Un buen número de científicos se dedicaron a estudiar la naturaleza química del material hereditario y los resultados obtenidos permitieron esclarecer la composición química y los procesos de regulación y expresión de los genes. Estructura del ADN El cuerpo de los organismos pluricelulares: Lo constituyen millones de unidades llamadas células. Las células que forman la flora y la fauna comunes, incluidos los seres humanos se denominan eucariotas; por el contrario, las bacterias son clasificadas como procariotas. Los procariotas cuentan con células de estructura simple y su ADN ,portador de la información genética, se halla inmerso en su interior. En el caso de los eucariotas, en cambio, el ADN se encuentra en el interior del núcleo, delimitado por una membrana y alcanza unos dos metros de longitud. En una célula eucariota, las molécula de ADN se enrollan de una forma compleja, ayudadas por proteínas accesorias, las histonas, que forman estructuras con aspectos de bastoncillos llamados cromosomas. El ADN, ácido desoxirribonucleico, y el ARN ácido ribonucleíco, constituyen los ácidos nucleicos, es decir macromoléculas que se encuentran dentro de los cromosomas en el núcleo de las células que forman el material hereditario de todos los seres vivos. Con fotografías del ADN el método de difracción de rayos X, realizadas por Rosalin Franklin con los descubrimientos de muchos investigadores y en sus propias y brillantes interpretaciones de los datos disponibles, Watson y Crick crearon un modelo de la estructura del ADN. Watson Estos descubrieron que no se trata de un enorme polinucleótido, sino de una estructura formada por dos cadenas. Los ácidos nucleicos están asociados a las proteínas y están formados por: Azúcar que contiene 5 átomos de carbono Carece de oxígeno por lo que es un azúcar oxidada y recibe el nombre de Dexosirribosa. Bases nitrogenadas: Purinas Adenina Guanina Bases nitrogenadas: Pirimidinas Citocina Timina Molécula de azúcar Cuando estos compuestos se combinan, forman los nucleótidos y muchos de ellos forman los polinucleótidos. Estos científicos encontraron que las bases púricas no podían aparearse con las bases pirimídinicas ni viceversa. Evaluación: Elabora un modelo de ADN utilizando alambre, madera, cable de colores, marcadores o colores, goma o silicón. Lo puedes hacer utilizando un modelo para que te guíes; luego llévalo a tu profesor para que te lo corrija. Sigue adelante con tu creatividad. Felicitaciones Los nucleótidos son los iniciadores de la síntesis de los ácidos nucleicos y éstos son ADN y ARN que son las bases en la cual se apoya la vida. La molécula de ADN está formado por cuatro nucleótidos que son Adenina,Guanina,Citocina y Timina, las cualesse escriben con la primera letra y en mayúscula, ejemplo Guanina(G),Timina(T). El ADN está formado por miles de nucleótidos en una secuencia continu a y que se unen mediante puentes de hidrógeno que están entre las bases nitrogenadas. Los nucleótidos están formados por tres componentes esenciales: un azúcar (la pentosa), un ácidofosfórico y una base nitrogenada.En la unión de la citosina con la guanina intervienen tres puentes de hidrógeno y entre la adenina y la timina intervienen dos puentes de hidrógeno. La molécula de ADN es lineal y está constituida por dos hileras por lo tanto tiene la capacidad de duplicarse, es decir, forma copias exactas de si misma; para que este proceso ocurra, las dos bandas se desenrollan y separan; cada una forma un molde y forma una nueva banda donde los nucleótidos se alinean siguiendo un orden que está determinado de manera específica donde la adenina se une con la timina y la citocina con la guanina. Cuando los nucleótidos se ordenan, se forma la nueva banda que debe ser igual a la que le dio origen. Esta replicación ocurre con exactitud para que la información genética no se altere, a medida que se va transmitiendo de generación en generación. Es conveniente decir que la replicación no siempre es exacta ya que pueden ocurrir mutaciones que alterarían la información genética y esto es importante para la evolución. Autoduplicación Semiconservativa: Los investigadores Matew, Messelson y Sthal hicieron un experimento donde utilizaron células cultivadas, su ADN contenía isotopos radiactivos confirmaron que las moléculas hijas, resultantes de la duplicación del ADN, contienen una hebra de la doble hélice madre y otra hebra sintetizada de nuevo durante la duplicación, por lo tanto, ésta, es semiconservativa, es decir que este es el principio que permite la reproducción exacta del código genético.En la doble hélice,las bases nitrogenadas se halla en el interior de cada cadena enfrentando a las bases de la cadena complementaria. Las