EVALUACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AIRE POR MICROORGANISMOS PATÓGENOS EN LOS BIOAEROSOLES, EN UNA ZONA DE ALTA ACTIVIDAD INDUSTRIAL Y FLUJO VEHICULAR DE LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA EN BOGOTÁ D.C. IVONE MILENA REY RODRÍGUEZ YELITZA MILENA FULA HUERTAS UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y SANITARIA BOGOTÁ D.C. 2005 EVALUACIÓN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AIRE POR MICROOGRANISMOS PATÓGENOS EN LOS BIOAEROSOLES, EN UNA ZONA DE ALTA ACTIVIDAD INDUSTRIAL Y FLUJO VEHICULAR DE LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA EN BOGOTÁ D.C. IVONE MILENA REY RODRÍGUEZ YELITZA MILENA FULA HUERTAS Trabajo de grado para optar al título de Ingeniero Ambiental y Sanitario Director HUGO SARMIENTO VELA Químico UNIVERSIDAD DE LA SALLE FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y SANITARIA BOGOTÁ D.C. 2005 Nota de aceptación _____________________ _____________________ _____________________ ________________________________ Firma del Director ________________________________ Firma del jurado ________________________________ Firma del jurado Bogotá, Noviembre de 2005 AGRADECIMIENTOS Los autores expresan sus agradecimientos a: El proyecto base “ESTIMACIÓN DEL RIESGO A LA SALUD HUMANA A PARTIR DE LA CARACTERIZACIÓN DE AEROSOLES EN LA LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA EN LA CIUDAD DE BOGOTÁ” de la Facultad de Ingeniería Ambiental y Sanitaria de la Universidad De La Salle. Hugo Sarmiento Vela, Director del proyecto. Gladys Quintero, Codirector del proyecto. Ricardo Montealegre, Coordinador de Laboratorios de Ciencias Básicas de la Universidad De La Salle El personal del laboratorio de microbiología de la Universidad De La Salle. Ana María Suárez y Lilian Vargas, estudiantes tesistas de Bacteriología de la Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Andrés Mauricio Mendoza, asesor estadístico del proyecto. Las directivas del INVIMA y el Colegio Distrital La Merced, por facilitar el ingreso a sus instalaciones en la etapa de muestreo. A nuestras familias por su esfuerzo para nuestra formación como profesionales. A todas aquellas personas que contribuyeron al desarrollo del proyecto. CONTENIDO pág. INTRODUCCIÓN.............................................................................................18 1 ANTECEDENTES.....................................................................................19 1.1 EN AMÉRICA LATINA ..............................................................................19 1.1.1 En Chile.. ..............................................................................................19 1.1.2 En México. ...........................................................................................20 1.2 EN BOGOTÁ...........................................................................................20 1.2.1 La Universidad del Bosque. . ..................................................................20 1.2.2 La Universidad Javeriana... .....................................................................21 1.2.3 La Universidad De La Salle. ...................................................................22 2 MARCO TEÓRICO ...................................................................................23 2.1 GENERALIDADES LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA ..................................23 2.1.1 Ubicación. ...........................................................................................23 2.1.2 Uso del suelo.. .......................................................................................23 2.1.3 Población.. ............................................................................................25 2.1.4 Contaminación atmosférica y enfermedad respiratoria en Puente Aranda....25 2.2 MATERIAL PARTICULADO Y EFECTOS EN LA SALUD .................................25 2.3 CARACTERÍSTICAS DE LOS BIOAEROSOLES.............................................26 2.4 PARÁMETROS METEOROLÓGICOS...........................................................27 2.5 RELACIÓN ENTRE LOS MICROORGANISMOS DEL SUELO Y LOS DEL AIRE ..28 2.6 LA ATMÓSFERA COMO HABITAT Y MEDIO DE DISPERSIÓN MICROBIANA ..29 2.7 MICROORGANISMOS ASOCIADOS A ENFERMEDADES RESPIRATORIAS ......30 2.8 INFECCIONES DEL SISTEMA RESPIRATORIO............................................31 2.8.1 Infecciones del Tracto Respiratorio Inferior.. ............................................32 2.8.2 Infecciones del Tracto Respiratorio Superior.............................................32 2.9 FAMILIAS DE MICROORGANISMOS..........................................................33 2.9.1 Familia Coccaceae..................................................................................33 2.9.2 Familia Enterobactereaceae. . ................................................................34 2.9.3 Familia Corynebacteriaceae.....................................................................35 2.9.4 Familia Bacillaceae. . .............................................................................36 2.9.5 Familia Pseudomonadaceae. ...................................................................37 2.9.6 Bacilos y Cocobacilos No Fermentadores de Lactosa. ................................37 2.10 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS ......................38 2.10.1 Pruebas bioquímicas. ............................................................................39 2.11 ANÁLISIS ESTADÍSTICO .........................................................................39 2.11.1 Variable aleatoria.. ...............................................................................40 2.11.2 Distribución de Poisson.. .......................................................................40 2.11.3 Análisis de Regresión............................................................................41 2.11.4 Modelo Lineal General.. ........................................................................42 2.11.5 Estimación por máxima verosimilitud.. ...................................................43 2.11.6 Odds ratio. ..........................................................................................43 3 METODOLOGÍA ......................................................................................45 3.1 SELECCIÓN PUNTOS DE MUESTREO........................................................45 3.1.1 CARACTERÍSTICAS PUNTOS DE MUESTREO.............................................47 3.2 MUESTREO ............................................................................................51 3.2.1 Principio básico del equipo MAS-100. .......................................................51 3.2.2 Período de muestreo.. ............................................................................52 3.2.3 Codificación de las muestras. ..................................................................54 3.3 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN...........................................................55 4 RESULTADOS Y ANÁLISIS.......................................................................58 4.1 FAMILIAS BACTERIANAS AISLADAS E IDENTIFICADAS .............................58 4.1.1 Frecuencia de familias identificadas. ........................................................58 4.1.2 Frecuencia de especies bacterianas identificadas.. ....................................63 4.1.3 Patógenos. ............................................................................................65 4.2 POSTULADOS DE ESTUDIO.....................................................................66 4.3 ANÁLISIS DESCRIPTIVO DE UFC .............................................................67 4.3.1 Gráficas.................................................................................................¡Error! Marcador no definido. 4.3.2 Estadísticos descriptivos. ............................¡Error! Marcador no definido. 4.3.3 Concentración de microorganismos..............¡Error! Marcador no definido. 4.4 ANÁLISIS INFERENCIAL DE UFC..................¡Error! Marcador no definido. 4.4.1 Análisis para factores meteorológicos y PM10 ¡Error! Marcador no definido. 4.4.2 Análisis para día y sector ............................¡Error! Marcador no definido. 4.4.3 Análisis por Jornadas..................................¡Error! Marcador no definido. 5 CONCLUSIONES .....................................................................................97 6 RECOMENDACIONES ..............................................................................99 BIBLIOGRAFÍA..............................................................................................100 ANEXOS........................................................................................................103 LISTA DE TABLAS pág. Tabla 1. Clasificación industrial de empresas cercanas a los puntos de muestreo .24 Tabla 2. Proporciones de algunas bacterias encontradas en suelos. ....................29 Tabla 3. Principales microorganismos patógenos aerotransportados....................29 Tabla 4. Tiempo de supervivencia de algunos microorganismos..........................30 Tabla 5. Características de algunos microorganismos patógenos respiratorios.....31 Tabla 6. Generalidades puntos de muestreo .....................................................47 Tabla 7. Descripción de períodos de muestreo y muestras por punto. .................53 Tabla 8. Descripción codificación de las muestras..............................................54 Tabla 9. Días de muestreo ..............................................................................53 Tabla 10. Frecuencia de familias ......................................................................62 Tabla 11. Microorganismos de mayor frecuencia ...............................................64 Tabla 12. Patógenos identificados en las muestras ............................................66 Tabla 13. Estadísticos descriptivos para todos los datos. ....... ¡Error! Marcador no definido. Tabla 14. Estadísticos descriptivos para cada jornada. .......... ¡Error! Marcador no definido. Tabla 15. Estadísticos descriptivos para cada punto.............. ¡Error! Marcador no definido. Tabla 16. Estadísticos descriptivos para agar sangre............. ¡Error! Marcador no definido. Tabla 17. Estadísticos descriptivos para agar chocolate......... ¡Error! Marcador no definido. Tabla 18. Concentración de UFC ..........................¡Error! Marcador no definido. Tabla 19. Correlaciones para agar Sangre.............¡Error! Marcador no definido. Tabla 20. Correlaciones para agar chocolate .........¡Error! Marcador no definido. LISTA DE FIGURAS pág. Figura 1. Movimiento del aire. .........................................................................27 Figura 2. Selección puntos de Muestreo............................................................46 Figura 3. Punto de muestreo N°1, INVIMA........................................................49 Figura 4. Punto N°2, Parque principal barrio Salazar Gómez...............................49 Figura 5. Punto N°3 Parque principal barrio Puente Aranda................................50 Figura 6.Punto N°4, Colegio La Merced ............................................................50 Figura 7.Punto N°5, Parque principal barrio Cundinamarca. ...............................51 Figura 8. Equipo de muestreo MAS-100............................................................52 Figura 9 . Procedimiento Fase Experimental......................................................56 Figura 10 Pruebas Bioquímicas ........................................................................57 Figura 11. Frecuencia familia BACILLACEAE ......................................................59 Figura 12. Frecuencia familia COCCACEAE ........................................................59 Figura 13. Frecuencia familia CORYNEBACTERIACEAE .......................................60 Figura 14. Frecuencia Familia ENTEROBACTERIACEAE.......................................60 Figura 15. Mediana de UFC en agar sangre para cada punto de muestreo ....¡Error! Marcador no definido. Figura 16. Mediana de UFC en agar chocolate para cada punto de muestreo ¡Error! Marcador no definido. Figura 17. Diagrama de cajas de UFC en agar sangre para cada jornada......¡Error! Marcador no definido. Figura 18. Diagrama de cajas de UFC en agar chocolate para cada jornada..¡Error! Marcador no definido. Figura 19. Diagrama de cajas de UFC en agar sangre para cada punto. .......¡Error! Marcador no definido. Figura 20. Diagrama de cajas de UFC en agar chocolate para cada punto. ...¡Error! Marcador no definido. Figura 21. Factores que influyen en la propagación de microorganismos ......¡Error! Marcador no definido. Figura 22. Regresión Poisson UFC vs. Factores meteorológicos-PM10, para agar sangre. .......................................................¡Error! Marcador no definido. Figura 23. Regresión Poisson UFC Vs. Temperatura, para agar Sangre.........¡Error! Marcador no definido. Figura 24. Regresión Poisson UFC vs. Factores meteorológicos-PM10, para agar chocolate. ...................................................¡Error! Marcador no definido. Figura 25. Regresión Poisson UFC Vs. PM10, para agar chocolate ¡Error! Marcador no definido. Figura 26. Regresión Poisson UFC Vs. día y sector, para agar sangre. ..........¡Error! Marcador no definido. Figura 27. Regresión Poisson UFC Vs. día, para agar sangre. ¡Error! Marcador no definido. Figura 28. Regresión Poisson UFC Vs. día y sector, para agar chocolate. ......¡Error! Marcador no definido. Figura 29. Regresión Poisson UFC Vs. día, para agar chocolate. . ¡Error! Marcador no definido. Figura 30. Regresión Poisson UFC Vs. Jornada (J1–J2), para agar sangre.....¡Error! Marcador no definido. Figura 31. Regresión Poisson número de UFC Vs. Jornada (J1–J2), para agar chocolate. ...................................................¡Error! Marcador no definido. Figura 32. Regresión Poisson número de UFC Vs. Jornada (J2–J3), para agar sangre. .......................................................¡Error! Marcador no definido. Figura 33. Regresión Poisson número de UFC Vs. Jornada (J2–J3), para agar chocolate. ...................................................¡Error! Marcador no definido. Figura 34. Regresión Poisson número de UFC Vs. Jornada (J1– J3), para agar sangre. .......................................................¡Error! Marcador no definido. Figura 35. Regresión Poisson número de UFC Vs. Jornada (J1 –J3), para agar chocolate. ...................................................¡Error! Marcador no definido. LISTA DE ANEXOS pág. ANEXO A. Ubicación localidad de Puente Aranda en la ciudad de Bogotá...........104 ANEXO B. Protocolos fase experimental..........................................................105 ANEXO C. Formato de campo ........................................................................114 ANEXO D. Hongos identificados en las muestras .............................................119 ANEXO E. Formato de laboratorio ..................................................................121 ANEXO F. Lista microorganismos identificados ................................................122 ANEXO G. Cuadros de Frecuencia por jornadas ...............................................123 ANEXO H. Datos corregidos de conteo............................................................138 ANEXO I. Tabla de corrección de Feller...........................................................139 ANEXO J. Plantilla de datos para SAS..............................................................140 ANEXO K. Rosa de vientos días de muestreo...................................................144 GLOSARIO AGAR: gel coloidal formado por hidratos de carbono que forma parte de la composición de un medio de cultivo. BIOAEROSOL: incluye alergenos (polen, hongos, esporas, partes y fecas de insectos) y patógenos casi siempre absorbidos por las partículas. En general es el conjunto de microorganismos suspendidos en el aire a través de las partículas. CEPA: cultivo de microorganismos que se derivan de otros con caracteres morfológicos específicos. CEPAS ENDÉMICAS: aquellas cepas que se caracterizan por estar distribuidas en determinadas áreas del cuerpo o medio ambiente. EPIDEMIA: cantidad mayor a la normal de individuos enfermos o infectados, en un período y área determinada. EPIDEMIOLOGÍA: estudio de la ocurrencia y distribución de enfermedades y los factores que controlan la presencia o ausencia de enfermedad. FACTORES METEOROLÓGICOS: conjunto de valores que toman los parámetros meteorológicos en un momento dado, que hacen variar las condiciones atmosféricas de un lugar, tales como precipitación, temperatura, dirección y velocidad del viento, entre otros. HUÉSPED: organismo capaz de sustentar el crecimiento de un microorganismo (bacteria, virus o parásito). INFECCIÓN: invasión y multiplicación de microorganismos en los tejidos corporales, produciendo enfermedad. INFECCIÓN NOSOCOMIAL: infección adquirida en ambientes intrahospitalarios, transmitida de persona a persona. INFECCIÓN RESPIRATORIA AGUDA (IRA): conjunto de infecciones del aparato respiratorio causadas por microorganismos virales, bacterianos y otros, con un período inferior a 15 días, con la presencia de uno o más síntomas o signos clínicos tales como tos, otitis, obstrucción nasal, respiración ruidosa, entre otros. INMUNOSUPRESIÓN: estado de un organismo en el cual la formación de anticuerpos se ve dificultada y se disminuye la capacidad de reacción frente a ciertas enfermedades. MECANISMOS DE DEFENSA: todos los mecanismos con que cuenta un organismo determinado para dar una respuesta específica inmune a una enfermedad. MEDIA: promedio numérico de un grupo de datos. MEDIANA: medida de tendencia central de un grupo de datos ordenados en forma ascendente, que no está influenciada por los valores extremos. MEDIO DE CULTIVO: solución acuosa que se solidifica y contiene diversos nutrientes para facilitar el crecimiento de diversos microorganismos y por modificaciones en su composición inhibir algunos de ellos. MEDIO ESPECÍFICO: medio de cultivo que contiene sustratos apropiados para que sólo los microorganismos de interés sean reconocidos con facilidad. MEDIO SELECTIVO: medio de cultivo que contiene sustancias inhibidoras o factores de crecimiento singulares para el crecimiento particular de un tipo determinado de microorganismos. MICROORGANISMO: organismos que no son visibles al ojo humano, por lo tanto requieren el uso de un microscopio para su observación y estudio. MICROORGANISMO PATÓGENO: microorganismo que posee factores de virulencia (toxinas, adhesinas, cápsula) que le facilitan colonizar, proliferar o producir enfermedad. MICROORGANISMO OPORTUNISTA: microorganismo que dependiendo de las condiciones del hospedador como personas inmunosuprimidas, puede perjudicar la salud. MORBILIDAD: estado de enfermedad y sus efectos asociados en el huésped. RIESGO: relación de todos los factores externos e internos con los cuales un individuo o un grupo de ellos puede verse afectado en una situación determinada. UNIDADES FORMADORAS DE COLONIA (UFC): crecimiento de un microorganismo sobre un medio de cultivo que se puede visualizar macroscópicamente en las muestras para su recuento e identificación. RESUMEN La localidad de Puente Aranda en la ciudad de Bogotá, es una zona de alta actividad industrial y flujo vehicular, en donde se reporta con gran frecuencia enfermedades respiratorias que se pueden asociar a la alta contaminación de la zona por estudios ya realizados. El presente estudio evaluó la presencia y determinó la concentración de microorganismos patógenos que se consideran importantes, en bioaerosoles, considerando factores que influencian su existencia y dispersión como son los parámetros meteorológicos y la concentración de material particulado. En la toma de muestras se empleó el equipo MAS-100. Para esto fue necesario definir una metodología de muestreo en exteriores para microorganismos en el aire. BIOAEROSOL MICROORGANISMO PATÓGENO PATÓGENO OPORTUNISTA ABSTRACT The town of Puente Aranda in the city of Bogotá, is an area of high industrial activity and vehicular flow where it is reported with great frequency breathing illnesses that can be associate to the high contamination of the area for studies carried out. The present study evaluated the presence and it determined the concentration of microorganisms pathogens, that are considered important, in bioaerosoles, considering factors that influence its existence and dispersion like they are the meteorological parameters and the concentration of material particulate. In the taking of samples the machine was used MAS-100. For this it was necessary to define a outdoor sampling methodology for microorganisms in the air. BIOAEROSOL MICROORGANISM PATHOGEN PATHOGEN OPPORTUNIST OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN OBJETIVO GENERAL Evaluar la presencia de determinados microorganismos patógenos en bioaerosoles en un sector de alta actividad industrial y flujo vehicular de la localidad de Puente Aranda, considerando la influencia de parámetros meteorológicos y su relación con el material particulado de 10µm. OBJETIVOS ESPECÍFICOS Diseñar una metodología apropiada para el muestreo de microorganismos presentes en bioaerosoles. Estimar la concentración de los microorganismos en los bioaerosoles presentes en la zona de estudio. Verificar la existencia de Haemophillus influenzae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa y Klebsiella pneumoniae en la zona de estudio. Establecer la influencia de los parámetros meteorológicos como temperatura, precipitación, dirección y velocidad del viento en la dispersión de los microorganismos encontrados. Determinar la relación existente entre el transporte de microorganismos y el material particulado en la zona de estudio. INTRODUCCIÓN El proyecto se realizó en una zona de alta actividad industrial y flujo vehicular en la localidad de Puente Aranda, incluye no sólo el estudio de la presencia de microorganismos patógenos en el aire, sino también el recuento de Unidades Formadoras de Colonia en las muestras, considerando factores que influencian su existencia y dispersión como son la concentración de material particulado (valores de PM10) y los parámetros meteorológicos considerados para el estudio: precipitación, temperatura, dirección y velocidad del viento. En la localidad de Puente Aranda es frecuente el reporte de casos de enfermedades respiratorias como neumonía, constituyéndose esto en un gran problema, especialmente en niños, ancianos y personas con alteraciones en su sistema respiratorio; allí se han realizado estudios epidemiológicos que relacionan contaminación del aire y enfermedades respiratorias, también estudios que asocian el material particulado con microorganismos de forma cualitativa, sin considerar la concentración de microorganismos en el aire y la representatividad de las muestras. Se evaluaron microorganismos patógenos que se consideran importantes, por ser los más frecuentes generadores de enfermedades respiratorias, como Haemophillus influenzae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae y además las especies bacterianas aisladas e identificadas en las muestras. Para la realización de la campaña de monitoreo se empleó el equipo MAS-100 del Laboratorio de Ingeniería Ambiental y Sanitaria de la Universidad de la Salle, para lo cual fue necesario el diseño de una metodología que garantizara la representatividad de las muestras en la zona de estudio, elaborando un protocolo de muestreo. 