PROCEDIMIENTO PARA LA EMISION DE DOCUMENTOS

DETERMINACION DE HIERRO EN HARINA DE
TRIGO. Método de Digestión vía seca y
Espectrofotometría de Absorción Atómica
Basado en método AOAC 999.11Modificado
Sección Química de
Alimentos y Nutrición
1.
ME-711.02-159
Emisión:
09-01-2008
Versión: 6
Actualización:
26-05-2016
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OBJETIVO
La cuantificación de hierro en harina mediante digestión vía seca y lectura por
Espectrofotometría de Absorción Atómica con llama.
2.
CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE
Aplicable a harinas en general a través de digestión por vía seca para posterior lectura en
Espectrofotometría de Absorción Atómica de Llama (FAAS)
3.
FUNDAMENTO
Las porciones de estudio son secadas mediante mufla con termostato con rampa de
temperatura o plancha calefactora, luego llevadas a cenizas a 550 °C bajo incrementos
graduales de temperatura (<50 °C/h). Luego se agrega HCl y la solución es evaporada a
sequedad. El residuo es disuelto en HNO3 y cuantificado por FAAS.
4.
DOCUMENTOS DE REFERENCIAS
4.1
AOAC Official Methods 999.11 “Lead, Cadmium, Copper, Iron and Zinc in foods- Atomic
Absorption Spectrophotometric after dry ashing“, Chapter 9 pag. 19; AOAC 19th edition
2012.
5.
TERMINOLOGÍA
5.1
Vía seca: Tratamiento de muestras a altas temperaturas hasta calcinación para
destrucción de materia orgánica.
5.2
FAAS: Espectrofotometría de Absorción Atómica en Llama.
6.
REACTIVOS, INSUMOS Y EQUIPOS
6.1
REACTIVOS
6.1.1
Patrón de referencia para hierro. (*)
6.1.2
Ácido clorhídrico 37 % p.a.
6.1.3
Ácido nítrico 65% p.a o Suprapure. (*)
6.1.4
Agua desionizada.
DUEÑO DE PROCESO:
Encargado de Laboratorio
de Nutrientes, Aditivos y
Contaminantes
APROBADO:
ESTE DOCUMENTO FUERA DE LA INTRANET
O IMPRESO SIN TIMBRE DE “DOCUMENTO
CONTROLADO” SE CONSIDERA COPIA NO
CONTROLADA
Jefe Subdepartamento
Alimentos y Nutrición
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INSUMOS
6.2.1
Cápsulas de porcelana, cuarzo o platino resistentes a altas temperaturas.
6.2.2
Matraces aforados de 50 mL.
6.2.3
Vidrios de reloj.
6.2.4
Espátula, toalla absorbente, plumón permanente
6.2.5
Micropipeta de 100 μL y de 1000 μL
6.2.6
Piseta
6.2.7
Elementos de seguridad (guantes y antiparras).
6.3
EQUIPOS
6.3.1
Espectrofotómetro de Absorción Atómica con mechero para uso con mezcla
aire/acetileno u óxido nitroso/acetileno con corrección de fondo apropiada. (*)
6.3.2
Lámparas: lámparas de cátodo hueco de Hierro. (*)
6.3.3
Mufla programable con termostato.
6.3.4
Plancha calefactora con control de temperatura (aprox. 300 °C).
6.3.5
Balanzas Analítica (*)
(*) Reactivos, insumos y equipos críticos
7.
DESCRIPCIÓN DE ACTIVIDADES
Antes de comenzar a trabajar con las muestras, asegurarse de la limpieza de su lugar de
trabajo y que todo lo mencionado en punto materiales, insumos y reactivos esté disponible.
A continuación se describe el método analítico, es crucial si no se dispone de práctica con el
método, leer completo este procedimiento antes de comenzar a trabajar.
7.1
Muestreo/Muestra
El ingreso de la muestra para su análisis debe cumplir con el Instructivo de
Aceptación o Rechazo de muestras IT-711-00-103.
7.2
Preparación de Reactivos

Estándares
Estándar de hierro 100 mg/L: Tomar 10 mL de solución concentrada de 1000 mg/L y
llevar a 100 mL con HNO3 0,1 M.
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Soluciones
Ácido clorhídrico 6M (1+1): Diluir 500 ml HCl (37 % w/w) a 1 litro con agua
desionizada.
Ácido nítrico 0.1M: Diluir 7 mL de HNO3 a un litro con agua desionizada.
7.3
Preparación de curva de calibración.
Realizar curva de calibración que contenga el estándar a 5 niveles; 1, 2, 3, 4 y 5
mg/L. Preparar la curva según la tabla y llevar a volumen con HNO3 0,1 M.
Concentración
mg/L
5
4
3
2
1
Alícuota
mL
5
4
3
2
2
Volumen final
mL
100
100
100
100
100
Concentración inicial
mg/L
100
100
100
100
100
7.4
Preparación de controles.
Los controles son preparados de igual manera como se hace con una muestra, es decir
el control (Quality Control), corresponde a una harina que deberá someterse a análisis
de igual forma como si fuera una muestra.
7.5
Preparación de la Muestra o etapas previas a realizar la medición.
Homogeneizar la muestra y pesar entre 3 a 4 g de la muestra en cápsula o crisol.
Tapar la cápsula con vidrio reloj.
