Informe Nacillus Quillaja Cerezos 2011-2012

EVALUACION DEL EFECTO PROTECTOR DE DIFERENTES PRODUCTOS EN LA
EFICACIA DEL CONTROL DE CANCER BACTERIAL (Pseudomonas syringae) EN
CEREZO
Objetivo General
 Se evaluó el efecto protector de la aplicación de diferentes Productos Comerciales
sobre el control de Pseudomonas syringae pv. syringae en Cerezos bajo condiciones
de campo.
Objetivos Específicos
 Se evaluó el Efecto Preventivo (tiempo de protección) de los Productos Comerciales
en el control de Pseudomonas syringae pv. syringae en Cerezos bajo condiciones de
campo.
 Se evaluó el nivel de Incidencia de Pseudomonas syringae pv. syringae en Cerezos
bajo condiciones de campo.
Metodología
a) Ubicación:
El ensayo se llevo a cabo en la Estación Experimental Fitonova, la cual se
encuentra ubicada en el Sector de Purísima, comuna de Talca. Dentro del predio las
aplicaciones de los tratamientos se efectuó a las hileras 5 y 6 del Sector N° 3. En plantas
de cerezo de 2 años, variedad Bing sobre Colt.
b) Época:
El presente ensayo se desarrollo entre brotación y cuaja, comprendiendo los meses
de octubre hasta mediados de diciembre.
c) Diseño Experimental:
Se utilizo un Diseño Factorial de 4 x 3, donde los factores son producto (detallados
abajo) y Momento de Aplicación,(14, 7 y 1 días pre inoculacion). De esta manera se
obtuvieron 16 tratamientos, los cuales consideran 3 repeticiones por plantas por
tratamiento.
d) Descripción del Ensayo:
 Tratamientos:
TESTIGO POSITIVO
DIA 0
DIA 7
DIA 14
SON TODOS IGUALES, NO SE
APLICAN Y SE INOCULAN AL DÍA
15
Strepto Plus 60 g/hl
X1
X2
X3
Bacillus subtilis cepa QST
713 300 g/hl
X1
X2
X3
Nacillus® 150 g/hl
X1
X2
X3
DIA 15
i
i (1,2,3)
i (1
i (1
i (1
Ac. Peracético 200 g/hl
Ac. Peracético + Nacillus
®
X1
X2
X3
i (1
X1
X2
X3
X = APLICACIÓN
1,2,3, FECHA DE APLICACIÓN
i = FECHA DE INOCULACIÓN

Forma y descripción de las aplicaciones: Las aplicaciones se realizaran con bomba
de carretilla, utilizando una presión de 3 bares, considerando un mojamiento de 400
L/ha (0,6 L/planta).

Inoculación de Microorganismos Fitopatógenos: Luego de 24 hrs de aplicados los
últimos tratamientos (momento de aplicación Día 15), se procedió a realizar heridas
mediante el uso de una lija de madera fina, a 2 brotes por planta (uno de cada lado de
la planta), luego de esto se inocularon las plantas por aspersión, de suspensión a una
concentración mínima de 1 x 10 6 UFC/ml del microorganismo fitopatógeno. Se obtuvo
solo un 50% de efectividad en este tipo de inoculación.
Evaluaciones
a) Incidencia de daño en yemas.
A los 7, 15 y 21 días, post inoculación se evaluó el porcentaje de yemas atizonadas,
evaluándose el total de yemas presentes en las ramas a las que se les practico heridas
con lija.
b) Poblaciones epifitas
Setenta y dos horas después de realizada la inoculación, se tomaron 5 yemas por
repetición, las que fueron maceradas en forma separada, en buffer de extracción por 2
horas, luego de lo cual 1 ml fue sembrado en placas Petri con agar B de King y puestas
en incubación por 48 hrs a 25°C, luego de lo cual se determino el porcentaje de yemas
por repetición, con presencia de Pseduomonas syringae.
