Licenciatura en Biología 1-3 Curso 2002-2003 INGENIERÍA GENÉTICA CÓDIGO: 17/93/2626 CURSO 2002-2003 Carga docente: 4,5 créditos totales (3 créditos teóricos y 1,5 créditos prácticos) Curso: 3º, Obligatoria 1er cuatrimestre Departamento/s: Fisiología, Genética y Microbiología Profesor/a-es/as: María José Bernabé Espinosa, Asunción Contreras de Vera, Ignacio Luque Romero, Rafael Maldonado Caro, José Martín Nieto, Paloma Salinas Berná, José Serrano Cartagena OBJETIVOS Introducir al alumno en los conceptos y los métodos propios de la tecnología del ADN recombiante. Clonación. Herramientas biológicas para la clonación molecular. Aplicaciones al análisis molecular de los sistemas biológicos. Aplicaciones en el diagnóstico molecular de enfermedades genéticas. Aplicaciones en Medicina forense. Obtención de organismos transgénicos y aplicaciones biotecnológicas. PROGRAMA DE TEORÍA 1.-Introducción Orígenes de la Ingeniería Genética. Genes e información genética. Estructura y propiedades de las moléculas portadoras de información genética. Flujo de la información genética. Clonación molecular. 2.-Enzimología de la Ingeniería Genética Herramientas, métodos y productos de la Ingeniería Genética. Nucleasas. Endonucleasas de restricción. Interés de las enzimas de restricción. Fosfomonoesterasas. Polinucleótido quinasa. ADN ligasas. ADN polimerasas dependientes de ADN. Aplicaciones más frecuentes. Secuenciación de ácidos nucleicos. PCR. ADN polimerasas dependientes de ARN. Desoxinucleotidil transferasa terminal. Poli-A polimerasa. 3.-Sistemas de vectores y hospedadores Sistemas procarióticos de vectores y hospedadores. Escherichia coli como hospedador. Vectores plasmídicos de E.coli. Vectores derivados de fagos de E. coli. Vectores combinados de plásmidos y fagos de E. coli. Otros sistemas procarióticos de vectores y hospedadores. Sistemas eucarióticos de vectores y hospedadores. Sistemas basados en Saccharomyces cerevisiae. Sistemas basados en células y virus de animales. Sistemas basados en células vegetales y sus agentes infecciosos. 4.-Procedimientos de construcción, clonación, selección y manipulación de moléculas de ADN recombinante Insertos de ADN. Ensamblaje de moléculas de ADN recombinante. Infección, transfección y clonación. Examen de poblaciones heterogéneas de moléculas recombinantes clonadas. Genotecas. Estrategias de clonación. 5.-Caracterización estructural y funcional de moléculas de ADN recombinante Licenciatura en Biología 2-3 Curso 2002-2003 INGENIERÍA GENÉTICA Anatomía general de un inserto clonado. Análisis de secuencias nucleotídicas. Localización de segmentos clonados en el genoma. Determinación del número de copias de una secuencia de ADN en un genoma. Analisis de la función de fragmentos de ADN clonados. Síntesis de polipéptidos a partir de fragmentos de ADN clonados. Definición de patrones de expresión génica en el tiempo y en el espacio. 6.-Mutagénesis dirigida Genética “clásica” y Genética “inversa”. Mutagénesis clásica. Mutagénesis insercional. Señalización de genes. Mutagénesis in vitro. Construcciones antisentido. Inactivación dirigida de genes. 7.-Diagnóstico molecular y terapia génica: Impacto del Proyecto Genoma Humano Presente y futuro de la Ingeniería Genética y sus aplicaciones. Polimorfismos moleculares. Secuenciación de genomas. Proyecto Genoma Humano. Impacto de la Ingeniería Genética en el estudio y diagnóstico de enfermedades. Terapia génica. 8.