observación de células musculares

PRÁCTICAS BIOLOGÍA COLEGIO MARAVILLAS
© Miguel Conesa 3ª ed.
PRÁCTICA nº 15
OBSERVACIÓN y ESTUDIO DE LAS FIBRAS
MUSCULARES (LISAS Y ESTRIADAS)
Materiales:
Microscopio
Elementos de disección
Porta y cubreobjetos.
Frascos lavadores con agua destilada-desionizada.
Cristalizador con agua
Pocillo para tinciones
Vidrios de reloj
Papel de filtro
Sueros fisiológicos: Vertebrados ClNa 0.9% Invertebrados CINa 0.6% Anfibios
CINa 0.75%
Formol al 10%
Alcohol 50º.70º,90º absoluto.
Mezcla alcohol-Xilol a partes iguales
Xilol puro
Hematoxilina
Eosina
Alcohol acético al 1%
Glicerina
Bálsamo de Canadá
Potasa al 33%
Pinceles
Método:
Para observar las fibras musculares estriadas se utilizará como material los
músculos estriados de las patas posteriores de saltamontes o cucarachas.
Es necesario eliminar el exoesqueleto para dejar al descubierto la musculatura
estriada voluntaria.
Se seguirá el siguiente protocolo:
o En un portaobjetos colocar unas gotas de suero fisiológico específico,
según el material que se esté utilizando.
o Tomar un trozo de músculo de unos 5mm. de longitud por 2mm. de
espesor.
o Ponerlo en el centro del portaobjetos y proceder a su disolución
ayudándose de las agujas enmangadas, procurando disociar las fibras
musculares hasta que queden aisladas.
o Deshidratar en alcohol de 96° durante 5 minutos.
o Lavar en abundante agua en un cristalizador.
o Teñir con hematoxilina durante 18 minutos.
o Lavar en agua hasta que no despinte.
o Teñir con Eosina durante 1 minuto.
o Lavar en agua abundantemente.
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© Miguel Conesa 3ª ed.
o Colocar de nuevo en un portaobjetos y separar las partes no disociadas
con un escalpelo.
o Alcohol de 70° durante 5 minutos, después de 90° y después absoluto
dos pases de cinco minutos.
o Alcohol-xilol a partes iguales durante 3 minutos.
o Xilol puro, 2 pases de 3 minutos cada uno. Montaje en Bálsamo de
Canadá.
Resultados:
Los núcleos aparecen teñidos de azul-violeta por la Hematoxilina y el
citoplasma aparece rojo-amarillento.
Para observar la musculatura lisa se utiliza como material la vejiga urinaria de
anfibios. La preparación y tinción se utiliza el mismo método descrito con
anterioridad.
Se observan fibras fusiformes ensambladas unas con otras. Estas fibras
carecen de sarcolema. Los núcleos teñidos se encuentran situado en el centro
de dichas fibras.
En las fibras estriadas de la musculatura de insecto se aprecian finísimas
fibrillas (Miofibrillas) entre las cuales se localiza el sarcoplasma .La vaina
membranosa se llama Sarcolema.
Preparación músculo liso
Preparación músculo estriado