FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS EN SISTEMAS DE AGUA DULCE MSc. Lizet De León DINAMA-DECA Facultad de Ciencias Universidad de la República - Uruguay [email protected] FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS EN SISTEMAS DE AGUA DULCE INTRODUCCIÓN Cianobacterias. Floraciones algales BIOLOGÍA Morfología (formas y tamaños celulares, niveles de organización). Fisiología (reproducción, alimentación, crecimiento). Taxonomía: los cuatro grupos y sus características distintivas. Principales géneros que desarrollan floraciones ECOLOGÍA Factores que favorecen y controlan su desarrollo. GESTIÓN Monitoreo de cianobacterias: Programas de monitoreo. Técnicas de muestreo en agua, conservación, análisis cualitativo, cuantitativo, toxicológico. Medidas de mitigación. CASOS DE ESTUDIO CIANOBACTERIAS Cyanophyta o Cyanophycea; (Reino MONERA=procariotas), algas verde-azules, bacterias fotoautótrofas con clorofila a (y b) integrantes del fitoplancton consideradas dentro de las microalgas por los ficólogos Origen de la vida en la Tierra • 3.500 millones de años…? • 2.700 millones? Eucariotas Suficiente O2? fósiles de cianobacterias CIANOBACTERIAS 3600 ----- 2700 m.años 1500 m.años Formación del planeta, 4.600 m.años Son los seres vivos más antiguos y por lo tanto las especies que existen son aquellas seleccionadas por superar las dificultades de la evolución ESTROMATOLITOS REGISTROS ACTUALES DE CIANOBACTERIAS FOSILES (Líneas claras) Australia, Bahamas, México FITOPLANCTON: (Reinos MONERA y PROTISTA), organismos fotoautótrofos, microalgas procariotas y eucariotas, de vida libre en la columna de agua COMPOSICIÓN DEL FITOPLANCTON Tamaños, fisiología y formas muy variados picoplancton (0.2-2m) unicélulas y bacterias nanoplancton (2-20 m) unicélulas y protistas microplancton (20-200 m) gdes células y colonias mesoplancton (200m -2mm) grdes colonias Imagen de fitoplancton al microscopio Foraciones algales o “blooms” • Incremento exponencial de la biomasa algal en un período corto de tiempo (horas a días) • No hay un “valor” que indique cuando hay una floración, es relativo al grupo y especie de organismo dominante • La OMS establece valores “guía” que orientan para la gestión de recursos acuáticos destinados al uso humano LAS FLORACIONES ALGALES TIENEN DIFERENTES CARACTERÍSTICAS, SEGÚN EL GRUPO DE ALGAS Y LAS ESPECIES QUE LA COMPONEN Dinoflagelados Cianobacterias Diatomeas Cianobacterias Gentileza de Luis, Concordia. Organismos fitoplanctónicos que desarrollan floraciones Chrysophyceae Dinophyceae Cyanophyceae Chlorophyceae FLAGELADOS Cryptophyceae FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS DE DIVERSOS GÉNEROS Y FORMAS (COLONIALES Y FILAMENTOSAS) SUSTITUCIÓN DE FLORACIONES ALGALES DE DIVERSOS GRUPOS BIOLOGÍA DE LAS CIANOBACTERIAS MSc. Lizet De León DINAMA-DECA Facultad de Ciencias Universidad de la República - Uruguay [email protected] CIANOBACTERIAS: ORGANISMOS PROCARIOTAS FOTOSINTETIZADORES AERÓBICOS SIMILITUD con BACTERIAS •Microscópicos de vida libre •Sin núcleo ni organelos •Pared tipo Gram-negativa •Reproducción por fisión •Formas simples (cocos, cilindros, ovoides) •Microscópicos, individuales o coloniales •Clorofila a y Pigmentos fotosintetizadores •Pigmentos en tilacoides con