dos cadenas están conectadas por puentes de hidrógeno que ligan específicamente la G con la C y la A con la T esta complementación en el apareamiento es de suma importancia, ya que la composición en bases de una cadena determina necesariamente la composición en bases de la otra. El azúcar y el ácido fosfórico se encuentra en el lado externo de las cadenas, formando, por decirlo así, la columna vertebral de la molécula. Para demostrar esto Messelson y Sthal realizaron varios experimentos donde utilizaron isótopos radiactivos de nitrógeno, cloruro de cesio (CsCl), y la bacteria Escherichia coli, luego de diferentes procedimientos llegaron a la conclusión de que la molécula de ADN se duplica semiconservativamente La mayor parte del ADN que poseen los seres vivos se encuentran en el núcleo de las células, específicamente en los cromosomas. Cada cromosoma se compone de una molécula de ADN y muchas moléculas de proteínas. Los cromosomas se distinguen unos de otros por su forma y tamaño y por las bandas características que presentan. El conjunto de los cromosomas de una célula se llama cariotipo y el conjunto de genes se denomina genoma. El descubrimiento de la estructura del ADN dio origen a la genética molecular y estableció que la información genética está contenida en la secuencia de bases nucleotídicas de este polímero. Las Enzimas de Restricción: En l970, H.Smith y J. Hopkins, descubren que las bacterias poseen unas enzimas que limitan la entrada de ADN extraño al interior de la célula bacteriana y las denominaron enzimas de restricción. Ellos determinaron que éstas cortan segmentos de las moléculas de ADN en sitios específicos caracterizados por secuencias cortas de nucleótidos de 4 ó 6 pares. estos cortes pueden ser rectos o sesgados; los cortes sesgados son de gran ayuda para los biólogos moleculares porque facilitan la inserción de un fragmento de ADN, debido a que dejan extremos “pegajosos” a los cuales se une la cadena complementaria del ADN insertado. El uso de las enzimas de restricción ha permitido el desarrollo de un campo nuevo de mucho interés científico. La Ingeniería Genética, que es la que se encarga de modificar las características hereditarias de un organismo en un sentido predeterminado mediante la alteración de su material genético. Para que se puedan modificar las características hereditarias de un organismo vivo, la ingeniería genética manipula directamente el código genético contenido en el ADN. En este proceso son importantes las enzimas de restricción, producidas por varias especies bacterianas, éstas son capaces de reconocer una secuencia determinada de la cadena de unidades químicas (nucleótidos) que forman la molécula de ADN, y romperla en dicha localización, los fragmentos de ADN obtenidos se pueden unir utilizando otras enzimas llamadas ligasas; lo que quiere decir que, las enzimas de restricción y las ligasas permiten romper y reunir de nuevo los fragmentos de ADN. Actualmente se conocen más de 150 enzimas de restricción, entre las cuales se pueden mencionar: EcoRI, EcoRII, HpII, HindII, BamI. Estas enzimas se suelen elaborar a partir del nombre científico de la bacteria donde se encuentre, por ejemplo: Eco: Escherichia coli ; Hp: Hemophilus parainfluenzae; Hind: Hemophilus influenzae;Bam: Bacillus amy loliquefaciens. ADN Recombinante: La recombinación es un proceso por el que se originan células o individuos en los que los alelos en los que diferían sus padres están asociados de diferente manera. Por lo tanto, la recombinación es, como la mutación, una fuente de variación genética, aunque con la recombinación no se crean nuevos alelos, sino que se intercambian alelos entre moléculas homólogas de ADN. El uso de las enzimas a permitido a los biólogos moleculares identificar, aislar, juntar, multiplicar, y expresar genes específicos del ADN de un organismo, se han desarrollado técnicas que permiten aislar un gen de la dotación total del ADN de un organismo insertado en otra molécula de ADN. La técnica experimental básica para la formación de ADN recombinante es la clonación de genes; la cual consiste en cuatro etapas: A.- Aislamiento del gen de interés para el investigador: Se extrae el ADN del organismo en estudio y se corta con una enzima de restricción específica para obtener el gen a estudiar. B.- Construcción de moléculas de ADN recombinante: El gen en estudio se une a una molécula de ADN de otro origen, denominada vector de clonamiento y se forma la molécula de ADN recombinante ,los vectores utilizados son: los virus, bacterias y plásmidos. C.- Multiplicación de las moléculas recombinantes: Las moléculas de ADN recombinante se introducen en una célula apropiada, generalmente bacterias, donde los vectores de clonación se multiplican replicando el gen en estudio introducido en el vector. D.