IA-RECAT-PO-002 Procedimiento Operativo
Anuncio
LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 1 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio 1. Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección OBJETIVO Describir el modo de operación óptima del Espectrofotómetro de Absorción Atómica PERKIN ELMER 3110, código EAA – 1 de la Sección RECAT. 2. ALCANCE Este procedimiento aplica al Espectrofotómetro de Absorción Atómica marca Perkin- Elmer, modelo 3110. 3. RESPONSABILIDAD Y AUTORIDAD 3.1. Jefe de Sección: Supervisar el uso del equipo de acuerdo a este procedimiento. 3.2. Analista: velar por una correcta utilización del equipo. Además debe anotar en el Registro de Condiciones y Control de Uso del Espectrofotómetro de Absorción Atómica EAA-1 IA-RECAT-PO-002-RE001 la información requerida cada vez que se utiliza el equipo. 4. DEFINICIONES No aplica 5. ABREVIATURAS Y/O SIGLAS IA: Inocuidad de Alimentos PO: Procedimiento Operativo RECAT: Residuos y Contaminantes en Alimentos de Origen Terrestre RE: Reporte EAA: Espectrofotómetro de Absorción Atómica On: Encendido Off: Apagado HCl: Ácido clorhídrico (calidad trazas) HNO3: Ácido nítrico (calidad trazas) mA: mili Amperios mL: mililitros nm: nanómetros min: minutos Dln: Disolución 6. REFERENCIAS Y/O BIBLIOGRAFIA IA-RECAT-PO-002-BT-001 Uso y Condiciones del Equipo IA-RECAT-PO-002-IN-001 Instructivo de Operación del Espectrofotómetro de Absorción Atómica, Perkin Elmer 3110 -Por Llama IA-RECAT-PO-002-RE-001 Condiciones y Control de Uso del Espectrofotómetro de Absorción Atómica © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 2 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección (EAA-1) IA-RECAT-PT-001-RE-005 Preparación de Disoluciones de Trabajo para Metales Pesados IA-RECAT-PE-004-RE-006 Preparación y Control de Estándares Manual de métodos analíticos para el espectrofotómetro de absorción atómica, Perkin Elmer 3110. Guía del usuario del espectrofotómetro de absorción atómica Perkin Elmer 3110, páginas 3 a 24, 119 a 137, 301 a 307 Instructivo para la instalación del programa AA WinLab en Windows 95 para el espectrofotómetro de absorción atómica Perkin Elmer 3110 Guía del programa AA WinLab para el espectrofotómetro de absorción atómica Perkin Elmer 3110. Tutor para usuarios nuevos del espectrofotómetro de absorción atómica (AA Lab Benchtop), páginas 105109, 173- 186 7. DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO 7.1 Datos del Equipo ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Marca: Perkin Elmer. Modelo: 3110. Patrimonio: 7053165. Ubicación: Área de Absorción Atómica. Identificación: EAA-1 7.2 Reactivos y Disoluciones de Trabajo 7.2.1 Reactivos Ácido nítrico concentrado (HNO3) calidad para análisis de trazas de metales. Ácido clorhídrico concentrado (HCl) calidad para análisis de trazas de metales Disolución madre de 1000 mg/L de Cobre. 7.2.2 Disoluciones de Trabajo Disolución de ácido nítrico al 5 % (HNO3 al 5 %): Se toma en cuenta el porcentaje del ácido especificado en la etiqueta del envase (generalmente 69 % - 71 %). Se preparan 500 mL, tomando en cuenta la cantidad necesaria para llevarlo al 5 % (generalmente 70 mL) y luego se lleva a 500 mL con agua desionizada. El ácido debe agregarse de último. Disolución de ácido clorhídrico 1 mol/L (HCl 1 mol/L): Al igual que el anterior, se debe tomar en cuenta el porcentaje del ácido especificado en la etiqueta del envase (generalmente está entre 36 % – 38 %). Se toman 83 mL de ácido y se llevan a 1 litro con agua desionizada. El ácido debe agregarse de último. Se anota la información correspondiente en IA-RECAT-PT-001-RE-005. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 3 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección Disolución #2: Se miden 33,35 g de Mg(NO3)2*6H2O en balanza, y se disuelve en 1 litro de ácido clorhídrico 1 mol/L (HCl 1 mol/L). Esta disolución se utiliza como disolvente para preparar las disoluciones stock y de trabajo. Se anota la información correspondiente en IA-RECAT-PT-001-RE-005. Disolución Stock de 100 mg/L de Cobre: Se toma 1 mL del estándar de 1000 mg/L de Cu y se lleva a un balón aforado de 10 mL, luego se afora con Dln. #2, HCl 1 mol/L o con agua desionizada. Esta disolución se utiliza para preparar los patrones de la curva de calibración y para marcar los controles. Se anota la información correspondiente en IA-RECAT-PE-004-RE-006. Control Instrumental de 2,00 mg/L de Cobre: Se toma 1 mL de la Dln. Stock de 100 mg/l de Cu y se trasvasa a un balón aforado de 50 mL, luego se afora con Dln. #2, HCl 1 mol/L o con agua desionizada. Esta disolución se utiliza para verificar el gráfico continuo. Se anota la información correspondiente en IA-RECAT-PE-004-RE-006. 