1 ANTECEDENTES Los efectos de la exposición de los individuos a largo plazo, a bajas concentraciones de contaminantes no están bien definidos; no obstante, los grupos susceptibles son niños, ancianos, fumadores, trabajadores expuestos y quienes padecen enfermedades pulmonares1. 1.1 EN AMÉRICA LATINA Se han realizado numerosos estudios que relacionan altas concentraciones de material particulado (PM10) con el aumento de consultas por enfermedad respiratoria. Se ha afirmado que aún los bajos niveles de contaminación del aire en las ciudades son dañinos para el tracto respiratorio de los menores de edad y ello se relaciona con el aumento del riesgo de padecer Infección Respiratoria Aguda (IRA)2. 1.1.1 En Chile3. En la ciudad de Temuco entre los años 2000 y 2002 se estudió a menores de 5 años que acudían por IRA a los Centros de Salud de Atención Primaria Santa Rosa y Amanecer de Temuco. Encontraron que las consultas por faringitis, amigdalitis, resfríos, sinusitis y otitis, ocuparon el primer lugar en ambos consultorios (65.9% y 71.3%, respectivamente) y el síndrome bronquial obstructivo (SBO) ocupó el segundo lugar con porcentajes que fluctúan entre 20.2% a 34.0%. El número de consultas según el período climático del año fueron muy similares: los valores en el otoño fueron de 29.2%, en el invierno 29.6% y en primavera 24.5% para el consultorio Amanecer y se presentó una tendencia similar para el consultorio Santa Rosa. Además obtuvieron que al aumentar la concentración de PM10 en 10µg/m3, se genera un incremento entre el 8% y el 26% en el número de consultas por enfermedad respiratoria en los niños entre 5 y 14 años de edad. 1 PEREA, Evelio J. Enfermedades Infecciosas: Patogénesis y diagnóstico. Salvat Editores S.A. 2 ROMERO PLACERES, M. Air pollution, bronchial asthma, and acute respirator and infections in children less years of age, Habana City. Salud pública (2004). p. 222-233. 3 BARRIOS, S., PEÑA, F. y OSSES S. Efectos de la contaminación atmosférica por material particulado en las enfermedades respiratorias agudas en menores de 5 años. CIENCIA Y ENFERMERIA X(2):21-29,2004. Chile 19 1.1.2 En México4. Se realizó un estudio durante el período comprendido entre el primero de julio de 1997 y el 25 de diciembre de 1998. Las consultas se clasificaron en dos grupos: asma e IRA. Se consideraron los parámetros meteorológicos: temperatura, humedad relativa y velocidad del viento. En esta investigación se determinó que el 50% de los casos de consultas por enfermedades respiratorias se presentó en las edades comprendidas entre 1 a 4 años, seguido por el grupo de niños menores de un año. Los grupos de 5 a 9 años el 23% y de 10 a 14 años 11.5%. Se observó un incremento de 20µg/m3 de PM10 en el promedio de 24 horas y a la vez un incremento de 4.97% en las consultas por asma con un retraso de cinco días. Para el IRA se observó que un incremento de 20µg/m3 de PM10 en el promedio de 24 horas podría tener un efecto inmediato e incrementar las consultas a urgencias en 2.95% después de tres días de la exposición a dicho contaminante y concluyeron que las condiciones que favorecen el desarrollo de síntomas de asma que ocasionarían un aumento en las visitas a urgencias, se presentan en las épocas del año en las que la temperatura es baja y las concentraciones de PM10 aumentan. 1.2 EN BOGOTÁ Estudios realizados en la ciudad de Bogotá han demostrado la relación existente entre las enfermedades respiratorias y concentraciones altas de PM10, que frecuentemente superan el máximo valor permitido por la norma local 180µg/m3 (Res.1208/03 DAMA) y 150µg/m3, según la EPA, que sólo puede ser sobrepasada una sola vez en un período de un año. De los estudios realizados se destacan los siguientes: 1.2.1 La Universidad del Bosque5. En 1997 realizó un estudio epidemiológico tomando como población a los niños menores de cinco años que vivían en un perímetro de doce cuadras a la redonda del UPA (Unidad Primaria de Atención) de Puente Aranda y además que asistían a instituciones educativas ubicadas dentro del mismo sector. 4 HERNÁNDEZ, TÉLLEZ, SANÍN, LACASAÑA, CAMPOS y ROMIEU. Relación entre consultas a urgencias por enfermedad respiratoria y contaminación atmosférica en Ciudad Juárez, Chihuahua. Salud pública de México / vol.42, no.4, julio-agosto de 2000. p. 288, 292-296. 5 ARISTIZABAL, Gustavo. Contaminación del aire y enfermedad respiratoria en la población infantil de Puente Aranda. Universidad del Bosque, Secretaría de Salud del Distrito, Bogotá, 1997. 20 En este estudio concluyeron que la concentración de PM10 promedio en la zona es alta (98,96µg/m3) por encima de la norma de la OMS y la Epa de 50µg/m3 para un año, con un máximo de 150µg/m3 para 24 horas una vez al año, mientras que en el estudio se encontró un máximo de 456,79µg/m3. La concentración de PM10 se asoció con las tasas de tos, sin que se observara relación dosis-efecto. Las altas concentraciones de PM10 no tienen un efecto considerable en la salud, aunque facilita la presencia de problemas respiratorios por niveles de NO2 y SO2. 1.2.2 La Universidad Javeriana. En 1999 se realizó un estudio de la contaminación atmosférica y enfermedad respiratoria en los niños menores de 14 años6 donde se presentó la relación de las fluctuaciones de la concentración de contaminantes atmosféricos y la presencia de síntomas y enfermedades respiratorias, en dos áreas residenciales de alta (Venecia) y baja contaminación (Engativá) según mediciones previas de PM10 en un período de tres meses; el tamaño de la muestra fue de 241 niños menores de 14 años, estudiantes de centros educativos cercanos a 2Km de las estaciones de PM10. Se obtuvo que el promedio de PM10 para el período de estudio superó los límites de la norma establecidas por la EPA de 50µg/m3 (Venecia 61.30 µg/m3 y Engativá 63.74µg/m3); en varios días se presentaron valores superiores a 150µg/m3 en las dos zonas de estudio. Se encontró una asociación de las concentraciones de PM10 y la presentación de síntomas en niños asmáticos y no asmáticos, esta asociación se da cuando se tiene en cuenta el día concurrente y los 5 días precedentes. Dentro de la misma investigación se estudiaron cinco zonas de Bogotá, 2Km a la redonda de los centros de Salud: CAMI Venecia, Bosa, PabloVI, Trinidad Galán, Engativá y Olaya, por un período de seis meses. Como diagnóstico para la medición de morbilidad se tuvo en cuenta infección de vía aérea superior, infección de vías aéreas bajas y asma o enfermedad broncoobstructiva; se tuvo en cuenta los parámetros meteorológicos: precipitación, temperatura, velocidad y dirección del viento. En las mediciones se presenta un promedio anual mayor a 50µg/m3 en las cinco zonas estudiadas y se presentó con frecuencia valores diarios superiores a 150 µg/m3. La zona que presentó mayor número de consultas fue Engativá (1886), la menor Trinidad Galán (545) y por categoría las infecciones en las vías aéreas altas son las más consultadas (3374) que corresponde al 72.7% del total de las consultas. Según el modelo en niños menores de 14 años una disminución de la concentración de PM10 en 10µg/m3 produciría una disminución de las consultas en un 17% 6 SOLARTE, Iván. Contaminación atmosférica y enfermedad respiratoria en los niños menores de 14 años en Santa Fe de Bogotá. Universidad Javeriana.1999 21 1.2.3 La Universidad De La Salle. En el 2003, se realizó una caracterización microbiológica del aire en la localidad de Puente Aranda, investigación realizada por Luis Camilo Blanco7. hizo Siendo la primera caracterización del aire de esta localidad, se identificó los siguientes grupos de microorganismos: Serratia sp, Klebsiella sp, Yersinia sp, Pseudomonas sp, Escherichia coli, Shigella sp, Corynebacterium sp, Candida sp y Rhodoturula sp, Aspergillus flavus, Aspergillus níger, Penicillum sp, Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermis, sin identificar Haemophillus influenzae y Streptococcus pneumoniae que son los causantes más importantes de infecciones Respiratorias Agudas. Se concluyó que los vientos de las horas de la tarde, para el primer trimestre del año, permiten la dilución y dispersión de PM10. Se confirmó una relación partícula-microorganismo, al presentarse un desarrollo de microorganismos en las huellas dejadas en los medios de cultivo. Los microorganismos identificados en este estudio se consideran patógenos oportunistas, dependiendo de las condiciones ambientales y la vulnerabilidad de la población. Los estudios relacionados anteriormente, sólo se refieren a la epidemiología generada por la contaminación y a la relación cualitativa entre los microorganismos y material particulado. 7 Blanco, Luis Camilo. Caracterización microbiológica del material particulado como factor de riesgo sobre la salud en la localidad de Puente Aranda. Universidad De La Salle, 2003. 22 2 2.1 MARCO TEÓRICO GENERALIDADES LOCALIDAD DE PUENTE ARANDA8 2.1.1 Ubicación. La localidad de Puente Aranda se encuentra ubicada en el centro de la ciudad y limita al norte, con la localidad de Teusaquillo por la línea del ferrocarril de occidente diagonal 22A; al sur, con la localidad de Tunjuelito por la autopista sur; al oriente, con las localidades de Los Mártires y Antonio Nariño, por la carrera 30 y al occidente, con las localidades de Fontibón y Kennedy, por la avenida 68, (ver Anexo A) 2.1.2 Uso del suelo. La localidad de Puente Aranda ha sido designada por el Departamento Administrativo de Planeación Distrital como el eje de la actividad industrial de Bogotá, ya que desde el año 1963 se ha propiciado el crecimiento industrial en esta zona, donde se encuentran numerosas industrias de textiles, plásticos, químicos, metalmecánica, alimentos y de transporte. En Puente Aranda no sólo se desarrolla la actividad industrial, también el comercio desempeña un papel muy importante que se lleva a cabo en diversas áreas de la localidad y para diversos sectores a nivel distrital. Por medio de una revisión exhaustiva del listado de fuentes de emisión registradas en la zona de estudio, se presentan en la tabla 1 la información de industrias cercanas (0,5km de radio) al parque principal de los barrios Salazar Gómez, Puente Aranda y Cundinamarca, las instalaciones del INVIMA y el Colegio La Merced, según sector de la economía de interés al que pertenecen. 8 Mapa Cultural de Puente Aranda. Alcaldía Local de Puente Aranda 2005. p. 27-29. 23 Tabla 1. Clasificación industrial de empresas cercanas a los puntos de muestreo SECTOR DE LA ECONOMÍA PUNTO DE MUESTREO INVIMA PARQUE SALAZAR GÓMEZ PARQUE PUENTE ARANDA LA MERCED PARQUE CUNDIN AMARCA 1 6 - 6 9 4 5 - 6 - 1 3 2 5 - - 1 1 4 1 - 1 - 1 1 2 7 6 4 7 2 6 6 3 7 - 2 - - 1 13 55 82 32 38 4 2 6 6 4 4 9 14 11 5 Intermediación Financiera 3 6 1 16 7 Otras actividades de servicios comunitarios, sociales y personales 2 2 2 28 - Servicios Sociales y de salud - 1 2 - - Construcción - - 2 2 - Hoteles y Restaurantes - - 11 6 9 Explotación minas y canteras - - 1 - - Agricultura, Ganadería, Caza, Silvicultura. - - - 1 9 SECCIÓN Industrias Manufactureras DIVISIÓN Elaboración de productos alimenticios Fabricación de productos textiles Fabricación prendas de vestir: Preparado y teñido de pieles Curtido y preparado de cueros. Fabricación de artículos cuero Fabricación de papel, cartón y sus producto Fabricación sustancias y productos químicos Fabricación productos de caucho y plástico Reciclaje Comercio, Reparación de Vehículos, Efectos Personales y Enseres Domésticos Transporte, Almacenamiento y Comunicaciones Actividades Inmobiliarias, Empresariales y de Alquiler Fuente: CÁMARA DE COMERCIO DE BOGOTÁ. Listado de empresas localidad de Puente Aranda. DAMA, 2001 24 2.1.3 Población. La localidad tiene una extensión total de 1.724,5 hectáreas, cuenta con 282.491 habitantes, está conformada por 5 UPZ (Unidades de Planeación Zonal): Ciudad Montes, Muzú, San Rafael, Puente Aranda y Zona Industrial; por hectárea las UPZ de Puente Aranda y Zona Industrial poseen la menor densidad de población, donde el mayor uso del suelo es industrial. Ciudad Montes, Muzú y San Rafael, tienen un índice de población superior al promedio del distrito (190 habitantes por hectárea); el 98.8% de la población local habita en el estrato 3. 2.1.4 Contaminación atmosférica y enfermedad respiratoria en Puente Aranda. La contaminación atmosférica en Puente Aranda es el resultado de las emisiones realizadas por diversas industrias presentes en el sector y de fuentes móviles, debido a que allí confluyen diversos corredores viales de alto flujo vehicular como la avenida de las Américas, la carrera 30, avenida 68, la calle 13 y avenida sexta. Para determinar el nivel de contaminación presente en la localidad se encuentran 2 estaciones de monitoreo de calidad de aire pertenecientes a la Red de Calidad del Aire del DAMA: la estación No. 12 CADE Energía y No.13 Puente Aranda (Merck), que registran PM10, SO2, NO2, CO y O3. Según estadísticas del DANE, en la Localidad de Puente Aranda la tasa de mortalidad con respecto a las enfermedades respiratorias es superior a la del promedio del Distrito, las enfermedades de las vías respiratorias inferiores representan el 4.9% de la tasa de mortalidad general reportada en este sector en el año 2001, la neumonía dentro de este valor representa el 67% y sigue siendo una de las diez principales causas de mortalidad9. La infección respiratoria aguda constituye el 12% de morbilidad atendida por consulta externa en esta localidad, el mayor porcentaje frente a otras causas. 2.2 MATERIAL PARTICULADO Y EFECTOS EN LA SALUD A largo plazo los efectos del material particulado en la salud se manifiestan por el aumento en la mortalidad diaria, incremento en las admisiones hospitalarias debidas a enfermedades respiratorias (mayores tasas de bronquitis y reducción de la función pulmonar) y prevalencia de tos10, se ha determinado que las 9 Recorriendo Puente Aranda 2004. Diagnóstico Físico y Socioeconómico de las Localidades de Bogotá D.C. Alcaldía Mayor de Bogotá. Secretaría de Hacienda, Departamento Administrativo de Planeación. Ibid., p. 48. 10 25 concentraciones menores a 100µg/m3 pueden generar efectos en la salud. La afectación puede variar según las diferencias en la composición química de las partículas; las partículas de diámetro menor a 10µm generadas en procesos de combustión son más toxicas que las de otro tipo de fuentes. Los efectos en la salud que ocasionan las partículas de diámetro menor a 2.5µm dependen de la acidez de los aerosoles y concentración de sulfatos11. El organismo cuenta con varios mecanismos los cuales facilita o impide la entrada de infecciones al sistema respiratorio, donde el aire es la principal vía de transporte. Las partículas que están comprendidas entre 0.1 a 10µm de diámetro son las únicas que tienen la capacidad de entrar al sistema respiratorio inferior el cual esta compuesto por la traquea, los bronquios y los bronquiolos. Los mecanismos de defensa del organismo (vellos nasales, las cilias, el revestimiento de la traquea, etc) impiden la entrada de partículas grandes al aparato respiratorio superior (epiglotis, laringe, cavidad nasal y faringe) y las pequeñas son exhaladas, no obstante, las partículas menores a 5µm penetran hasta los pulmones y se depositan en los alvéolos. Al avanzar hacia los pulmones las partículas realizan difíciles movimientos circulares que hacen que las partículas choquen con las paredes de la traquea y bronquios; por este medio infecciones como la difteria, la influenza, afecciones respiratorias virales agudas y enfermedades contagiosas como sarampión y paperas se establecen en el organismo. Los aerosoles microbianos que están incluidos en un rango menor a 10µm atraviesan el tracto respiratorio y de acuerdo al tamaño de la partícula se sitúan en diferentes partes: faringe, laringe, boca, traquea, bronquios, bronquiolos y alvéolos12. 2.3 CARACTERÍSTICAS DE LOS BIOAEROSOLES Los bioaerosoles incluyen alergenos (polen, hongos, esporas, partes y fecas de insectos) y patógenos (virus y bacterias), casi siempre absorbidos por las partículas. Los países con alta contaminación y humedad presentan graves problemas por biocontaminantes (bioaerosoles); temperaturas y humedades relativas altas favorecen el crecimiento de la población microbiológica contaminante (hongos, bacterias, virus) y se ve perjudicado por las variaciones de temperatura entre el día y la noche.13 11 OPS, CEPIS. Guías para la Calidad del Aire. OMS. Lima 2004. p. 26. 12 MADIGAN, MARTINKO y PARKER. Biología de los microorganismos. 8 Ed. Southern Illinois University.1999 13 OPS-OMS. Calidad de Aire en Interiores. Contaminantes y Efectos en la Salud. 26 A menudo los microorganismos encontrados en el aire se encuentran aglomerados en bioaerosoles de tamaño entre 3 y 10µm, pero según estudios se pueden tener microorganismos individuales con tamaños de 1 a 3µm.14 La mayoría de las bacterias están asociadas a tamaños superiores a 3µm. Es por ello que necesariamente se debe contemplar el estudio de muestreo de partículas especialmente de 10µm. 2.4 PARÁMETROS METEOROLÓGICOS La transformación y remoción de los contaminantes no sólo depende de sus características sino también de fenómenos climáticos como radiación solar y la humedad, la lluvia y la niebla, que pueden ocasionar cambios físicos y/o químicos en los contaminantes. La velocidad y dirección del viento transportan los contaminantes que dependen de la estructura térmica de la atmósfera para su desplazamiento, que se presenta por compresión (aumento de la temperatura) y descompresión adiabática (disminución de la temperatura), permitiendo movimientos por convección, advección y subsidencia. Figura 1. Movimiento del aire. Subsidencia Convección Advección Fuente: Los autores, 2005 Para que los contaminantes sean dispersos y “diluídos” en el aire se requieren condiciones de inestabilidad atmosférica, que se da por diferencia en las características térmicas de una parcela de aire contaminada, permitiendo que el contaminante no vuelva a su altura inicial, al mantener su temperatura mayor que la temperatura del aire en la misma altitud. 14 BELL, HALE, SHAW AND BLACK. Evaluating of novel bioaerosol generation device for the use for the studies requiring airborne microorganisms agglomerated. 27 El fenómeno que dificulta este tipo de desplazamiento es la inversión térmica que se presenta cuando la temperatura del ambiente aumenta con la altitud, por lo tanto la parcela de aire a medida que incrementa su altura tendrá una temperatura menor a la del aire ambiente sin dejarla pasar de esta posición, lo cual permite su presencia concentrada en el lugar donde fueron emitidos, los contaminantes que no se pueden dispersar hacia arriba lo pueden hacer horizontalmente a través de los vientos superficiales, incrementando el factor de riesgo para la salud de la población.15 Según un estudio de los efectos de los factores meteorológicos realizado en Estados Unidos16, la concentración de bioaerosoles en la atmósfera está en función de los ciclos diurnos, incrementa al amanecer, tiene su máximo al medio día, se disminuye en la tarde y en la noche se presentan las más bajas concentraciones de nueve de la noche a cinco de la mañana. Las perturbaciones de estas condiciones surgen debido a la advección del aire durante el día, resultando en reducción de la concentración y durante la noche un incremento en la concentración por el ingreso de bioaerosoles de fuentes distantes. El incremento de la estabilidad de la atmósfera puede resultar en reducción de la mezcla del aire y debido a esto se pueden presentar altas concentraciones de bioaerosoles. La precipitación es otro parámetro a considerar ya que influye drásticamente por efecto de dilución. 2.5 RELACIÓN ENTRE LOS MICROORGANISMOS DEL SUELO Y LOS DEL AIRE Las bacterias encontradas en áreas terrestres muestran gran similitud con la población bacteriana existente en la atmósfera, compuesta principalmente por bacterias Gram positivas (generalmente Bacillus sp y Micrococcus sp.) esto se puede sustentar en la posible resistencia que presentan este tipo de bacterias a las fluctuaciones ambientales. En el grupo de las bacterias Gram negativas se encuentra Pseudomonas sp y Flavobacterium sp. Otros microorganismos frecuentes son Acinetobacter sp., Agrobacterium sp., Alcaligenes sp., Brevibacterium sp., Corynebacterium sp., Nocardia sp17; Mycobacterium sp., Staphylococcus sp. y Streptococcus sp.18 15 CENTRO PANAMERICANO DE INGENIERIA SANITARIA Y CIENCIAS DEL AMBIENTE. Conceptos básicos sobre la meteorología de la contaminación del aire. CEPIS. 16 JONES, M. Alan; HARRISON, Roy M. The effects of meteorological factors on atmospheric bioaerosol concentration. Science Direct, ELSEVIER. Noviembre 15 de 2003 17 GRANT, W.D., LANG, P.E. Microbiología ambiental. Editorial Acribia S.A. Zaragoza, España 1989 28 Tabla 2. Proporciones de algunas bacterias encontradas en suelos. GÉNERO % GÉNERO % Arthrobacter 5-60 Flavobacterium 1-20 Bacillus 7-67 Corynebacterium 2-12 Pseudomonas 3-15 Micrococcus 2-10 Agrobacterium 1-20 Staphylococcus <5 Alcaligenes 1-20 Mycobacterium <5 Fuente: M. Atlas, Ronald, BARTHA, Richard. Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental. Pearson Educación S.A.4 Ed. Madrid 2002. p. 329. 2.6 LA ATMÓSFERA COMO HABITAT Y MEDIO DE DISPERSIÓN MICROBIANA El aerotransporte es el principal medio de dispersión de los microorganismos, así su presencia se ve favorecida por la mezcla rápida del aire a causa de los gradientes térmicos que se presentan en la tropósfera inferior que puede proporcionar habitats temporales para los microorganismos. Tabla 3. Principales microorganismos patógenos aerotransportados BACTERIAS PATÓGENAS AEROTRANSPORTADAS ESTADO FUENTE DIÁMETRO (µm) Pseudomonas aeruginosa Contagioso Ambiental 0.57 Staphylococcus aureus Endógeno Humana 0.95 Moraxella lacunata Endógeno Humana 1.00 Klebsiella pneumoniae Endógeno Ambiental 0.40 Alcaligenes sp Endógeno Humana 0.75 Haemophilus influenzae Contagioso Humana 0.43 Streptococcus pneumoniae Contagioso Humana 0.90 ENFERMEDAD Infecciones oportunistas Meningitis Neumonía, otitis media Fuente: THE PENNSYLVANIA STATE UNIVERSITY. Bioaerosol and bioaerosol dynamics. Disponible en http:/www.arche.psu.edu/iec/abe7bioaero.html. 18 M. Atlas, Ronald, BARTHA, Richard. Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental. Pearson Educación S.A.4 Ed. Madrid 2002. p. 329. 