- Expresión del gen clonado: El gen clonado se extrae y se une a otra molécula de ADN conocida como vector de expresión a los nuevos organismos obtenidos y se les llama transgénicos. En los estudios del ADN recombinante, los principales instrumentos son las enzimas restrictivas, las plásmidios y los virus. Las enzimas restrictivas fueron aisladas al mismo tiempo que se descubrieron los retrovirus. Dichas enzimas funcionan a modo de tijeras y permiten cortar el ADN en regiones precisas. El Plásmido es un pequeño fragmento circular de ADN localizado afuera del cromosoma de las bacterias y de algunas levaduras. ESTRUCTURA DEL ARN El ARN es un polímero de ribonucleótidos de uracilo, citosina, guanina y adenina, organizado en una banda simple, como la mitad de una escalera con la misma estructura del ADN: los laterales están formados por los grupos fosfatos y azúcares de los cuales parte una base nitrogenada. Para traducir de un idioma a otro se necesitan un diccionario y unas reglas gramaticales; igualmente, para traducir el ADN a las proteínas se necesita una clave o código genético de equivalencia, que se denomina Código Genético. Bases nitrogenadas: Purinas Adenina Guanina Bases nitrogenadas: Pirimidinas Citocina Uracilo Molécula de azúcar: Ribosa No todos los genes que existen en una célula se expresan todo el tiempo. A lo largo del desarrollo y dependiendo de las necesidades celulares, una veces se expresan unos genes y otras veces otros del cual se origina. El gen o los genes que se van a expresar se copian primero mediante un proceso que se denomina transcripción, y que consiste en que la secuencia de nucleótidos correspondiente al gen en cuestión se transcribe a una molécula de ARN mensajero (ARNm), que se separa del ADN y viaja desde el núcleo al citoplasma (si se trata de una célula eucariota). Es como si de toda la información que existe en una norme biblioteca (el núcleo con su inmensa cantidad de ADN) y se sacara una fotocopia de una sola página o de unas pocas páginas, de un libro. Por lo tanto la función del ARNm es señalar la secuencia de acuerdo con la cual los aminoácidos son incorporados del ADN a los ribosomas para dirigir la síntesis de proteína. El ARNm posee una sola banda, es lineal complementaria a la del ADN del cual se origina. Es metabólicamente muy activo; en la célula existen tantos ARN como genes deben ser transcrito el mensaje escrito en nucleótidos tiene que traducirse en aminoácidos. Este proceso se denomina traducción. El “diccionario” lo constituyen las moléculas de ARN transferente (ARNt) que son moléculas de estructura compleja, tan hábilmente diseñada, que por uno de sus extremos se unen a un aminoácido determinado, mientras que por el otro se unen a un pedacito de tres nucleótidos determinados por el ARN mensajero, llamado Codón. Se encuentra en el citoplasma celular en forma libre, funciona como aceptor de aminoácidos y es específico de cada uno de ellos, existen en la células más de veinte tipos de moléculas aproximadamente, constituye el 15 % del total del ARN celular. De este modo, por cada tres nucleótidos del mensajero se va colocando el aminoácido que corresponde, realizándose luego el enlace peptídico entre los aminoácidos sucesivos y resultando finalmente sintetizado el polipéptido correspondiente. El reconocimiento de los codones por las moléculas de ARNt y la síntesis de polipéptidos se lleva a cabo en los ribosomas, que son estructuras formadas por ARN ribosómico (ARNr) y proteínas. El ARN ribosomal (ARNr) es un orgánulo celular constituido por ARN y proteínas en cantidades iguales. La función principal es unirse a la molécula de ARNm y leer el código genético. Traducción de la información hereditaria: El ARNm sale del núcleo al citoplasma, se dirige a los ribosomas donde se encuentran las proteínas. La información del ARNm es leída por la molécula de ARNt, que contiene una secuencia de tres bases nitrogenadas llamadas tripletes, a la que corresponde un aminoácido específico Las moléculas del ARNt adoptan una forma de hoja de trébol, con 4 brazos y el brazo central se encuentra el anticodón, que es el triplete complementario al triplete del ARNm que se esté leyendo. La información que contiene el ARNm es leída en tripletes y cada uno de estos tiene su triplete complementario de ARNt que codifica para un aminoácido específico. Ejemplo, si el triplete del ARNm (codón) es GCA (guanina, citocina, adenina) corresponde en el ARNt con el triplete (anticodón) CGU (citocina, guanina, uracilo este ARNt busca en citoplasma su aminoácido específico: alanina, y así continua la lectura.