REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD RAFAEL URDANETA FACULTAD DE INGENIERÍA ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA OS D A RV E S E SR O H C E R DE SELECCIÓN DE UN BIOCIDA PARA LA ELIMINACIÓN DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN PLANTAS DE INYECCIÓN DE AGUA EN EL PATIO TANQUE ULE (PDVSA) MARACAIBO, SEPTIEMBRE DE 2005 REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD RAFAEL URDANETA FACULTAD DE INGENIERÍA ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA OS D A RV E S E SR O H C E R DE “SELECCIÓN DE UN BIOCIDA PARA LA ELIMINACIÓN DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN PLANTAS DE INYECCIÓN DE AGUA EN EL PATIO TANQUE ULE (PDVSA)” Trabajo Especial de Grado presentado para optar al título de Ingeniero Químico Realizado por: Br. Delainy Carolina González Labarca MARACAIBO, SEPTIEMBRE DE 2005 ii Este jurado aprueba el trabajo especial de grado titulado “SELECCIÓN DE UN BIOCIDA PARA LA ELIMINACIÓN DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN PLANTAS DE INYECCIÓN DE AGUA EN EL PATIO TANQUE ULE (PDVSA)” presentado por la bachiller González Labarca, Delainy Carolina, C.I: 16.458.286, para optar al título de Ingeniero Químico en la Universidad Rafael Urdaneta. Maracaibo Septiembre de 2005. OS D A RV E S E Ing. José Ramón S RFerrer González. O H C C.I: 3.924.460. E R DE Tutor Académico. __________________________ Jurado: Prof. Ana Castro. C.I: 6.728.686. __________________________ Ing. Oscar Urdaneta B. C.I: 4.520.200. Director de la Escuela de Ingeniería Química. Jurado: Ing. MSc. Edinson Alcántara A. C.I: 3.453.064. __________________________ Ing. José Bohórquez. C.I: 3.379.454. Decano de la Facultad De Ingeniería. iii REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD RAFAEL URDANETA FACULTAD DE INGENIERÍA ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA OS D A RV E S E SR O H C E R DE “SELECCIÓN DE UN BIOCIDA PARA LA ELIMINACIÓN DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN PLANTAS DE INYECCIÓN DE AGUA EN EL PATIO TANQUE ULE (PDVSA)” Trabajo Especial de Grado presentado para optar al título de Ingeniero Químico ______________________________________ GONZÁLEZ LABARCA, DELAINY CAROLINA. C.I: 16.458.286 MARACAIBO, SEPTIEMBRE DE 2005 iv DEDICATORIA Quiero dedicar mi trabajo especial de grado a todas las personas que de una u otra manera colaboraron conmigo y me dieron fuerzas para alcanzar esta gran meta. A Dios, por haberme dado la vida, por encaminar mi destino y por darme OS D A RV la oportunidad de ser quien soy. Gracias por estar hoy y siempre a mi lado. E S E R Sincondicional, O vida, por darme siempre su apoyo guiarme por el buen camino, H C E ER hacer de mí sueño realidad. Espero estén orgullosos de lo que han logrado. Deste A mis Padres Delso y Liyibeth, por ser las personas más importante en mi Gracias por existir, este es mi más preciado regalo para ustedes. Nunca los defraudaré. Los amos. A mis Hermanos Delso y Delimar, por estar siempre a mi lado en todo momento. Los quiero mucho. A alguien Especial en mi vida a ti Terry Pírela, por brindarme todo tu apoyo, aconsejarse y estar allí cuando más lo necesito. Gracias por ser tan Especial conmigo. A mi Tío Dírimo, por ser quién me ayudó a conseguir éste gran logro. A mi Primo Dírimo Jr., porque siempre estuvo allí en lo que necesitara. A mi Tutor Ing. José Ferrer, por brindarme su apoyo para lograr mi meta y por guiarme por el camino del éxito. v A mis Amigos y Compañeros de trabajo en la Empresa Tratamientos Químicos, C. A., por haberme dado su apoyo y confianza que tanto valoro Ing. Michele Garófalo, Sr. Oscar Antúnez, Sr. Néstor Méndez y a todos mil gracias. A todos ustedes, les dedico este pedacito de mí, que no es mas que el símbolo de esa puerta que deja atrás un ansiado final y da paso a un temeroso comienzo. E S E SR O H C E R DE OS D A RV Delainy González. vi AGRADECIMIENTOS A Dios todopoderoso, por darme la fortaleza y tener perseverancia para lograr culminar con éxito éste mi trabajo de grado. A mis Padres, por su ayuda, apoyo y educación recibida por ellos hasta ahora. OS D A RV E S E SR O H C E R E Dírimo ya que con su ayuda y con el material prestado pude A mi DTío A la Empresa Tratamientos Químicos, C.A., por prestarme sus instalaciones para la realización de esta investigación. hacer posible éste mérito. Al Ing. Dírimo Jr González., Ing. Michele Garófalo y el Sr. Oscar Antúnez, porque estuvieron dispuestos en todo momento a ayudarme y brindarme su apoyo incondicional. A la Universidad Rafael Urdaneta, por brindarme los conocimientos esenciales para cumplir con la meta de ser Ingeniero Químico. A mi Tutor Ing. José Ferrer, quien estuvo conmigo apoyándome y brindándome toda su experiencia y conocimiento durante el desarrollo de mi trabajo. A mi Asesora Metodológica Prof. Milagros Quijada, por su colaboración, ayuda y paciencia para aclarar todas las dudas de redacción y normas a seguir para lograr la culminación de mi tesis. vii A todo el Personal Docente, por brindarme sus conocimientos a lo largo de toda nuestra trayectoria dentro de la institución, en especial a mi tutor José Ferrer, a mi director de escuela Oscar Urdaneta y a todos los demás profesores que de una u otra manera me dieron los conocimientos necesarios para poder ser un Ingeniero Químico. …Y a todas aquellas personas que me motivaron y me ayudaron a culminar éste gran paso tan importante para mí. Sobre todo a mis padres, OS D A RV hermanos y esa personita tan especial que llegó a mi vida justo en el momento que E S E SR O H C E R DE más lo necesitaba. A todos muchas Gracias. viii González Labarca, Delainy Carolina. Selección de un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). Universidad Rafael Urdaneta, Facultad de Ingeniería, Escuela de Ingeniería Química. Tesis de Pregrado. Maracaibo Septiembre de 2005. RESUMEN Se seleccionó un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE-PDVSA. En el sistema donde circulan esta agua, la cantidad de bacterias sulfato reductoras debe ser igual o menor a 100 colonias/ml para evitar el taponamiento de los yacimientos y prevenir la corrosión de líneas y equipos, y así asegurar la calidad del agua de inyección y garantizar la factibilidad del proceso de recuperación secundaria del petróleo sin afectar sus yacimientos. Para alcanzar este propósito, se analizó física y químicamente el agua que se encuentra en el patio tanque ULE-PDVSA; en la cual se evaluaron 8 biocidas a base de Glutaraldehído y THPS en el laboratorio, cumpliendo todos con el criterio de calidad. Aplicando el método API-RP-38 durante un lapso de 7 días se determinó que el biocida (producto) TQ-4 a base de Glutaraldehído fue el mas óptimo y rentable para este tipo de agua de formación a una dosis de 240 ppm por 4 horas. Probado en campo, el agua tratada cumplió con el criterio de calidad establecido para bacterias sulfato reductoras. OS D A RV E S E SR O H C E R DE Palabras claves: Biocida, Bacterias Sulfato Reductoras, Plantas de Inyección de Agua. ix González Labarca, Delainy Carolina. Selection of a biocide to eliminate the sulfate reducing bacteria on plants of water injection at the ULE (PDVSA) yard tank. Gonzalez L, Delainy C. University Rafael Urdaneta. Faculty of Engineering, School of Chemical Engineering. Thesis of Pregrado. Maracaibo September of 2005. ABSTRACT It was selected a Biocide to eliminate the sulfate reducing bacteria on plants of water injection at the ULE (PDVSA) yard tank. In the systems where these waters flow, the quantity of sulfate reducing bacteria must be equal or minus to 100 colonies/ml to avoid the deposits to be obstructed and prevent the corrosion of lines and equipment, to insure the quality of the water injection and guarantee the feasibility of the process of secondary recovery of the petroleum without affecting their deposits. To reach this purpose, was analyzed physically and chemistry the water in the yard tank ULE (PDVSA); in which 8 Biocides were evaluated on base of Glutaraldehyde y THPS in the lab, fulfilling with the quality criterion. Applying the method API RP 38, during 7 days was determined that the product TQ-4 on base of Glutaraldehído was the very best and profitable for this type of water of formation on doses of 240 ppm. Tested on camp, the treated water fulfilled the quality criterion established for this sulfate reducing bacteria. OS D A RV E S E SR O H C E R DE Passwords: Biocides, Sulfate reducing bacteria, plants of water injection. x ÍNDICE GENERAL Pág. Dedicatoria…………………………………………………………………….v Agradecimiento………………………………………………………………..vii Resumen………………………………………………………………………..ix Abstract…………………………………………………………………………x Índice General………………………………………………………………….xi OS D A RV Lista de Tablas…………………………………………………………………xiv E S E SR O Introducción…………………………………………………………………….1 H C E R DE Lista de Fotos…………………………………………………………………..xv Lista de Figuras………………………………………………………………..xvi CAPÍTULO I EL PROBLEMA Planteamiento del Problema…………………………………………………….4 Formulación del Problema……………………………………………………....6 Objetivos de la Investigación……………………………………………………6 Objetivo General………………………………………………………..6 Objetivos Específicos…………………………………………………..6 Justificación……………………………………………………………………..7 Delimitación de la Investigación………………………………………………...8 Delimitación Espacial…………………………………………………..8 Delimitación Temporal………………………………………………....8 xi CAPÍTULO II MARCO TEÓRICO Antecedentes de la investigación………….…………………………………..10 Bases Teóricas………………………………………………………………...12 Bacterias………………………………………………………………12 Clasificación de las Bacterias…………………………………………12 OS D A RV Estructura de una Célula Bacteriana…………………………………..14 E S E R SCampo O Bacterias Perturbadoras en el Petrolífero……………………..23 H C E Corrosión Microbiana………………………………………………....28 DER Crecimiento Microbiano…………………..…………………………..17 Identificación y Contaje de Bacterias………………………………….20 Control de Microorganismos………………………………………….29 Biocida………………………………………………………………...29 Clasificación de Biocida………………………………………………30 Factores Determinan la Elección de un Biocida……………………....37 Función de los Biocida en la Recuperación de Crudo………………...39 Definición de Términos Básicos……………………………………………...41 Mapa de Variables……………………………………………………………46 xii CAPÍTULO III MARCO METODOLÓGICO Tipo de Investigación…………………………………………………………48 Diseño de la Investigación……………………………………………………48 Técnica de Recolección de Datos…………………………………………….49 Procesamiento, Análisis e Interpretación de los Datos……………………….49 Fases de la Investigación……………………………………………………...50 OS D A RV E S E S R IV O CAPÍTULO H C E R DE ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS Resultados y Análisis de los Resultados……………………………………...56 Conclusiones………………………………………………………………….74 Recomendaciones…………………………………………………………….75 Referencias Bibliográficas……………………………………………………76 xiii LISTA DE TABLAS Tablas Pág. 1 Diferencias entre cada Biocida Evaluado…………………………..38 2 Resultados de pH, dureza, alcalinidad, hierro y crudo………….....56 3 Resultados del cultivo (Blanco)…………………………………....57 4 E S E Resultados del cultivo (Producto S RTQ-2)…………………………...61 O H C (Producto TQ-3)…………………………....62 E Resultados del cultivo R DE 5 6 OS D A RV Resultados del cultivo (Producto TQ-1)…………………………...59 7 Resultados del cultivo (Producto TQ-4)…………………………....64 8 Resultados del cultivo (Producto TQ-5)…………………………....65 9 Resultados del cultivo (Producto TQ-6)…………………………....67 10 Resultados del cultivo (Producto TQ-7)…………………………....68 11 Resultados del cultivo (Producto TQ-8)…………………………....70 12 Resultados de la Efectividad de los Biocida…………………….….72 xiv LISTA DE FOTOS Fotos Pág. 1 Blanco……….………………………………………………………58 2 Producto TQ-1……………………………………………………....60 3 Producto TQ-2……………………………………………................61 4 Producto TQ-3……………………………………………................63 5 Producto TQ-4……………………………………………................64 6 Producto TQ-5……………………………………………................66 7 8 OS D A RV E S E SR O Producto TQ-6………………………………………………………67 H C E R Producto DE TQ-7………………………………………………………69 9 Producto TQ-8………………………………………………………70 10 Producto Seleccionado TQ-4………………………………………..72 xv LISTA DE FIGURAS Figuras Pág. 1 Esquema de una Célula Bacteriana……………………………..…..14 2 Curva del Crecimiento Microbiano……………………………..