7.3 Condiciones de almacenamiento Los estándares de la casa comercial se almacenan a temperatura ambiente en el área de espectrofotometría de absorción atómica. La disolución stock (100 mg/L) de Cobre se almacena por 6 meses aproximadamente (o hasta que se terminen) a temperatura ambiente o en refrigeración. La disolución de trabajo (2 mg/L) se almacena a temperatura ambiente o en refrigeración y son sustituidas por nuevas cuando se terminen (aproximadamente cada 3 meses). 7.4 Encendido del Equipo de Absorción Atómica (EAA) La siguiente es una guía para el manejo del equipo de absorción atómica para la determinación de cadmio, cobre, plomo o cualquier otro elemento que se determine por llama. Pueden consultarse además los manuales del equipo. 1Encender el CPU, el monitor y la impresora conectados al EAA. 2Encender el Equipo de Absorción Atómica (EAA-1) en el botón On/Off ubicado en la pared derecha del equipo en la esquina inferior izquierda. Fig. 1. “Botón de encendido y apagado del EAA-1” 7.4.1 Acceso al programa del Equipo de Absorción Atómica (EAA) 1- Buscar el ícono del programa AA WinLab Analyst que se encuentra en el escritorio de Windows. 2- Dar doble clic al ícono anterior para entrar directamente al programa, y así poder utilizar el equipo desde la computadora. 3- Después de unos segundos, aparece la ventana principal del programa llamada AA WinLab, y seguidamente aparece una sub-ventana llamada Checking Connections. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 4 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección 4- En el centro de esta ventana hay 2 figuras, en la parte de arriba la figura representa el EAA, modelo 3110 y la figura de abajo representa el FIAS, modelo 100. 5- A la par de la figura del EAA debe aparecer un cuadro verde con un (para trabajar con llama), indicando que hay conexión entre el programa y el EAA. 6- Luego se le da un click a la opción Exit, para entrar a la ventana o recuadro introductorio del Programa de Perkin Elmer (AA WinLab). 7- Si en cambio, estando en Checking Connections apareciera un cuadro rojo , indica que no hay conexión entre el programa y el equipo; por lo que se procede a darle un clic a la opción Reset IEEE. Se repiten entonces los pasos 5 y 6. 8- Dentro del recuadro introductorio, en la parte inferior, aparecen 3 íconos con diferentes opciones: a- El primer ícono ubicado a la izquierda, indica la técnica que se va a utilizar; en este caso se debe dar clic sobre Flame (llama), que es la técnica que se utiliza en este método, hasta que aparezca la opción en fondo azul. b- Si aparece la opción FI-MHS en el primer recuadro, se le da un click en la flecha negra para que aparezca la opción Flame. (Ver paso anterior) c- El último ícono ubicado a la derecha del recuadro, se llama Menus and Tool Bar , por lo que se le debe de dar un click sobre él para entrar a la ventana principal (AA WinLab) del programa. 7.4.2 Uso de la Ventana Principal del programa del Equipo 1Dentro de la ventana, aparece una serie de íconos ubicados en la parte superior, estos son las opciones principales del programa: 2- Chequear que en el ícono Technique, ubicado en esquina superior derecha sobre la opción Method, indique que la técnica a utilizar es: flame . 3- Luego se le da click a la opción Method para que se abra una sub-ventana llamada Open Method, donde aparece la lista de todos los métodos de interés. 4- Ubicar el cursor sobre la técnica de interés y se le da un click, marcándola con un fondo negro; luego se le da un click a la opción OK ubicada en la parte superior derecha de la ventana. 