 -4,16 -3,27 -1,2 -2,06 -1,48 -4,16 -4,03 -1,38 -1,1 -1,94 -1,20 -4,71 -3,81 -3,03 -1,07 -1,65 -1,02 Tabla No. 18. Resultados para las bacterias Thiobacillus Thioparus después de la desinfección bajo las condiciones de las pruebas descritas. K=-2.3[log10(C0CT)T] K a 1 horas K a 2 horas K a 4 horas K a 6 horas K a 10 horas K a 14 horas A B C D E -4,79 -4,08 -3,33 -2,88 -2,32 -1,87 -4,2 -3,50 -2,73 -2,23 -1,62 -1,06 -3,32 -2,53 -1,62 -0,93 -0,01 0,52 -3,00 -2,17 -1,13 -0,16 -0,63 1,19 -3,28 -3,2 -1,58 -2,55 -2,01 -1,53 84