29 Durante la dispersión de microorganismos acuáticos y del suelo, estos pueden residir en la atmósfera antes de encontrar su reservorio; las concentraciones de sustancias inorgánicas en zonas industriales, las concentraciones de agua, intensidad lumínica y concentraciones de CO2 presente en las nubes favorecen el crecimiento de microorganismos, los núcleos de condensación también representan un aporte de nutrientes minerales. La mayoría de microorganismos no pueden soportar transportes a larga distancia debido a la desecación y radiación de luz UV. En una atmósfera seca el tiempo de supervivencia de algunas bacterias puede variar de acuerdo a adaptaciones (por ejemplo pigmentaciones y esporas) para lograr exposiciones ambientales más prolongadas19: Tabla 4. Tiempo de supervivencia de algunos microorganismos en una atmósfera seca. TIEMPO DE SUPERVIVENCIA 106 años 104-105 años 200 años 120-200 días 60 días 12-48 horas 2-4 horas 12-40 días MICROORGANISMO Bacilos Gram (+) no formadores de esporas, cocos Cocos, Actinomicetos, bacilos Gram (-), bacterias formadoras de esporas. Bacillus sp., Clostridium sp. Streptococcus pyogenes, Micoplasma mycoides, Corynebacterium diphtheriae, Staphylococcus aureus. Mycobacterium avium Streptococcus salivarius, Neisseria gonorrhoeae, Escherichia coli, Pasteurella multocida. Klebsiella pneumoniae, Neisseria meningitis. Campylobacter fetus, Yersinia pseudotuberculosis, Proteus morganii. Fuente: M. Atlas, Ronald, BARTHA, Richard. Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental. Pearson Educación S.A.4 Ed. Madrid 2002. p. 329 2.7 MICROORGANISMOS ASOCIADOS A ENFERMEDADES RESPIRATORIAS La neumonía por el Staphylococcus aureus, es la enfermedad más frecuente en niños mayores; varios estudios han demostrado que Streptococcus pneumoniae, 19 M. Atlas, Ronald, BARTHA, Richard, Op. cit., p.337. 30 Mycoplasma pneumoniae y Haemophillus influenzae son bacterias aisladas usualmente, todos estos microorganismos excepto Mycoplasma pneumoniae son también generadores de faringoamigdalitis y absceso pulmonar en donde también hay presencia de anaerobios y con alguna frecuencia enterobacterias.20 Algunas características de los microorganismos patógenos considerados dentro de este estudio se presentan en el cuadro 5. Tabla 5. Características de algunos microorganismos patógenos respiratorios. MICROORGANISMO MORFOLOGÍA MEDIO DE CULTIVO Staphylococcus aureus Bacilos cocobacilos Gram (-) Cocos Gram (+) Catalasa (+) Streptococcus pneumoniae Cocos Gram (+) Catalasa (-) Pseudomonas aeruginosa Bacilo y cocobacilos Gram (-). *Agar McConkey Oxidasa (+) Haemophillus influenzae y *Agar Chocolate *Agar Sangre *Agar Sangre Bacilo y cocobacilos Klebsiella pneumoniae Gram (-), *Agar McConkey Oxidasa (-) OBSERVACIONES 50-60% de bronquitis crónica Coloniza 25-85% de las personas sanas La neumonía producida es consecutiva a la gripa Coloniza el 18% de las personas y desarrolla el 15% de las neumonías Responsable del 1–5% de las neumonías Fuente: PEREA, Evelio J. Enfermedades Infecciosas: Patogénesis y Diagnóstico. Salvat Editores S.A. 2.8 INFECCIONES DEL SISTEMA RESPIRATORIO El sistema respiratorio se divide en tracto respiratorio inferior (traquea, bronquios y bronquiolos) y tracto respiratorio superior (epiglotis, tejidos circundantes, laringe, cavidad nasal y faringe). Los seres humanos tienen varios mecanismos de defensa: vellos nasales, cornetes, cilias, revestimiento mucoso de la traquea y reflejos como la tos, el estornudo y la deglución, también la flora normal de la nasofaringe y 20 ASCOFAME. Guías de Práctica Clínica Basadas en la Evidencia. Infección Respiratoria Aguda. Proyecto ISS-.ASCOFAME, Asociación Colombiana de Facultades de Medicina. 31 orofaringe que previenen la colonización del tracto respiratorio superior por microorganismos patógenos21. 2.8.1 Infecciones del Tracto Respiratorio Inferior. En Colombia el Instituto de los Seguros Sociales22 ha reportado que la infección respiratoria aguda (IRA) es la primera causa de morbilidad, de consulta a los servicios de Salud y de internación en menores de cinco años. La neumonía es la infección respiratoria que afecta el tracto respiratorio inferior (bronquíolos, tubos bronquiales y alvéolos). La mayoría de las infecciones del tracto respiratorio inferior son de origen viral, pero el riesgo de muerte es mayor en la infección bacteriana. En cifras reportadas por el Comité Distrital para la prevención y manejo de la IRA23, en Bogotá en el año 2004 se presentaron 202 casos de mortalidad en niños menores de cinco años. Las localidades que registran mayor número de casos de muerte por IRA son Ciudad Bolívar, Usme, San Cristóbal, Rafael Uribe Uribe, Bosa, Kennedy, Puente Aranda, Suba y Engativá La neumonía es una causa importante de enfermedad y muerte, ocasionada principalmente por Legionella pneumophila, Chlamydia pneumoniae y Streptococcus pneumoniae, el cual es el causante del 80% de las neumonías bacterianas; en las neumonías intrahospitalarias es frecuente las especies de Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa, Legionella sp, Staphylococcus aureus, y Streptococcus pneumoniae. En casos de bronquitis crónica se han cultivado Haemophillus influenzae, Streptococcus pneumoniae y Moraxella catarrhalis24. 2.8.2 Infecciones del Tracto Respiratorio Superior. La faringitis y amigdalitis es causada por el Streptococcus pyogenes, aunque se aíslan frecuentemente Haemophillus influenzae, Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, no esta comprobado que causen esta enfermedad. La infección en la epiglotis es causada por Haemophillus tipo b y también por Staphylococcus y Micrococcus. Se pueden presentar infecciones por otros agentes como Corynebacterium diftheriae, que puede encontrarse en pacientes que presentan dolor de garganta y otra sintomatología más grave. Rinoescleroma es una infección crónica de las vías FORBES, Betty A. Diagnóstico Microbiológico. Argentina: Editorial Médica Panamericana S.A. 2004. p. 920. 21 22 ASCOFAME, Op. cit. 23 Plan Distrital Contra Enfermedades Respiratorias. En : El Tiempo. Bogotá. (05, febrero,2005). FORBES, Op. cit., p. 924-927. 24 32 nasales, senos paranasales, faringe y laringe que se caracteriza por una obstrucción nasal de larga duración en la cual se presenta Klebsiella rhinoscleromatis y Klebsiella ozaenae que causa una infección anaerobia leve. 2.9 FAMILIAS DE MICROORGANISMOS Gran parte de los microorganismos que son habituales en el medio ambiente y de interés en la salud humana, se agrupan en las familias: Coccaceae, Bacillaceae, Corynebacteriaceae, Enterobacteriaceae, Bacilos y Cocobacilos no fermentadores de lactosa, Pseudomonadaceae. 2.9.1 Familia Coccaceae. A esta familia pertenecen los cocos Gram positivos, catalasa positiva. el Staphylococcus sp. se encuentra normalmente en la nariz, la boca, garganta, saliva, piel y se halla presente en el contenido intestinal y en las heces25; este género se caracteriza por que sus especies siendo microorganismos no esporulados poseen alta resistencia al calor y a la deshidratación. Considerando la normalidad de la presencia de este género en algunas partes del cuerpo sin que cause daño, esta situación puede ser alterada por disminución en la resistencia del organismo o aumento en la virulencia del microorganismo; puede ser muy virulento debido a que varios factores propician que cause infección o enfermedad, por ejemplo, las toxinas y enzimas se encargan de mediar en la expansión y supervivencia del microorganismo en la zona infectada. Las principales infecciones causadas por este grupo de microorganismos son meningitis, endocarditis, furunculosis y neumonía26. Staphylococcus epidermis es un patógeno oportunista y se transmite generalmente por procedimientos e intervenciones médicas como por ejemplo los implantes; otras especies oportunistas están comprometidas con infecciones de las vías urinarias, abscesos de la piel, otitis media, infecciones nosocomiales endocarditis y osteomielitis. Las especies de Micrococcus hacen parte de la flora normal de los seres humanos, difícilmente son la causa de infecciones en los humanos y se considera que su 25 CARMONA, Osvaldo. GOMEZ, María Josefina. MONTES, Tibaire. MARCANO, Carmen. MARIÑO, Franklin. Microbiología medica de Divo. Ed. Mc Graw Hill. 5Ed. 1997. p. 117-123. Ibid., p. 163-176. 26 33 virulencia es muy baja, pueden transmitirse de persona a persona a través del aire o por contacto27. Especies que con mayor frecuencia se asocian con patología humana: Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus haemolyticus Staphylococcus saprophyticus Staphylococcus lugdunensis Staphylococcus auricularis Staphylococcus xylosus Staphylococcus simulans 2.9.2 Familia Enterobactereaceae. A esta familia pertenecen los bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos, fermentadores de glucosa, reductores de nitratos, no formadores de esporas. Algunos microorganismos colonizan el aparato gastrointestinal y hacen parte de la flora normal de este sistema; la infección puede presentarse por bacterias que se establecen en algunas partes del cuerpo donde no son habituales, pueden transmitirse de persona a persona. El género de Salmonella sp, Shigella sp y la especie Yersinia enterocolítica solo habita el intestino cuando causa infección, ingresan al cuerpo por ingestión de alimentos y agua contaminados, así mismo pero con menor frecuencia se transmite Salmonella tiphy y Shigella sp., Escherichia coli se encuentra en las heces y puede ocasionar infección intestinal, infección urinaria, neumonía, meningitis neonatal, sepsis, enteritis aguda, peritonitis28 y es la causa principal de infecciones nosocomiales, es más virulento que otras especies oportunistas de enterobacterias; su resistencia se muestra en que puede estar presente fuera del organismo en condiciones húmedas y aguas contaminadas. El género Citrobacter puede aislarse frecuentemente en muestras de vías urinarias, Citrobacter diversus es causante de meningitis neonatal, septicemia y otras infecciones no intestinales. El género Providencia cuenta con tres patógenos reconocidos (P. alcalifaciens, P. rettgeri y P. stuartii) asociadas con infecciones urinarias y nosocomiales. 27 FORBES, Op. cit., p. 295-297. 28 CARMONA, Op. cit., p. 163-176. 34 Las especies de importancia medica dentro del género Klebsiella son Klebsiella oxytoca que ocasiona infecciones similares a las de Klebsiella pneumoniae (neumonía, infecciones de las vías urinarias, infecciones de oído y meningitis), Klebsiella ozaenae y Klebsiella rhinoscleromatis son una de las causas de la infección nosocomial. La especie Morganella morganii es un patógeno humano causante de infecciones urinarias, neumonía, otitis entre otras29. Algunas especies importantes son: Citrobacter freundii Citrobacter koseri Citrobacter amalonaticus Enterobacter aerogenes Enterobacter cloacae Escherichia coli Klebsiella oxytoca Klebsiella ozaenae Klebsiella pneumoniae Morganella morganii Proteus mirabilis Proteus vulgaris Salmonella sp, Shigella boydii Shigella flexneri Yersinia enterocolítica Alcaligenes feacalis Pantoea aglomerans Serratia odorífera Providencia alcalifaciens 2.9.3 Familia Corynebacteriaceae. Son bacilos Gram positivos, catalasa positiva y no forman esporas, hacen parte de la flora normal de los seres humanos, pueden encontrarse en el medio ambiente y estar asociados con diversos animales. El patógeno más importante de esta familia es el Corynebacterium diphtheriae que sólo tiene como huésped el ser humano, las demás especies son oportunistas y sólo producen infección en personas inmunodeficientes. FORBES, Op. cit., p. 378. 29 35 Algunas especies importantes son: Corynebacterium diphtheriae Corynebacterium amycolatum Corynebacterium auris Corynebacterium jeikeium Corynebacterium pseudotuberculosis Corynebacterium minutissimum Corynebacterium xerosis Corynebacterium ulcerans Corynebacterium striatum Corynebacterium urealyticum 2.9.4 Familia Bacillaceae. Todas las especies de Bacillus son bacilos Gram positivos, aerobios y esporulados y se consideran patógenos oportunistas de virulencia baja, pueden transmitirse fácilmente a personas inmunosuprimidas y personas expuestas a materiales contaminados. Bacillus anthracis es el género de más alta virulencia, en menor medida Bacillus cereus se encuentra presente en el suelo, puede causar infecciones graves, envenenamiento por ingestión de alimentos contaminados, agujas contaminadas y producir infecciones oculares; en personas inmunosuprimidas pueden presentarse infecciones en diferentes partes del cuerpo30. Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium y Bacillus pumilus son microorganismos no patógenos presentes en el suelo, agua, polvo, se encuentran en la superficie de las plantas y en materiales en descomposición. Otras especies de Bacillus cuando penetran en zonas donde no son habituales pueden producir endocarditis, neumonitis, bacteriemia y meningitis31. Algunas especies importantes son: Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus mycoides Bacillus circulans Bacillus licheniformis Bacillus subtilis Bacillus megaterium FORBES, Op. cit., p. 327. 30 CARMONA, Op. cit., p. 220. 31 36 2.9.5 Familia Pseudomonadaceae. Son bacilos Gram negativos, móviles, usan hidratos de carbono, alcoholes y aminoácidos como fuentes de carbono y energía, pueden desarrollarse a temperaturas bajas pero la temperatura optima de crecimiento es de 30-37ºC. Las Pseudomonas habitan generalmente el medio ambiente y raramente colonizan la piel y las mucosas humanas, la especie mas común es la Pseudomonas aeruginosa, es una especie que no forma esporas ni es capsulada, sus pigmentos ejercen una acción bactericida sobre varias bacterias; puede transmitirse de diferentes formas especialmente a personas inmunodeficientes en las cuales puede causar infecciones potencialmente fatales como meningitis, endocarditis y septicemia. La Pseudomonas aeruginosa puede causar con frecuencia otitis externa e infecciones nosocomiales32. Algunas especies importantes son: Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas alcaligenes Pseudomonas fluorescens Pseudomonas monteilii Pseudomonas putida Pseudomonas pseudoalcaligenes 2.9.6 Bacilos y Cocobacilos No Fermentadores de Lactosa. Las especies de Aeromonas, Plesiomonas shigelloides y Chromobacterium violaceum son bacilos Gram negativos, oxidasa positiva, fermentadores de glucosa, el hábitat principal es el agua, no hacen parte de la flora normal de los seres humanos, la transmisión se hace por ingestión de alimentos y agua contaminados, las especies de Aeromonas pueden provocar gastroenteritis especialmente en niños, aunque no puede presentarse un diagnóstico muy claro porque no se conocen con certeza sus factores de virulencia33. Los géneros Moraxella (cocobacilo Gram negativo) y Neisseria (cocos Gram negativos), no utilizan glucosa; las infecciones por las especies de Moraxella sp, y Neisseria elongata aumentan por lesiones en la barrera defensiva de las mucosas o dérmicas lo que hace invadir sitios estériles. 32 FORBES, Op. cit., p. 401. 33 Ibid, p. 435. 37 El género Moraxella sp., puede colonizar las vías respiratorias superiores, las vías urinarias y los ojos. Moraxella lacunata ocasionalmente produce conjuntivitis e infecciones corneanas34. Alcaligenes faecalis ocasionalmente puede encontrarse en infecciones graves, se asocia con septicemia, peritonitis y meningitis35. Las especies de Acinetobacter se pueden presentar usualmente en la naturaleza (agua, suelo). Acinetobacter sp. ocasionalmente puede producir infecciones graves como meningitis septicemia, y neumonía nosocomial, este género y Fusobacterium sp. (Fusobacterium moriferum, Fusobacterium necroforum y Fusobacterium nucleatum son las especies más frecuentes) se localiza fácilmente en el aparato gastrointestinal, genital y respiratorio de personas sanas. Géneros y especies importantes: 2.10 Aeromonas caviae Aeromonas hydrophila Aeromonas jandaei Aeromonas schubertii Aeromonas veronii Moraxella osloensis Moraxella nonliquefaciens Moraxella lacunata Moraxella atlantae Moraxella lincolnii Moraxella elongata Moraxella weaver Fusobacterium mortiferum Flavobacterium odoratum Acinetobacter calcoaceticus AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS Para la mayoría de las bacterias la temperatura de incubación es de 35-37°C, Haemophillus influenzae y Streptococcus pneumoniae requieren una atmósfera con una concentración aumentada de CO2 del 5-10%, para esto se usa una cámara de CO2 (un recipiente hermético y una vela), estos microorganismos pueden ser 34 FORBES, Op. cit.,p. 453. 35 CARMONA, Op. cit., p. 194. 38 detectados 48 horas después de ser incubados. Staphylococcus aureus requiere de 48 a 72 horas de incubación. Pseudomonas de 24 a 48 horas.36 2.10.1 Pruebas bioquímicas. Efectos de los microorganismos sobre algunas pruebas que se realizan para su identificación37: 2.11 Tinción de Gram: coloración que permite diferenciar la morfología de las bacterias, es decir, si es coco, bacilo, cocobacilo y si forma espora. Azúcares: degradación del azúcar y acidificación del medio. Catalasa: se realiza con peróxido de hidrógeno y es positiva cuando los microorganismos contienen la enzima catalasa, la cual descompone el peróxido en oxígeno y agua, produciendo burbujas. Citrato de Simmons: se observa una alcalinización del medio al ser degradado el citrato por los microorganismos. Coagulasa: se realiza con plasma y es positiva al observarse un precipitado granular o formación de coágulos. Fenilalanina: se detecta el ácido fenilpirúvico producido por la desaminación del medio. LIA (Agar Lisina de Hierro): se detecta la descarboxilación de la lisina. Oxidasa: determina la presencia de las enzimas oxidasas y diferencia el tipo de oxidación biológica. RM (Rojo de Metilo): se observa la producción de un ácido estable como láctico, acético o fórmico. SIM: para comprobar la formación de H2S y motilidad. TSI (Three Sugar Iron): degradación del azúcar y formación de ácido. Urea: hidrolización de la urea formando CO2 y amoniaco. VP(Voges Proskauer): se observa la producción de acetoína. ANÁLISIS ESTADÍSTICO El análisis estadístico se realiza para determinar las relaciones entre variables que son objeto de estudio. 36 FORBES, Op. Cit., p. 397. 37 Mac Faddin, Jean F. Pruebas bioquímicas para identificación de bacterias de importancia clínica. Ed Panamericana. p.39-190 39 “La estadística se encarga de realizar deducciones entre un conjunto de todos los elementos de un experimento que tienen una característica común. La estadística descriptiva o deductiva es un método que se utiliza para obtener de un conjunto de datos, conclusiones sobre ellos que no sobrepasan del conocimiento que aportan, la estadística inferencial o inductiva es el método que se usa para obtener conclusiones que sobrepasan del conocimiento que proporcionan los datos, busca obtener información mediante un procesamiento de datos de una muestra tomada de él”38. 2.11.1 Variable aleatoria. Cuando se realizan experimentos los resultados están sujetos al azar. En un experimento estadístico se describen los procesos en los cuales se realizan observaciones al azar que generan cantidades aleatorias. El tipo de variable de un experimento depende de las características de los datos; una variable aleatoria39 asocia un número real con cada elemento del espacio muestral, es decir, asigna un número real a cada resultado del experimento. “Una variable aleatoria es discreta cuando el conjunto de resultados del experimento contiene un número finito de posibilidades”40, sólo puede tomar valores enteros. “Una variable aleatoria es continua cuando el conjunto de resultados puede tomar todos los valores teóricamente posibles entre dos valores dados”41. 2.11.2 Distribución de Poisson. Es una distribución de probabilidad discreta en donde “los experimentos que dan valores a la variable aleatoria X, el número de eventos que ocurren en un intervalo temporal o espacial dado se denominan Experimentos de Poisson42; el intervalo dado puede ser cualquier longitud; así un experimento de Poisson puede generar observaciones para la variable aleatoria X que represente por ejemplo el número de llamadas telefónicas por hora que recibe una oficina y una observación para un intervalo espacial de un experimento de Poisson podría ser o el número de unidades formadoras de colonia (UFC) en un volumen de aire muestreado”. El número X de resultados que ocurren dentro de 38 PORTUS GOVINDEN, Lincoyán. Curso práctico de estadística. Ed. Mac Graw Hill, 1984. p.3-4. 39 WALPOLE, Ronald E. Probabilidad y estadística para ingenieros. 6 Ed. Prentice Hall, 1999. p. 51. 40 Ibid., p. 53. 41 PORTUS, Op. cit., p. 4. 42 Ibid., p. 135. 40 un experimento de Poisson se llama variable aleatoria de Poisson y su distribución de probabilidad distribución de Poisson. Un experimento de Poisson debe cumplir con las siguientes condiciones: El número de eventos que ocurren en un intervalo o región específica es independiente del número de los eventos que ocurren fuera de ellos. La probabilidad de que ocurra un sólo resultado durante un intervalo corto o región específica pequeña es proporcional a la longitud del intervalo o tamaño de la región y no dependen del número de resultados que ocurran fuera de ellos. La probabilidad de que en cualquier intervalo ocurran dos o más eventos, es insignificante. La distribución de la probabilidad de la variable aleatoria de Poisson X, que representa el número de resultados que ocurren en un intervalo dado o región específica que se denota con t, es: λt P(x; λ t) = [e- (λ t)x] / x! X= 0,1,2,3,…, donde λ es el número promedio de resultados por unidad de tiempo o región. La media y la varianza de la variable de Poisson P(x: λ t) son iguales a (número de medio de eventos por unidad de tiempo)” 43. λt 2.11.3 Análisis de Regresión. Se realiza para estimar las relaciones existentes entre las variables de interés y así mismo desarrolla un método de predicción de una variable respuesta respecto a una o más variables de regresión independientes44. Para la determinación de un modelo probabilístico se debe tener claro la descripción del comportamiento de una variable aleatoria, los valores que ella pueda tomar y de otros relacionados con la variable en estudio que caracterizan el conjunto de resultados (parámetros del modelo). Cada modelo probabilístico puede representar distintos tipos de variables45. 43 WALPOLE, Op. Cit., p. 136-137. 44 Ibid., p. 358. 45 PEREZ de VARGAS, Abraira. Métodos multivariantes en Bioestadística. Ed. Centro de Estudios Ramón Areces. Madrid, 1996. 41 Las variables pueden tener distribuciones de probabilidad discreta (binomial, multinomial, hipergeométrica, binomial negativa, geométrica o de Poisson) o distribuciones continuas de probabilidad (normal, exponencial, Chi-cuadrada, logarítmica normal entre otras)46. “La regresión tiene dos significados: uno surge de la distribución conjunta de probabilidad de dos variables aleatorias; el otro es empírico y nace de la necesidad de ajustar alguna función a un conjunto de datos”47 Se deben obtener estimaciones para los parámetros que intervienen en el modelo, esto se puede realizar con el método de mínimos cuadrados o con la estimación por máxima verosimilitud. 2.11.4 Modelo Lineal General. Una variable respuesta dada se considera como una función de varias variables de predicción. “Sean x1, x2, ..., xk, k variables de predicción, las cuales pueden tener alguna influencia sobre una respuesta Y, y supóngase que el modelo tiene la forma donde Yi es la Yi = β0 + β1xi1 + β2xi2 + … + βkxik + εi, i= 1, 2, ..., n, i-ésima observación de la respuesta para un conjunto de valores fijos xi1, xi2, …, xik de las variables de predicción, εi es el error aleatorio no observable asociado con Yi, y β0, β1, …, βk son m = k+1 parámetros lineales (que en el modelo no aparece como exponente, multiplicado o dividido por otro parámetro)48 desconocidos. Esta ecuación recibe el nombre de modelo lineal general y da origen a lo que se conoce como una regresión lineal múltiple. Es posible que dos o más variable de predicción interactúen, es decir, el efecto de una de las variables de predicción sobre la variable de respuesta depende del valor de otra variable de predicción”49. 