C.M.C. Curso 2012 ‐2013 Tema 4 LA REVOLUCIÓN GENÉTICA: BIOTECNOLOGÍA 1.‐ El ADN: el secreto de la vida El ácido desoxirribonucleico (ADN) es la molécula encargada de llevar la información genética de todos los seres vivos, a través de ella se transmiten las órdenes que controlan a las células de todos los organismos. 1.1.- Composición química del ADN Es una gran molécula formada por la unión de otras moléculas más sencillas llamadas nucleótidos. Cada nucleótido está formado a su vez por tres tipos de componentes químicos. Componentes de un nucleótido Molécula de Ácido fosfórico en forma de grupo fosfato Molécula de pentosa: Desorribosa Base nitrogenada. Que pueden ser de los siguientes tipos: Adenina Purinas Pirimidinas Guanina Citosina Timina La unión de millones de moléculas como esta en cadena no ramificadas conforman el ADN 1.2.- Estructura del ADN El ADN está formado por dos largas cadenas de nucleótidos enrolladas en una doble hélice. Las dos cadenas se unen entre sí por la parte interna de la doble hélice a través de enlaces entre las bases nitrogenadas. Las uniones entre las bases nitrogenadas, denominadas pares de bases, no son cualesquiera, sino que existe una complementariedad química entre ellas, de tal forma que sólo puede unirse de la siguiente forma: 1.2.- Estructura del ADN La Adenina de una cadena solo se une a la Timina de la otra por medio de un doble enlace de puentes de hidrógeno (A=T, T=A) La Citosina de una cadena solo se une a la Guanina de la otra mediante un triple enlace de puentes de hidrógeno (C≡G, G≡C) En este vídeo también se explica: http://www.youtube.com/watch?v=i-ATJ1FwYps 1.3.- Replicación del ADN La REPLICACIÓN es el proceso por el cual se sintetizan dos copias idénticas de ADN tomando como molde otra cadena de ADN. La REPLICACIÓN sucede justo antes de la división celular con lo que las células hijas heredan la misma dotación genética que las células madre, lo que nos asegura que la información genética se trasmite de generación en generación. Cada doble hélice después de la replicación estaría formada por una hebra original y una hebra nueva En este vídeo también se explica: http://www.youtube.com/watch?v=zO2Yv43mldM 1.4.- Transcripción y Traducción del ADN La TRANSCRIPCIÓN es la síntesis de ARNm tomando como molde una hebra de ADN. El ácido ribonucleico (ARN) está formado por una sola cadena de nucleótidos que son ligeramente diferentes a los del ADN. Los nucleótidos del ARN están formados por: pentosa, grupo fosfato y una base nitrogenada como las de los del ADN, a excepción de la Timina que es sustituida por otra: el Uracilo. En este vídeo también se explica: 1.4.- Transcripción y Traducción del ADN La TRADUCCIÓN es el proceso de síntesis de proteínas llevado a cabo en los ribosomas, a partir de la información aportada por el ARN mensajero que es, a su vez, una copia de un gen. En este vídeo también se explica: Un resumen de todo lo visto hasta ahora lo podemos ver en el siguiente vídeo. http://www.youtube.com/watch?v=HjywHm5-gAo Otro sitio de interés:EL MUNDO http://www.elmundo.es/especiales/2003/02/salud/genetica/descifrar_la_vida.html RELACIÓN ENTRE LOS GENES Y LAS PROTEÍNAS CÓDIGO GENÉTICO: La célula utiliza un código para saber qué proteína específica debe construir a partir de un trozo de ADN. Los símbolos del código son las bases nitrogenadas de la molécula de ARNm tomadas de tres en tres, formando un grupo al que se llama codón. Cada codón corresponde a un aminoácido en la proteína que se va a formar. RELACIÓN ENTRE LOS GENES Y LAS PROTEÍNAS CÓDIGO GENÉTICO: El código tiene cuatro letras: A, G, C y U, que se agrupan de tres de en tres. Esto da lugar a 64 combinaciones diferentes (4x4x4). Sin embargo sólo hay 20 aminoácidos diferentes que están en las proteínas. RELACIÓN ENTRE LOS GENES Y LAS PROTEÍNAS CÓDIGO GENÉTICO: 2.‐ Biotecnología: un conjunto de tecnologías ADN recombinante es cualquier molécula de ADN formada por la unión de segmentos de ADN de origen diferente Esta tecnología permite manipular el ADN, es decir, cortar, aislar, pegar, reproducir y secuenciar fragmentos específicos del ADN de cualquier organismo 3.