XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico PIRIFORME

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
EFECTOS DE LA PROTEÍNA β-AMILOIDE SOBRE LA DINÁMICA DE LA CORTEZA
PIRIFORME
María Estefanía Guerrero Gómez, Centro Universitario de los Lagos-Universidad de Guadalajara,
[email protected], Benito Ordaz Sánchez, Instituto de Neurobiologia- UNAM,
[email protected], Fernando Peña Ortega, Instituto de Neurobiología- UNAM, [email protected].
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La enfermedad de Alzheimer (EA), se caracteriza por la pérdida progresiva de la memoria
y el deterioro de las funciones cognoscitivas. Estas alteraciones, al menos en las etapas
tempranas de la enfermedad se deben a los efectos de la proteína β-amiloide soluble.
Dado que estudios recientes han mostrado que uno de los síntomas más tempranos de la
EA es la disminución de la capacidad olfativa (hiposmia) se han empezado a realizar
estudios enfocados a entender los efectos que desencadena la proteína β-amiloide soluble
en los circuitos neuronales asociados a la olfacción. Debido a que la corteza piriforme
representa el primer relevo cortical de la información enviada por el bulbo olfatorio,
decidimos estudiar el efecto de la proteína β-amiloide soluble sobre esta corteza.
METODOLOGIA
Se obtuvieron cortes horizontales de encéfalo de ratón CD1 de 500 µm de grosor que
contenían la corteza piriforme. Un grupo de rebanadas fueron cargadas con el indicador
fluorescente sensible a calcio FLUO-8 para analizar la actividad espontanea de la corteza
con resolución unicelular tanto en ausencia como en presencia de la proteína β-amiloide.
Para ello se tomaron videos de actividad de la corteza piriforme con la ayuda de un
microscopio de epifluorecencia (MEP). Otras rebanadas fueron colocadas en un set de
registro de campo electrofisiológico con el fin de registrar la actividad espontánea
poblacional de la corteza piriforme antes y después de agregar la proteína β-amiloide.
Para ello se realizaron registros de campo con electrodos de succión colocados en las
capas profundas de la corteza piriforme. Al final en ambos experimentos se aplicó
lidocaína para bloquear la generación de potenciales de acción y así diferenciar la
actividad neuronal de la actividad glial. Para el procesamiento de los datos de los
experimentos con imágenes de fluorescencia de calcio se hizo uso del software ImageJ,
el fSIENN y finalmente los datos son procesados en MATLAB. Se utilizó el programa
Clampfit para analizar los registros de campo a través de análisis de Fourier.
CONCLUSIONES
Los experimentos realizados con imágenes de fluorescencia de calcio han mostrado que
la actividad neuronal en la corteza piriforme (medida como número de células y
activaciones por célula) va disminuyendo durante la incubación con la proteína β-amiloide
30 nM. De igual manera, la actividad poblacional de campo en la corteza piriforme
disminuye en su potencia durante la incubación con la proteína β-amiloide 30 nM. Lo
anterior, nos permite concluir que proteína β-amiloide disminuye la actividad de la corteza
piriforme y la dinámica de su circuito. Este efecto podría contribuir a la hiposmia que se
observa en la EA.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico
Agosto 2014