5- Nuevamente aparece la ventana principal del programa (AA WinLab), por lo que se debe chequear que en la opción Method aparezca el método de interés1 y a la vez el símbolo del metal que se va a determinar. NOTA1: Antes de empezar el análisis se recomienda optimizar el equipo con una disolución de concentración y absorbancia …conocida del elemento de interés llamada Control Instrumental. Si la última técnica utilizada fue FI-MHS (generador de hidruros), el equipo primero debe optimizarse con Cu (ver siguiente …Nota). © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 5 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio 7.4.3 Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección Colocación manual de la lámpara NOTA2: Tal y como se menciona en la Nota anterior, si el equipo ha sido utilizado con otra técnica que no sea llama, se debe de optimizar el quemador con la lámpara de Cu ya que el haz de luz de este elemento está dentro del rango visible, y esto hace más fácil la optimización de la lámpara y el quemador. 1La lámpara del elemento correspondiente se coloca en la pared derecha del equipo, en la esquina superior izquierda; cerca del panel de control. 2La lámpara tiene dos extremos planos, uno transparente y otro negro; en este último extremo hay un cordón negro, éste tiene un conector que se coloca debajo de la lámpara, en el enchufe color negro de diámetro más pequeño con 9 hoyos. 3Los dientes deben calzar correctamente con los agujeros del enchufe. NOTA3: Si la lámpara es nueva, se debe colocar un adaptador para conectarla con el equipo. 7.4.4 Ajuste y Optimización de la lámpara 1- Antes de ajustar la lámpara, primero se debe ajustar el ancho y el alto del slit, al igual que la longitud de onda. aEn la parte superior del equipo, hay dos perillas, una de ellas es para regular el ancho de la rejilla y la otra para regular el alto de la rejilla utilizada para dejar pasar el haz de luz. Por ejemplo; para el elemento cobre, cadmio o plomo, el ancho del slit debe ser de 0.7 mm y la altura debe ser la máxima (high). Para ajustar esto, se colocan manualmente las perillas en la posición que se requiera. bPara ajustar la condición de longitud de onda, el equipo tiene una perilla redonda, grande y negra ubicada en la parte superior de la pared izquierda, donde manualmente se hace girar hasta obtener la longitud de onda deseada. Se recomienda para Cobre una longitud de onda de 324.8 nm y para Cadmio es de 228.8 nm 2- Una vez enchufada la lámpara, se busca en la ventana principal del programa AA WinLab el cuarto ícono llamado Lamps, y se le da un clic, donde aparece una sub-ventana: Align Lamps donde se muestra toda la información sobre el metal de interés en los recuadros color blanco. 3- Debajo del indicativo Elements, se escribe en la celda blanca el símbolo del elemento a determinar. 4- Chequear que debajo del indicativo Current (mA) aparezca un 0, indicando que la lámpara no esté activa. Luego debe darse un clic en el círculo pequeño color verde debajo de la opción Set up ( : punto verde), para que recobre la información del elemento. 5- Debajo del indicativo Wavelength, en la celda color blanco, aparece la longitud de onda óptima con la que el equipo trabaja cada elemento. Por ejemplo, para Cu aparece 324,8 nm. 6- Una vez realizado el ajuste se vuelve a la sub-ventana del software Align Lamp y en la celda debajo de Current (mA) se digita el valor deseado o el límite inferior del ámbito de corriente de la lámpara que se encuentra escrito en una etiqueta de la lámpara sobre su extremo negro. Por ejemplo, para Cu es 15 mA, con un ámbito de (15 a 25) mA. 7- Se ubica el cursor en Set Up ( ) y se le da un click para activar la corriente. 8- Cuando la energía de la lámpara se activa, aparece en la parte superior de la sub-ventana, una franja © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 6 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección verde horizontal que indica la intensidad de la energía de la lámpara, que oscila continuamente hasta que se estabilice, esto hasta que se ajuste correctamente. NOTA4: Los ajustes de la lámpara se hacen con el propósito de obtener la máxima intensidad de corriente. Esta intensidad se refleja en la franja horizontal color verde ubicada en la parte superior de la sub-ventana Align Lamp. 9- La energía de la lámpara se puede ajustar de las siguientes maneras: a- Se hace un movimiento rotacional a la lámpara para optimizar la corriente, lo que se refleja en la barra horizontal verde. b- Se giran manualmente las 2 perillas color negro que se encuentran ubicadas arriba del panel de control del equipo al lado derecho, primero la perilla más grande y luego la perilla pequeña. 