46 WALPOLE, Op. Cit., p. Contenido 47 CANAVOS, George C. Probabilidad y estadística, aplicación y métodos. p. 445 48 Ibid., p. 447. 49 Ibid., p. 503-504. 42 2.11.5 Estimación por máxima verosimilitud. “Este método selecciona como estimador a aquel valor del parámetro que tiene la propiedad de maximizar el valor de la probabilidad de la muestra aleatoria observada. Una función de verosimilitud es el producto, ya sea de probabilidades o de densidades”50 “Se emplea para estimar los parámetros desconocidos en el modelo lineal simple. Tienen propiedades deseables de consistencia, suficiencia y varianza mínima, además proporcionan los medios necesarios para el desarrollo de criterios de inferencia para β0 y β1”.51 2.11.6 Odds ratio. “Es una medida de asociación que cuantifica la relación entre dos variables dicotómicas es decir, entre variables cuyo resultado sólo son dos eventos. Esta medida cuantifica la magnitud de la asociación existente y además permite examinar el efecto que otras variables pueden causar en esa asociación (como podrían ser por ejemplo la edad, el sexo, etc). En una ecuación de regresión logística se puede interpretar el exponencial del coeficiente como odds ratio de la variable correspondiente"52. odds ratio = eb Y= a + bX; O “en el caso de los estudios epidemiológicos, usualmente se dispone de dos grupos, uno de ellos utilizado como referencia o de comparación con el cual se efectúa el contraste y el odds ratio corresponde al cociente de dos odds o relaciones previamente estimadas. Expuestos No Expuestos 50 CANAVOS, Op. Cit., p. 265-267. 51 Ibid., p. 455-456. Casos A C 52 Controles b d MOLINERO, Luis. Odds ratio, Riesgo Relativo y Número Necesario a Tratar. Disponible en http://www.seh-lelha.org/oddsratio.htm 43 En este caso el odds ratio corresponde a: OR = odds de enfermedad en expuestos (1) odds de enfermar en no expuestos (2) (1) Odds de enfermar en expuestos = casos en expuestos / no-casos en expuestos (2) Odds de enfermar en no expuestos = casos en no expuestos/ no-casos en no expuestos o bien OR = a / b c/d = axd cxb El odds ratio identifica la magnitud o fuerza de la asociación, lo que permite hacer comparaciones entre las variables”53. 53 Indicadores de riesgo epidemiológico. Universidad católica http://escuela.med.puc.cl/Recursos/recepidem/IndEpi5.htm. 44 de Chile. Disponible en 3 METODOLOGÍA 3.1 SELECCIÓN SITIOS DE MUESTREO Se definió la parte norte de la localidad como punto de partida para la selección de los sitios específicos de muestreo, por corresponder según uso del suelo como sector no residencial, cumpliendo con la característica preestablecida para el desarrollo del proyecto en una zona de alta actividad industrial. El área está delimitada por las avenidas principales del sector (Avenida Carrera 30, Avenida calle 6, Avenida de las Américas, Avenida 68, Ferrocarril Calle 22F). Esta área se dividió en áreas geométricamente iguales para facilitar la distribución relativamente uniforme de los puntos específicos de muestreo, cercanos a las avenidas cumpliendo con la característica de muestreo en una zona de alto flujo vehicular (Ver figura 2) Se seleccionaron cuatro sitios dentro de esta área, los cuales cumplen con condiciones aptas para la toma de muestras tales como ser un espacio abierto sin obstáculos altos cercanos y de fácil acceso a cualquier hora del día y de la semana, estos sitios fueron el Colegio Distrital La Merced y el parque principal de los barrios Salazar Gómez, Puente Aranda y Cundinamarca. Un quinto sitio de muestreo correspondió a las instalaciones del INVIMA que está en el límite fuera de la localidad que junto al Colegio La Merced fueron los dos lugares donde se llevó a cabo el muestreo para MATERIAL PARTICULADO, HIDROCARBUROS y METALES, cuyos proyectos conforman igualmente el proyecto base al cual esta sujeto esta investigación. 45 Figura 2. Ubicación de sitios de Muestreo 1 Punto de muestreo Av 68 Ferrocarril Cll 22F 2 3 División de áreas Av Américas 4 5 Av Cra 30 Av Cll 6 Fuente: Recorriendo Puente Aranda 2004. Diagnóstico Físico y Socioeconómico de las Localidades de Bogotá D.C. Alcaldía Mayor de Bogotá. Secretaría de Hacienda, Departamento Administrativo de Planeación. Plano 10: Estratificación. p. 45. 46 3.1.1 CARACTERÍSTICAS DE LOS SITIOS DE MUESTREO. Tabla 6. Generalidades sitios de muestreo Sitio 1 2 Dirección Cra 68D #17-11 Cll12 Con Cr 66 Nombre Avenidas Cercanas . Av 68 INVIMA . Cll13 Parque Barrio Salazar Gómez (S.G.) . Av 68 . Cll13 Entorno (Emisiones) Características Ubicación Equipo Flujo vehicular Generalidades (Animales, Olores, Residuos Sólidos.) Zona industrial, comercial. Edificaciones de mediana altura. Numerosos ductos de emisiones discontinuas. Terraza de suelo impermeabilizado que permite el depósito de agua lluvia. Equipo ubicado sobre columna estructural de la construcción que sobrepasa en altura el muro de seguridad. Sistema de aire acondicionado de inyección a 3m. Intersección vehicular de 4 puntos, vehículos de transporte público municipal y departamental pesado, flujo moderado. Suaves olores de industrias de alimentos (penetrante olor a chocolate y café en las tardes). Equipo sobre plataforma a un nivel de 1.8 m de altura, con un área pastosa de 46.40m2 con fondo arbóreo y vía vehicular a 8m aprox, chimenea a aprox. 200m. Sin árboles. Residuos sólidos de actividades recreativas, residuos Vía vehicular a orgánicos de animales aprox. 8m, de domésticos (perros) y transporte presencia de aves en público las viviendas. Olores pesado. provenientes de Nacional de Chocolates. Zona residencial, viviendas de 3 plantas en 2 costados del parque y muro cercano de 3.5m de altura. Industrias cercanas sobre la Av 68 y la Cll 13. 47 Parque Barrio Puente Aranda (P.A.) Zona residencial y comercial (talleres) circundante, edificaciones de 2 y 3 . Cll 13 plantas, centros médicos cercanos, . Av. De árboles frondosos y Las con ramas muy Américas extendidas. Iglesia cercana de aprox. 30m de altura, Cárcel Modelo. 3 Cra 56 Con Cll16 4 Centro Educativo . Cll 13 Distrital Cll 13 (TransmLa #41-51 ilenio) Merced (Merced) 5 Cll34 Con Cr16 Parque . Av 19 Barrio Cundina- . Cr 30 marca (Cund.) . Cll 13 Ubicación del equipo a 2.10m de altura sobre estructura de tubo, suelo en pavimento con área pastosa cercana y árboles a una distancia de 13-14m y muro de 4-9 m de altura. Los 4 costados del parque son vía y una es principal de transporte público y pesado Residuos sólidos de actividades recreativas, residuos orgánicos de animales domésticos. Olores provenientes de establecimientos comerciales (expendio de pollo y panadería) Altura de muestreo a 1.55m Zona industrial de sobre grada en cemento en alimentos, el área deportiva del colegio, Árboles a aprox. automotriz, imprentas, emisiones 25m sobre zona verde y área cercana en concreto a continuas (Mazda). aprox. 30m de la Calle 13. El costado norte del Colegio es la Avenida. Cll 13 con tráfico vehicular continuo y Transmilenio Residuos sólidos de actividades de descanso del colegio. Olores provenientes de industrias de alimentos (COMAPAN). Altura de muestreo a 1.60m de altura sobre plataforma, con zona verde circundante, con árboles cercanos (3 y 10m) de baja altura, una edificación cercana de aprox. 12m de altura. La parte occidental del parque es concurrida con vehículos de transporte pesado. Residuos sólidos y orgánicos animales. Olores provenientes de industrias de alimentos (salsa de tomate). Zona industrial, sonidos de maquinaria en funcionamiento (Postobon, medias TALL). Fuente: Los Autores, 2005. 48 Figura 3. Sitio N°1, INVIMA Fuente: Los autores, 2005 Figura 4. Sitio N°2, Parque principal barrio Salazar Gómez Fuente: Los autores, 2005 49 Figura 5. Sitio N°3, Parque principal barrio Puente Aranda Fuente: Los autores, 2005 Figura 6. Sitio N°4, Colegio La Merced Fuente: Los autores, 2005 50 Figura 7. Sitio N°5, Parque principal barrio Cundinamarca. Fuente: Los autores, 2005 3.2 MUESTREO El período de muestreo se realizó en dos etapas, un muestreo preliminar y uno definitivo, con el COLECTOR MICROBIOLÓGICO DE GÉRMENES AÉREOS MAS-100 del laboratorio de Ingeniería Ambiental de la Universidad De La Salle, (ver anexo B, Protocolo de muestreo). 3.2.1 Principio básico del equipo MAS-100. El MAS-100 está basado en el principio de muestreador de aire de Andersen, que aspira el aire a través de una placa perforada y las partículas que contiene se dirigen hacia la superficie del agar de la cápsula de Petri. El MAS-100 utiliza un aspirador de alta potencia y supervisa el volumen de forma continuada. Este sistema mide la corriente de aire entrante y regula el aire aspirado para obtener un caudal constante de 100litros por minuto.54 54 MERCK COMPANY. Manual 02 del MAS-100 51 Figura 8. Equipo de muestreo MAS-100 Fuente: Merck, Chile ago. 2003, disponible en http://www.merck.cl Fuente: Los autores, 2005 3.2.2 Período de muestreo. El muestreo preliminar se realizó para ajustar la metodología de muestreo, es decir conveniencia de los medios de cultivo según el crecimiento presentado, horas de muestreo, tiempos y desplazamiento entre puntos, procesamiento microbiológico (incubación de muestras en el laboratorio, preparación de medios de cultivo), duración batería del equipo, uso del equipo, facilidad de acceso a instalaciones por divulgación del proyecto, precauciones de seguridad del equipo y de las muestras. Se eligieron dos días hábiles de la semana y un día de descanso (domingo) y un sábado por ser aparentemente un día intermedio de actividad laboral que se muestrearía en el definitivo. El período de muestreo está comprendido desde el 25 de mayo de 2005 hasta el 17 de julio de 2005. 52 Tabla 7. Días de muestreo ETAPA Preliminar Definitivo CÓDIGO A1 Jn2 Pn3 X A2 Jn2 Pn3 X A3 Jn2 Pn3 X A4 Jn2 Pn3 X A5 Jn2 Pn3 X A6 Jn2 Pn3 X A7 Jn2 Pn3 X A8 Jn2 Pn3 X A9 Jn2 Pn3 X A10 Jn2 Pn3 X FECHA 25 Mayo de 2005 29 Mayo de 2005 31 Mayo de 2005 7 Junio de 2005 9 Junio de 2005 12 Junio de 2005 9 Julio de 2005 12 Julio de 2005 14 Julio de 2005 17 Julio de 2005 DÍA DE LA SEMANA Miércoles Domingo Martes Martes Jueves Domingo Sábado Martes Jueves domingo Fuente: Los autores, 2005 La toma de muestras es la siguiente: Tabla 8. Descripción de períodos de muestreo y muestras por punto. Dos Etapas Definitivo En una Semana En un Día En una Jornada En un Punto Preliminar – Definitivo Dos semanas de muestreo Tres días, Más un día sábado Tres períodos del día Cinco Puntos Cuatro Muestras Fuente: Los autores, 2005 En la etapa preliminar también se tomaron muestras en Agar Cetrimide, pero debido a que sólo en el 2% de las muestras se presentó crecimiento, este medio de cultivo se excluyó del muestreo definitivo, igualmente los microorganismos que crecen en este medio se podrían recuperar en los otros medios utilizados. Las condiciones de la toma de muestras se registraron en un formato de campo (ver anexo C, Formato de campo) 53 El total de muestras tomadas por medio de cultivo fue 134 durante diez días de muestreo (tres preliminar y siete definitivo), este valor no incluye las muestras tomadas el primer día, es decir que está dado por: (1muestra/punto)*(5puntos/jornada)*(3 jornadas/día)*(9días) = 135 muestras pero no se tomó la muestra de la jornada tres en Cund. el 14 de julio, por lo tanto el número de muestras totales es 135-1= 134 3.2.3 Codificación de las muestras. Para facilitar el manejo de las muestras se estableció una codificación teniendo en cuenta el día, la jornada, el punto y el medio de cultivo, teniendo continuidad con las siguientes etapas del proyecto base al continuar secuencialmente la numeración del día, quedando fijos los otros caracteres, así: An1 Jn2 Pn3 X; siendo Tabla 9. Descripción codificación de las muestras n1 Día de muestreo Va de 1 a 10; siendo 1 el primer día y 10 el último día en esta etapa y 11 el primer día de la segunda etapa del proyecto base. N2 n3 Jornada del día Punto de Muestreo (hora) Va de 1 a 5; siendo, 1:INVIMA Va de 1 a 3; 2: Parque Barrio siendo, Salazar Gómez. 1: 6:00 - 10:00 3: Parque Barrio 2: 11:30 -15:30 Puente Aranda. 3: 16:30 – 20:30 4: Colegio La Merced. 5: Parque Barrio Cund. X Medio de cultivo S: Agar Sangre Ch: Agar Chocolate Mc: Agar McConkey Sb: Agar Saboureaud Ct: Agar Cetrimide Fuente: Los autores, 2005 De tal forma que A5 J1 P3 Ch, corresponde a la muestra tomada en agar Chocolate en el Parque Barrio Puente Aranda, entre 6:00am y 10:00am en el quinto día de muestreo (9 de junio de 2005). 54 3.3 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN (ver anexo B, Protocolo de aislamiento e identificación de microorganismos en el aire). Se realizó la toma de muestras con medios de aislamiento primario para géneros comunes: Agar Sangre, Agar Chocolate, Agar Mac Conkey, Agar Cetrimide. El procedimiento general para identificación de microorganismos se muestra en la figura 4, incluyendo la toma de muestras. En este procedimiento no se tiene en cuenta el crecimiento de hongos en los medios agar sangre y agar chocolate, pues se identificaron en las muestras de Agar Saboureaud para el proyecto “ESTUDIO MICROBIOLÓGICO EN BIOAEROSOLES DE UNA ZONA DE ALTA ACTIVIDAD INDUSTRIAL Y FLUJO VEHICULAR EN BOGOTÁ, Y DETERMINACIÓN DE PUNTOS CRÍTICOS” realizado por estudiantes de la Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, el cual apoya el estudio en esta fase de la metodología, (ver anexo D, Hongos identificados en las muestras). Los medios de cultivo utilizados tanto para la toma de muestras como para el análisis e identificación de microorganismos, se someten a un control de calidad de esterilidad, es decir se incuba una caja con medio de cultivo “estéril” para comprobar que no se ha contaminado en el proceso de preparación. Durante la incubación y el trasporte de las muestras del sitio de muestreo al laboratorio, una caja de petri con medio de cultivo “estéril” acompaña las muestras e igualmente se incuba, determinando si las muestras han sido contaminadas en este proceso. 55 Figura 9 . Procedimiento Fase Experimental Preparación Medios* * Sometido a Control de Calidad Pruebas Bioquímicas Toma de muestra Incubación* Conteo de Colonias Aislamiento Estudio macroscópico Fuente: Los autores, 2005 Luego de la toma de muestras, se transportaron al laboratorio de microbiología de la Universidad de la Salle y se incubaron a una temperatura de 37°C durante un período de 24 a 48 horas. A partir del crecimiento en los medios de cultivo de aislamiento primario, se procede a la cuantificación de unidades formadoras de colonia de las muestras en Agar sangre y Agar chocolate y se realiza un estudio macroscópico de las colonias registrado en un formato de trabajo en laboratorio (ver anexo E, Formato de laboratorio), para enumerar, aislar e identificar las diferentes especies bacterianas con pruebas bioquímicas según protocolos establecidos en la literatura. Las pruebas bioquímicas para identificación de las especies bacterianas se muestra en la figura 5. Inicialmente se debe determinar si es una bacteria Gram negativa o Gram positiva por medio de la tinción de Gram, guiando así el procedimiento para la identificación por este diagrama que ha sido planteado particularmente para microorganismos frecuentes en medio ambiente, de acuerdo a las características específicas del proyecto, limitando las pruebas de identificación convenientemente. 56 Figura 10. Pruebas Bioquímicas COLONIA Gram (+) Cocos Gram (-) Bacilos Bacilos Esporulado Bacillus spp Corynebacterium spp Catalasa Streptococcus spp Oxidasa (-) Micrococcus spp Staphylococcus spp Glucosa Lactosa Manosa Xilosa TSI SIM (-) (+) (+) Enterobacterios Coagulasa (+) Crecimiento en NaCl 6,5% CAMP Optoquina Bilis esculina Bacitracina Hemólisis Citrato Simmons Maltosa Reducción de Nitratos VP (α): S. pneumoniae Reducción de Nitratos Maltosa Glucosa Sacarosa Oxidasa TSI LIA Citrato Simmons UREA SIM Fenilalanina RM VP S. aureus Fuente: Los autores, 2005 57 4 RESULTADOS Y ANÁLISIS Este estudio es de tipo exploratorio, es decir que busca identificar un patrón al reunir elementos que permitan sugerir una asociación etiológica55 con las medidas resumen de observaciones individuales, como lo son las medias de los conteos en las muestras y medidas que resumen las características físicas de los puntos de muestreo. 4.1 FAMILIAS BACTERIANAS AISLADAS E IDENTIFICADAS Se identificaron 50 especies bacterianas (ver anexo F, Lista de microorganismos identificados) en la muestras tomadas en la zona de estudio y su análisis se realizó por presencia y frecuencia de los microorganismos agrupados en familias. De las especies identificadas, no todas las bacterias han sido reportadas como causantes de enfermedades respiratorias, sólo unas pocas, otros son potenciales patógenos para el sistema, especificados en el numeral 4.1.3 y otras son responsables de infecciones diferentes a las respiratorias como meningitis, otitis, infecciones gastrointestinales y conjuntivitis, entre otras, mencionadas en el capítulo dos, frecuentes en poblaciones con niveles significativos de contaminación atmosférica. Algunas de las bacterias identificadas Escherichia coli, Corynebacterium sp, Staphylococcus gallinarum, están asociados con animales56 y se presentan por arrastre del viento de material desde el suelo o las terrazas de las viviendas donde permanecen frecuentemente animales en los puntos residenciales. 4.1.1 Frecuencia de familias identificadas. Las gráficas fueron elaboradas a partir del anexo G. Cuadros de frecuencia. 55 Metodología de la investigación epidemiológica. p. 85-86. 56 FORBES, Op. Cit. 58 Figura 11. Frecuencia familia BACILLACEAE BACILLACEAE Presencia (%) 50 40 J1 30 J2 20 J3 10 0 INVIMA SG. P.A. LA MERCED Cund AV. 19 Puntos de muestreo Del anterior gráfico se observa que la familia Bacillaceae, se presenta mayor variación en las muestras del barrio Puente Aranda, con porcentajes de presencia altos en las tres jornadas. Se presentan porcentajes similares entre jornadas para el resto de los puntos, siendo la Merced el de valores más bajos. Figura 12. Frecuencia familia COCCACEAE STHAPHYLOCOCCUS a.GÉNERO GÉNERO STAPHYLOCOCCUS Frecuencia (%) Presencia(%) 50 40 30 J1 J2 J3 20 10 0 INVIMA SG. P.A. LA MERCED Cund AV. 19 Puntos de muestreo Frecuencia (%) Presencia (%) b. GÉNERO MICROCOCCUS 50 40 30 J1 20 J2 10 J3 0 INVIMA SG. P.A. LA MERCED Puntos de muestreo 59 Cund AV. 19 El género Staphylococcus pertenece a la familia Coccaceae, el cual presenta mayor variación en el INVIMA como se observa en la figura 12a; la más baja presencia se da en Puente Aranda y un pico en la jornada tres en la Merced. El género Micrococcus también pertenece a la familia Coccaceae y como se observa en la figura 12b, presenta poca variación entre jornadas y menor entre puntos, lo cual sugiere que su presencia no está sujeta a cambios de temperatura durante el día, pues esta varía entre jornadas. Figura 13. Frecuencia familia CORYNEBACTERIACEAE Presencia Frecuencia (%) (%) CORYNEBACTERIACEAE 50 40 30 J1 20 J2 10 J3 0 INVIMA SG. P.A. LA MERCED AV. 19 Cund Puntos de muestreo En la figura 13 se observa que la familia Corynebacteriaceae presenta un pico en la jornada uno de la Merced y en la jornada tres del S.G., se sugiere que el hallazgo de esta familia podría estar asociado a animales y este punto es el más frecuentado por animales domésticos pues es un barrio residencial. Figura 14. Frecuencia Familia ENTEROBACTERIACEAE Presencia(%) Frecuencia (%) ENTEROBACTERIACEAE 50 40 30 J1 20 J2 10 J3 0 INVIMA SG. P.A. LA MERCED Puntos de muestreo 60 AV. 19 Cund La frecuencia de aislamiento de géneros de esta familia es baja, al comparar la figura 14 con las anteriores, es decir que pocos microorganismos identificados pertenecen a esta familia, lo cual se justifica por los reportes que lo definen como no común en el aire. Comportamiento creciente a través del día en S.G. y La Merced, siendo estos puntos los de mayor flujo vehicular, lo cual puede incidir por vibraciones de tráfico pesado, en el arrastre desde el suelo de estas especies. La tabla 10 muestra el porcentaje de las familias de mayor presencia en las muestras, determinado por la relación entre el número de especies pertenecientes a cada familia presentes en una jornada del punto y el total de especies identificadas para ese punto en esa jornada. PF(%) = EJ * 100 / TE ; en donde PF: frecuencia de la familia en la jornada de interés de un punto, dado en porcentaje EJ: número de especies de la misma familia que aparecen en esa jornada del punto TE: total de especies identificadas para esa jornada del punto. Ejemplo: Para la jornada uno del INVIMA se identificaron 27 especies de microorganismos y 9 de ellos pertenecen a la familia BACILLACEAE, sin tener en cuenta el porcentaje de frecuencia de cada microorganismo, únicamente su aparición en la muestra. PF(%)BACILLACEAE= 9 * 100 / 27 = 33.33% 61 Tabla 10. Frecuencia de familias PUNTO Frecuencia (%) FAMILIA J2 J3 33,33 32,14 36,36 33,94 Staphylococcus 18,52 7,14 13,64 13,10 Micrococcus 14,81 17,86 22,73 18,47 CORYNEBACTERIACEAE 14,81 17,86 18,18 16,95 ENTEROBACTERIACEAE 14,81 14,28 4,54 11,21 BACILLACEAE 38,09 34,78 25,00 32,62 Staphylococcus 14,28 13,04 10,71 12,68 Micrococcus 23,81 17,39 17,86 19,69 CORYNEBACTERIACEAE 19,04 17,39 25,00 20,47 ENTEROBACTERIACEAE 4,76 13,04 14,28 10,69 BACILLACEAE 27,59 32,00 43,48 33,36 Staphylococcus 10,39 12,00 8,69 10,36 Micrococcus 17,24 20,00 21,73 19,66 CORYNEBACTERIACEAE 17,24 20,00 17,39 18,21 ENTEROBACTERIACEAE 10,34 8,00 4,35 7,56 BACILLACEAE 20,83 32,00 27,27 26,70 Staphylococcus 12,50 12,00 18,18 14,23 Micrococcus 20,83 20,00 22,73 21,19 CORYNEBACTERIACEAE 25,00 16,00 18,18 19,73 ENTEROBACTERIACEAE 4,17 8,00 13,64 8,60 BACILLACEAE 35,71 30,43 31,82 32,65 Staphylococcus 10,71 13,04 13,64 12,46 Micrococcus 17,86 17,39 22,73 19,33 CORYNEBACTERIACEAE 14,29 13,04 18,18 15,17 ENTEROBACTERIACEAE 10,71 8,69 4,54 7,98 BACILLACEAE INVIMA S.G. P.A. MERCED CUND. Promedio J1 COCACCEAE COCACCEAE COCACCEAE COCACCEAE COCACCEAE 62 Un porcentaje significativo corresponde a microorganismos de la familia BACILLACEAE que no presentan gran variación entre las jornadas de muestreo para cada punto, ni entre puntos, exceptuando el valor en la Merced en donde el porcentaje disminuye en la jornada uno, puede darse por el incremento de temperatura con respecto al inicio de la jornada por ser el último punto muestreado en esta jornada. Las especies de esta familia son esporulados lo que las hace resistentes y facilita su presencia en el medio ambiente, siendo transportadas por el aire. 4.1.2 Frecuencia de especies bacterianas identificadas. Las especies de microorganismos de mayor frecuencia de aparición, según las cuadros y gráficas de frecuencia, (ver anexo G), están relacionadas en la tabla 11. El porcentaje relacionado en la tabla 11, está dado por el número de días en que aparece el microorganismo en la jornada de un mismo punto y el total de días de muestreo (8 días). F(%) = A * 100 / 8 ; en donde F: frecuencia del microorganismo en la jornada de interés de un punto, dado en porcentaje A: número de días en que aparece el microorganismo en esa jornada del punto Ejemplo: el Bacillus subtillis aparece siete veces, es decir que se identificó en las muestras de siete días del INVIMA en la jornada dos. F(%)Bacillus subtillis = 7 * 100 / 8 = 87,5% 63 Tabla 11. Microorganismos de mayor frecuencia PUNTO INVIMA S.G. P.A. MERCED CUND. Frecuencia (%) Microorganismo J1 J2 J3 Bacillus subtillis 100 87,5 100 Bacillus cereus 87,5 62,5 62,5 Micrococcus luteus 87,5 87,5 62,6 Bacillus subtillis 100 100 100 Staphylococcus xylosus 62,5 62,5 75 Micrococcus luteus 62,5 62,5 62,5 Bacillus subtillis 100 100 100 Staphyloccoccus xylosus 62,5 50 75 Micrococcus luteus 87,5 62,5 50 Bacillus subtillis 75 87,5 100 Bacillus cereus 50 50 62,5 Sthapylococcus xylosus 75 62,5 62,5 Micrococcus luteus 75 62,5 87,5 Corynebacterium amycolatum 87,5 37,5 75 Bacillus subtillis 100 75 87,5 Bacillus cereus 50 50 75 Staphylococcus xylosus 75 75 75 Micrococcus luteus 37,5 62,5 75 Corynebacterium amycolatum 75 87,5 50 La frecuencia de los microorganismos no varía significativamente entre las jornadas del día pues oscila en un rango aproximado de 25% en cada punto, así mismo las especies más frecuentes en un punto, se repiten en los demás puntos. 