…..19 3 Método API-RP-38. Cultivo de Bacterias Extinción por Dilución....21 4 Cultivo de Bacterias, Extinción por Dilución………………………23 5 6 7 OS D A Bacterias Sulfato Reductoras……………………………………….26 RV E S E R S Blanco……………………………………………………………….58 HO C E Producto DERTQ-1………………………………………………………60 8 Producto TQ-2………………………………………………………62 9 Producto TQ-3………………………………………………………..63 10 Producto TQ-4………………………………………………………65 11 Producto TQ-5………………………………………………………66 12 Producto TQ-6………………………………………………………68 13 Producto TQ-7………………………………………………………69 14 Producto TQ-8………………………………………………………71 15 Efectividad de los Biocida…………………………………………..73 xvi INTRODUCCIÓN Las bacterias sulfato reductoras (BSR) pueden vivir en grupos o colonias fijadas a superficies sólidas o suspendidas en el agua. Las bacterias fijadas a la superficie son llamadas bacterias sésiles, cuando ellas están suspendidas en el agua se denominan bacterias planctónicas. OS D A RV Estas bacterias causan serios problemas en las plantas de inyección de E S E S Rde corrosión y pueden causar directamente O participan directamente en la reacción H C E R picaduraD enE la base de la biopelícula producida por la colonia bacteriana. 2. La agua. Ellas reducen el sulfato a sulfito y sulfuro en el agua. Cuatro tipos de problemas pueden resultar de la actividad de reducir el sulfato: 1. Las BSR generación de ácido sulfhídrico (H2S) por parte de las BSR puede incrementar la corrosividad del agua. 3. La presencia de BSR en un sistema que originalmente era libre de H2S crea la posibilidad de agrietamiento por acción del sulfuro y aparición de picaduras en el acero al carbono. 4. La corrosión ácida resulta en la formación de sulfuro de hierro soluble que es un excelente material de taponamiento. Los productos químicos usados para el control de los microorganismos en los sistemas de tratamientos de agua de deshidratación se denominan biocida. Estos contienen uno o más compuestos químicos tales como aldehídos, compuestos de amonio cuaternario y aminas. El Glutaraldehído es ampliamente usado para el control bacteriano en las aguas de deshidratación de petróleo, pero no es eficiente para penetrar la biopelícula donde se establecen las BSR y es frecuentemente mezclado con otros productos químicos tales como sales de amonio cuaternario para aumentar su eficiencia en la penetración. 1 Los biocida no son universales en su poder de control de las BSR, por lo que cada biocida debe ser probada con la flora bacteriana presente en el sistema de estudio. Estos no controlan el crecimiento bacteriano instantáneamente por lo que requieren un tiempo suficiente de contacto cuando se adicionan por carga. El período de tratamiento puede estimarse a través de pruebas de tiempo- dosis de control bacteriano. El análisis del agua que entra a la planta de tratamiento en estudio, OS D A RV evidenció la presencia de BSR en una cantidad mayor de 100 colonias/ml, lo cual, E S E SR O H C E R E La se desarrolló en cuatro fases las cuales involucraron: 1) Dinvestigación aunado al alto costo de tratamiento químico con biocida, hace necesario la adecuación de este tratamiento químico de la planta (Carrasquero, 2002). La caracterización del medio de crecimiento microbiano; 2) La determinación del crecimiento microbiano sin biocida; 3) La determinación del crecimiento microbiano con biocida y 4) Establecer el efecto de la eliminación de las bacterias sulfato reductoras. El objetivo general de este trabajo es seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULÉ (PDVSA). 2 OS D A RV E S E SR O H C E R DE CAPÍTULO I EL PROBLEMA CAPÍTULO I EL PROBLEMA Planteamiento del Problema. Países a nivel mundial y Venezuela confrontan desde hace muchos años atrás, uno de los grandes problemas como es la corrosión en todas sus formas, OS D A RV provocadas por aguas de efluentes industriales, aguas domésticas y desechos E S E S R la emisión de diversos productos al medio Oocasionar de los peligros la cualC pueden H E R E ambiente. D químicos generados a nivel industrial en las aguas de inyección de pozos. Estos problemas son difíciles de solucionar en una sociedad donde no existe conciencia El Estado Zulia es un área de creciente y acelerado desarrollo de bacterias sulfato reductoras presentes en el Lago de Maracaibo. Este desarrollo cada día conlleva a un aumento de la corrosión sin un previo tratamiento de los efluentes industriales (ULÉ) PDVSA contra dicha bacteria. Actualmente, en el estado existen empresas tratan el agua por diferentes vías para evitar la reproducción de las bacterias sulfato reductoras, por medio de biocida estos se encargan de llevar el control del crecimiento de estos microorganismos reduciendo así la corrosión y por tanto la contaminación del lago. Las bacterias sulfato reductoras son organismos anaeróbicos es decir no necesitan oxígeno para vivir, pueden crecer en agua dulce o salobre, viven en grupos o colonias fijadas a superficies sólidas o suspendidas en el agua; estas bacterias toman el sulfato del agua y lo transforman en H2S (ácido sulfhídrico o sulfuro de hidrógeno). Éste ácido es sumamente corrosivo y ataca al hierro produciendo un precipitado negro más hidrógeno. Por lo tanto al eliminar esta 4 bacteria se elimina la corrosión de los equipos y mejora el hábitat del Lago. (http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S025407702003000100004&lng=es&nrm=iso). Este tipo de bacterias tiene como problema la participación directa en la reacción de corrosión y pueden causar picadura en la base de la biopelícula producida por la colonia bacteriana en las tuberías sumergidas en el Lago. OS D A RV Para evitar los problemas ocasionados por las bacterias sulfato reductoras y E S E R S O biocidas para la eliminación del desarrollo de los microorganismos en los sistemas H C E de tratamiento DERde agua de deshidratación. Estos biocida contienen uno o más asegurar la calidad del agua de inyección, además de garantizar la factibilidad del proceso de recuperación secundaria, son usados productos químicos denominados compuestos químicos tales como aldehídos, compuestos de amonio cuaternario y aminas. No son universales en su poder de control de las bacterias sulfato reductoras, en la cual cada biocida debe ser probado con la flora bacteriana presente en el sistema de estudio. Estos no controlan el crecimiento bacteriano instantáneamente por lo cual requieren un tiempo suficiente de contacto cuando se adicionan por carga. Por consiguiente, estas sustancias activas (Biocida) impiden la acción sobre microorganismos nocivos por medios químicos o biológicos. Para ello se contó con el patio tanque ULÉ (PDVSA) para la toma de muestra, por ser uno de los principales patios de occidente la cual maneja grandes cantidades de crudo y por tanto de agua, en donde contiene grandes cantidades de bacterias sulfato reductoras la cual PDVSA controla todos los parámetros de dicha bacteria. Contamos con la empresa Tratamientos Químicos, C. A. para desarrollar el estudio de la selección de un biocida para la eliminación de dichas bacterias. 5 Formulación del Problema. ¿Como seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA)? Objetivos de la Investigación. Objetivo General. OS D A RV Seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras E S E S R Específicos. O Objetivos H C E R Caracterizar DE el medio de crecimiento microbiano del efluente de patio tanque en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). 1.- ULÉ (PDVSA). 2.- Determinar el crecimiento microbiano en el laboratorio físico-químico de la empresa Tratamientos Químicos, C.A., con la finalidad de seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULÉ (PDVSA). 3.- Evaluar el control del desarrollo al utilizar el biocida en el laboratorio físicoquímico de la empresa Tratamientos Químicos, C.A., con la finalidad de seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULÉ (PDVSA). 4.- Establecer el efecto de la eliminación de las bacterias sulfato reductoras de las tuberías y equipos de las plantas de inyección de agua en el patio tanque ULÉ (PDVSA). 6 Justificación de la Investigación. La selección de un biocida a partir de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua permite simular el efecto que éste tendría al controlar y a su vez eliminar estas bacterias en los efluentes del lago, los cuales además de generar un problema a la formación de gases malolientes como el ácido sulfhídrico (H2S), ocasionan graves problemas en la corrosión de los metales. OS D A RV Por otra parte, las cantidades crecientes de bacterias sulfato reductoras E S E SunaRadecuada disposición. Esto permite además O alternativa lo cual permita darles H C E R demostrar la importancia de la realización de investigaciones que tiendan a DE actualmente generadas en las plantas de inyección de agua de ULÉ (PDVSA) y creando serios problemas de polución, hacen necesaria la búsqueda de una controlar el nivel de corrosión de tuberías y equipos. Lo anteriormente expuesto, sumado a una sociedad de microorganismos en la cual, las bacterias sulfato reductoras, contenidas en los efluentes de patio tanque ULÉ (PDVSA), así como la aparición de la formación de gases malolientes y la corrosión de los metales la cual se agrava cada día mas, dejan ver la relevancia de seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras. A futuro se podrán establecer procesos los cuales permitan obtener a gran escala productos (biocida) evitando la corrosión en los metales, la producción de ácido sulfhídrico, el taponamiento de los yacimientos en pozos de inyección y además aseguren la calidad del agua en los mismos, garanticen la factibilidad del proceso de recuperación secundaria del petróleo y este producto sea el más efectivo y a menor costo. De esta manera se pueden satisfacer los requerimientos del entorno aumentando la productividad y calidad de servicio y así lograr eliminar la corrosión de las fuentes de agua producida por los desechos desembocados a los efluentes. 7 Delimitación de la Investigación. Delimitación Espacial. La selección de un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua se llevó a cabo al tomar la muestra en los efluentes de patio tanque ULÉ (PDVSA), ubicada en la costa oriental del lago (Estado Zulia) y al analizar dichas muestras en el laboratorio físico- químico de la OS D A RV empresa Tratamientos Químicos, C.A., ubicada en la zona industrial segunda E S E SR O H C E R Delimitación Temporal. DE etapa calle 149B con avenida 71 al lado de la Alfarería Alfa Z y detrás de Polar Lago II. La investigación se realizó en un periodo comprendido entre Enero de 2005 y Julio de 2005. 8 OS D A RV E S E SR O H C E R DE CAPÍTULO II MARCO TEÓRICO CAPÍTULO II MARCO TEÓRICO Antecedentes de la investigación En 1994, Duque presentó como trabajo especial de grado para optar al OS D A RV título de Ingeniero Químico, de la Universidad del Zulia, un estudio titulado “EFECTOS DE LAS BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS DE LAS E S E OS enRun sistema dinámico con circulación en un en la cual se evaluó C estaH aleación Edel Lago de Maracaibo, proveniente del canal de la bahía de el R E solo paso de agua D AGUAS DEL LAGO DE MARACAIBO SOBRE LA ALEACION Cu- Ni”, Tablazo Planta Eléctrica del Complejo Petroquímico Zulia. Los resultados físicoquímicos indicaron condiciones propicias para el desarrollo microbiano determinándose la presencia de bacterias sulfato reductoras en el orden 1x 107 cel/ml. Este estudio, de sistemas de monitoreo, permitió caracterizar el mecanismo de falla por corrosión, encontrando micro picaduras y biocapas debajo de depósitos localizados en solo 6 meses de circulación. En 1998, Flores y Torres realizaron, como trabajo especial de grado para optar al título de Ingeniero Químico, de la Universidad del Zulia, un estudio titulado “TRATAMIENTO ANAERÓBICO MESOFÍLICO POR CARGA DE AGUA RESIDUALES SINTÉTICAS A ALTAS CONCENTRACIONES DE SULFATO”, donde aplicaron los procesos anaerobios para el tratamiento de compuestos aromáticos en aguas de desechos, tales como el fenol y benzonato los cuales pueden ser degradados efectivamente mediante estos procesos. Este estudio determinó la existencia de una influencia inhibidora por parte de las bacterias sulfato reductoras sobre las bacterias metano productoras, independientemente de la concentración de sulfato en el medio. 