10- Una vez ajustada la energía, ésta se deja estabilizar durante unos minutos (al menos 10 minutos). 11- Transcurrido el tiempo necesario, se ubica el cursor en Set Up ( ) y se le da un click para dejar fija la energía. 12- Se pretende que la lámpara trabaje con una energía superior al 50 %, pero si no sucede, se debe digitar el número siguiente al escrito en la celda de la corriente y repetir el punto 9. Por ejemplo, de 15 mA pasa a 16 mA para Cu el cual se encuentra debajo de la opción Energía en la esquina superior derecha de la sub-ventana. 13- Una vez estabilizada (sin movimientos bruscos), se cierra la sub-ventana Align Lamps. 14- Se anotan los datos de estas condiciones en el Registro de Condiciones y Control de Uso del Espectrofotómetro de Absorción Atómica EAA-1 IA-RECAT-PO-002-RE-001 7.4.5 Ajuste manual del quemador NOTA5: Los ajustes del quemador se deben de llevar a cabo con la lámpara de Cobre, ya que se puede observar el haz de luz. 7.4.5.1 Ajuste Vertical: 1- Se abre la puerta protectora de la llama que se ubica en la parte frontal del equipo. 2- En la base del quemador hay una perilla en forma horizontal, si se mueve hacia la derecha, el quemador sube; si se mueve hacia la izquierda el quemador baja. 3- El quemador tiene que quedar en una posición óptima para que el haz de luz (roja) proveniente de la lámpara de Cobre, no pegue en la parte superior del quemador, aproximadamente a unos 5 mm. de la base. 4- Se utiliza una hoja o pedazo de papel blanco para garantizar que en ella se refleja la luz color rojo, proveniente del haz de luz de la lámpara. 7.4.5.2 Ajuste Horizontal: 1- Debajo del nebulizador hay una perilla larga en dirección al usuario que se encarga de mover el quemador hacia afuera y hacia adentro. Si se gira hacia la derecha el quemador se dirige hacia adentro y si se gira hacia la izquierda el quemador se mueve hacia afuera. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 7 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección 2- El quemador tiene que quedar de forma tal que el haz de luz proveniente de la lámpara, pase por la ranura del quemador. 3- Para corroborar la posición óptima del quemador se utiliza una pedazo de hoja color blanco que se coloca en la pared derecha interna, frente al quemador para poder ver el haz de luz color rojo que proviene de la lámpara. 7.4.5.3 Ajuste Rotacional: 1- Este ajuste se hace con la perilla pequeña que está debajo de la perilla de ajuste vertical. 2- El ajuste debe hacerse hasta que tanto el quemador como el haz de luz queden en la misma dirección, o sea, que el haz de luz quede en línea y sobre la rejilla. Esto puede hacerse, ayudándose con un papel color blanco que refleja el haz de luz color rojo proveniente de la lámpara. 3- Se cierra la puerta para protegernos del calor de la llama. NOTA6: El ajuste del quemador también se hace mediante la utilización del Gráfico Continuo; o sea, mediante la lectura de un estándar de Absorbancia conocida, para confirmar la optimización. 7.5 Limpieza del Quemador La naturaleza de las muestras aspiradas determina el intervalo de limpieza del quemador. Se observan residuos en la rejilla del quemador cuando las muestras tienen alto contenido de sólidos; si es así, se debe limpiar inmediatamente después de utilizarlo: haciendo pasar una espátula plana por la rejilla del quemador para limpiar las impurezas presentes. Luego de pasarla varias veces, se limpian los residuos pegados a la espátula con un papel toalla y se repite hasta que la espátula salga limpia. 7.6 Encendido de la llama NOTA7: Antes de encender la llama, se debe asegurar que la manguera pegada al recipiente de desechos esté con agua para evitar alguna explosión en caso de que la llama se devuelva. 