-Biotecnología Molecular. Plantas y animales transgénicos Biotecnología molecular. Organismos transgénicos, obtención y utilidades. Impacto de la Ingeniería Genética en la industria y en la sociedad. PROGRAMA DE PRÁCTICAS Las prácticas programadas se distribuyen en tres sesiones de 5 horas cada una (de 15:00 a 20:00 horas) para cada grupo. Dos de las sesiones (dos días consecutivos por grupo) se realizarán en el laboratorio (Edificio los Arcos) entre el 16 de Octubre y el 28 de Noviembre. La sesión restante (análisis de secuencias de ADN) tendrá lugar en la sala de ordenadores (entre el 21 de Noviembre y el 21 de Diciembre). CRITERIOS DE EVALUACIÓN Se realizará un único examen final, que será calificado entre 0 y 30 puntos y constará de 30 preguntas con 4 respuestas alternativas. Varias de estas preguntas estarán destinadas a evaluar el grado de atención y rendimiento del alumno en las prácticas. Se descontarán 0,33 puntos por cada respuesta errónea. Las preguntas no respondidas no puntuarán negativamente. Para aprobar la asignatura se requerirá haber obtenido un mínimo de 15 puntos. Los alumnos que lo deseen podrán realizar, de forma individual y concisa, un trabajo escrito relacionado con los contenidos de la asignatura. Éste será evaluado entre 0 y 1 punto, pudiendo contribuir a mejorar la calificación obtenida en el examen. El sistema de calificación será idéntico en Septiembre. En la convocatoria de Diciembre se realizará un examen con varias preguntas de desarrollo breve. BIBLIOGRAFIA · BROWN, T.A. (1999). Genomes. BIOS Scientific Publishers. Didáctico y actual. Muy bien para consulta de algunos temas y aspectos muy concretos. Licenciatura en Biología 3-3 Curso 2002-2003 INGENIERÍA GENÉTICA · COX, T. y SINCLAIR, J. (1998). Biología Molecular en Medicina. Cobertura muy limitada del programa. En español. · GLICK, B.R. y PASTERNAK, J.J. (1998). Molecular Biotechnology. Principles and Applications of Recombinant DNA. ASM Press. Muy actual e interesante, permite ampliar los aspectos más aplicados del temario. · IZQUIERDO ROJO, M. (1999). Ingeniería Genética y Transferencia Génica. Pirámide. Muy reciente (y breve), y buena cobertura del programa de la asignatura; escrito por una española. · LUQUE, J. y HERRÁEZ, A. (2001). Biología Molecular e Ingeniería Genética. Conceptos, Técnicas y Aplicaciones en Ciencias de la Salud. Harcourt. Profuso en ilustraciones, muy didácticas. Contiene abundantes temas de Ingeniería Genética. En español. · OLD, R. y PRIMROSE, S. (1995). Principles of Gene Manipulation. Buena cobertura del programa de la asignatura. · SINGER, M. y BERG, P. (1993). Genes y Genomas. Omega. Muy extenso y detallado, con varios capítulos dedicados a la Ingeniería Genética. El orden de presentación de la información es el mismo que se sigue en la asignatura. La versión original, en inglés, es de 1991. · STRACHAN, T. y READ, A. (1996). Human Molecular Genetics. BIOS Scientific Publishers. Muy bien, aunque con una cobertura muy limitada del programa. · WATSON, J.D., GILMAN, M., WITKOWSKI, J. y ZOLLER, M. (1992). Recombinant DNA. Freeman. Didáctico y ameno. Revistas Las revistas de divulgación en español Investigación y Ciencia y Mundo Científico contienen gran cantidad de artículos y comentarios relacionados con la Ingeniería Genética. Existen además revistas en inglés, como Trends in Genetics, Nature Genetics, Current Opinion in Genetics and Development y otras, disponibles en la Hemeroteca de la Facultad de Ciencias, que contienen artículos de revisión de máxima actualidad sobre temas de investigación en Genética. Todos estos artículos constituyen un excelente complemento a los libros de texto recomendados y son válidos para la elaboración de trabajos escritos.