10 En 1999, Álvarez y Arrieta presentó como trabajo especial de grado para optar al título de Ingeniero Químico, de la Universidad del Zulia, un estudio titulado “ADECUACIÓN DE LOS TRATAMIENTOS FÍSICO-QUÍMICOS DE PLANTAS DE INYECCIÓN DE AGUAS EN POZOS”, el cual tuvo como objetivo el acondicionamiento de los tratamientos físico-químicos de las plantas de aguas efluentes de Puerto Miranda y Bachaquero. Estas deben cumplir con los parámetros para asegurar la calidad del agua de inyección y garantizar la factibilidad del proceso de recuperación secundaria del petróleo sin afectar los OS D A RV yacimientos respectivos. Para alcanzar este propósito, se realizaron análisis físicos-químicos y microbiológicos para caracterizar las aguas de las E S E S Rinhibidores de incrustaciones y biocida los O productos químicos como clarificantes, H C E R cuales fueron DEprobados en campo. segregaciones y sus mezclas en cada planta, así como se evaluaron diversos En 2002, Carrasquero presentó como trabajo especial de grado para optar al título de Ingeniero Químico, de la Universidad del Zulia, un estudio titulado “CORROSIÓN SULFÍHIDRICA Y PERMEACIÓN DE HIDRÓGENO BAJO CONDICIONES QUE SIMULEN CORROSIÓN POR BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS”, en la cual estudió la morfología del ataque del hierro y la permeación de hidrógeno a las condiciones alcanzadas por la difusión del ácido sulfhídrico abiótico. Este trabajo se hizo con la finalidad de comparar la acción corrosiva del ácido sulfhídrico biótico con la acción abiótica del ácido sulfhídrico, utilizando un substrato como el hierro. En 2003, Barrientos realizó como trabajo especial de grado para optar al título de Ingeniero Químico, de la Universidad del Zulia, un estudio titulado “CORRELACION ENTRE EL CRECIMIENTO SÉSIL DE LA DESULFOVIBRIO DESULFURICANS SUBESPECIE DESULFURICANS CON LOS PRODUCTOS DE CORROSIÓN Y LA MORFOLOGÍA DE ATAQUE DEL HIERRO”, éste estudio consistió en 7 ensayos a nivel de 11 laboratorio lo cual permitieron evaluar el comportamiento del crecimiento bacteriano a nivel sésil de bacterias sulfato reductoras identificada como desulfovibrio desulfuricans subespecie desulfuricans ATCC 7757 sobre una lamina de hierro puro a diferentes períodos de exposiciones: 3,6,9,15,18,21,24 horas. Estos resultados permitieron establecer una correlación entre el crecimiento nivel sésil, la morfología de ataque y los productos de corrosión. Bases Teóricas OS D A RV Bacterias E S E OS yRlongitudes de 1 a 100 veces ese valor. diámetro del orden deC 0.5H micrones E de especies diferentes de bacterias que se clasifican en R E Existen miles D Son organismos extremadamente pequeños, de diferentes formas y géneros y familias, (Tratamientos Químicos, C.A.). Clasificación de las Bacterias 1.- Según su Forma - Coccus: Son bacterias redondas o esféricas. - Bacillus: Son bacterias con forma de bastón. - Vibrio: Son bacterias con forma de “S” o de una coma. - Clostridium: Son bacterias que tienen forma de agujas pequeñas. - Spirillum: Son bacterias que tienen diferentes formas. El nombre completo de una especie de bacterias describe en general forma y funciones en donde Desulfovibrio desulfuricans, es una especie de bacteria, pequeña que vibra rápidamente y reduce iones sulfato y la bacteria Clostridium Nigrificans es una bacteria con forma de aguja que deja negras las aguas. (Tratamientos Químicos, C.A.). 12 2.- Según si Requiere o no Oxígeno - Aeróbicas: Bacterias la cual requieren oxígeno. - Anaeróbicas: Bacterias la cual crecen solo en ausencia de oxígeno. - Facultativas: Bacterias la cual pueden crecer ya sea en presencia o en ausencia de oxígeno. (Tratamientos Químicos, C.A.) 3.-Según el tipo de sustrato OS D A RV E S E SR O como es el caso de lactato de sodio. H C E R E ecuación describe un caso típico la cual corresponde a una La Dsiguiente • Heterotróficas: Si la bacteria consume un producto orgánico especie de Desulfovibrio: Ecuación Nº1: 2 CH3CHOHCOONa + MgSO4 → 2 CH3COONa + CO2 + MgCO3 + H2S + H2O Sustrato orgánico + Sulfato inorgánico (Lactato de sodio). (Tratamientos Químicos, C.A.) • Autotróficas: Si las bacterias metabolizan el hidrógeno gaseoso. La siguiente ecuación describe el proceso: Ecuación Nº2: 4 H2 + HCO3 + SO4= → Sº + HO¯ + CO2 ↑ + 4 H2O 13 Corresponde a otros tipos de Desulfovibrio, en la cual se requiere una fuente de carbono orgánico por oxidación proporcionando el hidrógeno gaseoso, (Tratamientos Químicos, C.A.). En general los resultados de campo indican la totalidad de bacterias del tipo Desulfovibrio sin especificaciones posteriores, puesto que el efecto es el mismo: reducen sulfato inorgánico a sulfuro, (Tratamientos Químicos, C.A.). OS D A RV Estructura de una Célula Bacteriana E S E R S externas O Algunas de estas estructuras son y otras incluidas dentro del propio H C E R cuerpo D de E la bacteria. Las estructuras externas de las bacterias son el flagelo Las bacterias están rodeadas por una serie de envolturas y apéndices. (órgano de locomoción), la fimbria o pili (órgano de adherencia), la cápsula o “slime”, y la pared celular, ésta última forma parte del cuerpo bacteriano. Como todas las células, las bacterias tienen una estructura indispensable: la membrana citoplasmática, el citoplasma y los ácidos nucleicos. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 22,23). Figura 1 Esquema de una Célula Bacteriana Fuente: Núñez, Gómez y Carmona (1991) 14 a) Flagelos: Son órganos de locomoción de los microorganismos de las cuales la poseen. Ellos son delgados, filamentosos, compuestos de una proteína elástica: la flagelina, miden de 3 a 12 um, se encuentran unidos a la pared de la bacteria y a la membrana citoplasmática por un cuerpo basal y un gancho. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 25). b) Pili: Son estructuras pequeñas, filamentosas, compuestas de subunidades de una proteína llamada pilina, solo se visualizan al microscópico OS D A RV electrónico. Estos pilis son más cortos, más pequeños, menos rígidos y muchos más numerosos de los flagelos. Igual al flagelo salen de un cuerpo basal de la E S E R Sconsidera O como en las no móviles, se les órganos de adherencia más a la de H C E R movilidad. El pili tiene un papel muy importante en la conjugación bacteriana, es DE membrana citoplasmática, pueden estar presentes tanto en las bacterias móviles el llamado pili sexual; durante la transferencia de material genético (DNA), uno de los pili se llama pili donante o masculino y el otro pili receptor o femenino, (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 26). c) Cápsula o “slime”: Muchas bacterias cuando crecen bajo condiciones apropiadas, pueden estar rodeadas de una capa gelatinosa, pobremente definida, que se colorea con dificultad a la cual se le denomina cápsula o slime. El tamaño y característica de la cápsula varía ampliamente de una cepa a otra, la sustancia gelatinosa compone la cápsula la cual consiste en un polisacárido o un polipéptido o ambos, de variable complejidad. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 25). d) Pared Celular: Es una estructura rígida en la cual mantiene la forma característica de cada célula bacteriana. Dependiendo de las especies y de las condiciones de cultivo, la pared celular puede suponer desde el 10 por ciento al 40 por ciento del peso seco de la célula. Las paredes celulares no son estructuras 15 homogéneas sino distintas capas la cual varían según el tipo de bacteria, existiendo diferencias tanto en su grosor como composición. Estas diferencias se utilizan para identificar y clasificar las bacterias, así como diferenciarlas mediante la tinción de Gram. (http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/micro2/tema03.html#anchor102665). Entre otras estructuras indispensables tenemos: OS D A RV e) Membrana Citoplasmática o Celular: Es una estructura fina la cual rodea el citoplasma de la célula, se encuentra entre éste y el lado interno de la E S E S Rfunciones, a las otras membranas de los O composición, estructura, y algunas H C E R organismos DEeucarióticos. Está constituida por una bicapa de fosfolípido: fosfatidilpared celular. La membrana citoplasmática de las bacterias es similar en etanolamina, con una estructura protéica; éstas moléculas de proteína pueden estar colocadas a un lado de la membrana o imbricadas de tal forma pueda atravesarlas de un lado a otro. Esta membrana, como las otras, contiene de un 50 a 70 por ciento de proteínas y un 20 a 35 por ciento de lípidos. En el lado externo de la membrana se encuentran enzimas la cual participan en la síntesis de la pared celular y en el otro lado interno enzimas en relación con las funciones del citoplasma. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 27). f) Citoplasma: Tiene un aspecto granuloso, muy fino, esto es debido a la presencia de ribosomas, éstas son estructuras esféricas de 150-200 nm de diámetro, las cuales contienen aproximadamente el 90 por ciento del ARN de la célula bacteriana. El citoplasma contiene un número importante de inclusiones granulares, las cuales básicamente son depósitos de gránulos. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 29). 16 g) Ácidos Nucleicos: De acuerdo a la composición química, los ácidos nucleicos se clasifican en ácidos desoxiribonucleicos (ADN) se encuentran residiendo en el núcleo celular y algunos organelos, y en ácidos ribonucleicos (ARN) actúan en el citoplasma. Se conoce con considerable detalle la estructura y función de los dos tipos de ácidos. (http://superfund.pharmacy.arizona.edu/toxamb/c1-1-1-3.html). OS D A RV Crecimiento Microbiano E S consiste esencial y E R S O específica y equilibrada de los componentes del fundamentalmente enC la H síntesis E protoplasma DEaRpartir de las sustancias nutritivas existentes en el ambiente. El desarrollo de los microorganismos Evidentemente, este proceso depende de las sustancias nutritivas disponibles de sus concentraciones, y es afectado por ellas; asimismo, se requiere un suministro continuo de energía para las reacciones endotérmicas de síntesis. Las bacterias difieren de los organismos superiores en que son unicelulares, es decir durante el desarrollo normal, el aumento de la población depende simplemente del crecimiento de cualquier célula perteneciente a dicha población. Cuando las bacterias han duplicado su tamaño pueden dividirse formando dos células idénticas y capaces de crecer y dividirse a la misma velocidad que las células individuales. Esto significa que el número de células en esa población aumenta en forma exponencial o logarítmica, es decir transcurre siempre el mismo lapso cada vez de duplicarse la población, pero el número de células a la cual participa en cada división se duplica en cada generación. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 61). Si se inocula un medio de cultivo adecuado con bacterias y se toman muestras pequeñas a intervalos regulares de tiempo, la representación gráfica de los datos dará una curva de crecimiento de característica. Generalmente se 17 grafican valores logarítmicos del número de células en lugar de valores aritméticos. Los logaritmos en base 2 son los más útiles, dado que cada unidad de la ordenada representa una duplicación de la población. La curva de crecimiento bacteriano puede dividirse en cuatro fases principales: (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág.64). 1.- Fase de Latencia (laq) o Retardo: Después de la inoculación, hay un aumento de tamaño celular en un momento en el cual la división celular es escasa OS D A RV o nula. Hay un marcado aumento de la actividad metabólica y de la susceptibilidad a los agentes físicos y químicos. Es el período de ajuste necesario E S E S REsta fase depende de la naturaleza de la O compatible con la síntesis celular. H C E R bacteria,D laE edad y el tamaño del inóculo, de la naturaleza del medio del cual para el reabastecimiento del pool de metabolitos celulares hasta un nivel provienen y de los nutrientes contenidos en el nuevo medio. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 64). 2.- Fase de Crecimiento Exponencial o Logarítmica: Durante esta fase, la masa y el número de células se incrementan en forma logarítmica, con un tiempo de generación constante. Es una fase de crecimiento equilibrado durante la cual, todos los componentes celulares aumentan en proporción constante. La velocidad de la división celular va a depender del tipo de bacteria, de la naturaleza del medio, de la temperatura, y en el caso de los organismos aerobios, de la velocidad de oxigenación. Durante esta fase se puede determinar el tiempo de generación, éste se define como el tiempo que tarda un cultivo bacteriano en duplicarse. Para E. coli, en caldo nutritivo a 37 ºC es de 20 minutos. Es la fase ideal para medir la sensibilidad de las bacterias a los agentes antimicrobios. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 64). 3.- Fase Estacionaria: El crecimiento logarítmico finalmente se desacelera debido a la acumulación de productos de desecho, agotamiento de los 18 nutrientes, cambios en el pH y disminución de la concentración de oxígeno. La población bacteriana pasa a una fase de crecimiento estacionario, en la cual el número de células viables permanece más o menos constante. Por lo general, algunas células se dividen, mientras otras mueren. (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, Pág. 64). 4.- Fase de Muerte: En ella la velocidad a la cual mueren las bacterias es mayor a la velocidad de reproducción; por ello, el número de células viables OS D A RV disminuye al paso del tiempo. El tiempo necesario para la muerte de todas las células varía de una especie a otra. Durante esta fase las bacterias adquieren con E S E R SPág. O (Núñez, Gómez y Carmona, 1991, 64). H C E DER frecuencia una morfología atípica, lo cual hace difícil su identificación. Figura 2 Curva del Crecimiento Microbiano Fuente: Núñez, Gómez y Carmona (1991) 19 Identificación y Contaje de Bacterias Un especialista puede identificar los microorganismos utilizando un microscopio y diferentes técnicas de teñido. Sin embargo estas técnicas son muy complicadas y sofisticadas, por lo cual se recurre a otras menos selectivas, pero más apropiadas para el campo petrolífero. Estas técnicas son las de cultivo, es decir hacer crecer las bacterias. Bacterias diferentes requieren alimentación diferentes, o sea “medios de cultivo” distintos, (Tratamientos Químicos, C.A.). OS D A RV Una muestra de agua en la cual se sospecha la existencia de bacterias se E S E R OsonSrelativamente Como los medios de C cultivo específicos se puede identificar el H E ERpresentes observando el tipo de medio en el cual se reproducen. tipo de D bacteria coloca en un medio de cultivo, de este modo las bacterias crecen y se multiplican. Efectuando el cultivo a diferentes diluciones se puede obtener una indicación del número de bacterias presentes. Existen diferentes versiones de las técnicas de identificación y contaje, (Tratamientos Químicos, C.A.). Método API-RP-38 Es una técnica del recuento de dilución por extinción. Utiliza procedimientos a continuación se describirán: - Se utiliza una serie de frascos tipo penicilina, conteniendo 9 ml del cultivo anaeróbico. Estos cultivos contienen una solución llamada agar, la cual les permite a las bacterias sulfato reductoras estar en su mismo medio facilitando el crecimiento de las bacterias y de un clavo, representando al hierro la cual al estar en contacto con el ácido sulfhídrico generado por estas bacterias y el sulfato producen sulfuro de hierro. Un cambio de color indica una prueba positiva con la presencia de bacterias. 20 - Se inyecta 1 ml de la muestra de agua en el primero de ellos y se mezcla. - Se retira 1 ml de solución del primer frasco con una jeringa descartable y se inyecta en el segundo. Se mezcla y se tira la jeringa. - Se retira 1 ml de solución del segundo frasco con una nueva jeringa descartable y se inyecta en el tercer frasco. Se mezcla y se tira la jeringa. - Luego éste procedimiento se repite el número de veces se desee. La dilución será para el n-símo frasco 1/10n-1 OS D A RV La mejor práctica es el uso de una nueva jeringa esterilizada cada vez el E S E SR O (Tratamientos Químicos, C.A.). H C E R DE líquido es transferido de una botella a la próxima para así no descartarla. Figura 3 Método API-RP-38. Cultivo de Bacterias Extinción por Dilución Fuente: Tratamientos Químicos, C.A. (2005) 21 La idea del procedimiento es diluir la muestra en la cual el ml que se inyecta en el último frasco no tenga bacterias, es decir la actividad bacteriana se haya extinguido. De allí se puede estimar el número de bacterias de la muestra original. Después de inocular los frascos se los incuba durante un período variable de 2 semanas como mínimo. Se recomienda temperatura constante, dentro de los 36,6 ºC (95ºF) por 24 horas de la temperatura a la que se muestrea puesto la velocidad de reproducción depende de la temperatura. En el campo, sin embargo, esto no es posible y conviene dejarlos en un ambiente protegido de la temperatura OS D A RV exterior. El crecimiento de bacterias queda indicado por la aparición de una turbidez en el caso de bacterias en general o un oscurecimiento en el caso de las E S E R S O suficientes para las bacterias en general y 2 semanas a un mes para que crezcan las H C E ER El contaje final puede efectuarse a los 7, 14, 21 y 30 días sulfato D reductoras. bacterias sulfato reductoras. Como regla aproximada se puede decir que 3 días son respectivamente pero la metodología utilizada por PDVSA es que el producto se inyecte cada 7 días. (Tratamientos Químicos, C.A.). En general se considera para el contaje de bacterias aeróbicas totales un valor de menos de 10.000 organismos/ml no es peligroso en aguas sin tratar pero que un contaje de 100.000 bacterias/ml es un indicio de una gran posibilidad de taponamiento por lo que se aconseja un tratamiento con biocida. Haciendo la salvedad de algunas bacterias formadoras de mucílagos no son detectadas por esta técnica pues solo se desarrolla sobre una superficie sólida. (Tratamientos Químicos, C.A.). 22 Figura 4 Cultivo de Bacterias, Extinción por Dilución Rango de Concentración de Las Bacterias en la Muestra Botellas Nº Factor de Dilución 1 1x 2 10x 3 100x 4 5 6 7 8 de Agua (Colonias/ml) 1-9 E S E SR O 10.000x H C E R 100.000x DE S O D 100 - 999 A RV 1.000x 10 - 99 1.000 - 9.999 10.000 - 99.999 100.000 - 999.999 1.000.000x 1.000.000 - 9.999.999 10.000.000x 10.000.000 - 99.999.999 Fuente: Tratamientos Químicos, C.A. (2005) Bacterias Perturbadoras en el Campo Petrolífero Aquí las bacterias perniciosas pueden aparecer en un yacimiento petrolífero pertenecen fundamentalmente a cuatro tipos según sus efectos: 1.- Bacterias Formadoras de Mucílagos: Estas bacterias no pertenecen a un único grupo bacteriano. Existen muchos tipos de bacterias capaces de formar un producto mucilaginoso, en general es una cobertura celular. Algunos tipos son aeróbicos, otros anaeróbicos y algunas son facultativas. Producen el mucílago sobre las superficies sólidas, (Tratamientos Químicos, C.A.). 23 Las principales familias de éste grupo son: Pseudomonas, Enterobacter, Aerobacter, Bacillus, Escherichia y Flavobacterium. Son heterótrofas y obtienen su energía de fuentes orgánicas, (Tratamientos Químicos, C.A.). Por ejemplo las Pseudomonas son poderosos taponadores de las formaciones y contribuyen a la corrosión, pues al aislar las superficies permiten la formación de celdas de concentración de oxígeno por un lado y por el otro, el crecimiento de bacterias sulfato reductoras. (Tratamientos Químicos, C.A.). OS D A RV E S E SR O pueden requerir menos de 0.5 ppm para subsistir. Se encuentra en aguas dulces, H C E ERfiltros, cañerías y otros equipos; también pueden subsistir en piletas, D pozos, 2.- Bacterias Ferrooxidantes: Estos organismos son aeróbicos, aunque salmueras y se caracterizan por poder oxidar el hierro ferroso existente en solución al estado trivalente, precipitando Fe(OH)3. (Tratamientos Químicos, C.A.). Ecuación Nº3: 4 FeCO3 + O2 + 6 H2O → 4 Fe(OH)3 + 4 CO2↑ El hidróxido férrico favorece la corrosión por formación de celdas de concentración de oxígeno y/o proporcionando el ambiente adecuado para las bacterias sulfato reductoras. Algunos ejemplos de estas bacterias son: Siderocapsa (capsulas pequeñas), Sphaerotilus (Bacteria filamentosa) y varias familias de bacterias envainadas, (Tratamientos Químicos, C.A.). 24 3.- Bacterias Sulfurooxidantes: Estas bacterias pertenecen fundamentalmente a dos clases: a) Bacterias Aeróbicas Incoloras: Un ejemplo de ésta es la Beggiatoa. Se encuentra en aguas en la cual contienen H2S, particularmente donde las cañerías colectoras vuelcan el agua en piletas abiertas. Se caracterizan por poseer filamentos, gránulos de azufre intracelulares y por un lodo grisáceo la cual puede taponar los filtros. Produce iones sulfato, es decir nutrientes para las bacterias OS D A RV sulfato reductoras. Tiene la particularidad de no crecer en los medios habituales de cultivo de laboratorio, éste modo debe ser reconocido al microscópico. E S E SR O H C E R Db)EBacterias Anaeróbicas Coloreadas: (Tratamientos Químicos, C.A.). Un ejemplo de ésta es el Chlorobium (verde), y Chromatium (púrpura), ellas requieren la luz solar para efectuar la fotosíntesis y producen una descomposición biológica. Su importancia en los sistemas de inyección es relativa, (Tratamientos Químicos, C.A.). 4.- Bacterias Sulfato-Reductoras: La mayor parte de los problemas en el campo petrolífero aparece por causa de bacterias del género Desulfovibrio y en menor proporción del género Clostridium, (Tratamientos Químicos, C.A.). Aquí se hará referencia fundamentalmente a la bacteria Desulfovibrio Desulfuricans, en la cual algunos tipos de éste mismo género difieren solamente en el sustrato orgánico requerido para su crecimiento pero todas reducen los iones sulfato a sulfuro, son anaeróbicas y pueden crecer en agua dulce o salobre. Son bacterias sésiles, es decir se adhieren a una superficie donde crecen. Este hecho es muy importante puesto el recuento de colonias obtenido a partir de muestras de agua, es sólo un indicio (y en general por defecto) de la población bacteriana del sistema, (Tratamientos Químicos, C.A.). 25 La aparición de iones sulfuro en el sistema por acción bacteriana tiene como consecuencia la formación de acido sulfhídrico (H2S), corrosión de los equipos y taponamientos debido a la formación de sulfuro de hierro (FeS). (Tratamientos Químicos, C.A.). Figura 5 Bacterias Sulfato Reductoras ORGAMISMOS ANAERÓBICOS OS D A RV E S E SR O H C E R DE SUSTANCIAS ORGÁNICAS H+, electrones DESCOMPOSICIÓN BIOLÓGICA (Bacteria Fermentadora) H2 ACIDOS GRASOS ALCOHOLES SO4 -2 BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS H2S CO2 CO2 Fuente: Tratamientos Químicos, C.A. (2005) 26 a) Síntomas de su Existencia - La gradual acidificación del agua de inyección, muestra un aumento de la concentración de sulfuros y/o se ennegrece. - Pérdida de inyectabilidad de la formación. - Deterioro del metal en el sistema, en especial en los puntos estacionarios (fondos de tanque, decantadores, y otros.). - Presencia de hierro en las aguas y eflorescencias en las superficies. OS D A RV - Al reflejar los pozos se produce “agua negra” y mucílago negro. (Tratamientos Químicos, C.A.). E S E S R en el Proceso de Corrosión b) Tres MecanismosO Intervienen H C E R DE - Actúan como despolarizantes catódicos, activando al hidrógeno en forma similar a la que se refiere para el oxígeno. La ecuación balanceada resume éste mecanismo: Ecuación Nº4: 4 Fe + SO4= + 4 H2O → FeS + 3Fe ( OH ) 2 + 2 OH - Es característico de las bacterias heterotróficas, es decir aquellas usando un sustrato orgánico, producen ácido acético. - El ataque del metal por el H2S generado por los microorganismos. (Tratamientos Químicos, C.A.). 27 Corrosión Microbiana La actividad microbiológica es reconocida como un contribuyente significativo a los problemas de corrosión enfrentados por varias industrias. Los procedimientos para determinar la influencia de los microorganismos han sido tediosos, ineficientes e imprecisos abarcando la gran importancia de la corrosión inducida por microorganismos (CIM), (Tratamientos Químicos, C.A.) OS D A RV Esta corrosión inducida por microorganismos son fenómenos de corrosión tienen lugar cuando determinados microorganismos se sitúan en la interface E S E SR proceso de corrosiónC y esH unO mecanismo de corrosión importante abarcando el 10 E de corrosión de este tipo. El 50 por ciento de los casos de R E por ciento de los casos D material-metálico-medio, modifican las condiciones en la cual se lleva a cabo el estructuras enterradas se atribuyen a la corrosión inducida por microorganismos. (Castro, Pág.26). Ha sido establecido unos de los mecanismos más importantes de la corrosión inducida por microorganismos es la despolarización catódica por hidrógeno utilizando como medio, las bacterias sulfato reductoras. Este tipo de bacteria, usa una enzima hidrogenasa para convertir la energía del proceso de corrosión en sus actividades metabólicas. Estos resultados en la corrosión localizada forman picaduras, debido a la producción de ácido sulfhídrico y depósitos de sulfato de hierro por medio de la bacteria. (Tratamientos Químicos, C.A). Las presentes pruebas se han concentrado en identificar la presencia de ciertos organismos como las bacterias sulfato reductoras en el agua y muestras de depósitos. Se ha convertido en aparente determinar la influencia de la bacteria en celdas de corrosión debería estar basado en una medida de la actividad de los organismos preferiblemente su número absoluto. (Tratamientos Químicos, C.A). 