fotosistema I •Fotosíntesis con liberación de Oxígeno SIMILITUD con ALGAS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS Tamaño Forma Color Organización Diferenciación celular Diferenciación colonial CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS TAMAÑO celular < 20 µm 5 um diámetro 20 um largo Colonias de 1-5 cm diámetro UNIDAS por matriz gelatinosa, vaina, mucílago (polisacáridos), que les permite alcanzar tamaños que las hacen visibles a simple vista (grumos, bolitas, hilos) <1 um largo CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS Células con apariencia homogénea Células con apariencia granulosa Sin vesículas de gas Con vesículas de gas CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS filamentosas (1D), ORGANIZACIÓN en colonias planas (2D), globosas (3D) Filamentos simples o uniseriados con comunicación entre células vecinas CELULAS VEGETATIVAS homogéneas y ESPECIALIZADAS diferenciadas para fijación de N (Heterocistos) y resistencia (Acinete, Akinete) CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS CELULAS DIFERENCIADAS Heterocyto: célula vegetativa modificada para la fijación de N atmosférico en condiciones de deficiencia de N en al agua Acinete: célula modificada para almacenar moléculas vitales que permitan la sobrevivencia en condiciones adversas CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS REPRODUCCIÓN POR FISIÓN BINARIA ALTA TASA INDIVIDUAL DE CRECIMIENTO ALMACENAMIENTO DE SUSTANCIAS NUTRITIVAS CONTROL DE SU POSICIÓN EN LA COLUMNA DE AGUA PIGMENTOS: CLOROFILA A, FICOCIANINAS, FICOERITRINAS SINTESIS DE SUSTANCIAS PROTECTORAS DE RADIACIÓN UV SINTESIS DE MOLECULAS AROMÁTICAS y TOXICAS (¿ALELOPATIA?) CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS REPRODUCCIÓN POR FISIÓN BINARIA ALTA TASA INDIVIDUAL DE CRECIMIENTO Formación de filamentos nuevos por fragmentación de los viejos en sitios “marcados” por células muertas o necridios. Los nuevos filmentos llamados hormogonios crecen por fisión binaria de las células CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS ALTA TASA INDIVIDUAL DE CRECIMIENTO ALMACENAMIENTO DE SUSTANCIAS NUTRITIVAS Cinética eficiente de incorporación de C inorgánico (crecimiento en condiciones alcalinas) Fijación de Nitrógeno atmosférico en condiciones de baja concentración Incorporación y almacenamiento de Fósforo en partículas de polifosfato (consumo lujurioso), que utilizan en condiciones ambientales deficientes del nutriente Formación de células de resistencia que eclosionan en condiciones favorables (meses en estado latente) Células de pequeño tamaño y alta tasa de división, favorecen la alta tasa de crecimiento poblacional Estas características de crecimiento de las cianobacterias son muy estudiadas y utilizadas en biotecnología, ya que son importante fuente de sustancias alimenticias, farmacológicas y de importancia ecológica CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS REQUERIMIENTOS DE NUTRIENTES EN PROPORCIÓN A LA COMPOSICIÓN CELULAR RELACIÓN DE REDFIELD: 106C/16N/1P • Almacenan o fijan sustancias nutritivas, con eficiencia • Alto consumo de CO2 incremento del pH • Fijación de N2 atmosférico Nitrogenasa • Limitación por fósforo / Consumo lujurioso de P(gránulos de polifosfato) CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS CONTROL DE SU POSICIÓN EN LA COLUMNA DE AGUA •Vacuolas •Mucílago •Organización espacial ACUMULADAS, Cianobacterias vacuoladas: 1- en algún estadio o tipo de célula 2- en todo el ciclo de vida DISPERSAS Velocidad de migración ≤ 3 m h-1 CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS AERÓTOPOS: Conjunto de vesículas o vacuolas de gas VACUOLAS DE GAS Sistema de microtúbulos que se unen o colapsan de acuerdo con la presión de turgencia en la célula CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS VAINA MUCILAGINOSA Acumulación – colonias haces Flotación No predación Adhesión de otros organismos Microorganismos patógenos CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS PIGMENTOS: CLOROFILA A, FICOCIANINAS, FICOERITRINAS CLOROFILA A: principal pigmento Carotenoides (B-caroteno y Zeaxantina) C-Ficoeritrina 495 a 570nm absorbe luz azul (430 -400 a 500 nm) C-Ficocianina (615-620 nm) Alloficocianina 650 a 670nm CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS La CLOROFILA A se encuentra en los Tilacoides Los Tilacoides están protegidos por Ficobilisomas Los Ficobilisomas están formados por moléculas de pigmentos accesorios: FICOCIANINAS, FICOERITRINAS C-Ficoeritrina 495 a 570nm Alloficocianina (650 a 670nm) C-Ficocianina (615-620 nm) CLOROFILA A: CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS SÍNTESIS DE SUSTANCIAS PROTECTORAS DE RADIACIÓN UV MAAs Carotenos Aminoácidos tipo Micosporinas Sustancias que absorben radiación UV ( principalmente entre 310-360 nm) protegiendo genoma y estructuras moleculares de daños por radiación La producción de los pigmentos y moléculas protectoras es gradual en el tiempo y está determinada por la “historia” de los organismos que las producen. Las cianobacterias tienen una larga historia de resistencia a la radiación UV (al menos, 2.500 millones de años!) CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS SINTESIS DE MOLECULAS AROMÁTICAS Y de MOLÉCULAS TOXICAS (¿ALELOPATIA?) Producción de metabolitos secundarios aromáticos: Geosmina (olor a “gamexán”) y 2 MetilIsoBormeol (2MIB) (olor a tierra mojada, humedad) Inhibición del crecimiento de algas competidoras --- Alelopatía Demostrada sobre otras cianobacterias y diversos grupos de Eucariotas Producción de sustancias antibióticas y fungicidas (Falch et al., 1995; Chetsumon et al., 1998; Piccardi et al., 2000) Inhibición y eliminación de zooplancton predador. Se ha demostrado la producción de toxinas estimulada por la presencia de zooplancton predador (Jang et al., 2003 y 2007) Eliminación de la BIOTA del Período Fanerozoico (570-60 m.a.) (Castle & Rodgers, 2009. Hypothesis for the role of toxin-producing algae in Phanerozoic mass extinctions based on evidence form the geologic record and modern environments. Environmental Geosciences. 16(1):1-23 CARACTERÍSTICAS FISIOLÓGICAS de las CIANOBACTERIAS PEPTIDOS CICLICOS HEPATOTOXINAS MCYS, Nodularina, TIPO DE TOXINAS ALCALOIDES NEUROTOXINAS DERMOTOXINA HEPATOTOXINA ANTX-a, ANTX-s, SXT Aplisiatoxina, Lyngbiatoxina Cilindrospermopsina (CYN) LIPOPOLISACÁRIDOS (LPS) IRRITANTES Intoxicaciones letales por cianotoxinas en animales País Animal Patologia Cianobacteria Referencia Argentina Australia Australia Canada Canada Finlandia Finlandia Noruega Inglaterra Escocia Escocia USA vacunos ovinos ovinos vacunos aves perros aves vacunos ovejeros perros peces perros hepatotox hepatotox neurotox neurotox neurotox hepatotox hepat.