1- Abra la válvula del cilindro para darle entrada al gas Acetileno a las tuberías que van hacia el equipo. Las presiones deben ser controladas cada vez que se utiliza; por ejemplo, la presión del cilindro no debe ser menor de 85 psi y la presión del gas debe estar entre (12 – 14) psi. NOTA8: La presión del cilindro no debe ser menor a 85 psi porque las tuberías se pueden contaminar con la acetona que se .encuentra en el fondo del cilindro; además puede causar una explosión. La presión del gas acetileno debe permanecer .entre (12 – 14) psi, NUNCA subir de 15 psi porque también puede provocar una explosión. 2- Las presiones del cilindro y el gas se anotan en el Registro de Condiciones y Control de Uso del Espectrofotómetro de Absorción Atómica EAA-1 IA-RECAT-PO-002-RE-001. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 8 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección 3- Encienda el extractor de gases, activando el interruptor, ubicado en la pared detrás del equipo. 4- Abra la entrada del aire (oxidante), girando hacia la derecha la perilla negra ubicada en la parte frontal izquierda del equipo. Gírela hasta Air y luego presione el botón color rojo ubicado arriba del anterior para iniciar la ignición. (Ver figura 2) Fuel Oxidant Ignite Oxidant Fig. 2. “Panel frontal del EAA-1 para encender la llama” 5- La llama debe ser azul y homogénea; esto se logra regulando el flujo con las perillas que se encuentran en el lado izquierdo del equipo Fuel (Acetileno) y Oxidant (Aire). Generalmente la relación del flujo entre el aire y el acetileno es 1:2 aproximadamente; por ejemplo, el combustible puede encontrarse en 1.5 psi y el oxidante en 3.0 psi. NOTA9: La llama debe ser completa, homogénea y azul; no debe estar cortada ya que significa que el quemador está sucio. 6- Si la llama se encuentra cortada, se debe: limpiar el quemador con una espátula hasta que ésta salga sin residuos y luego aspirar agua desionizada de 3 a 5 minutos. NOTA10: Los conectores o cables de seguridad del quemador se utilizan como protección para evitar que el quemador se dispare, y así evitar una explosión. Cuando uno de ellos está mal colocado, la llama no se enciende o el botón rojo ubicado en la parte frontal izquierda del equipo lo indicaría encendiéndose. 7.7 Ajuste del Gráfico Continuo (Lectura del Control Instrumental) 1- Una vez que la posición del quemador se ha optimizado, se ajusta finalmente con el gráfico continuo. 2- Se busca el comando Tools en la parte superior de la sub-ventana AA WinLab , se le da un clic y se activa la opción Continuos Graphics para que aparezca una ventana nueva. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 9 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección 3- Se enciende la llama. (Ver Punto anterior, 7.6) 4- Se coloca agua desionizada en la bandeja de muestras, ubicado en la parte frontal del equipo, colocando la manguera dentro de esta, para que succione el agua. 5- Se le da un clic en el primero de los tres íconos ubicados en la parte inferior de la sub-ventana, de izquierda a derecha, llamado Auto Zero. 6- Se continúa dando clic a la opción de Auto Zero hasta que estabilice la línea base. NOTA11: Las Absorbancias promedio de Cu y Cd se pueden observar en el Registro IA-RECAT-PE-004-RE-002 Gráficos de Control. Por ejemplo, el promedio de Absorbancias obtenidas durante el 2010 para Cu fue de 0,238 usando 2,00 mg/L como control instrumental y para Cd fue de 0,153 usando un control instrumental de 0,50 mg/L. 7- Inmediatamente, se coloca el estándar de concentración conocida sobre la bandeja de muestras y se introduce la manguera para que succione y dé la primera lectura de Absorbancia. 8- Mientras succiona se va ajustando nuevamente el quemador en forma horizontal y rotacional, hasta que se observe una máxima Absorbancia (valor máximo que se puede obtener). La Absorbancia varía dependiendo de la posición del quemador. 7.8 Lectura de curva de calibración y muestras 1- Dentro de la ventana principal AA WinLab, se le da un clic al ícono SmpInfo , e inmediatamente se abre una sub-ventana llamada Sample Information Editor Untitled donde se introduce toda la información de las muestras. En el encabezado se escribe la descripción del análisis (elemento a analizar, # Set y fecha; por ejemplo), luego se pasa al recuadro que se refiere a información general del set de muestras (identificación del lote, unidad de volumen, unidad de masa y el nombre del analista a cargo). En el último recuadro se introduce la información de cada muestra (el nombre y # de protocolo, el peso (en gramos) y el factor de dilución (en mL)). Una vez que se tiene toda la información, se da un clic en File, ubicado en la barra de herramientas principal, se despliega una lista de opciones, entonces se le da un clic en Save as. Luego se despliegan otras opciones en Sample Info File..., esto, para guardar la información en un archivo específico, según el elemento a analizar. 