28 Control de Microorganismos Existen cuatro tipos de reactivos químicos para el control de los microorganismos: - Bactericidas: Sustancias en la cual matan bacterias. - Bacteriostatos: Sustancias en la cual inhiben el crecimiento de las bacterias. - Biocidas: Sustancias en la cual además de matar bacterias, matan otras OS D A RV formas de vida. - Biostatos: Compuestos en la cual retardan el crecimiento de bacterias E S E SR O H C E R E de eliminar las bacterias o solamente inhibir su crecimiento y La Ddecisión y otras formas de vida. su reproducción depende del tipo de bacterias que se encuentre. Las bacterias sulfato reductoras requieren un bactericida pues se debe buscar su eliminación total. En otros casos, sin embargo es posible transigir y usar sustancias bacteriotásticas. Sea cual fuera la decisión, un estudio previo del problema es imprescindible en todos los casos, puesto que la aparición de los primeros inconvenientes se puede producir en momentos en que ya sea imposible tomar soluciones adecuadas, (Tratamientos Químicos, C.A.). Biocida Un biocida es un agente físico o químico la cual pueden matar organismos. Es un término aplicado a los productos químicos utilizados para destruir organismos vivos, también interfieren o amenazan la salud y las actividades humanas. Entre ellos están los herbicidas (para controlar malezas), los nematicidas (contra gusanos y similares), los insecticidas (contra las plagas de insectos), los acaricidas (contra los ácaros), los fungicidas (contra enfermedades 29 de las plantas y moho), y los raticidas. (www.Ingenieroambiental.com.ar/dic_amb/601.htm). Son biocida los insecticidas, herbicidas, fungicidas y plaguicidas en general. Producen efectos a corto plazo, en la cual hongos, insectos y plantas no deseados desarrollan formas resistentes al cabo de un tiempo. Algunos biocida son selectivos, siendo más potentes contra un número pequeño de especies, en tanto otros son más indiscriminadamente tóxicos. OS D A RV (www.Ingenieroambiental.com.ar/dic_amb/601.htm). E S E S RCuando se conocen estos datos en muchos O determina con pruebas de laboratorio. H C E R E de bacterias y de otros microorganismos necesita ser reducido. casos, elD número El límite máximo tolerable de población microbiana en sistemas se Esto se puede lograr mediante la adición de biocida; productos químicos son tóxicos para los microorganismos. Los biocidas son generalmente dosificados a un sistema para reducir eficaz y rápidamente la población de los microorganismos, los cuales no pueden recuperarse fácilmente del descenso de población. Hay varios tipos de biocida, algunos de los cuales tienen una amplia gama de efectos sobre muchas y diversas clases de bacterias. (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). Clasificación de Biocida 1.- Biocida Oxidantes Oxidan irreversiblemente proteínas provocando pérdida de la actividad enzimática, hidrólisis de los constituyentes orgánicos y consecuentemente la rápida muerte de la célula. (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). 30 a) Cloro Gas: El cloro es posiblemente el biocida industrial más usado hoy en día. Se utilizó durante mucho tiempo para la desinfección de los abastecimientos de agua domésticas y para el retiro del sabor y los olores del agua. La cantidad de cloro necesita ser agregada a un sistema de agua viene determinada por varios factores, a saber: demanda de cloro, tiempo de contacto, pH, temperatura del agua, volumen de agua y cantidad de cloro se pierde con la aireación, (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). OS D A RV Cuando el cloro gaseoso se incorpora a un abastecimiento de agua, se hidroliza para formar ácido hipoclórico y clorhídrico. Es éste último el que E S E SR O H C E R E clorhídrico es el responsable de las reacciones de oxidación del El Dácido determina la actividad biocida, (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). citoplasma de los microorganismos, después de la difusión a través de las paredes de la célula. El cloro entorpece la producción de adenosín trifosfato (ATP), un compuesto esencial para la respiración de los microorganismos. Las bacterias que están presentes en el agua, morirán como consecuencia de los problemas de respiración experimentados, causados por la actividad del cloro. (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). La cantidad de cloro necesita ser agregada para el control del crecimiento bacteriano la cual viene determinada por el pH. Cuanto más alto es el pH, más cloro es necesario para matar a las bacterias indeseadas en un sistema de agua, (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). b) Sales de Hipoclorito: Las sales de hipoclorito son sales del ácido hipocloroso. Principalmente se utilizan la sal sódica y la cálcica y funcionan de forma similar al resto de generadores de cloro. El más utilizado en tratamiento de aguas es el hipoclorito sódico para no incrementar el potencial incrustante del 31 agua circulante adicionando más calcio. Son más fáciles de manipular a diferencia del cloro aunque tienen todas sus ventajas y limitaciones. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). c) Cloroisocianuratos: Generadores de cloro en agua suministrados habitualmente en forma sólida. Se pueden llegar a utilizar en sistemas pequeños prefieren utilizar un biocida oxidante y no pueden justificar el coste de un equipo OS D A RV de dosificación de cloro en forma gas o en forma líquida. Inicialmente aplicados en piscinas, se observó que los cianuratos funcionan como estabilizadores ya que E S E SR O (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di H C E R os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). DE reducen la inactivación del cloro debida a la luz ultravioleta. d) Dióxido de Cloro: Históricamente el dióxido de cloro se utilizaba como agente blanqueante en la industria textil, del papel y celulosa. Al adicionarse al agua no produce ácido hipocloroso de forma inmediata ya que permanece como ClO2 en solución. Por eso es más efectivo que el cloro cuando el pH del agua es más elevado. No genera los problemas de olor y sabor la cual posee la adición de cloro, aunque en torres de refrigeración ésta ventaja no es decisiva. El dióxido de cloro es un gas explosivo, así se genera directamente en el punto de aplicación mezclando habitualmente una fuerte solución clorada con clorito sódico e inmediatamente inyectado en el agua a tratar. Normalmente, el dióxido de cloro tiene una demanda de cloro menor por no combinarse con compuestos nitrogenados. En sistemas con contaminaciones amoniacales importantes puede presentar ventajas respecto a otras formas oxidantes cloradas. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). 32 e) Ozono: El ozono es naturalmente inestable. Puede ser utilizado como agente oxidante de gran alcance, cuando se genera en un reactor. Como un biocida, él actúa de la misma manera a la del cloro; dificulta la formación del Adenosín trifosfato (ATP), en la cual la respiración de la célula de los microorganismos se hace difícil. Durante la oxidación con ozono, las bacterias mueren generalmente por pérdida del citoplasma la cual sostiene la vida. Mientras el proceso de la oxidación ocurre, el ozono se divide en oxígeno diatómico y un átomo de oxígeno, se pierde durante la reacción con los líquidos de la célula de las OS D A RV bacterias. Algunos de los factores determinan la cantidad de ozono requerida durante la oxidación como son pH, temperatura, compuestos orgánicos y E S E SR O (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). H C E R DE solventes, y productos acumulados de la reacción. El ozono es más respetuoso con el medio ambiente a la del cloro, porque no agrega el cloro al sistema del agua. Debido a su descomposición, el oxígeno no dañará la vida acuática. Generalmente 0,5 PPM de ozono se agregan a un sistema de agua, sobre base continua o intermitente. (www.lenntech.com/español/biocidas.htm). 2.- Biocida No Oxidantes Debido a las limitaciones medioambientales del cloro y al incremento de los programas de tratamiento de agua para evitar corrosiones la cual trabaja a un pH alcalino (por encima de 8), el uso de biocida no oxidantes se ha extendido bien como tratamiento principal o como complemento a la acción de los biocida oxidantes. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). 33 a) Sales de Amonio Cuaternario: Son compuestos de nitrógeno catiónicos y con actividad sobre la tensión superficial del agua. Probablemente representa el grupo de biocida no oxidantes más ampliamente utilizado para el tratamiento de agua de refrigeración de procesos industriales. Son generalmente efectivos para controlar algas y bacterias aunque su actividad frente algunos microorganismos específicos varía en función de la estructura del compuesto (de la cadena alquílica). En general son eficaces como Alguicidas y Bactericidas a pH neutro o ligeramente alcalino aunque su efectividad frente a los hongos es muy OS D A RV baja. Su actividad bactericida / bacteriostática es debida a la carga catiónica formando un enlace electrostático con la membrana celular del microorganismo. E S E SR una desnaturalizaciónC deH lasO proteínas y la muerte de la célula. La actividad de la RE mayoríaD deE amonios cuaternarios se reduce si el contenido en cloruros, del agua Finalmente se produce la distorsión de la permeabilidad de la membrana celular, circulante, es muy grande. También se ve afectada su actividad por la elevada acumulación de lodo en el sistema. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). b) Isotiazolonas: Estos microbicidas, usualmente disponible como una mezcla de dos o más isotiazolonas, se utilizan como biocida de amplio espectro. Son efectivas a concentraciones muy bajas y en un amplio rango de pH. Pueden controlar bacterias aerobias y anaerobias (incluidas las sulfato reductoras) así como hongos y algas. Habitualmente las formas comerciales de éstos preparados no poseen capacidad surfactante, por lo cual se pueden combinar sin problemas, con la mayoría de dispersantes e inhibidores de corrosión. Su actividad se ve sólo ligeramente afectada por la presencia de dureza, amonio, cloruros o sólidos en suspensión y además no tiene interacciones con los materiales habituales de construcción de los sistemas. Sin embargo, no posee una capacidad alta de penetración en la biomasa, por tanto en sistemas en la cual tenga una cantidad de lodo orgánico acumulado importante, se deberá adicionar un biodispersante. 34 Además a la hora de manejar los preparados se debe actuar con especial atención por poseer efectos termales adversos. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). c) Compuestos Organobromados: Este grupo de compuestos incluye la dibromo-nitrilopropionamida (DBNPA) y bromohidroxiacetofenona (BHPA). Son microbicidas de amplio espectro con particular eficacia sobre las bacterias. No son OS D A RV agentes oxidantes y por tanto se pueden utilizar en sistemas con altos contenidos en biomasa. El DBNPA hidroliza de manera rápida a pH mayores de 8. Por ello E S E R S O rápidamente a las bacterias si el pH es alcalino. La actividad microbicida del H C E ER del pH. Estos productos tienen una solubilidad muy baja en BHPA no Ddepende debe ser utilizado en sistemas teniendo la posibilidad en la cual el biocida ataque agua y deben ser adicionados en puntos en las cuales se logre una adecuada dispersión. Tienen una mayor actividad para las bacterias y no frente a hongos y algas. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). d) Guanidinas: Estos materiales funcionan como surfactantes catiónicos interrumpiendo las reacciones enzimáticas extracelulares y por ello el desarrollo de las paredes celulares de algas y bacterias. Pueden ser utilizados en sistemas con presencia moderada de contaminantes hidrocarbonados (aceites y grasas por ejemplo). Sin embargo, altos niveles de sólidos en suspensión inorgánicos limitan la efectividad de estos compuestos. La sobre dosificación puede generar problemas de espumas. Son más efectivas para mantener un sistema libre de problemas microbiológicos partiendo de un sistema limpio y menos efectivo para mitigar un sistema con problemas de ensuciamiento severos. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). 35 e) THPS (Sulfato de tetrakis (hidroximetil) fosfonio): Este producto pertenece a una nueva clase de microbiocidas “verdes”, combinando alta efectividad con una relativa baja toxicidad. Es especialmente recomendado para el tratamiento de aguas de recuperación secundaria en la industria del petróleo, así como para la industria del papel. (Tratamientos Químicos, C.A.). Entre sus principales propiedades se destacan: - Baja toxicidad. - Optimo desempeño a bajos niveles de dosificación. - Alta efectividad contra bacterias sulfato reductoras. - Rápida degradación en el medio ambiente. OS D A RV E S E S R (THPS O - No produce bio-acumulación H C E R E Destructura). no posee halógenos es su (Tratamientos Químicos, C.A.) f) Glutaraldehído: Este compuesto ha demostrado efectividad frente a bacterias tanto aerobias como anaerobias. Su efectividad es más limitada frente a algas y hongos. Se puede neutralizar de manera fácil. Si el pH del agua es alcalino puede ser necesario potenciar su acción bactericida con la utilización de un surfactante. Su acción biocida se basa en su capacidad de enlazar proteínas y por ello no debe utilizarse en sistemas que tengan contaminaciones de amonio. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). El glutaraldehído es uno de los microbiocidas químicos más efectivos conocidos. Es altamente eficaz contra una amplia variedad de microorganismos incluyendo las bacterias sulfato reductoras, algas, y es, por lo tanto, idealmente satisfecho para una variedad de aplicaciones de campo de crudo incluso en el tratamiento de inyección de agua. El mecanismo de microorganismos muertos con glutaraldehído esta influenciado por el pH, tiempo, concentración y temperatura. 36 Estos factores influyen en la interacción de glutaraldehído con otros componentes en la matriz circundante, (Tratamientos Químicos, C.A.) Factores Determinan la Elección de un Biocida La selección del biocida más apropiado para un sistema determinado depende de una serie de factores: - El tipo de microorganismos presentes. - El histórico de operación del sistema. OS D A RV E S E S Rantincrustante y anticorrosivo. O - La naturaleza del tratamiento H C E R Ecaracterísticas físico-químicas del agua. -D Las - El esquema hidráulico del sistema. - Las restricciones medioambientales. - La toxicidad del biocida para los manipuladores del mismo. - El costo de aplicación del biocida. - La facilidad de realizar un análisis del residual de biocida de forma fácil y rápida. (http://www.cresca.upc.es/congreslegionella/ponencies/ponencies/Gregori_de_Di os_Visio_generica_dels_Biocidas.pdf). 37 Tabla 1 Diferencias entre cada Biocida Evaluado Tipo de Biocida Características Es un producto químico a base de THPS a una proporción de TQ-1 240 ppm a una concentración del 35%. Es un producto químico a base de Glutaraldehído a una TQ-2 OS D A RV proporción de 240 ppm a una concentración del 5%. E S E R S O H Es Cun producto químico a base de Glutaraldehído a una E R DE proporción de 240 ppm a una concentración del 40%. TQ-4 Es un producto químico a base de Glutaraldehído a una TQ-3 proporción de 240 ppm a una concentración del 25%. Es un producto químico a base de Glutaraldehído a una TQ-5 proporción de 240 ppm a una concentración del 15%. Es un producto químico a base de Glutaraldehído a una TQ-6 proporción de 240 ppm a una concentración del 20%. Es un producto químico a base de Glutaraldehído a una TQ-7 proporción de 240 ppm a una concentración del 10%. Es un producto químico a base de Glutaraldehído a una TQ-8 proporción de 240 ppm a una concentración del 30%. Nota: La diferencia entre los productos TQ-2 al TQ-8 son las concentraciones del biocida Gluteraldehído. 38 Función de los Biocida en la Recuperación de Crudo En la mayoría de las operaciones de recuperación de crudo se utilizan vastas cantidades de agua. Dadas las condiciones favorables, los bajos niveles de microorganismos usualmente presentes en el agua se multiplicaran rápidamente y causarán serios problemas. Los problemas típicos incluyen corrosión de la tubería de producción, válvulas, empacaduras, etc., acidez del crudo, bloqueo de filtros. (Tratamientos Químicos, C.A.) OS D A RV 1.- Inyección de Agua (Recuperación Secundaria de Crudo): Su E S E R S condiciones Ocrea antes de su uso. EsteC proceso ideales para el crecimiento de los H E R y en particular de las bacterias sulfato reductoras. Incluso organismos DEanaeróbicos práctica es normal en la inyección y retención de agua para desoxigenar el agua en sistemas aireados la bacteria aeróbica pueden rápidamente utilizar el oxígeno disponible, produciendo ambientes anaeróbicos localizados. (Tratamientos Químicos, C.A.). Las bacterias sulfato reductoras (BSR) tiene la habilidad de reducir los sulfatos a sulfuros resultantes en la producción del gas sulfuro de hidrógeno y ácidos corrosivos, (Tratamientos Químicos, C.A.). Sin control, el ataque bacteriano conlleva a: - Corrosión de la tubería de inyección de agua. - Bloqueo de filtros. - Acidificación del crudo. - Creación de condiciones peligrosas de trabajo debido a la producción del gas toxico sulfuro de hidrógeno (H2S). 39 Las consecuencias de estas ocurrencias pueden ser muy caras y en casos extremos ellos pueden conllevar a la adquisición de un nuevo pozo de inyección. (Tratamientos Químicos, C.A.). Por consiguiente, el uso de un biocida efectivo provee un significado relativamente económico de minimizar o prevenir problemas. (Tratamientos Químicos, C.A.). OS D A RV 2.- Recuperación de Crudo Mejorada: Después de la inyección del agua, la recuperación de crudo mejorada puede ser técnicamente empleada para E S E OS R por la recuperación de crudo mejorada. dos métodos que hanC sidoH considerados E C.A.). R E (Tratamientos Químicos, D incrementar la recuperación de crudo. Inyección de polímeros y surfactante son Las soluciones de polímeros y surfactantes están susceptibles para atacar las bacterias aeróbicas y anaeróbicas, (Tratamientos Químicos, C.A.). En la ausencia de control bacteriano el ataque puede resultar en: - Degradación del polímero o surfactante, como consecuencia puede traer una pérdida de su efecto. - La corrosión de la tubería de inyección debido a los ácidos producidos por las bacterias sulfato reductoras (BSR). - Acidificación del crudo por el sulfuro de hidrógeno producido por las bacterias sulfato reductoras (BSR). - Creación de condiciones peligrosas de trabajo debido a la producción de sulfuro de hidrógeno el cual es tóxico. (Tratamientos Químicos, C.A.) 40 Definición de Términos Básicos Ácido Sulfhídrico (H2S) Es un gas inflamable, incoloro con un olor característico a huevos podridos. Se le conoce comúnmente como ácido hidrosulfúrico o gas de alcantarilla. La gente puede detectar su olor a niveles muy bajos. (http://www.atsdr.cdc.gov/es/toxfaqs/es_tfacts114.html) Adenosín Trifosfato (ATP) OS D A RV Está formado por adenina, ribosa y tres grupos fosfatos, contiene enlaces E S E SR energía almacenada. CHO E R E (http://www.monografias.com/trabajos14/adenosin/adenosin.shtml) D de alta energía entre los grupos fosfato; al romperse dichos enlaces se libera la Aeróbicos Aplícase al ser vivo el cual necesita del oxígeno molecular para subsistir. (http://www.legionela.info/glosario/glosariolegio.htm) Anaeróbicos Aplícase al organismo el cual puede vivir sin oxígeno. (http://www.legionela.info/glosario/glosariolegio.htm) Autótrofos Corresponden al primer escalón de la cadena alimenticia. Son organismos capaces de sintetizar su propio alimento a partir de la luz solar y de compuestos inorgánicos. A este grupo pertenecen las plantas superiores y las algas. Cerca del 50 por ciento de la energía solar la cual llega a la superficie de la tierra es absorbida por estos organismos. (http://www.lablaa.org/ayudadetareas/biologia/biolo70.htm) 41 Bacterias Organismo unicelular, microscópico, sin clorofila ni núcleo, pero con gránulos de cromatina dispersos en el protoplasma y provistos a veces de flagelos o cilios mediante los cuales se mueve en un medio líquido. Muchas de sus especies viven en las aguas, dulces o marinas; abundan en sustancias orgánicas, en el suelo y en materias orgánicas en putrefacción; otras son parásitas, más o menos patógenas. (http://www.legionela.info/glosario/glosariolegio.htm) OS D A RV Bacterias sésiles Son bacterias la cual habitan en biopelículas adheridas a las superficies. E S E SR O H C E R E Reductoras (BSR) Bacterias DSulfato (http://www.galeon.com/ingalimentos/biofilms.htm). Son capaces de obtener carbono desde dióxido de carbono, ofrecen la posibilidad de llevar diversas formas de azufre ionizado (SO4, SO3, SO2) a sulfuro de algún catión, típicamente sulfuro de hidrógeno, H2S. La reactividad del sulfuro de hidrógeno se pueden producir sin un número de moléculas hoy valiosas para la sociedad industrial. (http://tamarugo.cec.uchile.cl/~cabierta/revista/5/azufre.htm). Bactericida Producto químico utilizado para evitar el desarrollo de bacterias la cual afectan los diferentes procesos del curtido. (http://www.cueronet.com/glosario/glosariob.htm). Biocida Sustancias activas y preparados. Contienen una o más sustancias activas, presentados en la forma en la cual son suministrados al usuario, destinados a destruir, contrarrestar, neutralizar, impedir la acción o ejercer un control sobre 42 cualquier organismo nocivo por medios químicos o biológicos. (http://www.legionela.info/glosario/glosariolegio.htm). Biopelícula Son comunidades de células alojadas en una matriz de polímeros orgánicos secretados por éstas, la cual está adherida a una superficie, y en cuyo interior las células adoptan un estado metabólico característico capaz de soportar condiciones adversas, (http://www.galeon.com/ingalimentos/biofilms.htm). OS D A RV Célula E S E SR O (http://es.wikipedia.org/wiki/Célula) H C E R DE Es la unidad estructural y funcional principal de los seres vivos. Corrosión Es la alteración la cual causa el ambiente en un objeto manufacturado, excluyendo los efectos puramente mecánicos (como el desgaste por frotación y la ruptura por impactos). Es un fenómeno mucho más amplio afectando a todos los materiales (metales, cerámicas, polímeros...) y todos los ambientes (medios acuosos, atmósfera, alta temperatura...), (http://es.wikipedia.org/wiki/Corrosión). Cultivo Prueba de laboratorio la cual consiste en hacer crecer bacterias u otros microorganismos para ayudar en el diagnóstico. (https://my.inova.com/public/healthresearch/content_display_full.cfm?doc_id=P0 6039). Dilución Es el bajar la concentración de una solución, mediante la adición de más solvente. Es decir la relación volumétrica entre solvente y soluto. (http://members.tripod.com/Arturobola/glosa.htm). 