-branq. hepatotox hepatotox neurotox branquias neurotox M. aeruginosa M. aeruginosa A. circinalis A. flos-aquae A. flos-aquae N. spumigena P. agardhii M. aeruginosa M. aeruginosa Oscillatoria sp M. aeruginosa A. flos-aquae Odriozola et al., 1984 Jackson et al., 1984 Negri et al., 1995 Carmichael & Gorham, 1978 Pybus & Hobson, 1986 Perrson et al., 1984 Erikson et al., 1986 Skulberg, 1979 Pearson et al., 1990 Gunn et al., 1992 Bury et al., 1995 Mahmood et al., 1988 Chorus & Bartram, 1999 Intoxicaciones letales y agudas por cianotoxinas en humanos Río Ohio, 1931. 1er reporte de gastroenteritis (Tisdale, 1931) Brasil, 1985. 2000 casos de gastroenteritis, 88 letales por agua potable (Teixeira et al., 1993). Brasil, 1996. 130 pacientes dializados presentaron patologías hepáticas, 60 murieron en 10 meses (Pouria et al., 1998) Reino Unido, 1989. 20 casos de intoxicación aguda durante canotaje (Turner et al., 1990) Australia, 1995. 852 casos de gastroenteritis, alergias, fiebre, úlceras dérmicas, durante 7 días en aguas de recreación (Pilotto et al., 1997) ECOLOGÍA DE LAS CIANOBACTERIAS MSc. Lizet De León DINAMA-DECA Facultad de Ciencias Universidad de la República - Uruguay [email protected] Floración de cianobacterias: rápido incremento de la biomasa algal (horas a días) DESARROLLO DE UNA FLORACIÓN CRECIMIENTO INICIAL CRECIMIENTO EXPONENCIAL CRECIMIENTO ESTACIONARIO SENESCENCIA ¿DONDE PUEDEN VERSE? ¿DONDE PUEDEN VERSE? PERÍODO DEL AÑO MORFOLOGÍA DE LA CUBETA TRANSPARENCIA DEL AGUA TURBULENCIA O ESTABILIDAD DE LA COLUMNA DE AGUA APORTES PUNTUALES DE NUTRIENTES DIRECCIÓN E INTENSIDAD DEL VIENTO TIEMPO DE RESIDENCIA Distribución en la columna de agua de floraciones de cianobacterias ACUMULATIVA En superficieAguas calmas ACUMULATIVA En profundidadAguas estratificadas DISPERSIVA Toda la columna Aguas mezcladas De León & Bonilla, 2009 Floraciones dispersivas en diferentes cuerpos de agua 0.5 m Floraciones acumulativas en diferentes cuerpos de agua De León & Bonilla, 2009 Eutrofización • Un río, un lago o un embalse sufren eutrofización cuando sus aguas se enriquecen con nutrientes. Los nutrientes aumentan la productividad de los sistemas acuáticos. Sin embargo, el aporte constante de nutrientes estimula el crecimiento de productores primarios (algas y plantas), que van acumulando biomasa (y disminuyendo la biodiversidad) en niveles excesivos. Cuando esta alta biomasa muere y se degrada, consume el oxígeno del agua, con las conocidas consecuencias de mal olor y sabor, mortandad de organismos y pérdida de la calidad. • El consumo de gran cantidad del oxígeno disuelto hace que las aguas dejen de ser aptas para la mayor parte de los seres vivos, resultando un sistema acuático empobrecido. • El grado de eutrofización puede medirse a través de la concentración de algunos parámetros (Pt, Clorofila, Transparencia), o de relaciones entre ellos (NT/PT; Clorofila/PT), o presencia de bioindicadores (floraciones algales, hidrófitas). oligotrófico PRODUCTIVIDAD DIVERSIDAD La Eutrofización es un proceso natural en la escala geológica. El incremento de la productividad del ecosistema acuático, favorecidos por los aportes de nutrientes adsorbidos a los sedimentos transportados desde la cuenca hidrográfica (aportes alóctonos) y por la mineralización de la materia orgánica que se degrada en el propio ecosistema, contribuyen a incrementar la tasa de sedimentación y disminuir el volumen de la columna de agua mesotrófico eutrófico Las floraciones algales representan un síntoma de eutrofización en los sistemas acuáticos ¿ A QUE SE DEBE LA APARICIÓN DE FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS? Las actividades realizadas en la cuenca hidrográfica tienen efectos directos en la calidad del agua. • La importancia de la cuenca hidrográfica sobre la calidad del agua se debe a que suelo y agua forman un sistema en constante interacción. • La Gestión de Cuenca es un método de trabajo ordenado para el conocimiento de la cuenca hidrográfica y la preservación de los recursos hídricos CICLO DEL AGUA Condensación Precipitación Nubes de lluvia Emisiones gaseosas CUENCA HIDROGRAFICA Lluvia ácida Evaporación Precipitación en el océano Escorrentía= lavado de tierras y trasnporte de minerales Infiltracion y Percolación Vertidos urbanos sin tratamiento Movimientos desde la cabecera (lentos) Condensación Transpiración De plantas Evaporación Precipita ción en el océano Precipitación Evaporación Desde el océano Cuenca alta Infiltracion y Percolación Escorrentía superficila (rapida) Cuenca media Reserva océanica Subcuenca Movimientos desde la cabecera (lentos) microcuenca Definir las unidades territoriales en la cuenca hidrográfica facilita la gestión organizada y eficiente Cuenca baja CUENCA HIDROGRAFICA AUMENTO DE LA POBLACION FLORACIONES ALGALES Aumento de las actividades productivas Agricultura no sustentable Pastoreo excesivo Deforestación/forestación INDUSTRIALIZACION USO INDISCRIMINADO DEL AGUA Acidificación Aumento del material en suspensión Contaminación con sustancias químicas Disminución del volumen y nivel de agua EUTROFIZACION FUENTES DE NUTRIENTES ALOCTONOS AGUAS RESIDUALES DOMESTICAS AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES AGUAS DE ESCORRENTIA AGRICULTURA Y GANADERIA NyP FUENTES DE NUTRIENTES AUTOCTONOS RESTOS VEGETALES EXCRESIONES DESCOMPOSICION DE MATERIA ORGANICA RESTOS ANIMALES Además de los factores ambientales y químicos asociados a las actividades en la cuenca hidrográfica, hay otros factores propios del sistema hídrico: •ESTRATIFICACIÓN Y MEZCLA DE LA COLUMNA DE AGUA •TIEMPO DE RESIDENCIA DEL AGUA •TEMPERATURA •TRANSPARENCIA ESTABILIDAD DE LA COLUMNA DE AGUA VIENTOS < 3m/s estratificación Termoclina = Epilimnio Mesolimnio Hipolimnio VIENTOS > 3 m/s mezcla Celdas de Langmuir convergencia/divergencia Síntesis Nutrientes Luz y Calor >20ºC Inóculo oo oo o oo o o oo o o oo o o o oo oo oo o o oo o oo o oo o oo o oo o Olor y sabor Mortandad Toxicidad oo o o Estabilidad NyP NyP OD Anoxia + Carga interna EFECTOS AMBIENTALES > BIOMASA ALGAL Competencia por luz > BIOMASA BACTERIANA Riesgo de organismos patógenos TOXICIDAD Alelopatia e intoxicaciones MORTANDAD de ORGANISMOS ACUÁTICOS EFECTOS SANITARIOS CONSUMO, CONTACTO, INHALACIÓN Presencia de organismos patógenos Intoxicaciones leves (molestias) a agudas Gastos de asistencia sanitaria Perjuicio a nivel de Turismo, pesca, deportes náuticos EFECTOS ECONÓMICOS Problemas de ESTETICA aspecto olor Caída del valor inmobiliario en zonas afectadas Interferencia con el uso del agua Sanitario Recreativo Productivo EFECTOS ECONÓMICOS Perjuicio al turismo, actividades deportivas y recreativas, costos derivados de atención sanitaria, pérdidas de producción en acuicultura y ganadería, caída valor inmobiliario en áreas afectadas Las floraciones de cianobacterias afectan las características de los sistemas acuáticos y determinan efectos negativos a nivel SANITARIO, AMBIENTAL y ECONÓMICO. La PREVENCIÓN, la PREVISIÓN y la REMEDIACIÓN son las medidas que contrarrestan o mitigan dichos efectos. Sin embargo, nada es posible sin el conocimiento adecuado de las particularidades de los sistemas afectados (agua y suelo), obtenidos en adecuados programas de MONITOREO GESTIÓN DE LOS RECURSOS HÍDRICOS CON CIANOBACTERIAS MSc. Lizet De León DINAMA-DECA Facultad de Ciencias Universidad de la República - Uruguay [email protected] MITIGACIÓN • DISMINUCIÓN DE APORTES DE NUTRIENTES • SUSTRACCIÓN DE BIOMASA (VEGETAL) ACUÁTICA • MANTENIMIENTO DE LOS SUELOS SIN EROSIÓN • MANEJO DE LOS TIEMPOS DE RESIDENCIA DEL AGUA EJEMPLO DE REMEDIACION Río con evidencia de eutrofización El mismo río luego de 10 años “sin” aporte de fósforo Bonilla y col., 2009 Medidas aplicadas a escala local para la mitigación de floraciones de cianobacterias Bonilla y col., 2009 Medidas recomendadas en aguas recreativas con floraciones de cianobacterias INFORMACIÓN BÁSICA para evitar riesgos sanitarios en aguas de recreación de acuerdo con recomendaciones de OMS NIVEL DE RIESGO RIESGO SANITARIO MEDIDAS A TOMAR 20.103 cél.ml-1 de cianobacterias o 10 ug l-1 clorofila a con dominancia de cianobacterias Efectos y molestias de corta duración, si las hay. Indicadores (carteles, folletos). Informar a autoridades. 105 cél.ml-1 de cianobacterias o 50 ug l-1 clorofila a con dominancia de cianobacterias Efectos de corta duración, molestias o síntomas más severos de larga duración Restringir los baños, controlar si se forma espuma, indicadores e información a autoridades y usuarios Formación de espumas de cianobacterias (blooms) Riesgo de Evitar contacto con intoxicación aguda y/o espuma, prohibición de letal baños, información a autoridades y usuarios Chorus & Bartram, 1999) GESTIÓN DE RECURSOS HÍDRICOS CON FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS INFORMACIÓN BÁSICA CONOCIMIENTO DEL SISTEMA A MONITOREAR PRESENCIA o no de floraciones PERÍODO de aparición y desaparición de floraciones DURACIÓN de los eventos SITIOS donde se observan PATRÓN DE APARICIÓN en el tiempo y en el espacio SOBREVIVENCIA a condiciones adversas GESTIÓN DE RECURSOS HÍDRICOS CON FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS Sitios de observación RECOMENDACIÓN: INSPECCIONAR PREVIAMENTE EL SISTEMA DITRIBUCIÓN HORIZONTAL: superficie del lugar, perímetro, accidentes costeros, etc. DISTRIBUCIÓN VERTICAL: profundidad del sistema (profundo o somero), estratificación o mezcla, actividades que alteren la estructura vertical, acción del viento REPETIBILIDAD DE LA OBSERVACIÓN: Considerar que el registro se debe repetir con frecuencia y regularidad al seleccionar el sitio de observación