2- Para salir se cierra la ventana en la X ubicado en la esquina superior derecha. 3- Se le da un clic al ícono WkSpace , e inmediatamente se abre una sub-ventana llamada Abrir donde se escoge el nombre del metal a trabajar. Por ejemplo, si se va a analizar cadmio, se busca Cadmio con ayuda de la barra de desplazamiento vertical. Se da un clic sobre la opción a escoger (cadmiobg) y se Acepta dando un clic en Aceptar. 4- Inmediatamente, aparecen 3 sub-ventanas, una de ellas se llama Manual Analysis, otra se llama Calibration, y otra Results. 5- En la sub-ventana Manual Analysis , se chequean los datos obtenidos; por ejemplo, la energía de lámpara, la longitud de onda, el slit y el estado actual del equipo. La sub-ventana Calibration , muestra la curva de calibración que se obtiene conforme se leen los estándares. La sub-ventana Results , muestra los valores de Absorbancia y Concentración en ppm (partes por millón) de cada muestra. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 10 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección NOTA12: Antes de empezar a leer, se debe dar nombre al archivo y al set donde se guardarán los resultados obtenidos. 6- Para darle nombre al archivo, se le da un clic al primer ícono Open... ubicado en la parte inferior de la sub-ventana Manual Analysis. 7- Para nombrar el set de resultados obtenidos, se le da un click al segundo ícono Open... ubicado debajo del anterior, entonces aparece una ventana llamada Choose Result Data Set. En el primer recuadro en blanco llamado Results Name se escribe el nombre del archivo de los resultados que se van a obtener. Por ejemplo, la sigla del elemento que vamos a determinar, y el set de muestras a analizar; así, Cd01-11. En el segundo recuadro en blanco llamado Description, se escribe toda la información que se requiera para poder identificar las muestras. Por ejemplo, la sigla del elemento a analizar y el número del set de muestras que se van a leer. Por ejemplo, si lo que se van a leer son controles, entonces se escribe el nombre del archivo; por ejemplo, la letra CI (indicando que son controles intralaboratoriales), la sigla de elemento a determinar, el mes y el año correspondiente; por ejemplo, CCdEne05. 8- Para salir se le da un click en OK y automáticamente aparecen ambos nombres en los recuadros. 7.8.1 Lectura de la Curva de Calibración: 1- Se coloca un recipiente con agua desionizada en la bandeja de muestras. 2- Se introduce el capilar en el recipiente con agua para iniciar la limpieza, y se deja un rato, luego se le da un clic en el ícono Analyze Blank de la sub-ventana llamada Manual Analysis, en la ventana principal AA WinLab y el equipo empieza a leer por triplicado. 3- Se repiten los pasos anteriores, pero con Agua desionizada o Disolución #2 o HCl 1 mol/L para autocerar. Se repite esto hasta que las lecturas den Absorbancia 0,000. 4- Una vez que la lecturas se han estabilizado y estén en 0,000 se continúa con el agua desionizada o disolución #2 en la bandeja, para iniciar la lectura de la curva de calibración. 5- El primer punto de la curva es de 0,00 mg/L; o sea, de la lectura del agua desionizada, o de la Disolución #2 o del HCl 1 mol/L. La lectura empieza cuando se le da un clic al ícono de Analyze Standard , dándose por triplicado. 6- Luego, se van colocando todos los patrones en el orden correspondiente para obtener la curva del elemento a determinar, siguiendo el paso anterior. 7- Cuando la lectura del último patrón haya terminado, la curva se refleja en una sub-ventana llamada Calibration. Si se abre la ventana, se puede observar en la base del gráfico: el tipo de calibración realizada, la pendiente, el coeficiente de correlación y el intercepto de la curva. 8- Una vez que se termina de leer la curva, se deja absorbiendo agua desionizada durante un rato para que limpie el conducto, y poder continuar con la lectura de las muestras. 