5. RESULTADOS
Los datos fueron sometidos a test de normalidad y homocedasticidad, siendo la prueba de
Shapiro Wilks no significativa (P= 0.422), por lo tanto normal, así mismos la prueba de
Homocedasticidad de Barllet fue no significativa P= 0.25, por lo tanto se cumplió con el
supuesto de homogeneidad de varianzas, permitiendo la aplicación de ANDEVA, la que
no dio un efecto significativo de los factores tratamiento en la evaluación de los 15 días.
(P= 0.059) y si para momento de aplicación (P< 0.05), sin interacción entre ambos (P=
0.059);io un efecto significativo de los factores tratamiento en la evaluación de los 21
días. (P< 0.01) y momento de aplicación (P< 0.05), sin interacción entre ambos (P< 0.01).
Pese a la no significancia del Andeva a los 15 días, se presentan los datos por la fuerte
tendencia que presentan, así en el grafico 1 se aprecia, que los mejores tratamientos,
serian las aplicaciones de Nacillus en cualquiera de las fechas, independiente de una
aplicación previa de acido peracético, pese a lo cual se aprecia una tendencia a que la
adición del acido incrementa las diferencias entre Nacillus y el antibiótico. Los
tratamientos compuestos por Strepto Plus y Bs QST, solo presentando diferencias
significativas con el control cuando fueron aplicados un día previo a la inoculación no
existiendo diferencias en las otras fechas de aplicación.
Incidecnia (yemas atizonadas %)
25
a
20
a
a
a
a
a
15
a
ab ab
bc
b
b
bc
10
bc
bc
bc
bc
c
5
0
1 dia
7 dias
15 dias
Días de aplicación previo a inoculación.
Testigo positivo
Ac. per.
Strepto Plus
Bs QST
Nacillus
Nacillus + Ac. Per.
Grafico 1. Incidencia %, de daño 15 días post inoculación, de Pseudomonas syringae pv.
syringae en yemas de plantas de cerezo bajo distintos momentos y tratamientos de
control (P= 0.059).
Así tenemos que el mayor porcentaje de control en la evaluación 15 días después de
inoculación, lo tienen los tratamientos con Nacillus ®, independiente de la adición de Ac.
Peracetico, manteniendo niveles de control sobre el 60% con diferencia de 1 día entre
aplicación e inoculación y no menores al 50%, con diferencia de 15 días.
100
a
80
a
a
a
Control %
ab
b
60
abc
b
b
bc
40
c
c
cd
20
d
d
0
1 dia
7 dias
15 dias
Días entre aplicacion e inoculación
Ac. per.
Strepto Plus
Bs QST
Nacillus
Nacillus + Ac. Per.
Grafico 2. Porcentaje de control 15 días post inoculación Pseudomonas syringae
pv. syringae en yemas de plantas de cerezo bajo distintos momentos y tratamientos de
control (P=0.059).
En el grafico 3 (evaluación a los 21 días), se aprecia que las plantas testigos incrementan
en mayor medida su nivel de incidencia respecto a la evaluación previa, a diferencia del
resto de los tratamientos. Al día después de la inoculación solo el tratamiento de acido
per acético no presento diferencias significativas con el testigo, mientras que los mejores
tratamientos, fueron ambos consistentes en Nacillus ®, con y sin acido per acético,
seguidos por el tratamiento químico basado en aplicaciones de estreptomicina y luego por
Bacillus QST 713. A los 7 días se mantiene la misma tendencia, mientras que con
aplicaciones 15 días previo a inoculación, solo los tratamientos basados en Nacillus ®, y
tratamiento químico, fueron capaces de diferenciarse del testigo.
Por lo tanto, se puede señalar que el acido per acético solo no entrega protección
residual; Bacillus QST 713 logra niveles de protección significativos de hasta 7 días,
mientras que aplicaciones de estreptomicina, Nacillus ® y Nacillus ® mas acido
peracético, entregan protección hasta 15 días, existiendo una tendencia a que la
combinación de Nacillus ® + acido peracético mejore el desempeño del primero, pero sin
diferencias significativas con Nacillus ® solo.