‐ Tecnología del ADN recombinante 3.1.- Enzimas celulares ¿Cómo actúan las enzimas de restricción y las ligasas en la creación de ADN recombinante? 1. Con la misma enzima de restricción se corta el ADN de dos organismos distintos 3. Las ligasas pegan los extremos y los fragmentos se unen de forma definitiva en una molécula de ADN 2. Los fragmentos de ADN de cada organismo se ponen en contacto. 3.‐ Tecnología del ADN recombinante 3.2.- Análisis de fragmentos de ADN La electroforesis en gel de agarosa es una técnica que se emplea para separar una mezcla de moléculas de ADN en bandas, cada una de ellas formada por moléculas de ADN de la misma longitud Esta técnica permite obtener el patrón de bandas característico y exclusivo del ADN de cualquier organismo: huella génica Se utiliza para investigar la autoría de un delito, establecer la paternidad… 3.‐ Tecnología del ADN recombinante 3.3.- Hibridación mediante sondas de ADN La hibridación del ADN es el proceso en el que dos hebras de ADN de cadena sencilla, con una secuencia de bases complementarias se unen para formar una molécula de ADN de cadena doble Este proceso permite identificar cadenas de ADN que porten un gen que codifique determinadas proteínas. Para ello lo que se hace es un ensayo de hibridación con una sonda de ADN. Ver ilustración de la página 99 del libro 3.‐ Tecnología del ADN recombinante 3.4.- Clonación del ADN La clonación de un fragmento de ADN consiste en la obtención de miles de millones de copias idénticas de dicho fragmento. Para clonar un fragmento de ADN, este debe ser introducido en una molécula portadora: vector de clonación (molécula de ADN pequeña capaz de entrar dentro de una bacteria y autorreplicarse dentro de ella) 3.‐ Tecnología del ADN recombinante 3.5.- Amplificación del ADN: reacción en cadena de la polimerasa (PCR) La PCR es una reacción en cadena que origina millones de copias de un segmento de ADN mediante la replicación de múltiples ciclos de replicación del ADN in vitro. Se utiliza para amplificar una muestra de ADN procedente de diversas fuentes: pequeñas cantidades de tejidos, sangre o semen conseguidos en la escena de un crimen, ADN de microorganismos patógenos, ADN de células embrionarias… 3.‐ Tecnología del ADN recombinante 3.6.- Secuenciación del ADN La determinación de la secuencia de nucleótidos es una parte fundamental de la información sobre cualquier fragmento de ADN Actualmente existe técnicas automatizadas e informatizadas que permiten una secuenciación sencilla y rápida Con estas técnicas se ha conseguido conocer los genomas completos de numerosos organismos. 4.‐ Técnicas de ingeniería genética Técnicas que permiten transferir genes entre distintas especies Las aplicaciones prácticas de estas técnicas son la obtención de organismos genéticamente modificados y la terapia génica 4.‐ Técnicas de ingeniería genética 4.1.- Organismos genéticamente modificados: OGM Los OGM o transgénicos son los organismos (bacterias, hongos, animales y plantas) que contienen un gen procedente de otro organismo o transgén. El transgén se introduce utilizando vectores de expresión: virus o plásmidos bacterianos en los que se inserta el gen o genes de un organismo determinado distinto del que después lo recibirá Dentro de los OGM podemos distinguir tres categorías: • Microorganismos genéticamente modificados • Animales transgénicos • Plantas transgénicas Veamos las aplicaciones más importantes de cada una de ellas. 4.‐ Técnicas de ingeniería genética 4.1.- Organismos genéticamente modificados: OGM Microorganismos genéticamente modificados 1. Biorremediación: se trata de diseñar microorganismos recombinantes que pueden emplearse en la mejora del medio ambiente, introduciendo en ellos nuevas características que aumenten su eficacia para eliminar la contaminación: Eliminación de mareas negras: bacterias que digieren hidrocarburos y los transforman en sustancias menos contaminantes. Eliminación de metales pesados: bacterias que pueden vivir en su presencia y mediante diversas reacciones químicas los eliminan. Producción de biocombustibles: Hay levaduras que son capaces de producir biodiesel y bioalcohol, que son menos contaminantes que los combustibles fósiles. Eliminación de plásticos biodegradables: Existen bacterias que son capaces de descomponer estos plásticos. 