64 El microorganismo de mayor frecuencia es el Bacillus subtillis, el cual se aisló e identificó en la totalidad de las muestras tomadas en agar sangre y/o chocolate en algunas jornadas del mismo punto, como en la jornada uno y tres en el INVIMA, o en las tres jornadas de los puntos Parque Barrio S.G y Parque Barrio P.A., esto muestra que la frecuencia de este microorganismo no esta dada por las variaciones de temperatura que se presentan a lo largo del día. Bacillus cereus presenta una tendencia de aumento leve en su frecuencia en la jornada tres para todos los puntos, para la jornada dos su frecuencia es del 50% exceptuando el INVIMA en donde es 62,5% y muy alta en la jornada uno, mientras que en los otros puntos esta jornada es la de menor frecuencia, ya que la dirección del viento va en sentido nororiente (hacia el INVIMA), ver anexo K. Rosa de los vientos, construida a partir de información de la estación meteorológica Merck. Micrococcus luteus no presenta una tendencia definida en su frecuencia al comparar entre puntos, por lo tanto su presencia depende de condiciones específicas del lugar. La frecuencias del Staphylococcus xylosus no presenta variaciones significativas entre jornadas del mismo punto ni entre puntos. La Merced y el barrio Cundinamarca, presentan mayor frecuencia de especies bacterianas, esta variedad se puede dar en la Merced por la influencia del material particulado del flujo vehicular y en el barrio Cundinamarca por ser un punto de una zona netamente industrial. 4.1.3 Patógenos. Las bacterias patógenas de interés en este estudio que se identificaron en las muestras tomadas son Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus subespecie anaerobius y Staphylococcus aureus subespecie aerobius, distribuidas en los cinco puntos de muestreo, como se observa en la siguiente tabla 65 Tabla 12. Patógenos identificados en las muestras Microorganismo Patógeno Punto La Merced Pseudomonas aeruginosa Parque P.A. Staphylococcus aureus sb anaerobius Staphylococcus aureus sb aerobius Jornada 2 1 Parque Cund. 2 INVIMA 1 Parque S.G. 1 Se debe tener en cuenta los patógenos oportunistas como Morganella morganii y Escherichia coli, identificados en algunas muestras, a pesar de su baja frecuencia, en esta zona la población es más vulnerable por las condiciones características de contaminación. Esto indica que en cada punto en donde se tomaron las muestras, la población es susceptible a la exposición de microorganismos patógenos, poniendo en riesgo su salud a pesar de su baja frecuencia. 4.2 POSTULADOS DE ESTUDIO La relación entre material particulado y el número de UFC es directa. Los microorganismos se encuentran aglomerados en los bioaerosoles y pueden adherirse a tamaños de partícula de tamaños de 3 a 10 µm57, por lo tanto el material particulado proveniente de las emisiones industriales favorece el transporte a través del aire de los microorganismos presentes en el medio ambiente, lo que se reflejaría al comparar muestras de puntos en zonas netamente industriales con residenciales y muestras tomadas entre semana con las de fin de semana, donde la actividad industrial se reduce considerablemente. 57 Bell, Op. cit., 66 La relación entre temperatura y el número de UFC es inversa Hay mayor UFC en la noche. Al incrementarse la temperatura la capa de aire se expande y se aleja por convección58, lo cual tendría un efecto de dilución en horas del medio día conllevando una reducción en la concentración de UFC, siendo mayor la carga microbiana en la noche al reducirse la temperatura. La relación entre velocidad del viento, precipitación y UFC es inversa. El viento contribuye al transporte de los contaminantes al desplazarlos cuando se presentan velocidades considerables, a menor velocidad los contaminantes pueden permanecen por más tiempo en la zona en que se genera la contaminación y la precipitación disminuye la concentración de los contaminantes presentes en el aire, alojándolos sobre superficies59. 4.3 ANÁLISIS DESCIPTIVO DE UFC El análisis se realizó independiente para cada medio de cultivo, agar sangre y agar chocolate. La medida de Unidades Formadoras de Colonia (UFC), está dada por la corrección estadística del recuento de las colonias que crecieron en las muestras tomadas en Agar Sangre y Chocolate para un volumen de muestreo de 500 L (ver anexo H, Datos corregidos conteo). Esta corrección está propuesta en el manual del equipo muestreador y es una tabla de corrección estadística según “Feller” en donde se ubica el número de formadores de colonia y se lee el total de probabilidad estadística (ver anexo I), lo cual se argumenta en que “a mayor cantidad de partículas, mayor es la posibilidad de que se recolecten dos a través del mismo orificio. En el caso de los microorganismos, dos gérmenes que se encontrasen muy próximos sólo formarían una colonia”60. 58 Cepis. Op. cit., Ibid. Lección 4. 59 60 Merck Company. Op. cit. 67 4.3.1 Gráficas. Para el análisis descriptivo se utilizó el valor de la mediana de UFC para cada jornada de los puntos, porque esta medida de posición no es afectada significativamente por valores extremos, como lo es la media (promedio de los datos) que es arrastrada hacia los valores extremos. Figura 15. Mediana del conteo de UFC en el medio agar sangre para cada punto de muestreo AGAR SANGRE 140 120 UFC 100 80 60 40 J1 20 J2 0 J3 INVIMA S.G. P.A. Merced Cund. Puntos de Muestreo En la figura 15 se observa que INVIMA presenta menor variación entre sus jornadas para este medio y junto con S.G. son los puntos de mayores valores. S.G. y Cund. tienen un aumento progresivo en el transcurso del día; exceptuando P.A. la jornada tres es la de mayor valor en los puntos. 68 Figura 16. Mediana del conteo de UFC en el medio agar chocolate para cada punto de muestreo AGAR CHOCOLATE 140 120 UFC 100 80 60 40 J1 20 J2 J3 0 INVIMA S.G. P.A. Merced Cund. Puntos de Muestreo En la figura 16 se observa que INVIMA y Merced presentan la disminución progresiva a través del día, contrario a lo que sucede en Cund. La Merced es el punto con menores valores en sus jornadas. INVIMA en la jornada uno y S.G. en la jornada tres son los mayores valores, similar a lo observado en agar sangre para estos dos puntos. Hay variaciones considerables entre los datos de jornadas y puntos, lo cual no permite establecer una tendencia, concluimos que INVIMA es el punto con valores más altos. 69 Figura 17. Diagrama de cajas del conteo de UFC en el medio agar sangre para cada jornada. AGAR SANGRE 600 545 34 P4 500 43 487 P5 428 10 P2 UFC 400 300 289 P2 14 1223 P1 200 100 0 J1 J2 J3 JORNADA En la figura 17 la media más alta está dada en la jornada tres sin alejarse demasiado de la media de las otras dos jornadas, para agar sangre. Los valores atípicos que se presentan en las jornadas uno y tres corresponden a días similares al de otros valores sin ningún contratiempo (días cotidianos). En la jornada uno los mayores valores desplazan la media del valor central (mediana) hacia arriba, esto se denomina como sesgado a izquierda. En la jornada dos se observa una distribución homogénea de los datos, pues la media se aproxima a la mediana. 70 Figura 18. Diagrama de cajas del conteo de UFC en el medio agar chocolate para cada jornada. AGAR CHOCOLATE 600 500 UFC 400 300 317 6 P1 200 201 42 P5 100 0 J1 J2 J3 JORNADA En la figura 18 los valores de la media son similares para las tres jornadas y contrario que en agar sangre, en la jornada uno la media se desplaza hacia los valores más bajos, es decir que es sesgado a derecha. Los valores extremos se presentan en días cotidianos. Igualmente que en agar sangre la media de la jornada dos es similar al valor de su mediana. 71 Figura 19. Diagrama de cajas del conteo de UFC en el medio agar sangre para cada punto. AGAR SANGRE 600 545 25 J3 500 487 25 J3 1428 J1 UFC 400 300 287 J3 20 223 J1 200 201 1 209 J3 22 22 J3 100 0 INVIMA S.G. P.A. Merced Cund. PUNTO DE MUESTREO En la figura 19 se observa comportamiento similar para P.A., Merced y Cund. en los valores de su media, así como entre INVIMA y S.G. Los valores atípicos para cada punto se presentan en generalmente en la jornada tres. P.A. es el punto que registra los menores valores. 72 Figura 20. Diagrama de cajas del conteo de UFC en el medio agar chocolate para cada punto. AGAR CHOCOLATE 600 500 UFC 400 300 204 J2 200 2 100 0 INVIMA S.G. P.A. Merced Cund. PUNTO DE MUESTREO En este medio se presenta sólo un valor atípico en P.A. que no se aleja significativamente del resto de valores como se observa en la figura 20, pues el punto con los valores más bajos. INVIMA y Merced están sesgados a derecha, es decir que la mayoría de los datos son valores bajos, por lo tanto la media es desplazada hacia abajo. No es tan clara la similitud entre P.A., Merced y Cund., pues los valores de sus medias no son tan similares como en agar chocolate, pero INVIMA y S.G. se mantiene similar. 73 4.3.2 Estadísticos descriptivos. Tabla 13. Estadísticos descriptivos del conteo de UFC. Estadísticos Medio Media Mediana Desv. Estándar Varianza Mínimo Máximo Coef. Variación (%) Agar Sangre 88,25 74 84,95 7216,52 1 545 96,26 Agar Chocolate 78,99 61 57,87 3348,94 7 317 73,26 En agar sangre el valor de la media y de mediana es mayor que en agar chocolate, pero así mismo presenta mayor dispersión en los datos, observado en el coeficiente de variación de la tabla 13. El valor máximo en agar sangre se presentó en La Merced el 12 de julio en la jornada tres y en agar chocolate se da en la jornada dos del INVIMA el 9 de julio, dos días cotidianos sin contratiempos. El valor mínimo para agar sangre se dio por la expansión de una colonia sobre las otras lo cual dificultó el recuento de la totalidad, por lo tanto como sólo esta era visible, se reportó el recuento como 1. Tabla 14. Estadísticos descriptivos del conteo de UFC en cada jornada. Punto Estadísticos Sangre Chocolate Media Mediana Desv. estándar Varianza Mínimo Máximo Coef. Variación (%) J1 77,51 68 77,84 6059,53 1 428 100,45 J2 72,22 60 56,57 3199,72 2 201 78,33 J3 115,64 89 108,12 11689,31 1 545 93,50 J1 78,89 58 53,62 2874,96 10 204 67,97 J2 69,24 61 57,24 3276,14 7 317 82,67 J3 89,07 75 62,14 3860,86 13 248 69,77 74 En la tabla 14 se observa que en el medio agar sangre se presenta mayor dispersión en los datos en las jornadas uno y tres contrario a lo que sucede en el medio agar chocolate. En todas las jornadas para los dos medios, el valor de la mediana es menor que la media, esto muestra el efecto que tienen sobre ella los valores altos. Los mayores valores en la concentración de microorganismos corresponden a las jornadas con mayor dispersión. Tabla 15. Estadísticos descriptivos del conteo de UFC en cada punto. Estadísticos Punto Media Mediana INVIMA 99,59 87 69,78 S.G. 114,96 89 P.A. 59,52 Merced S a n g r e C h o c o l a t e Mínimo Máximo Coef. Variación (%) 4869,71 17 287 70,07 90,89 8261,88 9 428 79,06 51 43,23 1868,95 1 148 72,63 82,41 67 105,64 11160,64 6 545 128,19 Cund. 84,65 65,5 96,61 9332,80 2 487 114,13 INVIMA 110,11 78 75,50 5700,87 13 317 68,57 S.G 87,85 76 56,30 3169,13 19 226 64,09 P.A. 65,37 56 46,83 2193,17 14 204 71,64 Merced 55,11 40 40,30 1624,49 13 157 73,13 Cund. 76,42 69 51,65 2667,37 7 201 67,59 Desv. Varianza Estándar Para la tabla 15 se observa que en agar sangre la menor dispersión de los datos se presenta en el INVIMA y en P.A. La Merced, presenta el máximo valor que es un valor atípico y así mismo es el punto con mayor dispersión. 75 El valor más bajo de la mediana se da en P.A. y el mayor en S.G. Para agar chocolate el coeficiente de variación es bajo y similar entre puntos, se presenta menor dispersión en S.G. El menor valor de la mediana se da en Merced y el mayor en INVIMA. Tabla 16. Estadísticos descriptivos del conteo de UFC en el medio agar sangre Punto INVIMA S.G. P.A. Merced Cund. Media Mediana Desv. estándar Varianza Mínimo Máximo Coef. Variac. (%) J1 91 87 62,50 3906,75 20 223 68,68 J2 101,56 85 60,62 3674,78 23 201 59,69 J3 106,22 88 90,05 8108,19 17 287 84,78 J1 134,11 74 138,12 19076,61 17 428 102,99 J2 93,11 89 56,01 3136,61 9 154 60,15 J3 117,67 110 60,66 3680,00 29 191 51,55 J1 60,22 43 43,54 1895,94 1 124 72,30 J2 51,33 58 39,72 1578,00 6 112 77,38 J3 67,00 51 49,61 2461,25 1 148 74,04 J1 65,11 68 38,26 1463,61 14 124 58,76 J2 44,00 24 54,53 2973,25 6 166 123,93 J3 138,11 76 162,32 26348,36 14 545 117,53 J1 37,11 27 28,82 830,36 8 90 77,66 J2 71,11 60 58,21 3388,61 2 183 81,86 J3 153,38 95 141,32 19970,55 60 487 92,14 En la tabla 16 se observa que para agar sangre los máximos se presentan en la jornada tres de cada punto y así mismo es la jornada con los mayores valores para la mediana. El mayor valor para la mediana de UFC se da en S.G. en la jornada tres y además es el de menor dispersión de los datos. 76 P.A. es el punto con menores valores de la mediana, sin grandes variaciones entre sus jornadas. Tabla 17. Estadísticos descriptivos del conteo de UFC en el medio agar chocolate. Coef. varia Desv. estándar Varianza 112 57,21 3273,00 42 175 50,78 78 88,25 7788,25 30 317 86,52 J3 115,67 68 85,74 7350,50 13 248 74,12 J1 96,78 83 61,96 3839,19 35 181 64,02 J2 70,44 65 38,44 1477,78 23 135 54,57 J3 96,33 116 66,87 4471,25 19 226 69,42 J1 64,89 47 58,16 3383,11 14 204 89,63 J2 44,33 37 29,58 875,00 15 110 66,73 J3 86,89 82 43,02 1850,61 30 141 49,51 J1 64,22 50 38,19 1458,69 22 128 59,47 Merced J2 50,56 31 35,05 1228,28 16 99 69,32 J3 50,56 28 49,52 2452,53 13 157 97,94 J1 55,89 56 34,02 1157,11 10 111 60,87 J2 78,89 78 65,15 4245,11 7 201 82,58 J3 96,75 90 48,27 2330,21 29 169 49,89 Punto Media J1 112,67 INVIMA J2 S.G. P.A. Cund. 102 Mediana Mínimo Máximo (%) Al comparar la información de la tabla 16 con la tabla 17 se observa que en este medio se presenta menores valores de UFC. También se presenta menor dispersión de los datos. EL punto con menores valores en la mediana es P.A. al igual que en agar sangre y el de mayores valores es S.G. 77 4.3.3 Concentración de microorganismos. La determinación del rango de concentración de UFC se realizó con el concepto de cuartiles, ya que los resultados del estudio son específicos para cada punto y jornada de muestreo, además presentan una alta dispersión. Teniendo el primer cuartil como límite inferior, el segundo cuartil como valor medio y el tercer cuartil como el límite superior, excluyendo así los valores atípicos muy bajos y muy altos que se presentaron. Tabla 18. Concentración de UFC Punto INVIMA S.G. P.A. Merced Cund. Cuartil 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 J1 37 87 123 41 74 226 29 43 106 25 68 97 16 27 64 UFC / 0,5m3 de aire SANGRE CHOCOLATE J2 J3 J1 J2 58 36 54 49 85 88 112 78 152 164 172 123 39 64 41 36 89 110 83 65 149 180 172 105 14 29 28 20 58 51 47 37 88 112 86 60 10 45 36 20 24 76 50 31 69 173 104 91 25 83 29 16 60 95 56 78 112 181 84 124 J3 48 68 199 33 116 132 44 82 133 20 28 76 58 90 145 En la tabla 18 el rango de concentración con mayor amplitud en el medio agar sangre se presenta en S.G. que va de 41 a 226 UFC, en donde la concentración presenta valores alrededor de 74 UFC. La concentración más baja se da para la jornada tres de Cund. en donde los valores están alrededor de 27 UFC entre 16 y 64 UFC. 78 Para el medio agar chocolate la concentración con mayor variación se presenta en el INVIMA en la jornada tres, con valor medio de 68 UFC teniendo un mínimo alrededor de 48 UFC y un máximo 199 UFC. La menor variación en la concentración se presenta en el parque P.A. con un valor medio de 37 UFC y un rango entre 20 y 60 UFC. Los menores valores de concentración se dan en agar chocolate y el rango es considerablemente amplio para los dos medios. 4.4 ANÁLISIS INFERENCIAL DE UFC Análisis de correlación entre las variables numéricas, para evaluar la relación entre los factores meteorológicos y PM10 con el número de UFC, se realizó una Regresión de Poisson discriminada por el medio (sangre o chocolate) y así observar el efecto que tiene los siguientes factores sobre el número de UFC. Los valores horarios de PM10 y meteorología (precipitación, temperatura, velocidad y dirección del viento) fueron obtenidos de la estación meteorológica Merck, para los días de muestreo (25 de mayo al 17 de julio de 2005). Estas correlaciones se realizaron con el programa SAS 8.0, entre las siguientes variables (ver anexo J. Plantilla de datos para SAS): Precipitación, Temperatura, Velocidad del viento y PM10 El sector, la jornada y el día, siendo: - El sector los puntos de muestreo clasificados en residencial (S.G. y P.A.) o industrial (INVIMA, Merced y Cund.); - La jornada (J1: mañana, J2: medio día o J3: tarde noche); - El día (entre semana o fin de semana) Figura 21. Factores que influyen en la propagación de microorganismos Factores Meteorológico Jornada Sector Día 79 Otros Se realizaron correlaciones de Pearson para establecer si hay asociación entre las variables de estudio y luego determinar las relaciones con regresiones de Poisson. Tabla 19. Correlaciones de Pearson para el medio agar Sangre Conteo Conteo PM10 Precipitación Temperatura PM10 Precip. Velocidad del viento Temp. Correlación de Pearson 1 ,164 -,010 -,236(**) -,096 Sig. (bilateral) . ,059 ,904 ,006 ,271 N 134 134 134 134 134 Correlación de Pearson ,164 1 ,024 -,488(**) -,210(*) Sig. (bilateral) ,059 . ,784 ,000 ,015 N 134 134 134 134 134 Correlación de Pearson -,010 ,024 1 -,123 -,015 Sig. (bilateral) ,904 ,784 . ,158 ,859 N 134 134 134 134 134 -,236(**) -,488(**) -,123 1 ,285(**) ,006 ,000 ,158 . ,001 Correlación de Pearson Sig. (bilateral) N 134 134 134 134 134 -,096 -,210(*) -,015 ,285(**) 1 Sig. (bilateral) ,271 ,015 ,859 ,001 . N 134 134 134 134 134 Velocidad Correlación de Pearson del viento ** La correlación es significativa al nivel 0,01 (bilateral). * La correlación es significante al nivel 0,05 (bilateral). En la tabla 19, se evidencia que al usar sangre como medio, existe una correlación significativa entre: Número de UFC y la temperatura inversamente proporcionales, (a mayor temperatura menor es la cantidad de UFC). PM10 y temperatura inversamente proporcionales (a mayor temperatura menor PM10. PM10 y velocidad del viento inversamente proporcionales (a mayor velocidad del viento menor PM10). Temperatura y velocidad del viento directamente proporcionales (a mayor temperatura mayor velocidad del viento). 80 Tabla 20. Correlaciones de Pearson para el medio agar chocolate Conteo Conteo Correlación de Pearson Sig. (bilateral) N PM10 Velocidad del viento Temp. 1 ,260(**) -,014 -,126 -,192(*) . ,002 ,872 ,146 ,026 134 134 134 134 134 ,260(**) 1 ,024 -,050 -,475(**) ,002 . ,784 ,570 ,000 N 134 134 134 134 134 -,014 ,024 1 -,029 -,021 ,872 ,784 . ,736 ,810 Correlación de Pearson Sig. (bilateral) N Temperatura Precip. Sig. (bilateral) Correlación de Pearson Precipitación PM10 134 134 134 134 134 -,126 -,050 -,029 1 ,054 Sig. (bilateral) ,146 ,570 ,736 . ,537 N 134 134 134 134 134 -,192(*) -,475(**) -,021 ,054 1 Correlación de Pearson Velocidad Correlación de Pearson del viento Sig. (bilateral) ,026 ,000 ,810 ,537 . N 134 134 134 134 134 ** La correlación es significativa al nivel 0,01 (bilateral). * La correlación es significante al nivel 0,05 (bilateral). En la tabla 20, se evidencia que al usar chocolate como medio, existe una correlación significativa entre: Número de UFC y PM10 directamente proporcionales (a mayor PM10 mayor es la cantidad de UFC). Número de UFC y velocidad del viento inversamente proporcionales (a mayor velocidad del viento menor es la cantidad de UFC). PM10 y velocidad del viento inversamente proporcionales (a mayor velocidad del viento menor PM10). 81 4.4.1 Análisis para factores meteorológicos y PM10 Figura 22. Regresión de Poisson del conteo de UFC vs. Factores meteorológicos-PM10, para el medio agar sangre. Cont eo = PM10 Pr eci pi t aci on Temper at ur a Vel oci dad Response Di st r i but i on: Quasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Li nk Funct i on: Log Log ( Cont eo ) = 5. 9336 + 0. 0066 Vel oci dad Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 4 674. 2858 168. 5714 129 7854. 4254 60. 8870 133 8528. 7112 Se observa si hay sobredispersión, para determinar el método con el que se realiza la regresión de Poisson Type I I I ( W al d) Test s Sour ce DF Chi Sq Pr > Chi Sq PM10 1 0. 4468 0. 5039 Pr eci pi t aci on 1 0. 1683 0. 6817 Temper at ur a 1 4. 6465 0. 0311 Vel oci dad 1 0. 1065 0. 7442 Var i abl e I nt er cept PM10 Pr eci pi t aci on Temper at ur a Vel oci dad 0. 1004 Temper at ur a Summar y of Fi t 88. 2537 Devi ance 7854. 425 Pear son Chi Sq 9374. 250 8. 5246 Devi ance / DF 60. 8870 Pear son Chi Sq / DF 72. 6686 Mean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce Model Er r or C Tot al Model Equat i on 0. 0012 PM10 0. 0500 Pr eci pi t aci on - DF 1 1 1 1 1 Par amet er Est i mat es Est i mat e St d Er r or 0. 8009 5. 9336 0. 0019 0. 0012 0. 1218 - 0. 0500 0. 0466 - 0. 1004 0. 0203 - 0. 0066 Pr > Chi Sq Chi Sq <. 0001 54. 8926 0. 5039 0. 4468 0. 6817 0. 1683 0. 0311 4. 6465 0. 7442 0. 1065 95%C. I . ( W al d) f or Par amet er s Est i mat e Lower Var i abl e Upper 5. 9336 I nt er cept 4. 3639 7. 5033 0. 0012 PM10 - 0. 0024 0. 0049 Pr eci pi t aci on - 0. 0500 - 0. 2887 0. 1888 Temper at ur a - 0. 1004 - 0. 1917 - 0. 0091 Vel oci dad - 0. 0066 - 0. 0464 0. 0332 R _ C o n t e 60 80 100 120 P_Cont eo 82 “p” valor: Significancia no debe ser mayor a 5% A partir de la figura 22, se observa que las variables: PM10, precipitación y velocidad del viento no tienen efecto significativo sobre el número de UFC. La variable que tiene un efecto importante sobre el número de UFC es la temperatura. Por esta razón, se aplicará una regresión Poisson para observar el efecto de temperatura sobre el número de UFC. Figura 23. Regresión Poisson del conteo de UFC Vs. Temperatura, para el medio agar Sangre. Cont eo = Tem per at ur a Response Di st r i but i on: Poi sson Li nk Funct i on: Log Log ( Cont eo M odel Equat i on = 6. 2690 - ) 0. 1154 Tem per at ur a 500 C o n t e o 400 300 200 100 12 14 16 18 20 Tem per at ur a M ean of Response SCALE Sour ce M odel Er r or C Tot al DF Sour ce Tem per at ur a 1 132 133 Sum m ar y of Fi t 88. 2537 Devi ance 7915. 574 Pear son Chi Sq 9521. 282 1. 0000 Devi ance / DF 59. 9665 Pear son Chi Sq / DF 72. 1309 Scal ed Dev 7915. 574 Scal ed Chi Sq 9521. 282 Anal ysi s of Devi ance Devi ance Devi ance / DF Scal ed Dev Pr > Scal ed Dev 613. 1371 613. 1371 613. 1371 <. 0001 7915. 5742 59. 9665 7915. 5742 8528. 7112 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 599. 8288 <. 0001 83 Var i abl e I nt er cept Tem per at ur a DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq 6. 2690 0. 0726 7463. 5483 - 0. 1154 0. 0047 599. 8288 Pr > Chi Sq <. 0001 <. 0001 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 6. 2690 6. 1268 6. 4113 Tem per at ur a - 0. 1154 - 0. 1247 - 0. 1062 95%C. I . ( LR) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 6. 2690 6. 1268 6. 4112 Tem per at ur a - 0. 1154 - 0. 1247 - 0. 1062 Parámetro estimado de la relación R _ C o n t e 60 80 100 120 P_Cont eo_1 Como se confirma en la figura 23, el efecto de la temperatura es significativo sobre el número de UFC, al usar el medio sangre. Este efecto es de 0,8909 (exponencial del parámetro estimado para la variable temperatura e-0,1154); es decir que por un grado centígrado más en la temperatura se espera 0.8909 UFC; entonces, si se aumenta en 10 ºC la temperatura se tendría aproximadamente (0.8909^10) o 0.3150 UFC, es decir una reducción al 31.50%. La temperatura es un factor protector sobre la aparición de UFC, constituyéndose en un factor de control de propagación de microorganismos. Por otro lado, con base en la estimación del intervalo de confianza para la variable temperatura, se puede observar que su efecto sobre el número de UFC está entre 0,8827 y 0,8992 con una confiabilidad del 95%. Temperatura: Temperatura: 15ºC 100 UFC 10 ºC más en temperatura 84 25ºC 31 UFC Figura 24. Regresión de Poisson del conteo de UFC vs. Factores meteorológicos-PM10, para el medio agar chocolate. Cont eo = PM 10 Pr eci pi t aci on Tem per at ur a Vel oci dad Response Di st r i but i on: Quasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Li nk Funct i on: Log Log ( Cont eo - ) = 4. 3821 + 0. 0342 Vel oci dad - 0. 0132 Tem per at ur a Sum m ar y of Fi t 78. 9925 Devi ance 4725. 484 Pear son Chi Sq 5202. 623 6. 3506 Devi ance / DF 36. 6317 Pear son Chi Sq / DF 40. 3304 M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al M odel Equat i on 0. 0030 PM 10 0. 0253 Pr eci pi t aci on Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 4 494. 7589 123. 6897 129 4725. 4836 36. 6317 133 5220. 2425 Type I I I ( W al d) Test s Sour ce DF Chi Sq Pr > Chi Sq PM 10 1 4. 4219 0. 0355 Pr eci pi t aci on 1 0. 0710 0. 7900 Tem per at ur a 1 1. 2375 0. 2660 Vel oci dad 1 0. 7277 0. 3936 Var i abl e I nt er cept PM 10 Pr eci pi t aci on Tem per at ur a Vel oci dad DF 1 1 1 1 1 Par am et er Est i m at es St d Er r or Est i m at e 4. 3821 0. 3117 0. 0030 0. 0014 - 0. 0253 0. 0951 - 0. 0132 0. 0118 - 0. 0342 0. 0401 Chi Sq Pr > Chi Sq 197. 6493 <. 0001 4. 4219 0. 0355 0. 0710 0. 7900 1. 2375 0. 2660 0. 7277 0. 3936 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 3821 3. 7712 4. 9930 PM 10 0. 0030 0. 0002 0. 0058 Pr eci pi t aci on - 0. 0253 - 0. 2117 0. 1610 Tem per at ur a - 0. 0132 - 0. 0363 0. 0100 Vel oci dad - 0. 0342 - 0. 1129 0. 0444 R _ C o n t e 20 80 P_Cont eo Como se observa en la figura 24, a través del “p” valor y con un nivel de significancia del 5%, se observa que los efectos de temperatura, precipitación y velocidad del viento son no significativos sobre el número de UFC. 85 Figura 25. Regresión de Poisson del conteo de UFC Vs. PM10, para el medio agar chocolate Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo ) = PM 10 Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel = Equat i on 3. 9624 + 0. 0038 PM 10 300 C o n t e o 200 100 50 100 150 200 250 PM 10 M ean of Response SCALE ( Pear son) 78. 9925 6. 3736 Sum m ar y of Fi t Devi ance 4867. 314 Devi ance / DF 36. 8736 Pear son Chi Sq 5362. 126 Pear son Chi Sq / DF 40. 6222 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 352. 9289 352. 9289 132 4867. 3136 36. 8736 133 5220. 2425 Sour ce M odel Er r or C Tot al Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 9. 3610 0. 0022 Sour ce PM 10 Var i abl e I nt er cept PM 10 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Chi Sq St d Er r or Est i m at e 682. 4181 0. 1517 3. 9624 9. 3610 0. 0012 0. 0038 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Upper Lower Est i m at e Var i abl e 4. 2597 3. 6651 3. 9624 I nt er cept 0. 0063 0. 0014 0. 0038 PM 10 R _ C o n t e 80 100 120 140 P_Cont eo_3 86 Pr > Chi Sq <. 0001 0. 0022 Como se observa en la figura 25, el efecto de PM10 sobre el número de UFC, es significativo haciendo uso del medio agar chocolate. Este efecto es de 1,0038, lo cual indica que por 1µg/m3 más en PM10 se tienen 1.0038 UFC, o por ejemplo, en un aumento de 10µg/m3 en PM10 se aumenta el número de UFC en 1,003810 = 1,0380UFC. PM10 es un factor de riesgo en el aumento de UFC, el valor máximo y mínimo de UFC ante la presencia de PM10 es de 1,00140098 y 1,00631989, respectivamente. 4.4.2 Análisis para día y sector Figura 26. Regresión de Poisson del conteo de UFC Vs. día y sector, para el medio agar sangre. Cont eo = Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo ) Sour ce Di a Sect or Var i abl e I nt er cept Di a Sect or M odel Equat i on 4. 2253 + 0. 4028 Di a + 0. 0214 Sect or Sum m ar y of Fi t 88. 2537 Devi ance 8075. 283 Pear son Chi Sq 10642. 73 9. 0134 Devi ance / DF 61. 6434 Pear son Chi Sq / DF 81. 2422 M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al = Di a Sect or Quasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 2 453. 4282 226. 7141 131 8075. 2830 61. 6434 133 8528. 7112 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 5. 3832 0. 0203 1 0. 0160 0. 8993 DF 1 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq Pr > Chi Sq 4. 2253 0. 1733 594. 3129 <. 0001 0. 4028 0. 1736 5. 3832 0. 0203 0. 0214 0. 1693 0. 0160 0. 8993 En la figura 26, se evidencia que si el sector es residencial o industrial no afecta el número de UFC. Por otra parte, el día tiene un efecto significativo sobre el número de UFC. Por tanto, se correrá una regresión Poisson con la variable día. 87 Figura 27. Regresión de Poisson del conteo de UFC Vs. día, para el medio agar sangre. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo ) M odel = = Di a Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log Equat i on 4. 2382 + 0. 4027 Di a 500 C o n t e o 400 300 200 100 0. 0 0. 5 1. 0 Di a M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al 88. 2537 8. 9816 Sum m ar y of Fi t Devi ance 8076. 586 Devi ance / DF 61. 1863 Pear son Chi Sq 10648. 22 Pear son Chi Sq / DF 80. 6683 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 452. 1254 452. 1254 132 8076. 5859 61. 1863 133 8528. 7112 Sour ce Di a Var i abl e I nt er cept Di a Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 5. 4185 0. 0199 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq 4. 2382 0. 1393 925. 6371 0. 4027 0. 1730 5. 4185 Pr > Chi Sq <. 0001 0. 0199 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 2382 3. 9652 4. 5112 Di a 0. 4027 0. 0636 0. 7417 Como se observa en la figura 27, el efecto del día, sea este entre semana o fin de semana, es importante sobre el número de UFC; en particular se tiene un número mayor de UFC para los días entre semana que para los días de fin de semana, esto puede tener como origen factores asociados con actividad laboral y flujo vehicular. Este efecto es de 1,5021; es decir, se tienen 50 (base 100) UFC más en un día entre semana que en un día del fin de semana, es decir que si el valor de UFC para el fin de semana es 100, entre semana es 150 o si es 30 entre semana es 45 UFC. 88 El día es un factor de riesgo respecto al número de UFC, el intervalo que contiene el efecto comprende 1,0791 y 2,0909. Estos valores describen el límite inferior y superior de este efecto. El límite superior indica que un día entre semana puede llegar a tener el doble de efecto que un día en el fin de semana. Figura 28. Regresión de Poisson del conteo de UFC Vs. día y sector, para el medio agar chocolate. Cont eo = Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo ) M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Di a Sect or Var i abl e I nt er cept Di a Sect or = Di a Sect or Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on 4. 0817 + 0. 4236 Di a 78. 9925 6. 4526 + Sum m ar y of Fi t Devi ance 4767. 338 Devi ance / DF 36. 3919 0. 0530 Sect or Pear son Chi Sq 5454. 261 Pear son Chi Sq / DF 41. 6356 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 2 452. 9044 226. 4522 131 4767. 3381 36. 3919 133 5220. 2425 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 10. 3361 0. 0013 1 0. 1702 0. 6799 DF 1 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq 4. 0817 0. 1325 949. 6851 0. 4236 0. 1318 10. 3361 0. 0530 0. 1285 0. 1702 Pr > Chi Sq <. 0001 0. 0013 0. 6799 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 0817 3. 8221 4. 3413 Di a 0. 4236 0. 1654 0. 6819 Sect or 0. 0530 - 0. 1989 0. 3050 Con base en el “p” valor mostrado en la figura 28, se evidencia que si el sector es residencial o industrial no afecta el número de UFC cuando se usa el medio: Chocolate. Por otra parte, el día tiene un efecto significativo sobre el número de UFC. Por tanto, se correrá una regresión Poisson con la variable día. 89 Figura 29. Regresión de Poisson del conteo de UFC Vs. día, para el medio agar chocolate. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Di a Var i abl e I nt er cept Di a = Di a Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel ) = 78. 9925 6. 4487 Equat i on 4. 1139 + 0. 4234 Di a Sum m ar y of Fi t Devi ance 4774. 450 Devi ance / DF 36. 1701 Pear son Chi Sq 5489. 316 Pear son Chi Sq / DF 41. 5857 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 445. 7922 445. 7922 132 4774. 4503 36. 1701 133 5220. 2425 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 10. 3349 0. 0013 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq 4. 1139 0. 1064 1493. 9728 0. 4234 0. 1317 10. 3349 Pr > Chi Sq <. 0001 0. 0013 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 1139 3. 9053 4. 3225 Di a 0. 4234 0. 1653 0. 6815 Como se observa en la figura 29, el efecto del día es importante en el número de UFC; en particular se tiene un número mayor de UFC para los días entre semana que para los días de fin de semana. Este efecto es de 1,5271; es decir, se tienen 52 (base 100) UFC más en un día entre semana que en un día del fin de semana. El día es un factor de riesgo respecto al número de UFC, el intervalo que contiene el efecto comprende 1,1798 y 1,9768. Estos valores describen el límite inferior y superior de este efecto. El límite superior indica que un día entre semana puede llegar a tener aproximadamente el doble de efecto que un día en el fin de semana cuando se usa el medio agar chocolate. 90 4.4.3 Análisis por Jornadas ¿Mañana o medio día? Figura 30. Regresión de Poisson del conteo de UFC Vs. Jornada (J1–J2), para el medio agar sangre. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Jor nada Var i abl e I nt er cept Jor nada ) = Jor nada Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on = 4. 2276 - 0. 0880 Jor nada Sum m ar y of Fi t 65. 0889 Devi ance 1922. 889 Pear son Chi Sq 1926. 140 6. 6928 Devi ance / DF 44. 7183 Pear son Chi Sq / DF 44. 7940 Anal ysi s of Devi ance Devi ance Devi ance / DF DF 5. 5083 5. 5083 1 44. 7183 43 1922. 8887 44 1928. 3970 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 0. 1236 0. 7252 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq Pr > Chi Sq 4. 2276 0. 1905 492. 3724 <. 0001 - 0. 0880 0. 2505 0. 1236 0. 7252 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Upper Lower Est i m at e Var i abl e 4. 6011 3. 8542 4. 2276 I nt er cept 0. 4028 - 0. 5789 - 0. 0880 Jor nada Con base en la observación de la figura 30, del “p” valor asociado a la variable jornada, se tiene evidencia estadística con un nivel de significancia del 5%, que no existe diferencia entre el efecto mañana o el medio día, sobre el número de UFC. 91 Figura 31. Regresión de Poisson del número de UFC Vs. Jornada (J1–J2), para el medio agar chocolate. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Jor nada Var i abl e I nt er cept Jor nada ) = Jor nada Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on = 4. 2376 + 74. 0667 6. 4713 0. 1304 Jor nada Sum m ar y of Fi t Devi ance 3256. 110 Devi ance / DF 37. 0012 Pear son Chi Sq 3685. 261 Pear son Chi Sq / DF 41. 8780 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 28. 2762 28. 2762 88 3256. 1096 37. 0012 89 3284. 3858 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 0. 6738 0. 4117 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq 4. 2376 0. 1159 1336. 1669 0. 1304 0. 1589 0. 6738 Pr > Chi Sq <. 0001 0. 4117 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 2376 4. 0104 4. 4649 Jor nada 0. 1304 - 0. 1810 0. 4418 Con base en la observación de la figura 31 del “p” valor asociado a la variable jornada, se tiene evidencia estadística con un nivel de significancia del 5%, que no existe diferencia entre el efecto mañana o el medio día, sobre el número de UFC al utilizar el medio agar chocolate. 92 ¿Medio día o tarde noche? Figura 32. Regresión de Poisson del número de UFC Vs. Jornada (J2–J3), para el medio agar sangre. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Jor nada Var i abl e I nt er cept Jor nada ) = Jor nada Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on = 4. 7505 - 0. 4707 Jor nada Sum m ar y of Fi t 93. 6854 Devi ance 5404. 697 Pear son Chi Sq 6296. 096 8. 5070 Devi ance / DF 62. 1229 Pear son Chi Sq / DF 72. 3689 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 450. 8670 450. 8670 87 5404. 6965 62. 1229 88 5855. 5635 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 6. 0717 0. 0137 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Pr > Chi Sq Chi Sq St d Er r or Est i m at e <. 0001 1586. 5911 0. 1193 4. 7505 0. 0137 6. 0717 0. 1910 - 0. 4707 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 7505 4. 5167 4. 9842 Jor nada - 0. 4707 - 0. 8451 - 0. 0963 Como se observa en la figura 32, el efecto de la jornada (medio día y tarde noche) es significativo. Este efecto es de 0,6246. Por lo tanto, si hay 100 UFC en la tarde noche, al medio día habrán 62 UFC. El intervalo de confianza indica que la razón de “odss” entre la tarde noche y el medio día respecto a el número de UFC está entre 0,4295 y 0,9082, por lo tanto la tarde noche es un factor protector para el número de UFC. 93 Figura 33. Regresión de Poisson del número de UFC Vs. Jornada (J2–J3), para el medio agar chocolate. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Jor nada Var i abl e I nt er cept Jor nada ) = Jor nada Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on = 4. 2376 + 0. 1304 Jor nada Sum m ar y of Fi t 74. 0667 Devi ance 3256. 110 Pear son Chi Sq 3685. 261 6. 4713 Devi ance / DF 37. 0012 Pear son Chi Sq / DF 41. 8780 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 28. 2762 28. 2762 88 3256. 1096 37. 0012 89 3284. 3858 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 0. 6738 0. 4117 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq Pr > Chi Sq 4. 2376 0. 1159 1336. 1669 <. 0001 0. 1304 0. 1589 0. 6738 0. 4117 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 2376 4. 0104 4. 4649 Jor nada 0. 1304 - 0. 1810 0. 4418 Con base en la observación de la figura 33, del “p” valor asociado a la variable jornada, se tiene evidencia estadística, que no existe diferencia entre el efecto del medio día y tarde noche, sobre el número de UFC al utilizar el medio agar chocolate. 94 ¿Mañana o tarde noche? Figura 34. Regresión de Poisson del número de UFC Vs. Jornada (J1– J3), para el medio agar sangre. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Jor nada Var i abl e I nt er cept Jor nada ) = Jor nada Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on = 4. 7505 - 0. 4000 Jor nada Sum m ar y of Fi t 96. 3596 Devi ance 5943. 820 Pear son Chi Sq 7786. 478 9. 4604 Devi ance / DF 68. 3198 Pear son Chi Sq / DF 89. 4997 Anal ysi s of Devi ance DF Devi ance Devi ance / DF 1 337. 3031 337. 3031 87 5943. 8197 68. 3198 88 6281. 1227 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 3. 7000 0. 0544 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq Pr > Chi Sq 4. 7505 0. 1326 1282. 9075 <. 0001 - 0. 4000 0. 2080 3. 7000 0. 0544 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Var i abl e Est i m at e Lower Upper I nt er cept 4. 7505 4. 4905 5. 0104 Jor nada - 0. 4000 - 0. 8076 0. 0076 Como se observa en la figura 34, el efecto de la jornada (mañana y tarde noche) es significativo. Este efecto es de 0,6703. Por lo tanto, si hay 100 UFC en la tarde noche, en la mañana habrán 67 UFC. El intervalo de confianza indica que la razón de “odss” entre la mañana y la tarde noche respecto a el número de UFC está entre 0,4460 y 1,0076, por lo tanto con un nivel de significancia del 5% la razón de “odds” al más será 1, lo cual indica que el efecto en la mañana o en la tarde noche en ese punto será idéntica. 95 Figura 35. Regresión de Poisson del número de UFC Vs. Jornada (J1 –J3), para el medio agar chocolate. Cont eo Response Di st r i but i on: Li nk Funct i on: Log ( Cont eo M ean of Response SCALE ( Pear son) Sour ce M odel Er r or C Tot al Sour ce Jor nada Var i abl e I nt er cept Jor nada ) = Jor nada Q uasi - Li kel i hood ( Poi sson Var i ance) Log M odel Equat i on = 4. 4894 - 0. 1214 Jor nada Sum m ar y of Fi t 83. 9213 Devi ance 3371. 527 Pear son Chi Sq 3467. 431 6. 3131 Devi ance / DF 38. 7532 Pear son Chi Sq / DF 39. 8555 Anal ysi s of Devi ance Devi ance Devi ance / DF DF 27. 4731 27. 4731 1 38. 7532 87 3371. 5270 88 3399. 0000 Type I I I ( W al d) Test s DF Chi Sq Pr > Chi Sq 1 0. 6884 0. 4067 DF 1 1 Par am et er Est i m at es Est i m at e St d Er r or Chi Sq Pr > Chi Sq 4. 4894 0. 1008 1981. 8181 <. 0001 - 0. 1214 0. 1463 0. 6884 0. 4067 95%C. I . ( W al d) f or Par am et er s Upper Lower Est i m at e Var i abl e 4. 6871 4. 2917 4. 4894 I nt er cept 0. 1653 - 0. 4081 - 0. 1214 Jor nada Con base en la observación de la figura 36, del p valor asociado a la variable jornada, se tiene evidencia estadística, que no existe diferencia entre el efecto de la mañana y la tarde noche, sobre el número de UFC al utilizar el medio agar chocolate. En todas las regresiones de Poisson se evidenció problemas de sobreestimación, por ello se utilizó en las regresiones la estadística Chi-Cuadrado de Pearson y el procedimiento de Quasi-verosimilitud, para evaluar la significancia del modelo. 96 5 CONCLUSIONES El muestreo preliminar permitió ajustar la metodología, proponiendo las condiciones de toma de muestra en cuanto al sector, puntos, días, horarios y medios, para la zona de estudio, siguiendo los protocolos de fase experimental. Se establecieron los protocolos para la fase experimental “MUESTREO PARA MICROORGANISMOS EN EL AIRE” y “AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS EN EL AIRE” , como documento soporte para un correcto procedimiento de muestreo. Al analizar los resultados de las muestras tomadas, de forma gráfica y con estadísticos descriptivos, cada punto, cada jornada y en dos medios de cultivo se observó que: La mayor concentración de UFC se presenta en el INVIMA y Salazar Gómez para los dos medios de cultivo. Los puntos de menor concentración son Puente Aranda y La Merced para agar sangre y agar chocolate respectivamente. En la jornada tres se reportaron los mayores valores en la concentración y datos atípicos. El medio agar sangre muestra mayores valores de concentración, sin embargo la información es más dispersa que la del medio agar chocolate. Existen diferencias significativas en el número de UFC para una misma muestra entre los medios de cultivo utilizados, siendo su selección un criterio sujeto al tipo de estudio. 97 El análisis en laboratorio de las muestras tomadas determinó que: Durante el período de muestreo se identificaron 50 especies de bacterias, de las cuales, dos corresponden a especies mencionadas en la literatura como especies patógenas de vías respiratorias, Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa, aunque su frecuencia es baja, la población es susceptible a la exposición, es decir, que existe riesgo potencial de generación de infecciones respiratorias. Dentro de las especies identificadas algunas no son considerados como patógenos de tracto respiratorio, pero factores de riesgo presentes en la población, la hacen vulnerable y estos microorganismos actuarían como oportunistas. La familia Bacillaceae con las especies Bacillus subtillis y Bacillus cereus, es la de mayor frecuencia sin presentar gran variación entre puntos y jornadas; su presencia se facilita por ser esporulados, resistentes en el medio ambiente, siendo así transportados por el aire. Con el análisis estadístico mediante regresiones de Poisson, se infieren las siguientes relaciones, para las muestras tomadas, entre las variables de estudio con el número de UFC: No existe un efecto significativo de la precipitación y la velocidad del viento sobre el número de UFC, para las muestras tomadas. La temperatura ejerce un efecto protector (relación inversa) sobre el número de UFC en el aire, aunque en la ciudad no hayan variaciones drásticas, esta variable tiene un efecto significativo reflejado en que en la noche el número de UFC es mayor que en la mañana o al medio día, para el medio agar sangre. Se determinó que los días entre semana tienen un número mayor de UFC que los días de fin de semana, esto puede darse por factores asociados con la actividad laboral y el flujo vehicular característico para cada día. La relación de UFC con PM10 se confirmó en el medio agar chocolate, con una asociación directa como factor de riesgo para el transporte de microorganismos en el aire. 98 6. RECOMENDACIONES Verificar la existencia de los microorganismos patógenos Pseudomonas aeruginosa y Staphylococus aureus, identificados en esta investigación. Validar las relaciones establecidas entre la concentración de microorganismos y las variables PM10, temperatura, velocidad del viento y precipitación . Hacer un diseño experimental especifico para determinar la relación entre número de UFC y el tipo de sector (industrial y residencial). Evaluar la influencia de otros factores que puedan incidir sobre la concentración de microorganismos presentes en el aire. Plantear el desarrollo de un programa de monitoreo que permita establecer la relación de la concentración de microorganismos con PM2.5 y la asociación de microorganismos con un diámetro de partícula. Verificar si el orden de exposición de los medios en la toma de muestra, es un evento independiente respecto a la concentración de microorganismos. Evaluar el período de monitoreo para cada medio, con el fin de establecer relaciones entre el número de UFC y el tiempo de muestreo. Realizar monitoreo microbiológico en lugares con menores niveles de contaminación para observar las relaciones encontradas en ambientes con condiciones antagónicas. 99 BIBLIOGRAFÍA ARISTIZABAL, Gustavo. Contaminación del Aire y Enfermedad Respiratoria en la Población Infantil de Puente Aranda. Universidad del Bosque. Secretaría de Salud del Distrito. Bogotá: 1997. ASCOFAME. Guías de Práctica Clínica Basadas en la Evidencia. Infección Respiratoria Aguda. Proyecto ISS-ASCOFAME. Asociación Colombiana de Facultades de Medicina. BARRIOS CASAS, Sara; PEÑA CORTÉS, Fernando; OSSES BUSTINGORRY, Sonia. Efectos de la contaminación atmosférica por material particulado en las enfermedades respiratorias agudas en menores de 5 años. En :Ciencia y Enfermería. Chile. Vol. 2, no. 10 (2004); p. 21-29. BELL, E. C.; HALE, T. L.; SHAW, M. J. AND BLACK, R. S. Evaluating of Novel Bioaerosol Generation Device for the Use for the Studies Requiring Airborne Microorganisms Agglomerated. BLANCO, Luis Camilo. Caracterización Microbiológica del Material Particulado como Factor de Riesgo Sobre la Salud en la Localidad de Puente Aranda. Universidad De La Salle. Bogotá: 2003. CADENA HERNANDEZ, Leticia; TÉLLEZ ROJO, Martha; SANÍN AGUIRRE, Luz Helena; LACASAÑA NAVARRO, Marina; CAMPOS, Armando y ROMIEU, Isabelle. Relación entre consultas a urgencias por enfermedad respiratoria y contaminación atmosférica en Ciudad Juárez, Chihuahua. En : Salud Pública de México. México. Vol.42, no. 4 (julio-agosto. 2000); p.288, 292-296. CANAVOS, George C. Probabilidad y 100 Estadística, aplicación y métodos. CARMONA, Osvaldo; GOMEZ, María Josefina; MONTES, Tibaire; MARCANO, Carmen y MARIÑO, Franklin. Microbiología Médica de Divo. Ed. Mc Graw Hill. 5Ed. 1997. CENTRO PANAMERICANO DE INGENIERIA SANITARIA Y CIENCIAS DEL AMBIENTE. Conceptos básicos sobre la meteorología de la contaminación del aire. CEPIS. FORBES, Betty A. Diagnóstico Microbiológico. Argentina: Editorial Médica Panamericana S.A. 2004 GRANT, W.D., LANG, P.E. Microbiología ambiental. Editorial Acribia S.A. Zaragoza, España 1989 Indicadores de Riesgo Epidemiológicos. Universidad Católica de Chile. Disponible en http://escuela.med.puc.cl/Recursos/recepidem/IndEpi5.htm. JONES, M. Alan; HARRISON, Roy M. The Effects of Meteorological Factors on Atmospheric Bioaerosol Concentration. Science Direct, ELSEVIER. Noviembre 15 de 2003 Mac Faddin, Jean F. Pruebas de Identificación para Microorganismos de Importancia Clínica. Ed. PANAMERICANA MADIGAN, MARTINKO y PARKER. Biología de los Microorganismos. 8 ed. Southern Illinois University, 1999. Mapa Cultural de Puente Aranda. Alcaldía Local de Puente Aranda 2005 M. Atlas, Ronald, BARTHA, Richard. Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental. Pearson Educación S.A.4 Ed. Madrid 2002. p. 329 MERCK COMPANY. Manual 02 del MAS-100 101 MOLINERO, Luis. Odds Ratio, Riesgo Relativo. Disponible en http://www.sehlelha.org/oddsratio.htm OPS-OMS. Calidad de Aire en Interiores. Contaminantes y Efectos en la Salud. OPS- OMS. Guías para la Calidad del Aire. CEPIS. Lima 2004. PEREA, Evelio J. Enfermedades Infecciosas: Patogénesis y Diagnóstico. Salvat Editores S.A. Plan Distrital Contra Enfermedades Respiratorias. En: El Tiempo, Febrero 05 de 2005. Recorriendo Puente Aranda 2004. Diagnóstico Físico y Socioeconómico de las Localidades de Bogotá D.C. Alcaldía Mayor de Bogotá. Secretaría de Hacienda, Departamento Administrativo de Planeación. ROMERO PLACERES, M.; MAS BERMEJO, P.; LACASAÑA NAVARRO, M.; TÉLLEZ, M.; AGUILAR VALDÉS, J.; Air pollution, bronchial asthma, and acute respirator and infections in children less years of age, Habana City. Salud pública Méx, 46, (3), 222-233. (2004). SOLARTE, Iván. Contaminación atmosférica y enfermedad respiratoria en los niños menores de 14 años en Santa Fe de Bogotá. Universidad Javeriana.1999 WALPOLE, Ronald E. Probabilidad y Estadística para Ingenieros. 6 ed. Prentice Hall. 1999. 102 ANEXOS 103 ANEXO A. Ubicación localidad de Puente Aranda en la ciudad de Bogotá 104 ANEXO B. Protocolos fase experimental 105 PROTOCOLO DE MUESTREO PARA MICROORGANISMOS EN EL AIRE a. MEDIOS DE CULTIVO. 1. Seleccione los medios de cultivo de acuerdo a los microorganismos de interés 2. Prepare los medios de cultivo* 3. Compruebe esterilidad con el resultado de la prueba de control de calidad* 4. Mantenga refrigeradas de 2 a 6°C las cajas de petri preparadas hasta el día de la toma de muestras . *Ver protocolo de Aislamiento e Identificación de microorganismos en el aire b. Guardapolvo PARA LA TOMA DE MUESTRAS 1. Esterilice el cabezal y el guardapolvo en autoclave (15 psi, 121°C, 15 minutos) antes de cada día de muestreo. 2. Asegúrese que el equipo esté cargado. 3. Reserve cajas de medio preparado para contingencias en campo. 4. Conserve las muestras en un recipiente hermético durante el transporte de las cajas de medio preparado. 5. Acompañe las cajas de medio durante su muestra y transporte con una caja de medio “estéril”, para control de calidad de contaminación. 6. Utilice antibacterial y tapabocas para la manipulación de los medios. 7. Tome la muestra (según protocolo anexo de operación del equipo) 8. Registre información de campo (ver anexo C formato de campo) 106 C a b e z a l c. MUESTREO 1. Verifique las condiciones de orden y acceso del punto a muestrear. 2. Coloque el equipo en el punto de muestreo en una zona alta y libre de obstáculos. 3. Encienda y programe el equipo según protocolo de operación. 4. Confirme la esterilidad de los medios de cultivo a muestrear (Observe si hay crecimiento de colonias en los medios). 5. Retire el cabezal del equipo. 6. Coloque la caja de petri cerrada sobre el soporte de la caja que posee el equipo y retírele la tapa. 7. Coloque el cabezal inmediatamente y retire el guardapolvo en el mismo instante en el que inicie la toma de muestra. 8. Asegúrese de que no se interrumpa la medición por falta de carga del equipo o por mala posición de la caja de petri*. 9. Coloque el guardapolvo en el instante en que finaliza la toma de muestra. 10. Retire el cabezal del equipo y tape la caja de petri. 11. Asegure la tapa de la caja a su base y codifique la muestra (An Jn Pn X)** . 12. Programe el equipo en la opción “start” para su apagado automático. 13. Codifique las muestras y presérvelas 14. Limpie el cabezal y el guardapolvo con un desinfectante (amonio cuaternario o glutaraldehído al 2%), se debe rotar para los días de muestreo y evitar fijación de microorganismos al equipo. 15. Coloque el cabezal y el guardapolvo al equipo. 16. Conserve las muestras en un recipiente hermético y llévelas a incubar en el menor tiempo posible. 17. Recargue el equipo según la frecuencia de muestreo. *Se pueden graduar los laterales del soporte de la caja para evitar desplazamientos. ** A: día, J: hora, P: punto de muestreo, X: medio utilizado Elaborado por: MILENA FULA H. IVONE M. REY R. Fecha: Junio de 2005 107 PROTOCOLO DE AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS EN EL AIRE a. PREPARACIÓN DE MEDIOS 1. Establezca el volumen de medio de cultivo a preparar (por cada caja de petri se sirven 25ml aprox)*. 2. Calcule la cantidad de agar según especificaciones del fabricante y volumen de sangre para medios a base de sangre (5 al 7% del volumen del medio de cultivo). 3. Disuelva completamente el agar en agua destilada y llévelo al autoclave (15 psi, 121°C, 15 minutos). Para preparación de agar sangre, agregue la sangre al agar luego de esterilización. 4. Situe las cajas de petri estériles alrededor del mechero, sirva el medio de cultivo estéril y deje enfriar. 5. Lleve a incubar los controles de esterilidad del laboratorio y de la preparación del medio de cultivo a 37ºC por 24 horas. 6. Etiquete y empaque los medios preparados en bolsas herméticas y llévelos a refrigerar de 2 a 6°C hasta su uso. *Ver anexo “OBSERVACIONES FASE EXPERIMENTAL” b. INCUBACIÓN 1. Confirme la esterilidad de los medios de cultivo preparados, por medio de la observación de los controles de esterilidad del laboratorio y los de la preparación del medio luego de 24 a 48 horas de ser incubados. 2. Lleve los medios de cultivo al laboratorio luego de la toma de muestras, manteniendo todas las condiciones de esterilidad para evitar contaminación de las muestras e inviabilidad de los microorganismos. 3. Incube las muestras por un período de 24 a 48 horas a 37ºC, posicionando las cajas de petri de forma invertida. c. ESTUDIO MACROSCÓPICO Y MICROSCOPICO 1. Manipule las muestras alrededor del mechero para evitar contaminación, manteniendo condiciones de asepsia utilizadas en la preparación de los medios de cultivo (Ver anexo “OBSERVACIONES FASE EXPERIMENTAL”) 2. Cuente todas las colonias visibles (no deben haber transcurrido menos de 24 horas desde el inicio de la incubación) y registre en el formato de laboratorio (anexo E) 108 3. Describa las colonias según tamaño, color, forma, textura y visibilidad de hemólisis, marque en la base de la caja de petri las colonias de interés enumerándolas y registrar en el formato, anexo E. 4. Observe que las colonias a aislar sean de diferentes características comparando los medios Agar Sangre y Agar Chocolate, seleccione las colonias y realice este registro. d. AISLAMIENTO 1. Marque la parte inferior de una caja con medio estéril dividiéndola en cuadrantes, anote la codificación de la muestra y el número de la colonia que va a ser sembrada. 2. Con un asa estéril tome la superficie de la colonia, deslice el asa haciendo una estría sobre la superficie de un medio estéril. 3. Lleve a incubar las cajas de petri a 37 ºC durante un periodo de 24 a 48 horas (en el caso de que halla muy bajo crecimiento). 4. Realice la tinción de Gram de las colonias aisladas según técnicas microbiológicas estipuladas. e. PRUEBAS BIOQUÍMICAS 1. De acuerdo al resultado de la tinción de Gram, determine el número de pruebas que deban realizarse (ver gráfico de Pruebas bioquímicas). 2. Prepare las pruebas según las indicaciones del fabricante, el volumen total se determina por el número de tubos a preparar (por cada tubo de ensayo se sirven 3 a 4ml aproximadamente). 3. Diluya completamente el agar en agua destilada, sirva las pruebas en los tubos de ensayo con una pipeta de 10 ml, tapar, acomódelos en una canastilla y esterilice en autoclave. 4. Al salir del autoclave, coloque los tubos de Fenilalanina y SIM en posición vertical y los demás de forma inclinada hasta su solidificación. 5. Refrigere los tubos hasta su utilización. 6. Siembre con un asa los microorganismos aislados de no más de 24 horas de incubación en los caldos y en los medios a base de azúcar. 7. Con un asa se siembra por estría en la superficie inclinada y en la columna vertical de las pruebas bioquímicas: TSI, SIM, Citrato de Simmons, LIA, Urea, RM-VP (Rojo de Metil y Voges Proskauer) y Fenilalanina. 8. Incube los tubos de las pruebas bioquímicas por un período de 24 horas a 37ºC, 9. Mediante las tablas de identificación de los microorganismos consulte los resultados de las pruebas y haga su registro en el formato de trabajo en laboratorio. Elaborado por: MILENA FULA H. Fecha: Junio de 2005 IVONE M. REY R. 109 OBSERVACIONES FASE EXPERIMENTAL - Preparar un volumen de medio de cultivo adicional de 50%, para los controles en la preparación de medios y esterilidad del laboratorio el 2%, en las cajas para el acompañamiento de los medios en la toma de muestra y la incubación según la frecuencia diaria y semanal de muestreo. - En la determinación de Haemophillus influenzae se usa el medio Agar Chocolate, en la incubación debe establecerse una atmósfera de CO2, esta condición puede crearse introduciendo las cajas de petri en un envase hermético dentro del cual se enciende una vela y se cierra, enseguida se incuba a 37ºC por un periodo de 24 a 48 horas. - Considerar en la preparación de medios: desinfección de los mesones (limpieza y flameado), uso de mecheros, evitar flujos de aire de fuentes de ventilación cercanas y uso de elementos de protección personal: bata, guantes, tapabocas y gorro. - Para evitar confusiones en la manipulación de colinas aisladas, resembrar en los medios colonias procedentes de la misma muestra. 110 MAS 100: COLECTOR MICROBIOLÓGICO DE GÉRMENES AÉREOS. PROTOCOLO DE OPERACIÓN LABORATORIO FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA DESCRIPCIÓN GENERAL El MAS-100 es un instrumento basado en el principio del muestreador de aire a través de una placa perforada. La corriente de aire resultante y las partículas que contiene se dirigen hacia la superficie de agar de la caja de Petri. Después de la toma se procede al cultivo de la muestra y al recuento de colonias, cuyo resultado se presenta en forma de número total de gérmenes (NTG). El MAS-100 utiliza un aspirador de alta potencia y controla el volumen de forma continuada. Este sistema mide la corriente de aire entrante y regula el aire aspirado hasta obtener un caudal de aire constante de 100 litros por minuto. Si la corriente de aire no fuese constante por motivos externos, la cantidad de aire se regularía automáticamente. FUNCIONAMIENTO DEL EQUIPO A. Conexión del MAS-100 Pulsar la tecla Yes: aparecerá la versión del software, la capacidad restante de la batería en litros “XXXXX liters left to aspirate” y el volumen de acumulación utilizado. B. Ajustar las caja de Petri 1. Ajustar los laterales de sujeción de la caja de Petri 2. Retire la tapa del orificio y coloque una caja de Petri sobre el soporte de cajas de petri. 3. Ajustar los 3 laterales azules con la llave fija No.3 de forma que la caja de Petri quede firmemente sujeta. Comprobar que este bien asegurada posicionando el cabezal de acumulación en posición horizontal. C. Realización de toma de muestras 1. Coloque el MAS-100 en una superficie estable. 2. Abra la tapa del orificio (con el guardapolvo acopiado) girándola hacia la derecha. 3. Coloque la caja de Petri, cerrada y sobre la sujeción de la caja. 4. Retire la tapa de la caja de Petri. 5. Cierre la tapa del orificio del MAS-100. 6. El cabezal de acumulación puede posicionarse en cualquier ángulo de la dirección de la corriente de aire, desde horizontal a vertical. 7. Programe el MAS-100 según instrucciones. 8. Retire el guardapolvo y comience la toma de muestras aéreas en el menú “Start” pulsando Yes. 9. Al finalizar la toma, se iluminará la luz roja y se visualizará el volumen acumulado. 111 10. Abra el cabezal de acumulación, extraiga la caja de Petri y colóquele su correspondiente tapa. 11. La caja de Petri está lista para su cultivo. 12. Siga las instrucciones del fabricante del medio de cultivo. 13.Después de la medición aparece “passed test completed” indicando 0 interrupciones. D. Apagar el MAS-100 Al indicar a final el último volumen recogido, apretar “yes” o “no” para activar el cierre automático en 5 minutos. E. Interrupción de una medición Si durante la toma de muestras pulsa “no”, aparece el mensaje “failed repeat test”, repita la prueba. Si se evaluara en el PC, debe estar determinada sin interrupción. F. Caudal de aire insuficiente Si el sensor no alcanza los 100 litros por minuto de la corriente de aire, aparece “air flor blocked” y se iluminará la luz roja. Retire la caja de Petri e inicie un nuevo análisis. Pulse “yes” o “no” para anular el mensaje de error. PARTES DEL EQUIPO EN UN MALETIN PORTATIL 1. 1 Sistema completo MASS-100: Cabezal, guardapolvo, paquete de baterías. 2. 1 adaptador de red. 3. 1 llave fija de 3 mm 4. 1 Tabla de corrección estadística según Feller. 5. 1 Tabla diagrama del programa de software ACCESORIOS Unidad de calibración DA-100 Cable PC/paquete del software Trípode 100-325 cm Adaptador rápido Bolsa para llevar colgada, liviana azul Adaptador de tubo flexible PIEZAS DE REPUESTO Tapa perforada Cubierta contra polvo Alimentador de corriente Paquete de batería NiMH Maletín resistente Beige. BIBLIOGRAFÍA: Manual 02 del MASS-100, Merck Company Elaborado por: Carolina Forero González Fecha: Marzo 15 de 2005 112 MAS 100: COLECTOR MICROBIOLÓGICO DE GÉRMENES AÉREOS. 6 PROTOCOLO DE MANTENIMIENTO Y CALIBRACIÓN LABORATORIO FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA CUIDADOS Y MANTENIMIENTO El MAS-100 debe calibrarse periódicamente. El cabezal, junto con el guardapolvo, pueden tratarse en un autoclave (15 min. A 121ºC). Antes de introducir el MAS-100 en un área aséptica, se recomienda limpiarlo con un desinfectante apropiado. Entre la toma de muestras aéreas sucesivas puede limpiarse la tapa con un desinfectante. Debe verificarse que los orificios de la tapa no estén taponados. Intervalo de temperaturas para conservación y uso 0 a 40ºC. Humedad relativa máxima: 80% para temperaturas hasta 31ºC, decreciendo linealmente hasta 50% de humedad relativa a 40ºC. CALIBRACIÓN Se calibra en fabrica a 100 litros por minuto. Sólo se permite el cambio de piezas mecánicas a personas autorizadas. Si se aprieta “yes” o “no” simultáneamente durante 3 segundos, se entra a “Calibration mode”. El valor k3 aparece en la pantalla y el ventilador empieza a funcionar. Para recalibración – ajustar el valor k3 y k5-se requiere la unidad de calibración DA-100 para el caso en el que no se requiera recalibración, apretar no al aparecer “k3 modify” y “k5 modify”, para entrar al recordatorio de calibración. Después de ajustar el recordatorio entre 1 y 12 meses regresará al modo de medición pulsando “yes”. BIBLIOGRAFÍA: Manual 02 del MAS-100, Merck Company Elaborado por: Carolina Forero González Fecha: Marzo 15 de 2005 113 ANEXO C. Formato de campo FECHA: Pto CÓDIGO JORNADA: HORA h (m) T (°C) OBSERVACIONES 1 2 3 4 5 114 TABLA SÍNTESIS INFORMACIÓN REGISTRADA EN CAMPO Día Jornada J1 A1 J2 J3 J1 A2 J2 J3 A3 J1 J2 J3 Pto H P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 6:36 7:16 7:57 9:09 11:10 NT NT NT NT NT NT NT NT 17:22 18:18 6:24 7:04 7:43 9:12 8:30 12:14 12:54 13:29 14:39 15:20 17:01 17:43 18:17 19:36 18:55 6:23 7:08 8:01 9:35 8:50 16:11 15:20 14:34 12:28 13:42 20:46 19:57 19:13 18:35 T°C 15 17 19 22 26 NT NT NT NT NT NT NT NT 18 NT 13 15 18 23 21 22 21 22 24 24 22 18 17 17 16 13 14 18 20 19 27 25 26 23 26 16 17 18 19 Nb Vi Em P FV FP B-M M-A NT NT NT NT NT NT NT NT A A A A A A A M M M M B A M A M M A A A M A M B M M M A A A A B B B M NT NT NT NT NT NT NT NT M A B A M B A M M B M M M B B B B A A B A B B B - S S S NT NT NT NT NT NT NT NT S NT S S S S S S S S S S NT NT NT NT NT NT NT NT M-A A B B B B B - M M M-A M B NT NT NT NT NT NT NT NT M-A M M M B M B M M M M B M B M B B A M M M M A B A M M-A B B M M-A B B M A B NT NT NT NT NT NT NT NT B B A B M M B M B B A B B B A B B B B M B B B - 115 RS S NT NT NT NT NT NT NT NT A A M M M M M M A M M M B M - O NT NT NT NT NT NT NT NT S - An S S NT NT NT NT NT NT NT NT S S S S S S S S - J1 A4 J2 J3 J1 A5 J2 J3 J1 A6 J2 J3 A7 J1 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 17:50 6:20 7:04 7:45 9:11 8:29 14:51 14:04 13:21 12:48 12:08 20:09 19:21 18:41 18:07 17:26 6:32 7:29 8:13 8:53 9:36 11:36 12:28 13:18 13:53 14:35 19:57 19:12 18:29 17:55 17:12 6:41 7:20 7:55 9:15 8:34 11:33 12:06 13:02 14:22 13:41 19:15 18:35 18:01 17:19 16:39 7:19 7:56 18 14 14 13 19 18 22 21 21 22 20 14 15 16 17 18 14 14 15 16 15 15 13 16 19 23 17 13 16 17 17 13 14 16 18 18 23 23 21 23 25 16 16 18 21 23 16 17 A A A M A A A A A A A A A M M A A A A A A A A M B A B M M M A A M A M A M A M M A M M M B - M B B B A A B B B B B B B B B B B B A B B B M B B B B M B M A M B M M A B 116 S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S M B B B B B M M-A M M M B B - B A B M M M M M M M B B B M A M M B M-A M M A M M M M B B B M M A B M B M B M B B B B B B M B M M B M B A B A B M B B A A B B A B A B B B M B B B B M A M M M M M B B B B B B B M A B M M A B B - * S S S S - S S S S J2 J3 J1 A8 J2 J3 J1 A9 J2 J3 A10 J1 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 8:31 9:58 9:15 12:03 13:03 13:51 16:05 18 23 17 21 22 22 25 M M M A M - B B B A B M S S S - M B M M M A M B B A A B B B - - S S - P5 15:20 27 M B - - M M - - S P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 20:56 20:13 19:33 19:02 18:17 6:38 7:18 7:55 8:36 9:14 16:32 15:54 14:29 13:54 13:10 20:18 19:31 18:50 18:19 17:37 6:38 7:20 7:57 8:50 9:25 16:43 15:52 14:29 13:53 13:15 19:21 18:42 18:09 17:36 NT 6:53 7:40 8:22 9:42 14 14 15 16 14 14 15 17 19 19 21 21 24 22 22 17 16 18 19 18 14 16 16 18 21 17 19 23 24 18 NT NT NT NT NT 17 19 21 21 M M B M B B M A M M B B M A A B A M A A A A A A M B M A M B M M NT B M M B B A M M B B A A B B B B B B B B B B B B NT - S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S S NT S S S - B B B B B M M NT - A B B M B M B B M B M M M M B B M B A B M M M B M M B A B B B B A B NT M B M M M B B B B B A M A B A B B B B B B NT B B - B B M B B B NT M - S S S NT S - S S S S NT S S - 117 J2 J3 P5 P1 P2 P3 P4 P5 P1 P2 P3 P4 P5 9:01 12:08 13:18 14:00 15:30 14:40 17:03 20:00 19:06 18:34 17:56 20 21 21 20 22 24 18 16 16 17 17 A M M A B B B A M M B B B B B B B B B B Pto: punto de muestreo H: hora T: temperatura Nb: nubosidad Vi: viento Em: emisiones P: precipitación FV: flujo vehicular FP: flujo peatonal RS: residuos sólidos O: olores An: animales NT: muestra no tomada 118 S S S S S - - B B B B B B B B B B B B B M B B - M M M M S S S - - ANEXO D. Hongos identificados en las muestras Punto INVIMA S.G. P.A. Merced J1 Inci dencia Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Levaduras. Acremonium spp. Microsporum spp. Sepedonium spp. Fusarium spp. Trichophyton spp. 7 7 6 4 3 2 1 1 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Levaduras. Scedosporium spp. Acremonium spp. Trichophyton spp. Sepedonium spp. Botrytis spp. Rhizopus spp. Fusarium spp. Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichophyton spp. Trichoderma spp. Levaduras. Microsporum spp. Acremonium spp. Scedosporium spp. Rhizopus spp. Botrytis spp. Fusarium spp. Penicillium spp. Aspergillus spp. Microsporum spp. Trichoderma spp. Levaduras. Trichophyton spp. Scedosporium spp. Acremonium spp. Cladosporium spp. Botrytis spp. 8 8 6 4 3 3 2 1 1 1 1 1 7 7 6 5 4 3 2 2 1 1 1 7 7 7 3 3 2 2 1 1 1 J2 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Sepedonium spp. Levaduras. Acremonium spp. Trichophyton spp. Rhizopus spp. Inci dencia 7 7 6 6 3 2 2 1 1 J3 Inci dencia Aspergillus spp. Penicillium spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Levaduras. Trichophyton spp. Botrytis spp. Acremonium spp. Scedosporium spp. Rhizopus spp. Fusarium spp. Aureobasidium spp. Cladosporium spp. Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Levaduras. Scedosporium spp. Acremonium spp. Trichophyton spp. Sepedonium spp. Botrytis spp. Fusarium spp. Cladosporium spp. 6 5 4 4 3 2 2 1 1 1 1 1 1 7 7 6 3 3 3 2 2 1 1 1 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Levaduras. Acremonium spp. Trichophyton spp. Scedosporium spp. Botrytis spp. Fusarium spp. Aureobasidium spp. 7 7 7 5 3 2 1 1 1 1 1 6.1 Aspergillus spp. Penicillium spp. Microsporum spp. Trichoderma spp. Levaduras. Acremonium spp. Scedosporium spp. Trichophyton spp. Botrytis spp. 7 6 5 4 3 2 2 1 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Rhizopus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Scedosporium spp. Acremonium spp. Botrytis spp. 5 5 5 3 3 1 2 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Levaduras. Acremonium spp. Trichophyton spp. Sepedonium spp. Botrytis spp. Fusarium spp. 6 6 6 6 2 1 1 1 1 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Rhizopus spp. Levaduras. Acremonium spp. Microsporum spp. Trichophyton spp. Fusarium spp. 6 6 6 4 3 3 2 1 1 119 Cund. Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Levaduras. Microsporum spp. Trichophyton spp. Scedosporium spp. Acremonium spp. Rhizopus spp. Cladosporium spp. Aureobasidium spp. 6 6 3 3 2 2 2 1 1 1 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Levaduras. Microsporum spp. Acremonium spp. Trichophyton spp. Rhizopus spp. Sepedonium spp. Botrytis spp. Fusarium spp. 7 7 4 3 2 2 2 2 1 1 1 Penicillium spp. Aspergillus spp. Trichoderma spp. Microsporum spp. Levaduras. Rhizopus spp. Trichophyton spp. Acremonium spp. Botrytis spp. Fusarium spp. 5 5 4 3 2 2 2 2 1 1 Fuente: SUÁREZ, Ana M., Vargas, Lilian. Estudio microbiológico en bioaerosoles de una zona de alta actividad industrial y flujo vehicular en bogotá, y determinación de puntos críticos. Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2005. 120 ANEXO E. Formato de laboratorio Fecha de muestreo: ______________________________________________________ A__ J__ P__ Recuento A. Sangre:_______ A. Chocolate:_______ A. Mc Conkey:_______ Colonia Gram Características 121 ANEXO F. Lista microorganismos identificados 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Bacillus megaterium Bacillus subtillis Bacillus polymyxa Bacillus mycoides Bacillus macerans Bacillus lentus Staphylococcus xylosus Staphylococcus aureus sb anaerobius Staphylococcus pasteuri Micrococcus kristinae Micrococcus rosea Micrococcus lylae Corynebacterium matruchotii Corynebacterim minutissimum Corynebacterium kutscheri Citrobacter amalonaticus Klebsiella ozaenae Escherichia coli inactiva Aeromona hydrophila Moraxella lacunata Pseudomonas aeruginosa Flavobacterium odoratum Pantoea aglomerans Serratia odorífera Providencia alcalifaciens 122 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 Bacillus licheniformis Bacillus cereus Bacillus circulans Bacillus pumilus Bacillus coagulans Staphylococcus eyuorum Staphylococcus gallinarum Staphylococcus aureus sb aerobius Staphylococcus lentus Micrococcus luteus Micrococcus sedentarius Corynebacterium amycolatum Corynebacterium jeikeium Corynebacterium flavescens Corynebacterium glucoronolyticum Citrobacter diversus Klebsiella oxytoca Acinetobacter calcoaceticus Aeromona salmonicica Morganella morganii Serratia rubidaea Flavobacterium mudovorum Alcaligenes feacalis Fusobacterium mortiferum Pantoea gergoviae Anexo G. Cuadros de Frecuencia por jornadas INVIMA en las tres Jornadas todos los días Jornada 1en el Jornada 2 en el Jornada 3 en el INVIMA todos INVIMA todos INVIMA todos Microorganismo los días los días los días Recuento Recuento Recuento Bacillus megaterium 1 1 1 Bacillus licheniformis 1 3 3 Bacillus subtillis 8 7 8 Bacillus cereus 7 5 5 Bacillus polymyxa 5 2 2 Bacillus circulans 1 2 1 Bacillus mycoides 3 3 2 Bacillus pumilus 1 Staphylococcus eyuorum 1 Staphylococcus xylosus 5 5 3 Micrococcus kristinae 3 2 3 Micrococcus luteus 7 7 5 Micrococcus rosea 2 2 Micrococcus sedentarius 3 1 1 Bacillus macerans 3 3 3 Corynebacterium amycolatum 5 6 4 Corynebacterium matruchotii 4 4 2 Corynebacterium jeikeium 3 1 2 Corynebacterim minutissimum 1 Citrobacter amalonaticus 1 Aeromona salmonicica 1 Citrobacter diversus 1 Moraxella lacunata 2 1 Serratia rubidaea 1 Pantoea aglomerans 1 Alcaligenes feacalis 1 Serratia odorífera 1 Fusobacterium mortiferum 2 1 Providencia alcalifaciens 1 Pantoea gergoviae 1 Klebsiella oxytoca 1 Bacillus lentus 1 Corynebacterium glucoronolyticum 2 1 2 Staphylococcus aureus sb anaerobius 1 Staphylococcus pasteuri 2 2 Micrococcus lylae 2 1 4 Staphylococcus lentus 1 1 2 Total 75 67 59 123 Microorganismos INVIMA en la jornada uno todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Bacillus pumilus Staphylococcus eyuor Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Pantoea aglomerans Alcalygenes feacalis Fusobacterium mortif Pantoea gergoviae Klebsiella oxytoca Corynebacterium gluc Staphylococcus aureu Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 8 10 Frecuencia Microorganismos INVIMA en la jornada dos todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Corynebacterim minut Citrobacter amalonat Aeromona salmonicica Citrobacter diversus Moraxella lacunata Serratia rubidaea Serratia odorifera Fusobacterium mortif Bacillus lentus Corynebacterium gluc Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 Frecuencia 124 6 8 Microorganismos INVIMA en la jornada tres todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Moraxella lacunata Providencia alcalifa Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 Frecuencia 125 8 10 Parque Principal Barrio S.G en las tres Jornadas todos los días Jornada 1en el Jornada 2 en el Jornada 3 en el parque S.G. parque S.G. parque S.G. Microorganismo todos los días todos los días todos los días Recuento Recuento Recuento Bacillus licheniformis 3 4 3 Bacillus subtillis 8 8 8 Bacillus cereus 4 4 5 Bacillus polymyxa 4 4 2 Bacillus circulans 3 1 2 Bacillus mycoides 3 4 3 Bacillus pumilus 1 Staphylococcus eyuorum 1 Staphylococcus xylosus 5 5 6 Micrococcus kristinae 4 2 4 Micrococcus luteus 5 5 5 Micrococcus rosea 1 2 Micrococcus sedentarius 3 1 1 Bacillus macerans 2 2 2 Corynebacterium amycolatum 3 5 5 Corynebacterium matruchotii 3 3 4 Corynebacterium jeikeium 1 Corynebacterim minutissimum 2 3 1 Aeromona hydrophila 1 Citrobacter diversus 1 1 Moraxella lacunata 1 Serratia rubidaea 1 1 Klebsiella ozaenae 1 1 Serratia odorífera 1 Fusobacterium mortiferum 1 Pantoea gergoviae 1 Bacillus lentus 1 Corynebacterium flavescens 1 Corynebacterium kutscheri 1 Corynebacterium glucoronolyticum 2 2 1 Staphylococcus aureus sb aerobius 1 Staphylococcus pasteuri 2 2 Micrococcus lylae 2 3 1 Staphylococcus lentus 1 2 Total 62 64 67 126 Microorganismos Parque S.G. en jornada uno todos los días Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Bacillus pumilus Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterim minut Citrobacter diversus Corynebacterium gluc Staphylococcus aureu Staphylococcus paste Micrococcus lylae 0 2 4 6 8 10 Frecuencia Microorganismos Parque S.G.en la jornada dos todos los días Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterim minut Serratia rubidaea Klebsiella ozaenae Serratia odorifera Fusobacterium mortif Bacillus lentus Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 Frecuencia 127 8 10 Microorganismos Parque S.G.en la jornada tres todos los días Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus eyuor Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Corynebacterim minut Aeromona hydrophila Citrobacter diversus Moraxella lacunata Serratia rubidaea Klebsiella ozaenae Pantoea gergoviae Corynebacterium flav Corynebacterium kuts Corynebacterium gluc Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 Frecuencia 128 6 8 10 Parque Principal Barrio P.A. en las tres jornadas todos los días Microorganismo Bacillus megaterium Bacillus licheniformis Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylosus Staphylococcus gallinarum Micrococcus kristinae Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentarius Bacillus macerans Corynebacterium amycolatum Corynebacterium matruchotii Corynebacterium jeikeium Corynebacterim minutissimum Aeromona hydrophila Aeromona salmonicica Citrobacter diversus Flavobacterium odoratum Klebsiella ozaenae Pantoea aglomerans Acinetobacter calcoaceticus Fusobacterium mortiferum Pseudomonas aeruginosa Morganella morganii Bacillus coagulans Bacillus lentus Corynebacterium flavescens Corynebacterium glucoronolyticum Staphylococcus pasteuri Micrococcus lylae Staphylococcus lentus Total Jornada 1en el Jornada 2 en el Jornada 3 en el parque P.A. parque P.A. parque P.A. todos los días todos los días todos los días Recuento Recuento Recuento 1 2 2 4 5 1 8 8 8 3 4 6 3 3 5 2 1 4 2 3 2 5 4 6 1 3 1 4 7 5 4 1 2 3 2 2 3 2 3 3 4 4 4 4 4 4 2 1 1 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 2 3 2 1 3 1 1 68 65 72 129 Microorganismos Parque P.A.en la jornada uno todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Staphylococcus galli Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Corynebacterim minut Aeromona hydrophila Aeromona salmonicica Citrobacter diversus Klebsiella ozaenae Pantoea aglomerans Acinetobacter calcoa Fusobacterium mortif Pseudomonas aerugino Corynebacterium gluc Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 8 10 Frecuencia Microorganismos Parque P.A.en la jornada dos todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Corynebacterim minut Flavobacterium odora Pantoea aglomerans Fusobacterium mortif Morganella morganii Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 Frecuencia 130 8 10 Microorganismos Parque P.A.en la jornada tres todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Citrobacter diversus Fusobacterium mortif Bacillus coagulans Bacillus lentus Corynebacterium flav Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae 0 2 4 Frecuencia 131 6 8 10 Colegio La Merced en las tres Jornadas todos los días Jornada 1 en el Jornada 2 en el Jornada 3 en el Colegio la Colegio la Colegio La Merced todos Merced todos Merced todos Microorganismo los días los días los días Recuento Recuento Recuento Bacillus megaterium 1 Bacillus licheniformis 4 4 3 Bacillus subtillis 6 7 8 Bacillus cereus 4 4 5 Bacillus polymyxa 3 3 2 Bacillus circulans 3 Bacillus mycoides 3 2 4 Staphylococcus xylosus 6 5 5 Staphylococcus gallinarum 1 Micrococcus kristinae 3 2 4 Micrococcus luteus 6 5 7 Micrococcus rosea 1 1 1 Micrococcus sedentarius 4 1 2 Bacillus macerans 2 3 Corynebacterium amycolatum 7 3 6 Corynebacterium matruchotii 3 4 2 Corynebacterium jeikeium 1 3 Corynebacterim minutissimum 3 2 Aeromona hydrophila 2 1 Aeromona salmonicica 2 Moraxella lacunata 1 Serratia rubidaea 1 1 Escherichia coli inactiva 1 Pantoea aglomerans 1 1 Serratia odorífera 1 Fusobacterium mortiferum 1 1 Pseudomonas aeruginosa 1 Corynebacterium flavescens 1 Corynebacterium glucoronolyticum 2 1 2 Staphylococcus pasteuri 2 3 2 Micrococcus lylae 2 2 3 Staphylococcus lentus 1 1 1 Total 69 62 66 132 Microorganismos Colegio la Merced en la jornada uno todos los días Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Corynebacterim minut Aeromona hydrophila Aeromona salmonicica Moraxella lacunata Pantoea aglomerans Fusobacterium mortif Corynebacterium flav Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 8 Frecuencia Microorganismos Colegio la Merced en la jornada dos todos los días Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Aeromona hydrophila Serratia rubidaea Serratia odorifera Fusobacterium mortif Pseudomonas aerugino Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 Frecuencia 133 6 8 Microorganismos Colegio La Merced jornada tres todos los días Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Staphylococcus galli Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterim minut Serratia rubidaea Escherichia coli ina Pantoea aglomerans Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 Frecuencia 134 8 10 Parque Principal Barrio Cund. en las tres Jornadas todos los días Microorganismo Bacillus megaterium Bacillus licheniformis Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Bacillus pumilus Staphylococcus xylosus Micrococcus kristinae Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentarius Bacillus macerans Corynebacterium amycolatum Corynebacterium matruchotii Corynebacterium jeikeium Corynebacterim minutissimum Aeromona hydrophila Citrobacter amalonaticus Moraxella lacunata Serratia rubidaea Flavobacterium mudovorum Escherichia coli inactiva Pantoea aglomerans Acinetobacter calcoaceticus Fusobacterium mortiferum Pseudomonas aeruginosa Pantoea gergoviae Bacillus lentus Corynebacterium glucoronolyticum Staphylococcus pasteuri Micrococcus lylae Staphylococcus lentus Total Jornada 1 en el Jornada 2 en el Jornada 3 en el Parque Cund. Parque Cund. Parque Cund. todos los días todos los días todos los días Recuento Recuento Recuento 2 2 2 1 8 6 7 4 4 6 6 2 2 2 2 1 1 3 4 1 6 6 6 2 3 2 3 5 6 2 1 2 2 1 2 3 4 3 6 7 4 2 5 3 3 1 3 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 1 3 1 1 1 67 62 63 135 Microorganismos Parque cund. Av.19 en la jornada uno todos los días Parque Bacillus megaterium Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Bacillus pumilus Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Corynebacterim minut Aeromona hydrophila Citrobacter amalonat Flavobacterium mudov Escherichia coli ina Pantoea aglomerans Fusobacterium mortif Bacillus lentus Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 6 8 10 Frecuencia Microorganismos Parquecund. Av.19 en la jornada dos todos los días Parque Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Aeromona hydrophila Moraxella lacunata Serratia rubidaea Acinetobacter calcoa Pseudomonas aerugino Pantoea gergoviae Staphylococcus paste Staphylococcus lentu 0 2 4 Frecuencia 136 6 8 Microorganismos Parque 19 en la jornada tres todos los días ParqueAv. cund. Bacillus licheniform Bacillus subtillis Bacillus cereus Bacillus polymyxa Bacillus circulans Bacillus mycoides Staphylococcus xylos Micrococcus kristina Micrococcus luteus Micrococcus rosea Micrococcus sedentar Bacillus macerans Corynebacterium amyc Corynebacterium matr Corynebacterium jeik Aeromona hydrophila Pantoea aglomerans Fusobacterium mortif Corynebacterium gluc Staphylococcus paste Micrococcus lylae Staphylococcus lentu 0 2 4 Frecuencia 137 6 8 ANEXO H. Datos corregidos conteo Dia Medio A1 25 mayo A2 29 mayo A3 31 mayo A4 7 junio A5 9 junio A6 12 junio A7 9 julio A8 12 julio A9 14 julio A10 17 julio S Ch S Ch S Ch S Ch S Ch S Ch S Ch S Ch S Ch S Ch INVIMA J1 J2 J3 68 29 223 56 111 172 61 68 106 110 287 158 85 248 43 108 54 175 153 61 90 77 209 76 37 158 140 194 17 112 93 35 20 201 118 171 317 61 80 85 88 61 78 183 87 60 53 47 64 214 30 23 19 42 30 13 J1 250 101 428 169 84 51 70 83 163 181 289 174 17 39 33 35 74 97 49 42 S.G. J2 154 54 89 76 58 98 148 135 128 44 9 23 150 112 83 65 19 27 J3 148 118 181 28 110 122 191 226 39 38 89 59 178 116 94 141 29 19 J1 78 99 1 14 124 204 43 47 101 76 74 95 30 23 28 33 111 58 30 34 138 P.A. J2 6 17 79 23 97 110 58 37 20 61 11 34 112 58 63 15 16 44 J3 1 56 90 138 148 127 47 141 38 30 134 82 74 101 20 76 51 31 MERCED J1 J2 J3 50 104 134 45 124 13 76 50 20 28 70 166 102 114 99 27 107 103 163 128 94 15 67 30 183 29 63 39 19 6 40 42 16 25 68 8 50 56 19 40 14 34 545 43 31 111 87 12 70 94 87 157 30 24 14 22 26 13 J1 58 79 74 56 22 111 17 64 54 104 14 60 8 10 90 40 28 26 27 32 CUND. J2 J3 - 85 82 124 29 138 101 78 74 71 120 44 79 37 201 7 169 2 60 8 116 183 87 201 52 60 487 102 154 52 123 12 89 23 101 ANEXO I. Tabla de corrección estadística según “Feller” Fuente: MERCK COMPANY Manual 02 del MAS-100. 139 ANEXO J. Plantilla de datos para SAS D UFC í a 223 0 172 0 428 0 169 0 10 14 0 124 0 50 0 74 0 56 0 56 0 61 0 154 0 54 0 60 17 0 13 0 20 0 85 0 124 0 111 0 68 0 148 0 118 0 10 56 0 76 0 28 0 82 0 29 0 106 1 158 1 84 1 51 1 124 1 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento 3 dio (µm/m ) (mm) (°C) (m/s) 1 1 116 0 11,7 1,5 1 0 116 0 11,7 1,5 0 1 141 0 12,3 0,9 0 0 141 0 12,3 0,9 0 1 161 0 13,5 1,7 0 0 161 0 13,5 1,7 1 1 97 0 14,7 2,8 1 0 97 0 14,7 2,8 1 1 97 0 14,7 2,8 1 0 97 0 14,7 2,8 1 1 53 0 18,3 4,9 1 0 53 0 18,3 4,9 0 1 49 0 18,4 5,4 0 0 49 0 18,4 5,4 0 1 47 0 19,1 5,8 0 0 47 0 19,1 5,8 1 1 49 0 19,4 5,8 1 0 49 0 19,4 5,8 1 1 49 0 19,4 5,8 1 0 49 0 19,4 5,8 1 1 60 0 18,2 6,4 1 0 60 0 18,2 6,4 0 1 55 0 17,1 5,1 0 0 55 0 17,1 5,1 0 1 55 0 17,1 5,1 0 0 55 0 17,1 5,1 1 1 60 0 15,4 3,9 1 0 60 0 15,4 3,9 1 1 46 0 16 5,3 1 0 46 0 16 5,3 1 1 90 0 13,2 1,4 1 0 90 0 13,2 1,4 0 1 144 0 13,7 3,8 0 0 144 0 13,7 3,8 0 1 144 0 13,7 3,8 D UFC í a 204 1 70 1 114 1 22 1 111 1 110 1 85 1 89 1 76 1 79 1 23 1 166 1 99 1 138 1 78 1 287 1 248 1 181 1 28 1 90 1 138 1 102 1 27 1 101 1 74 1 43 1 175 1 70 1 83 1 43 1 47 1 107 1 128 1 17 1 64 1 J P 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 140 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento 3 dio (µm/m ) (mm) (°C) (m/s) 0 0 144 0 13,7 3,8 1 1 58 0 16 4,8 1 0 58 0 16 4,8 1 1 68 0 15 4,8 1 0 68 0 15 4,8 1 1 71 0 18,7 5,9 1 0 71 0 18,7 5,9 0 1 61 0 19 5,4 0 0 61 0 19 5,4 0 1 75 0 19,2 5,5 0 0 75 0 19,2 5,5 1 1 64 0 17,7 6 1 0 64 0 17,7 6 1 1 66 0 18 6,3 1 0 66 0 18 6,3 1 1 72 0 15,6 3,1 1 0 72 0 15,6 3,1 0 1 64 0 16,4 3,3 0 0 64 0 16,4 3,3 0 1 64 0 16,4 3,3 0 0 64 0 16,4 3,3 1 1 58 0 16,8 4,5 1 0 58 0 16,8 4,5 1 1 60 0 17,4 6,2 1 0 60 0 17,4 6,2 1 1 55 0 12,1 1,3 1 0 55 0 12,1 1,3 0 1 55 0 12,1 1,3 0 0 55 0 12,1 1,3 0 1 76 0 13,4 1,1 0 0 76 0 13,4 1,1 1 1 134 0 16,3 3,3 1 0 134 0 16,3 3,3 1 1 113 0 14,6 1,3 1 0 113 0 14,6 1,3 J P 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 D UFC í a 108 1 153 1 58 1 98 1 97 1 110 1 103 1 94 1 71 1 44 1 54 1 61 1 110 1 122 1 148 1 127 1 163 1 15 1 120 1 79 1 90 1 76 1 163 1 181 1 101 1 76 1 67 1 29 1 54 1 104 1 77 1 37 1 148 1 135 1 58 1 37 1 30 1 63 1 37 1 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento dio (µm/m3) (mm) (°C) (m/s) 1 1 127 0 16,3 5,8 1 0 127 0 16,3 5,8 0 1 160 0 16,4 5,6 0 0 160 0 16,4 5,6 0 1 160 0 16,4 5,6 0 0 160 0 16,4 5,6 1 1 107 0 16,2 5,5 1 0 107 0 16,2 5,5 1 1 107 0 16,2 5,5 1 0 107 0 16,2 5,5 1 1 156 0 14,4 1,6 1 0 156 0 14,4 1,6 0 1 153 0 14,8 2 0 0 153 0 14,8 2 0 1 147 0 15 2,2 0 0 147 0 15 2,2 1 1 147 0 15 2,2 1 0 147 0 15 2,2 1 1 148 0 15,2 2,1 1 0 148 0 15,2 2,1 1 1 191 0 13,8 1,3 1 0 191 0 13,8 1,3 0 1 256 0 13,8 2,3 0 0 256 0 13,8 2,3 0 1 268 0 14,5 1,6 0 0 268 0 14,5 1,6 1 1 268 0 14,5 1,6 1 0 268 0 14,5 1,6 1 1 208 0 14,7 1,7 1 0 208 0 14,7 1,7 1 1 89 0,2 13,8 5 1 0 89 0,2 13,8 5 0 1 95 0,4 12,7 3,7 0 0 95 0,4 12,7 3,7 0 1 70 0 15,4 1,7 0 0 70 0 15,4 1,7 1 1 70 0 15,4 1,7 1 0 70 0 15,4 1,7 1 1 97 0 17,6 2 D UFC í a 71 209 1 158 1 191 1 226 1 47 1 141 1 183 1 39 1 201 1 169 1 140 0 112 0 289 0 174 0 74 0 95 0 19 0 42 0 14 0 60 0 194 0 93 0 128 0 44 0 20 0 61 0 60 16 0 20 80 17 0 35 0 39 0 38 0 38 0 30 0 40 0 25 0 J P 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 141 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento dio (µm/m3) (mm) (°C) (m/s) 1 0 97 0 17,6 2 1 1 138 0 14,7 1,8 1 0 138 0 14,7 1,8 0 1 138 0 14,7 1,8 0 0 138 0 14,7 1,8 0 1 125 0 15,3 2,9 0 0 125 0 15,3 2,9 1 1 104 0 16,3 3,9 1 0 104 0 16,3 3,9 1 1 104 0 16,3 3,9 1 0 104 0 16,3 3,9 1 1 115 0 12,7 0,5 1 0 115 0 12,7 0,5 0 1 138 0 13,6 0,7 0 0 138 0 13,6 0,7 0 1 138 0 13,6 0,7 0 0 138 0 13,6 0,7 1 1 163 0,2 15,6 5,8 1 0 163 0,2 15,6 5,8 1 1 143 0 14,9 1,3 1 0 143 0 14,9 1,3 1 1 70 0 16,8 6,3 1 0 70 0 16,8 6,3 0 1 79 0 17,6 5,1 0 0 79 0 17,6 5,1 0 1 79 0 17,6 5,1 0 0 79 0 17,6 5,1 1 1 68 0 18,5 6,2 1 0 68 0 18,5 6,2 1 1 84 0 18,8 5 1 0 84 0 18,8 5 1 1 53 0 15,9 3,9 1 0 53 0 15,9 3,9 0 1 67 0 16,6 5,5 0 0 67 0 16,6 5,5 0 1 61 0 18 5,1 0 0 61 0 18 5,1 1 1 61 0 18 5,1 1 0 61 0 18 5,1 J P 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 D UFC í a 60 0 116 0 20 0 171 0 17 0 39 0 30 0 23 0 68 0 56 0 80 10 0 201 0 317 0 90 23 0 11 0 34 0 80 19 0 183 0 201 0 118 0 61 0 89 0 59 0 134 0 82 0 50 0 40 0 87 0 52 0 80 1 61 1 33 1 35 1 28 1 33 1 14 1 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento dio (µm/m3) (mm) (°C) (m/s) 1 1 67 0 19,3 4,9 1 0 67 0 19,3 4,9 1 1 145 0 13,8 1,2 1 0 145 0 13,8 1,2 0 1 145 0 13,8 1,2 0 0 145 0 13,8 1,2 0 1 101 0 15,4 1,2 0 0 101 0 15,4 1,2 1 1 150 0 16,5 4,7 1 0 150 0 16,5 4,7 1 1 150 0 15,4 4,7 1 0 150 0 15,4 4,7 1 1 69 0 17,5 4,2 1 0 69 0 17,5 4,2 0 1 71 0 17,8 64 0 0 71 0 17,8 6,4 0 1 109 0 17,6 7,5 0 0 109 0 17,6 7,5 1 1 79 0,2 17,6 7,4 1 0 79 0,2 17,6 7,4 1 1 79 0,2 17,6 7,4 1 0 79 0,2 17,6 7,4 1 1 69 0 13,3 4,9 1 0 69 0 13,3 4,9 0 1 69 0 13,3 4,9 0 0 69 0 13,3 4,9 0 1 76 0 14,1 4,9 0 0 76 0 14,1 4,9 1 1 87 0 14,4 6,2 1 0 87 0 14,4 6,2 1 1 87 0 14,4 6,2 1 0 87 0 14,4 6,2 1 1 79 0 12,3 3,8 1 0 79 0 12,3 3,8 0 1 98 0 13,1 3 0 0 98 0 13,1 3 0 1 98 0 13,1 3 0 0 98 0 13,1 3 1 1 88 0 15,2 1,8 D UFC í a 43 1 90 1 40 1 85 1 78 1 150 1 112 1 112 1 58 1 34 1 31 1 60 1 102 1 88 1 183 1 178 1 116 1 74 1 101 1 545 1 111 1 487 1 154 1 87 1 47 1 74 1 97 1 111 1 58 1 87 1 94 1 28 1 26 1 60 1 64 1 83 1 65 1 63 1 15 1 J P 3 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 1 1 142 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento dio (µm/m3) (mm) (°C) (m/s) 1 0 88 0 15,2 1,8 1 1 84 0 15,5 4 1 0 84 0 15,5 4 1 1 92 0 17 2,1 1 0 92 0 17 2,1 0 1 74 0 17,3 4,9 0 0 74 0 17,3 4,9 0 1 67 0 17,6 5,5 0 0 67 0 17,6 5,5 1 1 77 0 17,8 6,1 1 0 77 0 17,8 6,1 1 1 77 0 17,8 6,1 1 0 77 0 17,8 6,1 1 1 135 0 13,2 2,8 1 0 135 0 13,2 2,8 0 1 126 0 13,9 2,8 0 0 126 0 13,9 2,8 0 1 146 0 13,8 3 0 0 146 0 13,8 3 1 1 146 0 13,8 3 1 0 146 0 13,8 3 1 1 145 0 14,5 4,2 1 0 145 0 14,5 4,2 1 1 105 0 13,1 1,7 1 0 105 0 13,1 1,7 0 1 112 0 13,7 1,9 0 0 112 0 13,7 1,9 0 1 112 0 13,7 1,9 0 0 112 0 13,7 1,9 1 1 125 0 14,6 2,3 1 0 125 0 14,6 2,3 1 1 118 0 15,7 2,6 1 0 118 0 157 2,6 1 1 137 0,2 13,2 1,9 1 0 137 0,2 13,2 1,9 0 1 113 8 13 3 0 0 113 8 13 3 0 1 125 0 17,3 4 0 0 125 0 17,3 4 J P 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 D UFC í a 12 1 87 1 52 1 123 1 53 1 214 1 94 1 141 1 20 1 76 1 70 1 157 1 30 0 42 0 49 0 42 0 30 0 34 0 30 0 D UFC í a 27 0 32 0 23 0 30 0 19 0 27 0 16 0 44 0 24 0 26 0 12 0 23 0 19 0 13 0 29 0 19 0 51 0 31 0 14 0 13 0 89 0 101 0 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento dio (µm/m3) (mm) (°C) (m/s) 1 1 116 0,4 16,3 3 1 0 116 0,4 16,3 3 1 1 116 0,4 16,3 3 1 0 116 0,4 16,3 3 1 1 207 0 13,5 1,8 1 0 207 0 13,5 1,8 0 1 167 0 14,1 1,3 0 0 167 0 14,1 1,3 0 1 167 0 14,1 1,3 0 0 167 0 14,1 1,3 1 1 143 0 14,3 1,1 1 0 143 0 14,3 1,1 1 1 87 0 12,8 1,2 1 0 87 0 12,8 1,2 0 1 87 0 13,7 1,7 0 0 87 0 13,7 1,7 0 1 86 0 16,2 2,3 0 0 86 0 16,2 2,3 1 1 82 0 16,5 4,4 J P 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 1 1 1 1 1 1 1 22 0 1 1 0 82 0 16,5 4,4 UFC: conteo corregido Día (1:entre semana; 0:fin de semana) J: jornada P (1:punto industrial; 0:punto residencial) Medio (1:agar sangre; 0:agar chocolate) 143 Vel. Me- PM10 Prec. Temp. Viento dio (µm/m3) (mm) (°C) (m/s) 1 1 86 0 16,2 2,3 1 0 86 0 16,2 2,3 1 1 68 0 18,4 4,7 1 0 68 0 18,4 4,7 0 1 58 0 18,8 4,2 0 0 58 0 18,8 4,2 0 1 58 0 18,8 4,2 0 0 58 0 18,8 4,2 1 1 79 0 20 1,9 1 0 79 0 20 1,9 1 1 56 0 19,1 3,1 1 0 56 0 19,1 3,1 1 1 56 0 19 2,9 1 0 56 0 19 2,9 0 1 81 0 16,5 4,3 0 0 81 0 16,5 4,3 0 1 83 0 17,2 3,5 0 0 83 0 17,2 3,5 1 1 83 0 17,2 3,5 1 0 83 0 17,2 3,5 1 1 68 0 18,2 4,1 1 0 68 0 18,2 4,1 J P 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 ANEXO K. Rosa de los vientos días de muestreo, de la estación Merck 29 mayo NORTE 25% 20% 15% 10% 5% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 31 mayo NORTE 25% 20% 15% 10% 5% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 144 7 junio NORTE 25% 20% 15% 10% 5% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 9 junio NORTE 25% 20% 15% 10% 5% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 145 12 junio NORTE 25% 20% 15% 10% 5% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 0,51-1,80 Julio 9 NORTE 35% 28% 21% 14% 7% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 146 Julio 12 NORTE 30% 24% 18% 12% 6% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 Julio 14 NORTE 30% 24% 18% 12% 6% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 147 Julio 17 NORTE 25% 20% 15% 10% 5% OESTE ESTE Velocidad del viento >11,06 8,49-11,06 5,40-8,49 3,34-5,40 1,80-3,34 SUR 0,51-1,80 148