doc_306-4-2014-05-3

PREPARACIÓN DE TRATAMIENTOS
Para los recubrimientos se utilizó quitosano disuelto en ácido acético 1N.
TRATAMIENTO DE BACTERIA
Las bacterias fueron aplicadas en solución de cultivo MRS con 1x10-9 UFC.
EMULSIÓN ACEITE DE NEEM
La fase oleosa (conformada por aceite de neem y aceite vegetal) fue agregado por goteo
a la solución de quitosano (fase acuosa) una vez incorporados la solución de fue
homogenizada en un ultra turrax a 20,000 rpm por 10 min.
COMPLEJOS SOLUBLES
Se formaron por solución de pectina y quitosano en concentración las cuales se
mezclaron en relación 1:1 y 2:1 (pectina : quitosano) posteriormente se incorporó el
aceite de Neem por goteo y se homogenizaron en el ultra turrax a 10,000 rpm por 10
min.
EMULSIÓN CON GOMA DE MEZQUITE
Para la preparación de este tratamiento la fase oleosa (constituida por aceite de neem y
aceite mineral grado alimenticio) fue agregada por goteo a una solución que contenía
goma de mezquite, después de la incorporación de ambas fases se sonicaron en un
equipo Helscher up 400S a 80% de amplitud, durante 10 min. Posteriormente a esta
solución se le agregó una solución de quitosano por goteo y nuevamente se sónico
durante 10 min. Al final se ajustó el pH.
COACERVADOS
Los coacervados se formaron mezclando Lactobacillus plantarum en solución de
pectina que fue incorporada para formar los microencapsulados en agitación con una
jeringa con aguja de 3mm para después se ajustó el pH.
TÉCNICAS ANALÍTICAS
POTENCIAL ζ
El potencial ζ es una medida de la estabilidad de una partícula e indica el potencial que
se requiere para penetrar la capa de iones circundante en la partícula para
desestabilizarla. Por lo tanto, el potencial zeta es la potencia electrostática que existe
entre la separación de las capas que rodean a la partícula
El potencial ζ de los sistemas de partículas se determinaron utilizando un Zetasizer
Nano ZS, Malvern Instruments (Malvern, R.U.), a la viscosidad y constante dieléctrica
del agua, con una corriente eléctrica de 150 V a 25°C. Se usa agua destilada como
medio de dispersión electroforética cuya movilidad se convierte en potencial ζ de la
ecuación de Helmholtz-Smoluchowski (n = 3).
𝜎0 =
𝜀
∗ 𝜑0
4𝑛𝐽
Dónde:
σ es la densidad de carga en la superficie del solido
ε es la contante dieléctrica del ion adherido
J es el radio medio del ion
ɸo es la diferencia de potencial entre la superficie del sólido y un punto en el interior
En la práctica, se hacen diluciones de la bacteria, las emulsiones, complejos solubles y
coacervados y se colocan en una celda de vidrio y se coloca el electrodo (cuidando de
que no se formen burbujas en el electrodo), se limpia con un papel ceda la muestra y se
coloca en el equipo, previamente configurado una plantilla que indique el tipo de celda
y el tipo de medición (pot ζ). Se realiza esta medición por triplicado.
TAMAÑO DE PARTÍCULA
El tamaño de las partículas para la emulsión se determinaron por espectroscopia de
correlación de fotones, utilizando un masterziser 2000 (Malrven, EE.UU.). Las
dispersiones se diluyeron con agua destilada para asegurar que la luz señal de dispersión
este dentro del rango de sensibilidad del instrumento. Las mediciones se realizaran por
triplicado para todos los lotes preparados y se realizaran en un ángulo de 90° de
dispersión a 25° C (n = 3). En la práctica, se selecciona una plantilla con los datos de la
emulsión (índice de refracción y tipo de sistema que en este caso es una emulsión) así
como la sensibilidad del equipo, con una varilla se toma una alícuota de la emulsión y
se coloca en la celda con agua, se agita y el equipo marca si se necesita una dilución
más para esto solo se agrega agua hasta llegar a la dilución y se mide por triplicado.
Para los coacervados y complejos solubles en el equipo Zetasizer Nano ZS, Malvern
Instruments (Malvern, R.U.) y con las mismas especificaciones que para determinar
potencial ζ, se determina el tamaño de partícula, solo se selecciona la opción SIZE para
que haga la medición.
APLICACIÓN DE TRATAMIENTOS EN FRUTOS
Primero se lavan los frutos con cloro a una concentración de 100ppm
sumergiendolos durante 1 minuto en esta solución y se enjuagan con agua limpia, se
secan con aire forzado y se seleccionan los frutos en mejor estado, desechando aquellos
que presentaran menor tamaño, daños mecánicos, fisuras o manchado del pericarpio, se
aleotorizan. Se aplicaron los recubrimientos por inmersión y se secaron por aire forzado
después se empacan.