Prueba DRI® Creatinine-Detect

Prueba DRI® Creatinine-Detect®
Para uso diagnóstico in vitro
10015638 (3 kits de 18 ml)
1797 (kit de 500 ml)
100272 Kit de calibrador Creatinine-Detect (2 x 25 ml)
100273 Kit de control Creatinine-Detect de 1,3 mg/dl (1 x 25 ml)
100274 Kit de control Creatinine-Detect de 7,5 mg/dl (1 x 25 ml)
100275 Kit de control Creatinine-Detect de 23,0 mg/dl (1 x 25 ml)
Uso previsto
La prueba DRI Creatinine-Detect® de está diseñada para la determinación cuantitativa de
creatinina en la orina humana con el fin de detectar la adulteración de la orina por dilución
o sustitución por una solución distinta de la orina.
Resumen y explicación de la prueba
Por lo general, un programa completo de análisis de drogas duras en orina implica la recogida
de muestras, una prueba de detección inicial mediante un inmunoensayo, seguida por una
prueba de confirmación, tal como una cromatografía de gases/espectrometría de masas (CG/
EM), para las pruebas positivas.1 Muchos consumidores de drogas tratan de evadir la detección
mediante la adulteración de la muestra con el fin de producir resultados falsos negativos durante
el inmunoensayo de selección inicial. Entre los métodos de adulteración se incluyen la dilución
con agua, la sustitución por un líquido exento de drogas, además de materiales domésticos
comunes (p. ej, vinagre, bicarbonato de sodio, líquido desatascador, detergentes, etc.) o la
adulteración con ciertos productos químicos (p. ej., Urine-Aid, que contiene glutaraldehído, o
Klear, que contiene nitrito de potasio).
Se han utilizado diversos métodos para detectar la adulteración de la orina. Entre estos métodos se
incluyen la medición de la temperatura, el pH, la densidad relativa y la concentración de creatinina
de la muestra. La orina normal recién recogida debe presentar las siguientes características
típicas: temperatura entre 32,5 y 37,7 °C,1 pH comprendido entre 4,7 y 7,8,2,3 densidad relativa
en el intervalo de 1,003 a 1,035 g/ml2,4,5 y concentración de creatinina entre 80 y 200 mg/dl.5-9 Si
cualquiera de estos parámetros de orina se encuentra fuera del intervalo especificado, existen
razones para creer que la muestra de orina ha sido adulterada.
Los músculos secretan diariamente creatinina a la orina. En ausencia de nefropatía, la tasa
de aclaramiento de creatinina en una persona es relativamente constante. La dilución de la
orina con agua o con cualquier otra solución distinta de la orina puede dar lugar a una menor
concentración de creatinina.
La prueba DRI Creatinine-Detect se puede llevar a cabo en analizadores automáticos de
química clínica para medir la concentración de creatinina. Este método se basa en la reacción
de Jaffe,10 mediante la cual se determina la concentración de creatinina colorimétricamente
utilizando picrato alcalino para formar un complejo de Janovski de color rojizo, de acuerdo con
la siguiente ecuación:
®
NaOH
Creatinina + ácido pícrico←
Complejo de Janovski (rojo)
Recogida y preparación de las muestras
Recoja las muestras de orina en recipientes de vidrio o plástico. Se han de utilizar muestras de
orina recién obtenidas. Las Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs:
Final Guidelines (Directrices Federales Obligatorias para los programas de pruebas de detección
de drogas en entornos laborales: Directrices finales) recomiendan que las muestras que no
sean objeto de una prueba inicial en un plazo de 7 días desde su llegada al laboratorio deben
colocarse en unidades de refrigeración seguras. Manipule todas las muestras de orina como si
fueran potencialmente infecciosas.11
Procedimiento del ensayo
Para realizar este ensayo, se pueden utilizar analizadores de bioquímica capaces de mantener
una temperatura constante, pipetear muestras, mezclar reactivos, medir la absorbancia a 505
nm y cronometrar la reacción con precisión.
Antes de realizar el ensayo, consulte la hoja de protocolos de cada analizador específico para
conocer los parámetros y/o las instrucciones adicionales.
Control de calidad y calibración
Utilice los calibradores de creatinina de 2,0 y 20,0 mg/dl para calibrar la prueba. Las buenas
prácticas de laboratorio sugieren el uso de muestras de control con el fin de validar la calibración y
garantizar un correcto funcionamiento. Thermo Fisher Scientific dispone de controles de creatina
de 1,3 mg/dl, 7,5 mg/dl y 23,0 mg/dl aptos para este fin. Asegúrese de que los resultados del control
se encuentren dentro de los intervalos establecidos. Vuelva a calibrar el sistema cuando se
utilicen reactivos nuevos o cuando los valores de control se encuentren fuera de los intervalos
establecidos. Todos los requisitos de control de calidad se han de realizar de conformidad con
las regulaciones o requisitos de acreditación locales, estatales y/o federales.
