Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Iztacala Itzel Romero Sandoval Raymundo Coate Camacho Mauricio Hernández Gallardo Profras: Ma. de los Ángeles García Gómez Elvia Lucía Pavón Meza Grupo: 2405 Proto: primero; zoo: animales (Protozoarios) CARACTERISTICAS GENERALES • Organismos unicelulares • Morfológicamente, toda la actividad vital se lleva a cabo en una célula • Las varias actividades son comparables, en función, con los órganos de un metazoario o metazoo, los cuales están compuestos de una gran numero de células agrupadas en tejidos • Por lo tanto posen orgánulos especializados Ameba • El cuerpo de todos los protozoarios está formado de una masa de citoplasma rodeada de una membrana, en cuyo interior se encuentran uno o varios cuerpos que contienen cromatina capaces de formar cromosomas y conformaciones membranosas como el retículo endoplásmico, aparato de Golgi, las mitocondrias y las vacuolas. Protozoarios son entonces organismos eucariontes que han evolucionado en sentido celular. Pequeños miden dos o tres micras y los más grandes hasta más de unos milímetros de diámetro y su tamaño también tiene relación con el lugar donde viven Paramecium De acuerdo con su hábitat se pueden considerar dos grupos importantes de protozoos : las especies de vida libre y aquéllas asociadas con otros organismos, que incluirán a los parásitos Vida libre -Agua dulce y salada -En el suelo -En materia orgánica en descomposición Los factores que influyen son, temperatura, luz composición química, acides y cantidad de alimento presente en el agua y grado de adaptabilidad individual del protozoo a los diversos cambios del medio ambiente Parásitos Algunos protozoos pertenecientes a todos los grupos, viven de, o en el interior de otros organismos Las relaciones entre los huéspedes y los protozoos difieren de varios modos, distinguiendo tres tipos de asociaciones: Parasitismo Asociaciones Giardia Simbiosis Comensalismo Fisiologia de los protozoos • Los protozoos presentan una gran variedad de tipos de nutrición, las cuales son: autótrofas y heterótrofas. • AUTOTROFAS: Es aquella en la que los protozoos son capaces de elaborar materia organica como carbohidratos simples apartir de compuestos inorgánicos, siempre en presencia de la luz solar. Po lo que tambien a este tipo de nutrición se le denomina holofitica • Heterótrofo: este tipo de nutrición consiste en la incorporación de material orgánico alimenticio al protozoos y puede ser de dos tipos: osmotrofa o soprozoica. • Osmotrofa: Es cuando las partículas alimenticias se encuentran disueltas en el medio ambiente y pasan por osmosis a través de la membrana estas sustancias son compuestos simples derivados de a descomposición de materia vegetal y animal o parte de los fluidos internos del hospedero, esto es en el caso de los protozoos parasito. • Holozoica: Consiste en la ingestión de alimentos solidos y que se lleva a cabo en la fagocitosis. Respiración de los protozoos • Los protozoos obtienen el oxigeno necesario para sus actividades metabólicas de dos maneras, la mayoría de las formas libres y unos cuantos parasitos, absorben oxígenos libre del medio que los rodea, atraves de la superficie general del cuerpo, por lo que se les llama aerobicos. • El otro método de respiración son los anaeróbicos, es decir que la mayoría de los protozoos parasitos y polisaprobicos obtienen el oxigeno por descomposición de otras sustancias, como el bióxido de carbón. Técnica de Preservación para protozoos El zooplancton puede ser encontrado en cuerpos de agua como lo son el océano y lagos, uno de sus representantes mas conocidos es el krill. Para capturar el zooplancton en su medio acuático es necesario utilizar una red que tiene huecos de apenas unas micras de ancho (esto evita que el zooplancton escape de la trampa debido a su tamaño). Una vez teniendo al zooplancton en la red esta es lavada de afuera hacia adentro con el propósito de agolpar a los microorganismos en el fondo de la red. Después se vacía todo el zooplancton en el interior de un frasco de plástico de 1 litro (la red puede poseer el envase en el fondo). Es muy importante aforar con agua de mar el frasco y la biomasa del zooplancton (3/4 del frasco) para añadir 100 ml de formaldehído puro (38%) neutralizado con borato de sodio para fijar y conservar la muestra al 4%, si al finalizar esta operación quedo espacio en el frasco, aforarlo con agua de mar. Cada una de las muestras recolectadas es rotulada con etiquetas