9- Automáticamente, conforme se leen las muestras, los resultados se van imprimiendo. 10- Los estándares de la curva se guardan en refrigeración o a temperatura ambiente, al igual que las disoluciones del control instrumental. NOTA13: Los patrones para la curva de calibración de cadmio son: 0 mg/lL que equivale a H2O desioniz. o Dln #2, 0,02 mg/lL © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 11 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección 0,04 mg/L; 0,10 mg/L, 0,25 mg/L y 0,50 mg/L. 7.8.2 Lectura de muestras: 1- Se coloca un recipiente con agua desionizada en la bandeja de muestras. 2- Se introduce la manguera en el recipiente para iniciar la absorción del agua desionizada y se deja pasar un rato para que limpie el conducto. 3- La primera lectura a realizar es la del blanco. Éste se coloca en la bandeja de muestras, se introduce la manguera, y se le da un clic en el ícono Analyze Sample de la sub-ventana llamada Manual Analysis, en la ventana principal AA WinLab. El equipo empieza a leer por triplicado. 4- Se repite el punto anterior con cada una de las muestras y por último, con los controles. NOTA14: Automáticamente, cuando se termina de leer una muestra, aparece el número y la identificación de la muestra que sigue en los recuadros blancos que se encuentran en el lado izquierdo de la ventana. 5- Automáticamente, conforme se leen las muestras, los resultados se van imprimiendo. 6- Cuando se termina de leer todas las muestras, se deja absorbiendo agua desionizada durante 5 minutos aproximadamente para limpiar el conducto. 7- Una vez que se enfríe el quemador, se desmonta para limpiarlo. Esto se hace cada vez que se considere necesario. (Ver punto 7.10) 7.9 Apagado de la llama y del equipo 1- Se cierra la entrada de aire (oxidante) y gas (acetileno), girando hacia la izquierda la perilla negra ubicada en la parte frontal del equipo, hasta llegar a Off. (Ver figura 3) Fuel Oxidant Ignite Oxidant Fig. 3. “Panel frontal del EAA-1 para apagar la llama” 2- Se cierra la válvula del cilindro de gas acetileno para detener la entrada de gas a las tuberías y al equipo. 3- Una vez cerrada la válvula del cilindro de gas, se abre la entrada de Aire y Gas, girando la perilla negra hacia la derecha (Ver figura 3); esto se hace para vaciar el gas que queda en las tuberías, hasta que la luz © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada LANASEVE Rige a partir de: 10-08-11 Código: IA-RECAT-PO-002 PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESPECTROFOTÓMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA Perkin Elmer 3110 - POR LLAMA- Versión 05 Página - 12 - de 12 Elaborado por: Analista de Laboratorio Revisado por: Encargada de Control de Calidad de Sección Aprobado por: Jefe de Sección roja se active, y los indicadores (balines) caigan (que lleguen a 0). 4- Se apaga el extractor de gases, desactivando el interruptor ubicado en la pared detrás del equipo. 5- Se apaga el Equipo de Absorción Atómica (EAA) en el botón On/Off ubicado en la pared derecha del equipo en la esquina inferior izquierda. Fig. 1. “Botón de encendido y apagado del EAA-1” 6- Se anotan en el registro IA-RECAT-PO-002-RE-001 Registro de Condiciones y Control de Uso del Espectrofotómetro de Absorción Atómica EAA-1 toda información importante que se requiera anotar. 7- Se cierra el programa AA WinLab y todas las ventanas y/o sub-ventanas que estén abiertas. 8- Se apaga el CPU, el monitor y la impresora conectados al EAA-1. 7.10 Limpieza del quemador Cada vez que se requiera, el quemador puede limpiarse de la siguiente manera: 1- Se apaga la llama y el equipo. (Ver punto 7.9). 2- Se remueve la cabeza del quemador del equipo. 3- Se preparan 500 mL de HNO3 al 5 % aproximadamente en un recipiente grande de vidrio y se introduce el quemador o se enjuaga con esta disolución para que elimine las impurezas presentes. Los cables de seguridad no deben tener contacto con la disolución para evitar su oxidación. 4- Luego se enjuaga con suficiente agua desionizada y se seca en un horno a baja temperatura o a temperatura ambiente sobre una servilleta de papel. 8. ANEXOS No aplica © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada
