La inducción de embriogénesis de microsporas en colza produce paredes celulares anormales con niveles alterados de calosa y celulosa Verónica Parra-Vega, Patricia Corral-Martínez, Alba Rivas-Sendra y Jose M. Seguí-Simarro COMAV - Universitat Politècnica de València. CPI, Edificio 8E - Escalera I, Camino de Vera, s/n, 46022. Valencia, Spain. e-mail: [email protected] La inducción de embriogénesis en microsporas produce cambios dramáticos en diferentes aspectos de la fisiología celular y la estructura, siendo los cambios en la pared celular unos de los más interesantes y poco conocidos. En este trabajo, hemos utilizado criofijación por alta presión y criosustitución (HPF/FS), immunolocalización y microscopía confocal y electrónica para analizar la estructura y composición de las primeras paredes de las células formadas tras la inducción de embriogénesis en cultivos de microsporas de colza (Brassica napus) tanto convencionales como tratados con agentes que alteran los niveles de Ca2 + intracelular. Nuestros resultados revelan que uno de los primeros signos de la entrada en embriogénesis es la formación, mediada por Ca2 +, de una capa rica en calosa y sin celulosa justo debajo de la intina. En paralelo, las primeras divisiones dan lugar a la formación de paredes celulares irregulares, con huecos e incompletas. Proponemos que las paredes celulares anormales se producen por la deposición masiva de material excretado del citoplasma, la síntesis masiva de calosa, y la inhibición de la síntesis de celulosa en paralelo. La calosa sería producida por calosa sintasas dependientes de Ca2+, y activadas por un aumento en los niveles de Ca2+ intracelular debido al aumento de la permeabilidad de la membrana plasmática como resultado del choque térmico utilizado como inductor. Todas estas características están ausentes en las estructuras tipo polen y en los embriones derivados de microsporas pocos días tras el final del choque térmico, que presentan paredes celulares convencionales de tipo somático. En conjunto, nuestros resultados proporcionan una explicación a una serie de aspectos relevantes de la embriogénesis de microsporas incluida la función del Ca2+ y la aparición de las paredes celulares anormales, la fusión nuclear y la duplicación del genoma.