internas y externas con los datos principales de la recolecta (fecha, hora, estación, la profundidad, Lat. N y Lon. W), y como complemento la tapa del frasco también es rotulada. También existen protozoos fuera del ambiente acuático, estos viven dentro de otros seres vivos en lo que conocemos como Parásitos, para fijarlos y observarlos detenidamente existe un método estandarizado en el que se utiliza el fijador conocido como Schaudinn, el cual es un compuesto de bicloruro de mercurio y alcohol, que se suele usar para fijar muestras fecales a las que posteriormente se les aplica tinción para estudios de protozoos parasitarios intestinales. Con líquido de Schaudinn Esparcir el mucus donde están contenidos los parásitos en una capa fina sobre el portaobjeto. Luego coloque el portaobjeto con el material hacia abajo en una jarra con líquido de Schaudinn por un período de 15 a 20 minutos, lavándolo entonces con etanol 70°. Luego transfiéralo a una solución de yodo etanol 70° (la solución deberá tener color té fuerte). El yodo remueve el cloruro de mercurio. Mantener en dicha solución hasta que quede de color marrón. Entonces lavar con alcohol 70° hasta su completa decoloración y guardar en un envase de portaobjetos. Para prevenir que los portaobjetos se toquen entre sí, se colocan aros de papel grueso entre ellos para separarlos. El diámetro interior de estos aros deberá dejar libre el frotis. Finalmente, etiquete los portaobjetos y tíñalos con hematoxilina de hierro FIJACIÓN Y CONSERVACIÓN DE PARÁSITOS. 1º) Relajación: Con frío, calor, soluciones alcohólicas. 2º) Conservación indefinida: Los parásitos se pueden conservar indefinidamente en recipientes herméticos con líquidos fijadores como el formol 4% o el alcohol 70 %. La cantidad de líquido fijador con respecto a la masa del material fijado será aprox 10:1. MÉTODOS DIRECTOS • • • • • • • • • • Los materiales pueden ser tratados previamente, para concentrar y/o mejorar la visualización de parásitos y hongos en ellos. EJEMPLOS Coproparasitario: incluye limpieza de la suspensión de materias fecales y enriquecimiento por centrifugación. Tratamiento de expectoraciones con soluciones cáusticas (reblandece el mucus y “aclara” las preparaciones). • • • • • • • • • EXAMEN EN FRESCO •El material se coloca sobre una lámina portaobjetos, montado en algún medio líquido o no, cubierto con una laminilla, para su observación al microscopio. Los líquidos de montaje (solución salina fisiológica, hidróxido de sodio o potasio 10-20%, lactofenol-azul algodón, lugol, glicerina tamponada) facilitan la observación microscópica evitando distorsiones de la luz, reblandeciendo el material y/o aumentando el contraste de los objetos buscados. • • • • • CULTIVOS II MEDIOS SELECTIVOS Sirven para el aislamiento de un agente o grupo de agentes determinados Tienen una formulación muy bien definida • • • • • CULTIVOS I MEDIOS GENERALES Sirven para el aislamiento primario de una variedad de agentes Pueden ser modificados con el agregado o cambio • de algún componente para darle mayor • especificidad Salud publica Tecnología Importancia Económica Marea Roja Biológica Donde representan la conexión trófica entre los productores y recicladores de nutrientes Son considerados como un eslabón de la cadena alimenticia productores de materia orgánica Importancia Ecológica depredadores naturales de bacterias contribuyen a la formación del sedimento marino Conforman al zooplancton en mares, océanos y cuerpos de agua que a su ves, sirven de alimento para muchas otras especies ALGUNAS LINEAS DE INVESTIGACIÓN • Una gran parte de especies es actualmente una herramienta indispensable para la biología molecular Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas en América Latina, T. brucei provoca la enfermedad del sueño en África, mientras que Leishmania sp. es el agente etiológico de la leishmaniasis en todo los continentes, salvo Oceanía. Nuestro laboratorio estudia los mecanismos moleculares involucrados en la regulación postranscripcional de la expresión genética en parásitos protoozoarios, al mismo tiempo que caracteriza posibles blancos de ataque para el desarrollo de agentes quimioterápicos y vacunas en la enfermedad de Chagas. (Parasitología Molecular) • Se utilizan también como modelos celulares en investigación biomédica y aún como agentes para el control biológico contra ciertos insectos vectores de importantes enfermedades • Muchos protozoos se utilizan en paleontología como fósiles índice