Colocar en mufla con termostato programable e incrementar la temperatura a una
velocidad de 50 °C/h hasta 550 °C. Dejar por al menos 8 horas.
Humedecer las cenizas con 5 mL de HCl 6M (1+1) y evaporar (a sequedad) en placa
calefactora a 100 °C ± 5 °C
Colocar nuevamente en mufla por 2 horas a 550°C hasta obtener cenizas blancas.
Si es necesario repetir el procedimiento hasta que las cenizas se formen completamente
(deben estar blancas/gris o ligeramente coloreadas. El número de repeticiones
necesarias varía dependiendo del tipo de producto).
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Agregar 5 mL de HCl 6M (1+1) asegurándose que las cenizas estén en contacto con el
ácido y calentar aprox. 5 minutos en placa calefactora a 100 °C ± 5 °C
Disolver el residuo con HNO3 0,1M tratando de que el ácido entre contacto con la
ceniza. Dejar reposar por 1-2 horas.
Trasvasijar a matraz de 50 mL y aforar con HNO3 0.1 M.
7.6
Análisis de la muestra o realización de la medición. Condiciones instrumentales.
Condiciones espectrofotométricas
Tipo de llama: Mezcla aire/acetileno
Longitud de onda: 248,3 nm
Ancho de slite: 0,2 nm
T° de ignición: 800 °C
T° de atomización: 2300 °C
Corrector de background con Deuterio
Leer la curva de calibración solicitada por el equipo y que contiene los parámetros de
concentración en mg/L, calcular el coeficiente de correlación lineal e intercepto e
interpolar la muestra para cuantificar el resultado de la absorbancia v/s concentración.
El método está seteado para hacer tres lecturas de la misma muestra y mostrar el
promedio de las mismas.
Ingresar los resultados según año en la carpeta compartida de la sección planilla
cálculos harinas (Año) (Ruta: Química Alimentos en "isp-adm.isp.cl"Y:\LNAC
711.02\Análisis\(Carpeta por año))
7.7
Cálculo de Resultados: como se obtienen los resultados y criterios de aceptación de
los mismos.
cxv
Hierro mg /kg = -------------a
Donde:
c = concentración en ug/mL obtenidos por la interpolación en la curva de
calibración de la muestra.
v = volumen de la muestra final
a = masa de la muestra en gramos
7.8
Aseguramiento de la calidad del ensayo.
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Se efectuarán controles sistemáticos y periódicos para comprobar la validez de los ensayos
realizados con el método analítico recogido en este procedimiento, según disponibilidad.
a) Nivel I:
Ensayos de intercomparación ó utilización de materiales de referencia certificados
ó patrones de referencia certificados, según disponibilidad.
b) Nivel II. Durante el desarrollo de la serie de trabajo se incluye:
Ajuste del cero del equipo
Control de blanco al inicio de las lecturas
Control de estándar de concentración conocida
Lectura del estándar como control por cada diez muestras leídas.
El material control debe cumplir con la recuperación de la carta control
indicada en RG 001-ME-711.02-159
7.9
Expresión de los Resultados.
Los resultados se expresarán como mg/kg donde la cantidad, corresponde a los
miligramos de analito (Fe) que se encuentran en un kilogramo de muestra
7.10
8.
Los desechos alimentarios en buen estado son eliminados por basura normal,
considerando el volumen de alimentos y criterio de la Jefatura correspondiente. Los
desechos expuestos a alguna contaminación biológica o química y desechos producto
del proceso, serán eliminados de acuerdo al procedimiento de Gestión de Residuos
(PR-644.00-002) e instructivo Manejo de Residuos peligrosos, especiales y otros (IT644.00-001).
CONTROL DE REGISTROS
ALMACENAMIENTO
IDENTIFICACION
Registro
electrónico
resultados
muestras de
hierro
RG 001-ME711.02-159
RESPONSABLE
Encargado de
laboratorio de
Nutrientes,
Aditivos y
Contaminantes
TIEMPO
5 años
MEDIO
SOPORTE
Electrónico
LUGAR
RESPONSABLE/
RECUPERACION
Carpeta compartida
sección Química de
Alimentos y
Nutrición
DISPOSICION
Eliminación de
archivo
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CONTROL DE CAMBIOS
PRINCIPALES
PUNTOS
MODIFICADOS
VERSION
FECHA
5
5
26/05/2016
26/05/2016
26/05/2016
7.1
7
26/05/2016
26/05/2016
26/05/2016
7.5
7.10
5
5
5
5
10.
8
CUADRO DE RESPONSABILIDADES
Ejecuta el método
Técnico de Laboratorio
Encargado de Laboratorio
11.
7.3
RESUMEN DE MODIFICACIONES
Se actualiza código de IT
Se agrega limpieza del área de trabajo.
Se cambia formato de redacción de curva de
calibración.
Se aclara temperatura de mufla.
Se incluye eliminación de muestras
Se elimina documentos transversales y se incorpora
registro digital.
ANEXOS
Elabora el informe de
resultados
Profesional encargado del
Laboratorio
Aprueba el informe de
resultados
Jefatura de Sub
departamento Alimentos y
Nutrición
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ANEXO N° 1 ME-712.02-159
PROGRAMAS MUFLA Naber N II
550 °C
8 hr
Programa 1: ME 711.02-159 (Rampla 1)
Fe en harinas
4:30 hr
100 °C
1 hr
2 hr
1 hr
50 °C
T°
ambiente