43 Efluentes Líquido proveniente de una planta industrial. (www.diccionarioelmundo.es) Eucarióticos Se dice de las células con núcleo diferenciado, envuelto por una membrana y con citoplasma organizado, y de los organismos constituidos por ellas. (Biblioteca de Consulta Microsoft® Encarta® 2005). Facultativas OS D A RV E S E SR O oxígeno. (http://www.aguamarket.com/diccionario/terminos.ast?Id=171). H C E R DE Bacterias donde pueden crecer tanto en presencia como en ausencia de Género Entidad taxonómica la cual agrupa a las especies afines. A su vez, los géneros afines se agrupan en familias. (http://huertayjardin.tripod.com.ar/huertayjardin/id10.html). Heterótrofas Organismo alimentado de sustancias orgánicas, tanto vivas como muertas, (Diccionario Hola Ciencias). Incubadora Es una caja u horno manteniendo el contenido a una temperatura constante, (http://www.elsaurio.com.ar/sivida/glosario.htm). Planta de Inyección de Agua Es una facilidad la cual permite elevar la presión de los pozos a través de los pozos de inyección con el objeto de mantener sus niveles de producción. Gran parte de ellas se encuentran ubicadas en el lago, permite usar el agua del mismo, 44 esto mediante un proceso de suavización (filtrado, desoxigenación) la cual inyecta a los pozos o a algún múltiple el agua sin deteriorar las tuberías. (http://www.coplan.com.ve/productos.html). Sésil Animal sujeto a un objeto o está fijo en un lugar (por ejemplo, los percebes), (http://www.tecnologiambiental.com/glosario/Glosario.php?letra=S). Sulfato OS D A RV Es un compuesto químico el cual se identifica por el anhídrido (óxido de E S E S enRla naturaleza debido a su origen volcánico. O Es una combinación muy corriente H C E R (http://es.wikipedia.org/wiki/Sulfato). DE azufre, SO4=), en el cual se acoplan diferentes metales y otras moléculas químicas. Sulfuro Es la combinación del azufre (número de oxidación -2) con un elemento químico o con un radical. Hay unos pocos compuestos covalentes del azufre, como el disulfuro de carbono (CS2) y el sulfuro de hidrógeno (H2S) considerados también como sulfuros, (http://es.wikipedia.org/wiki/Sulfuro). Vibrio Es un género de bacteria, incluido en el subgrupo gamma de los Proteobacteria, (http://en.wikipedia.org/wiki/Vibrio) 45 OS D A RV E S E SR O H C E R DE CAPÍTULO III MARCO METODOLÓGICO CAPÍTULO III MARCO METODOLÓGICO Tipo de Investigación. En el presente estudio se empleó el tipo de investigación descriptiva, por ser el que más se ajusto al problema planteado, el cual según Tamayo (1998), OS D A RV “Comprende la descripción, registro y análisis e interpretación de la naturaleza E S E R OS descriptiva Asimismo, la C investigación consiste en la caracterización de un H E hecho, fenómeno DERo grupo con el fin de establecer su estructura o comportamiento. actual, y la composición o naturaleza de los fenómenos”. (Arias, 1999, Pág. 48). La aplicación de este tipo de investigación, permitió describir las fases para la selección de un biocida, y registrar los resultados con la finalidad de poder analizar e interpretar la eliminación de las bacterias sulfato reductoras. Diseño de la Investigación El estudio se realizó bajo los márgenes de una investigación de campo, que según Arias (1997), “Consiste en la recolección de datos directamente de la realidad donde ocurren los hechos, sin manipular o controlar variable alguna”. La eliminación de las bacterias sulfato reductoras, fue medida directamente en el lugar donde se realizaron los ensayos, de manera tal no existiese la posibilidad de alterarse los resultados. Además, cabe destacar en la metodología para la selección de un biocida no se manipuló o controló ninguna variable sino las estipuladas por el procedimiento para la selección de dicho biocida. 48 Técnica de Recolección de Datos La técnica de recolección de datos empleada en el presente estudio, fue la observación directa, la cual según Tamayo (1998), “Consiste en obtener los datos directamente de la realidad a través del contacto directo del investigador con el fenómeno a estudiar”. Esta técnica permitió obtener los datos directamente de la realidad OS D A RV mediante la observación de cada una de las fases a las cuales fueron sometidas las E S E SR O H C E R DE bacterias sulfato reductoras, y posteriormente, establecer el efecto de la eliminación de dicha bacteria. Procedimiento, Análisis e Interpretación de los Datos Las técnicas de procesamiento y análisis de los datos describen las distintas operaciones a las cual serán sometidos los datos obteniendo: clarificación, registro, tabulación y codificación. (Arias, 1997, Pág. 55). En el análisis se definen las técnicas lógicas (inducción, análisis, síntesis) o estadísticas descriptivas o inferenciales las cuales serán empleadas para descifrar revelando los datos recolectados. (Arias, 1997, Pág. 55). Para la investigación se empleó como técnica de recolección de datos la tabulación y el registro de los resultados arrojados por las muestras de las bacterias sulfato reductoras, cuyo análisis se realizó mediante el uso de la estadística descriptiva, promediándose los datos de la eliminación de dichas bacterias y la estimación de la efectividad de éste en los lapsos de tiempo que fueron estipulados. 49 Fases de la Investigación El objetivo de esta investigación fue la selección de un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). Para ello se utilizó la muestra de la planta de inyección de agua del patio tanque ULE (PDVSA), la cual fue suministrada a varios cultivos por separado, dichas muestras fueron sometidas a cada una de las fases descritas a continuación, de acuerdo a los objetivos planteados. OS D A RV E S E SR O H C E R En esta fase se caracterizó el medio de crecimiento microbiano del DE Fase 1: Caracterización del medio de crecimiento microbiano. efluente de patio tanque ULE (PDVSA), y para ello se realizaron los siguientes parámetros: Determinación de pH: Este proceso consistió en utilizar un pHmetro marca Hanna Instruments el cual fue determinado paso a paso: - Se ajusta la temperatura del potenciómetro a 25 ºC o otra temperatura que se especifique. - Se verifica el potenciómetro con las soluciones tampón adecuado para el valor de pH que se espera obtener. - Se ajusta la temperatura de la muestra a ensayar 36,6 ºC + 1 ºC o a otra se especifique, se sumerge el electrodo en dicha muestra, se deja que la lectura se estabilice y se mide el pH. 50 Determinación de Dureza: Este proceso determina la cantidad de dureza total en el agua. Para comprobar el mismo se utilizó un cilindro graduado de 50 ml donde se midió 50 ml de la muestra o una alícuota llevada a 50 ml con agua destilada. Luego se transfiere la muestra a un erlenmeyer de 250 ml, se agrega 1 ml de solución amortiguadora, 0.2 gr del indicador cromo negro T y se titula con la solución de EDTA, hasta que el indicador vire al color azul. Estas muestras se hacen por duplicado. OS D A RV E S E SR O H C E R Este DEproceso fué determinado por el método colorímetro (Lamote). Se Determinación de Hierro: toma una muestra aproximadamente de 10 ml, se le agrega 0.1 gr de un agente reductor hierro y se mezcla hasta disolver, luego se toma y se le agrega 6 gotas de un indicador, se agita se espera 5 minutos y luego se coloca en el aparato (Lamote). Determinación de Alcalinidad: Este proceso determina la cantidad de alcalinidad presente en el agua. Para comprobar el mismo se utilizó un cilindro graduado para medir el volumen apropiado de la muestra, si el volumen de muestra escogido para la determinación es de 25 ml, se lleva a 50 ml con agua destilada libre de dióxido de carbono antes de titular, para poder apreciar mejor el punto final de la titilación. Se transfiere a un erlenmeyer de 250 ml. Si la muestra contiene cloro agregue una gota de tiosulfato de sodio 0.1 normal. Se añade 3 gotas del indicador mixto y se titula con la solución de ácido sulfúrico 0.02 normal hasta el indicador vire al color rosa pálido. Se hace una muestra testigo con agua destilada usando el mismo volumen final usado con la muestra; como referencia al vire del indicador. 51 Determinación de Aceite presente en el Agua (Crudo): Se toma una botella de 100 ml, se llena hasta 50 ml de un solvente aromático o xileno, se le agrega los 50 ml restantes del agua (muestra), luego se le agrega 2 gotas de cloruro de zinc y se agita ,se deja reposar hasta que las fases se separen y se toma una muestra del solvente llevándolo a un envase de vidrio que contenga cloruro de calcio, se deja allí de 3 a 5 minutos y luego se lleva hasta el aparato Espectrofotómetro el cual tomará la lectura. OS D A RV E S E OS R En esta fase C se H determinó el crecimiento microbiano en el laboratorio E físico-químico DERde la empresa Tratamientos Químicos, C.A., con la finalidad de Fase 2: Crecimiento microbiano sin biocida. seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULÉ (PDVSA). Para ello se realizaron los siguientes pasos: - Se utiliza una serie de frascos tipo penicilina, conteniendo 9 ml del cultivo anaeróbico. Estos cultivos contienen una solución llamada agar, la cual les permite a las bacterias sulfato reductoras estar en su mismo medio facilitando el crecimiento de las bacterias y de un clavo, representando al hierro la cual al estar en contacto con el ácido sulfhídrico generado por estas bacterias y el sulfato producen sulfuro de hierro. Un cambio de color indica una prueba positiva con la presencia de bacterias. - Se inyecta 1 ml de la muestra de agua en el primero de ellos y se mezcla. - Se retira 1 ml de solución del primer frasco con una jeringa descartable y se inyecta en el segundo. Se mezcla y se tira la jeringa. - Se retira 1 ml de solución del segundo frasco con una nueva jeringa descartable y se inyecta en el tercer frasco. Se mezcla y se tira la jeringa. 52 - Luego éste procedimiento se repite el número de veces que se desee. La dilución será para el n-símo frasco 1/10n-1 - Seguidamente se procede a colocar todas las muestras en una incubadora la cual está previamente calibrada a la temperatura de incubación, temperatura aproximada de 36,6 ºC (95ºF). Fase 3: Crecimiento microbiano con biocida. OS D A RV En esta fase se evaluará el control del desarrollo al utilizar el biocida en el E S E OS R reductoras en plantasC deH inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). E R Para elloD seE realizaron los siguientes pasos: laboratorio físico-químico de la empresa Tratamientos Químicos, C.A., con la finalidad de seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato - Se utiliza una serie de frascos el cual se le añadió 100 ml de la muestra y se van dosificando a una proporción de 240 ppm con su respectivo biocida, se agita hasta lograr mezclar bien los líquidos. - Luego se utiliza una serie de frascos tipo penicilina, conteniendo 9 ml del cultivo anaeróbico. Estos cultivos contienen una solución llamada agar, la cual les permite a las bacterias sulfato reductoras estar en su mismo medio facilitando el crecimiento de las bacterias y de un clavo, representando al hierro la cual al estar en contacto con el ácido sulfhídrico generado por estas bacterias y el sulfato producen sulfuro de hierro. Un cambio de color indica una prueba positiva con la presencia de bacterias. - Se retira 1ml de la muestra de agua ya dosificada en el primero de ellos y se mezcla. - Se inyecta 1 ml de solución con una nueva jeringa descartable al primer cultivo, se agita hasta mezclar bien. - Se inyecta 1 ml de solución con una nueva jeringa descartable al segundo cultivo, se agita hasta mezclar bien. 53 - Luego éste procedimiento se repite el número de veces se desee. La dilución será para el n-símo frasco 1/10n-1 - Seguidamente se procede a colocar todas las muestras en una incubadora la cual está previamente calibrada a la temperatura de incubación, temperatura aproximada de 36,6 ºC (95ºF). Fase 4: Efecto de la eliminación de los microorganismos. OS D A RV En esta fase se prepararon 8 tipos de biocida cada uno con composiciones E S E SR O reductoras. H C E R DE diferentes con respecto a su efecto sobre las bacterias sulfato reductoras, al final se seleccionará el biocida más efectivo para la eliminación de las bacterias sulfato 54 OS D A RV E S E SR O H C E R DE CAPÍTULO IV ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS CAPÍTULO IV RESULTADOS Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS Los resultados y análisis de los resultados de esta investigación se presentan en orden según los objetivos específicos planteados en el primer capítulo. OS D A RV E S E R S O efluente de patio tanque ULE (PDVSA). H C E R DE Objetivo 1.- Caracterizar el Medio de Crecimiento Microbiano del El medio de crecimiento microbiano debe ser sometido a pruebas de laboratorio con el fin de determinar sus características físicas, químicas y biológicas. A continuación se presenta la tabla 2, en la cual se muestra el pH y los ppm de dureza, alcalinidad, hierro y crudo evaluados al medio de crecimiento microbiano. Tabla 2 Resultados de pH, Dureza, Alcalinidad y Hierro pH Dureza Alcalinidad Hierro Crudo 7.60 500 ppm 324 ppm 9.6 ppm 8 ppm Fuente: González, (2005) 56 De acuerdo a los resultados de la tabla 2 nos indica un pH cercano al equilibrio de los iones hidronios y oxidrilo dando 7.60 siendo lo máximo permitido (6-9), con una dureza alta (máximo permisible 50-150), una alcalinidad adecuada al pH, encontrándose el contenido del hierro a 9.6 ppm (máximo permitido 10 ppm) lo cual indica una disolución del metal en las tuberías y de un crudo de 8 ppm mostrando la cantidad de aceite presente en el agua (límite máximo o rangos de aceites minerales e hidrocarburos 20 ppm). Las bacterias sulfato reductoras están contenidas en el agua que tiene el crudo, el agua viene en OS D A RV forma emulsionada dentro del crudo o en forma libre asociada con él y por medio E S E SR O H C E R Objetivo DE 2.- Determinar el crecimiento microbiano en el laboratorio de la deshidratación cuando viene emulsionada se retira el agua del crudo. De esta manera se pudo caracterizar el medio del crecimiento microbiano. físico químico de la empresa Tratamientos Químicos, C.A., con la finalidad de seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). El crecimiento microbiano fue determinado por medio del método APIRP-38 sin biocida el cual nos muestra como las bacterias se fueron comportando por medio de cultivos expresada la biomasa en colonias/ml durante el tiempo de 7 días, a continuación se presentan los resultados en la tabla 3. Tabla 3 Resultados del Cultivo (Blanco) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 101 107 107 107 107 107 107 Biomasa (Colonias/ml) Fuente: González, (2005) 57 Los resultados de la tabla 3 nos muestran en el primer día un aumento de colonias a 10 1 colonias/ml pero a partir del segundo día hasta el séptimo hubo un crecimiento acelerado de las bacterias contándose hasta 107 colonias/ml mostrando en la foto 1 y figura 7. Foto 1 Blanco OS D A RV E S E SR O H C E R DE Fuente: González, (2005) Figura 6 Blanco Blanco Biomasa (Colonias/ml) 12000000 10000000 8000000 6000000 4000000 2000000 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) 58 El blanco es designado así por no tener ningún tratamiento aplicado, es decir el agua es traída directamente de ULE (PDVSA) para saber cuantas bacterias hay presentes de la muestra original. Objetivo 3.- Evaluar el control del desarrollo al utilizar el biocida en el laboratorio físico-químico de la empresa Tratamientos Químicos, C.A., con la finalidad de seleccionar un biocida para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE OS D A RV (PDVSA). E S E R OS (biocidas) designadosC cada uno como producto TQ-1 a base de THPS y del TQ-2 H RE al TQ-8DaE base de Glutaraldehído, fue evaluado por el método API-RP-38 En el control del desarrollo al utilizar el biocida se utilizaron 8 productos dosificado anteriormente cada muestra a una proporción de 240 ppm a diferentes concentraciones, por medio de esto nos indicó como las bacterias se fueron comportando a través de cultivos, expresada la biomasa en colonias/ml, durante el tiempo de 7 días con la finalidad de seleccionar un biocida para la eliminación de la bacteria sulfato reductora. A continuación se presentan los resultados: Tabla 4 Resultados del Cultivo (Producto TQ-1) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 100 100 100 100 100 100 100 Biomasa (Colonias/ml) Fuente: González, (2005) 59 Los resultados de la tabla 4 nos muestran como el producto TQ-1 a base de THPS indicó una inhibición del crecimiento bacteriano en todas sus diluciones del primer al séptimo día contándose hasta una colonia de 100 colonias/ml mostrado en la foto 2 y figura 8. Foto 2 Producto TQ-1 OS D A RV E S E SR O H C E R DE Fuente: González, (2005) Figura 7 Producto TQ-1 Producto TQ-1 Biomasa (Colonias/ml) 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) 60 Tabla 5 Resultados del Cultivo (Producto TQ-2) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 102 102 102 102 102 102 102 Biomasa (Colonias/ml) OS D A RV Fuente: González, (2005) E S E S R del 5% no indicó una inhibición del O H Glutaraldehído a una concentración C E R crecimiento DEbacteriano del primer al séptimo día contándose hasta una colonia de Los resultados de la tabla 5 nos muestran como el producto TQ-2 a base de 102 colonias/ml mostrado en la foto 3 y la figura 9. Foto 3 Producto TQ-2 Fuente: González, (2005) 61 Figura 8 Producto TQ-2 Producto TQ-2 Biomasa (Colonias/ml) 120 100 80 60 OS D A RV 40 E S E SR O H C E R DE 20 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) Tabla 6 Resultados del Cultivo (Producto TQ-3) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 - - 101 101 101 101 101 Biomasa (Colonias/ml) Fuente: González, (2005) Los resultados de la tabla 6 nos muestran como el producto TQ-3 a base de Glutaraldehído a una concentración del 25% indicó los dos primeros días ninguna presencia de bacterias pero a partir del tercero al séptimo día se dió una inhibición del crecimiento microbiano contándose hasta una colonia de 101 bacterias/ml mostrado en la foto 4 y figura 10. 62 Foto 4 Producto TQ-3 OS D A RV E S E SR O H C E R DE Fuente: González, (2005) Figura 9 Producto TQ-3 Producto TQ-3 Biomasa (Colonias/ml) 12 10 8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) 63 Tabla 7 Resultados del Cultivo (Producto TQ-4) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 - - 100 100 100 100 100 Biomasa (Colonias/ml) OS D A RV Fuente: González, (2005) E S E OS R H Glutaraldehído a unaC concentración del 40% indicó los dos primeros días ninguna E R pero a partir del tercero al séptimo día se dió una inhibición presencia DdeEbacterias Los resultados de la tabla 7 nos muestran como el producto TQ-4 a base de del crecimiento microbiano contándose hasta una colonia de 100 bacterias/ml mostrado en la foto 5 y figura 11. Foto 5 Producto TQ-4 Fuente: González, (2005) 64 Figura 10 Producto TQ-4 Producto TQ-4 Biomasa (Colonias/ml) 1,2 1 0,8 0,6 OS D A RV 0,4 E S E SR O H C E R DE 0,2 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) Tabla 8 Resultados del Cultivo (Producto TQ-5) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 100 101 101 101 101 101 101 Biomasa (Colonias/ml) Fuente: González, (2005) Los resultados de la tabla 8 nos muestran como el producto TQ-5 a base de Glutaraldehído a una concentración del 15% indicó el primer día una inhibición del crecimiento bacteriano contándose a 100 colonias/ml pero a partir del segundo al séptimo día llegó hasta una colonia de 101 bacterias/ml mostrado en la foto 6 y figura 12. 65 Foto 6 Producto TQ-5 OS D A RV E S E Fuente: S R González, (2005) O H C E R DE Figura 11 Producto TQ-5 Producto TQ-5 Biomasa (Colonias/ml) 12 10 8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) 66 Tabla 9 Resultados del Cultivo (Producto TQ-6) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 100 100 100 101 101 101 101 Biomasa (Colonias/ml) OS D A RV Fuente: González, (2005) E S E OS R H Glutaraldehído a unaC concentración del 20% indicó del primero al tercer día una E ER inhibición crecimiento bacteriano contándose a 10 colonias/ml pero a partir Ddel Los resultados de la tabla 9 nos muestran como el producto TQ-6 a base de 0 del cuarto al séptimo día llegó hasta una colonia de 101 bacterias/ml mostrado en la foto 7 y figura 13. Foto 7 Producto TQ-6 Fuente: González, (2005) 67 Figura 12 Producto TQ-6 Producto TQ-6 Biomasa (Colonias/ml) 12 10 8 6 OS D A RV 4 E S E SR O H C E R DE 2 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) Tabla 10 Resultados del Cultivo (Producto TQ-7) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 - 102 102 102 102 102 102 Biomasa (Colonias/ml) Fuente: González, (2005) Los resultados de la tabla 10 nos muestran como el producto TQ-7 a base de Glutaraldehído a una concentración del 10% indicó el primer día ninguna presencia de bacterias pero a partir del segundo al séptimo día llegó hasta una colonia de 102 bacterias/ml mostrado en la foto 8 y figura 14. 68 Foto 8 Producto TQ-7 OS D A RV E S E SR O H C E R DE Fuente: González, (2005) Figura 13 Producto TQ-7 Producto TQ-7 Biomasa (Colonias/ml) 120 100 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) 69 Tabla 11 Resultados del Cultivo (Producto TQ-8) Tiempo (Días) 1 2 3 4 5 6 7 - - 101 101 101 101 101 Biomasa (Colonias/ml) OS D A RV Fuente: González, (2005) E S E OS R del 30% indicó los dos primeros días de Glutaraldehído a C unaHconcentración E R E ningunaD presencia de bacterias pero a partir del tercero al séptimo día llegó hasta Los resultados de la tabla 11 nos muestran como el producto TQ-8 a base una colonia de 101 bacterias/ml mostrado en la foto 9 y figura 15. Foto 9 Producto TQ-8 Fuente: González, (2005) 70 Figura 14 Producto TQ-8 Producto TQ-8 Biomasa (Colonias/ml) 12 10 8 6 4 OS D A RV 2 E S E SR O H C E R DE 0 1 2 3 4 5 6 7 Tiempo (Días) Fuente: González, (2005) Objetivo 4.- Establecer el efecto de la eliminación de las bacterias sulfato reductoras de las tuberías y equipos de las plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). El efecto de la eliminación de las bacterias sulfato reductoras se estableció por medio de 8 biocida (biocidas) designados cada uno como producto TQ-1 a base de THPS y del TQ-2 al TQ-8 a base de Glutaraldehído, cada uno con composiciones diferentes, lo cual permitió seleccionar el Biocida (producto) TQ-4 como el más efectivo para la eliminación de las bacterias sulfato reductoras. A continuación se muestran los resultados de la efectividad de los biocida: 71 Tabla 12 Resultados de la Efectividad de los Biocida Biocida (Producto) 1 2 3 4 5 6 7 8 100 102 101 100 101 101 102 101 Biomasa (Colonias/ml) OS D A RV Fuente: González, (2005) E S E R del producto TQ-1 S final Biocidas, indicando un contaje O H EC TQ-3, TQ-5, TQ-6, TQ-8 de 10 R colonias/ml,Edel producto D Los resultados de la tabla 12 nos muestran como fue la efectividad de los 8 1 y TQ-4 de 100 colonias/ml y del producto TQ-2 y TQ-7 contándose hasta una colonia de 102 colonias/ml. Estableciendo así el efecto de la eliminación de las bacterias sulfato reductoras, la cual se seleccionó el Biocida (producto) TQ-4 por ser el más efectivo e inhibir el crecimiento microbiano al tercer día contándose hasta una colonia de 100 colonias/ml a una concentración alta del 40% mostrado en la foto 10 y figura 16. Foto 10 Producto Seleccionado TQ-4 Fuente: González, (2005) 72 Figura 15 Efectividad de los Biocida Efectividad de los Biocida Biomasa (Colonias/ml) 120 100 80 OS D A RV 60 E S E SR O 20 H C E R DE 0 40 1 2 3 4 5 6 7 8 Biocida (Producto) Fuente: González, (2005) 73 CONCLUSIONES 1. En función del objetivo general planteado, los resultados de este trabajo permitieron seleccionar el biocida TQ-4 a base de Glutaraldehído, por cumplir con los requisitos básicos: costo, impacto ambiental, logística y además, por la eliminación de las bacterias sulfato reductoras, lo cual redujo el contenido de biomasa a 100 Bacterias/ml, siendo lo máximo permisible 102 bacterias/ml de agua. OS D A RV E S E S Rhierro y crudo. O de bacterias sulfato reductoras, H C E R DE 2. El agua del efluente de patio tanque ULE-PDVSA tiene un alto contenido 3. El biocida seleccionado TQ-4 es un producto biodegradable, es decir no ocasiona ningún impacto sobre las propiedades físico-químico del efluente, ni de los metales. 4. El biocida a base de THPS producto (Biocida) TQ-1, a pesar de presentar buenos resultados en la eliminación de las bacterias sulfato reductoras, en plantas de inyección de agua en el patio tanque ULE-PDVSA, se desactiva por el contacto con bisulfito de amonio y cloro, presentes en esta agua, lo cual no permite escogerlo como un biocida adecuado. 74 RECOMENDACIONES 1. Estudiar el comportamiento y la efectividad de los biocida realizando cultivos mensuales en la planta de inyección de agua en el patio tanque ULE (PDVSA). 2. Realizar los ensayos inmediatamente después de tomar la muestra en sitio OS D A RV para así evitar se dañe el agua, lo cual al pasar más de un día se mueren E S E SR O H C E R E a PDVSA los resultados donde 3. D Presentarle las bacterias y evitar a la hora de inyectar a los cultivos la jeringa no tenga burbujas por ser las bacterias anaeróbicas. se garantice al biocida (producto) TQ-4 es bueno por reducir costos y aumenta la vida útil de equipos y material. 75 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ÁLVAREZ, I; ARRIETA, R. “Adecuación de los tratamientos físico-químicos de plantas de inyección de aguas en pozos”. Universidad del Zulia. Facultad de Ingeniería. Escuela de Ingeniería Química. Trabajo Especial de Grado. Maracaibo. 1999. OS D A RV API: “Recommended practice for biological analysis of surface injection waters”. E S E SR O H C E R ARIAS,D F.E El proyecto de la Investigación. Guía para su elaboración. Editorial API RP 38. Editorial American Petroleum Institute Division Production. Second Edition. Dallas, Texas. 1975. Episteme. 2da Edición. Venezuela. 1997. Pág. 50, 55. ARIAS, F. El proyecto de la Investigación. Guía para su elaboración. Editorial Episteme. 3da Edición. Venezuela. 1999. Pág. 48. 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