Incidecnia (yemas atizonadas %)
70
a
60
a
a
50
ab
a
ab
ab
b
b
40
bc
bc
c
30
c
cd
d
b
bc
c
20
10
0
1 dia
7 dias
15 dias
Días de aplicación previo a inoculación
Testigo positivo
Ac. per.
Strepto Plus
Bs QST
Nacillus
Nacillus + Ac. Per.
Grafico 3. Incidencia %, de daño 1 días post inoculación Pseudomonas syringae pv.
syringae en yemas de plantas de cerezo bajo distintos momentos y tratamientos de
control (P< 0.05).
Los porcentajes de control con 1 día de diferencia entre aplicación e inoculación, se
mantuvieron cercanos al 80% para todos los tratamientos, no existiendo grandes
diferencias entre ellos, a los 7 días, los tratamientos con Nacillus ® y Strepto Plus, bajan a
cerca de un 40% sin diferencias entre ellos, pero superiores a Bacillus QSt y Ac. Per
acético, y sin diferencias con los niveles de control a los 15 días, mientras que ac.
Peracético y Bacillus QST, siguen bajando.( Grafico 4).
120
a a
100
a
a
a
Control %
80
b
60
b
bc
b
b
bc
40
cd
bc
cd
d
20
d
0
1 dia
7 dias
15 dias
Días entre aplicacion e inoculación
Ac. per.
Strepto Plus
Bs QST
Nacillus
Nacillus + Ac. Per.
Grafico 4. Porcentaje de control 21 días post inoculación Pseudomonas syringae
pv. syringae en yemas de plantas de cerezo bajo distintos momentos y tratamientos de
control (P< 0.05).
Al evaluar el efecto sobre poblaciones epifitas (grafico 3), todos los tratamientos muestran
una disminución significativas (P< 0.059, con aplicaciones 1 día pre inoculación, todos los
tratamientos mostraron efecto significativo, siendo el acido peracético el único con
presencia de poblaciones epifitas, diferenciándose tanto del testigo, como del resto de los
tratamientos. En aplicaciones a los 7 días, solo el manejo con antibiótico y los
tratamientos con Nacillus® mostraron diferencias con el testigo, mientras que a los 15
días, solo los tratamientos con Nacillus ® tienen efecto significativo sobre las poblaciones
epifitas en las yemas.
Poblaciones epifitas (% yemas con presencia)
120
a
a
ab
ab
a
a a
100
80
ab
60
b
b
b
40
20
0
1 dia
7 dias
15 dias
Días de aplicación previo a inoculación
Testigo positivo
Ac. per.
Strepto Plus
Bs QST
Nacillus
Nacillus + Ac. Per.
Grafico 3 Incidencia (%) de poblaciones epifitas de Pseudomonas syringae pv. syringae
en yemas de plantas de cerezo bajo distintos momentos y tratamientos de control (P<
0.05).
Conclusiones
Todos los productos evaluados, mostraron un efecto de control tanto sobre el daño
causado, como sobre las poblaciones epifitas de Pseudomonas syringae pv. syringae,
cuando existía una diferencia de un día entre momento de aplicación e inoculación del
patógeno.
Con diferencias de 7 y 15 días entre aplicación e inoculación, solo los tratamientos
consistentes en Strepto Plus y Nacillus ® con o sin ac. Peracético, tiene un efecto de
control sobre daño como poblaciones epifitas de Pseudomonas syringae pv. syringae.
Dado que el presente ensayo considero la generación de heridas e inoculación del
patógeno en forma artificial, se considera que el nivel de control de Nacillus ® con y sin
acido peracético y Strepto Plus, logra niveles de protección aceptables por 15 días, en el
periodo de brotación a floración, en ausencia de lluvias, condiciones en las que se
desarrollo el ensayos.