Resultados e interpretación de los datos
Se genera una curva de calibración lineal con el fin de calibrar el ensayo. La concentración de
creatinina en la muestra se extrapola a partir de la curva de calibración utilizando el valor de
absorbancia de la muestra. La mayoría de los analizadores de química clínica cuentan con un
software de ajuste de curva incorporado que permite calcular los valores de concentración
de creatinina de forma automática, sin necesidad de tratamiento adicional de los datos. El
calibrador de 2,0 mg/dl se utiliza para determinar si la muestra de orina se ha sustituido por
otro tipo de solución, mientras que el calibrador de 20,0 mg/dl se utiliza para determinar si la
muestra está diluida.
Valores esperados
La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de creatinina y se mide
espectrofotométricamente a 505 nm.
La concentración de creatinina en las muestras de orina normales oscila entre 80 y 200 mg/dl.
Se considera que las muestras de orina con < 20 mg/dl de creatinina están adulteradas. La
adulteración de la orina por sustitución de la muestra de orina por una solución distinta de la
orina dará lugar a una concentración de creatinina < 2 mg/dl.
Materiales incluidos
Limitaciones
Reactivo Creatinine-Detect 1: contiene hidróxido de sodio en una solución acuosa.
Reactivo Creatinine-Detect 2: contiene ácido pícrico en una solución acuosa.
Calibradores y controles (se venden por separado):
Kit de calibradores Creatinine-Detect: contiene 1 x 25 ml de creatinina a 2,0 mg/dl y 1 x 25 ml de
creatinina a 20,0 mg/dl en una solución acuosa.
Kit de control Creatinine-Detect de 1,3 mg/dl: contiene 1 x 25 ml de creatinina a 1,3 mg/dl.
Kit de control Creatinine-Detect de 7,5 mg/dl: contiene 1 x 25 ml de creatinina a 7,5 mg/dl.
Kit de control Creatinine-Detect de 23,0 mg/dl: contiene 1 x 25 ml de creatinina a 23,0 mg/dl.
Precauciones y advertencias
1.
2.
3.
Esta prueba está diseñada exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Los reactivos
son nocivos por ingestión.
El reactivo 1 contiene hidróxido de sodio, que es cáustico. El reactivo 2 contiene ácido
pícrico, que puede causar una reacción alérgica local o generalizada. Use ropa protectora
adecuada, guantes y protección ocular/facial.
No utilice los reactivos después de su fecha de caducidad.
Preparación y almacenamiento de los reactivos
Los reactivos están listos para su uso. No es necesario preparar los reactivos. Si se conservan
adecuadamente, todos los componentes del ensayo son estables hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta. Los reactivos Creatinine-Detect se deben almacenar a temperatura
ambiente, mientras que los calibradores y los controles se deben almacenar entre 2 y 8 °C.
Este ensayo está optimizado para la determinación cuantitativa de creatinina en la orina humana
únicamente para detectar casos de adulteración.
Características típicas de funcionamiento
Los siguientes datos típicos de funcionamiento se generaron con un analizador de química
clínica Hitachi 717:
Precisión:
Precisión intraensayo (n=60)
Control
Media ± DE
(mg/dl)
1,3
7,5
23,0
1,2 ± 0,04
7,4 ± 0,10
23,6 ± 0,30
Precisión total (n=60)
% CV
Media ± DE
(mg/dl)
% CV
3,2
1,3
1,4
1,2 ± 0,04
7,4 ± 0,12
23,6 ± 0,40
3,5
1,7
1,5
Linealidad
El ensayo es lineal entre 0,78 mg/dl y 420 mg/dl. La linealidad del ensayo se determinó analizando
diluciones en serie de una muestra de creatinina de 600 mg/dl. Se obtuvo una correlación de
1,000 al representar la concentración de creatinina observada de cada solución frente a la
correspondiente concentración de creatinina esperada.
Interferencia con sustancias endógenas
Se estudió la interferencia con sustancias endógenas en orina. No se observó interferencia en
muestras de orina a las que se añadieron sustancias endógenas hasta la concentración indicada.
Compuesto
Ácido ascórbico
Albúmina
Galactosa
Glucosa
Hemoglobina
Riboflavina
Urea
Concentración
20 mg/ml
500 mg/dl
10 mg/dl
3000 mg/dl
300 mg/dl
7,5 mg/dl
6000 mg/dl
Exactitud y relación
Se analizaron ochenta muestras de orina con los calibradores previamente disponibles, de 5 y
20 mg/dl, (x) y los nuevos calibradores de 2,0 y 20,0 mg/dl (y). El análisis de correlación dio lugar
a una ecuación de regresión lineal de y = 0,990x+1 y un coeficiente de correlación de 1,000.
Bibliografía
1. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. National Institute
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2. Schumann GB, and Schweitzer SC, 1989, Examination of Urine. In Clinical Chemistry:
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4. Tiez, NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. Philadelphia: WB Saunders, 514 (1990).
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59, 227-232 (1976).
11. Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 2009.
Microgenics Corporation
46500 Kato Road
Fremont, CA 94538 EE. UU.
Servicio técnico y de
asistencia al cliente en EE. UU.:
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2014 05