4.‐ Técnicas de ingeniería genética 4.1.- Organismos genéticamente modificados: OGM Microorganismos genéticamente modificados 2. Productos industriales, farmacéuticos y médicos: se pueden utilizar microorganismos genéticamnete modificados para que se comporten como pequeñas “factorías vivientes” para fabricar productos que los microorganismos no producen de forma natural: Enzimas: algunas bacterias y hongos genéticamente modificados se utilizan para producir enzimas que se agregan a los detergentes o pueden utilizarse en la fabricación de vaqueros lavados a la piedra. Antibióticos: muchos de ellos (tetraciclina, penicilina,…) son producidas por bacterias y hongos genéticamente modificados. Proteínas humanas: Hay levaduras y bacterias genéticamente modificadas para producir insulina humana, hormona del crecimiento, factor antihemofílico, etc. Ver figura de la página 103 4.‐ Técnicas de ingeniería genética 4.1.- Organismos genéticamente modificados: OGM Animales transgénicos Se trata de animales que llevan en sus células algún gen procedente de otro organismo, que ha sido obtenido mediante tecnología del ADN recombinante Varias son las aplicaciones de estos animales: Aumentar la resistencia a enfermedades y mejorar la producción animal. Diseñar animales knockout: en ratones KO, se sustituye un gen funcional por otro inutilizado y se examinan los efectos que esto tiene sobre el animal Fabricar órganos de animales para transplante: xenotransplantes. El cerdo parece el mejor animal para ello ya que sus órganos tienen un tamaño parecido al de los humanos y son fáciles de criar. Se trata de obtener cerdos transgénicos modificados en sus características inmunitarias para evitar el rechazo del transplantado. Crear granjas farmacéuticas. Se puede insertar transgenes que codifiquen proteínas humanas (insulina, factor hemofílico, ..) en el ADN de vacas, ovejas o cabras y luego recuperar dichas proteínas a través de la leche de estos animales. 4.‐ Técnicas de ingeniería genética 4.1.- Organismos genéticamente modificados: OGM Plantas transgénicas Se trata de transferir genes a las plantas procedentes de organismos distintos, y poder así realizar cruzamientos para obtener nuevas y útiles variedades vegetales. Se han conseguido plantas transgénicas con fines muy diferentes: Resistencia contra herbicidas o plagas. Plantas como la soja, el algodón y el maíz son resistentes a los herbicidas que destruyen las malas hierbas. Frutas y verduras resisten plagas de insectos por ser portadores de genes venenosos bacterianos que son tóxicos a dichos insectos. Resistencia a las heladas, las sequías o al exceso de acidez y salinidad del suelo: Fresas transgénicas con un gen de un pez del ártico que produce proteínas anticongelantes. Retrasar la maduración. Frutos que al madurar no se ablandan: tomateras. Mejorar el valor nutritivo de las plantas empleadas en agricultura. Plantas de arroz que producen granos con provitamina A y que en el cuerpo humano se convierte en vitamina A. Producir sustancias de interés farmacológico. Plantas que son capaces de producir proteínas humans y proteínas virales para utilizarlas como vacunas. 4.‐ Técnicas de ingeniería genética 4.2.- Terapia génica Tiene como objetivo tratar, curar y prevenir enfermedades producidas por un solo gen defectuoso introduciendo en el paciente un gen terapéutico o funcional Existen dos tipos de terapia génica, la somática y la de línea germinal Terapia génica somática. Se introducen algunas células transgénicas para disminuir los síntomas de la enfermedad. Terapia génica de la línea germinal. Se introducen células transgénicas en un óvulo fecundado, asegurándonos así que el gen terapéutico formará parte del código genético de todas las células del cuerpo, incluidas las de la línea germinal futura. Se realiza solo en ratones. Todavía no se ha experimentado en humanos debido a todos los problemas éticos que el uso de estas técnicas plantea