GESTIÓN: monitoreo Propuesta de estrategias de muestreo de acuerdo con el uso del sistema acuático a monitorear. Tomado de Kruk et al., 2009 GESTIÓN: monitoreo La CAPACIDAD TÉCNICA Y ANALÍTICA determinará el grado de información alcanzado 1- monitoreo de parámetros ambientales (mensual o quincenal) pH nutrientes temperatura Concentración de OD 2- inspección visual (diaria, semanal o quincenal) Datos de campo Fecha y hora Clima: viento, sol, nubes, etc. Altura del agua Corrientes Turbiedad 3- monitoreo de desarrollo masivo de cianobacterias (al menos quincenalmente) Muestras cualitativas cuantitativas EXPERTO clorofila microscopio fotómetro filtros 4- monitoreo de cianotoxinas bioensayos Inmunoensayo (lector ELISA) Bioquímico (HPLC) GESTIÓN: monitoreo PLANILLA DE CAMPO (ejemplo) Fecha Estación (Nombre, N°, característica) Proyecto Observador Puente viejo Paso cangrejos Hora Luz (Soleado/nublado/par cialmente soleado) Viento (intensidad, dirección, duración) Hidrología (Corriente, estancada, transpar., turbia, profund.) Floración Presencia/ausencia Sol intenso Brisa del N Llano (50cm), estancado Yerbas dispersas en la orilla “S” no Olor Si /no / a que? Observaciones Niños jugando pesca Peces muertos GESTIÓN: vigilancia Bonilla y col., 2009 GESTIÓN: vigilancia Bonilla y col., 2009 Muestreo de floraciones de cianobacterias en programas de monitoreo y/o vigilancia EQUIPAMIENTO PARA SALIDA DE CAMPO Planilla de campo Termómetro Disco Secchi Botellas plásticas nutrientes clorofila fitoplancton Conservadora Balde + cuerda Cámara de fotos GPS PLANILLA DE CAMPO PARA PARÁMETROS AMBIENTALES Muestreo de floración red de plancton botellas plásticas cualitativas botellas plásticas cuantitativas solución Lugol/formol GUANTES AGUA LIMPIA! Muestreo para análisis cualitativo, cuantitativo y toxicológico Muestreo para análisis cualitativo, cuantitativo y toxicológico •Escala de muestreo •Uso del sistema •Ubicación de las estaciones •Frecuencia de muestreo •Horario de muestreo •Parámetros •Instrumentos •Preservación de muestras •Actividades al regreso Muestreo para análisis cualitativo, cuantitativo y toxicológico La presencia de floraciones de cianobacterias potencialmente tóxica requiere ciertos cuidados en la operativa de muestreo Muestreo para análisis cualitativo, cuantitativo y toxicológico Gentileza Daniel Sienra, IMM DATO DE CAMPO + DATO LABORATORIO = “REGISTRO” Muestreo para análisis cualitativo, cuantitativo y toxicológico IDENTIFICACIÓN Gentileza Daniel Sienra, IMM CONTEO CLOROFILA TOXICIDAD DATO DE CAMPO + DATO LABORATORIO = “REGISTRO” Análisis cuali y cuantitativo Kruk y col., 2009 ANALISIS CUALITATIVO: CLASIFICACIÓN TAXONOMICA ORDEN CHROOCOCCALES FAMILIA Synechoccaceae Merismopediaceae Microcystaceae ORDEN OSCILLATORIALES FAMILIA Phormidiaceae Pseudanabaenaceae ORDEN NOSTOCALES FAMILIA Nostocaceae Rivulariaceae ORDEN STIGONEMATALES, actualmente situado como Familia de Nostocales ANALISIS CUANTITATIVO ANALISIS TOXICOLÓGICO Métodos utilizados para la determinación de cianotoxinas. Cuali: cualitativo, Cuanti: cuantitativo, S: sensibilidad, P: precisión. SinPC: no requiere pre-concentración, PC: requiere pre-concentración. Modificado de Brena&Bonilla, 2009. Tipo de cianotoxina Método Resultados Microcystinas y nodularinas Bioensayo con ratón Mide equivalente de Muchos animales toxicidad Ensayo inhibición de proteinfosfatasa Suma total de equivalentes de toxicidad Inmunoensayo ELISA Suma total de microcystinas Falsos positivos o negativos HPLC (+ UV, + MS) Identifica toxinas con estándares disponibles Costoso y parcial Identifica toxinas con estándares disponibles Costoso Cylindrospermopsina HPLC Desventajas ANALISIS TOXICOLÓGICO Métodos utilizados para la determinación de cianotoxinas. Cuali: cualitativo, Cuanti: cuantitativo, S: sensibilidad, P: precisión. SinPC: no requiere pre-concentración, PC: requiere pre-concentración. Modificado de Brena&Bonilla, 2009. Tipo de cianotoxina Método Resultados Desventajas Saxitoxina Bioensayo con ratón Mide equivalente de toxicidad Muchos animales Ensayo neurobiastoma Suma total de equivalentes de toxicidad (STX) Inmunoensayo ELISA Suma total de microcystinas Falsos positivos o negativos HPLC (+ UV, + MS) Identifica toxinas con estándares disponibles Costoso y parcial Anatoxina a/ Biensayo Homoanatoxina a en ratón Anatoxina a-S ELISA Identifica toxinas con estándares disponibles HPLC GC Biensayo en ratón ELISA Baja disponibilidad estándares Baja disponibilidad kits ¡MUCHAS GRACIAS! CASOS DE ESTUDIO EN URUGUAY MSc. Lizet De León DINAMA-DECA Facultad de Ciencias Universidad de la República - Uruguay [email protected] Red hidrográfica del Uruguay EMB. SALTO GRANDE SOBRE EL RIO URUGUAY Salto Grande Bonete SISTEMA DE EMBALSES EN CADENA SOBRE EL RIO NEGRO Palmar Baygorria Tem Con 20 TIEMPO DE RESIDENCIA y FLORACIONES ALGALES 10 0 E E F M A MY S N D1 D2 E F MZ 4e+5 1500 2e+5 1000 200 3e+4 3e+4 2e+4 2e+4 1e+4 5e+3 0 150 100 50 0 N D E E F M A MY S N D1 D2 E F MZ 5e+5 200 6 TR Abundancia 60 5 8e+5 4e+5 7e+5 3e+56e+5 4 40 Abundancia NO3 PO4 SiO2 100 20 5e+5 2e+5 3 2 50 1 00 4e+5 1e+53e+5 2e+5 0 1e+5 0 NN D EE EE FM M S A MY N SD1 N D2 D1 D2 E1 EF 0 F MZ MZ 400 3e+6 2e+6 2e+6 8e+5 TR Abundancia 300 1e+5 6e+4 4e+4 100 2e+4 0 0 N D E E F verano M A MY S N D1 D2 E1 F inv-prim. verano MZ PALMAR 8e+4 200 Abundancia fitoplancton (cél.ml-1) 150 BAYGORRIA Nutrientes (µg l-1) Tiempo de Residencia (d) 80 Tiempo de residencia (d) Abundancia fitoplancton (cél.ml-1) 6e+5 Sílice reactivo (mg l-1) Tiempo de Residencia (d) 2000 Abundancia (cél.ml-1) Las floraciones estivales en los tres sistemas, coinciden con períodos de mayor tiempo de residencia 8e+5 TR Abundancia BONETE 2500 Abundancia fitoplancton (cél.ml-1) D Abundancia de Fitoplancton (cél.ml -1) N Embalse de Salto Grande (Argentina-Uruguay) Río Uruguay N Quirós & Luchini (1982): diatomeas dominantes, excepto por blooms de cianobacterias en los brazos Gualeguaycito y Mandisoví. Berón (1990). Cauce principal (95 % input)=Rio brazos (<5% input) = lagos Nutrientes no son limitantes SST limitan crecimiento algal O’Farrell & Izaguirre (1994) La riqueza del fitoplancton disminuyó con la construcción del embalse De León & Chalar (2005) Dos estaciones marcadas por la composición del fitoplancton. Crecimiento de cianobacterias limitado por turbidez TIEMPO DE RESIDENCIA y FLORACIONES ALGALES Menor abundancia de algas en períodos de bajo TR 1.2e+5 TR Fitop. total 70 1.0e+5 60 8.0e+4 50 6.0e+4 40 4.0e+4 30 2.0e+4 20 Abundancia (cél.ml-1) Tiempo de Residencia (d) 80 0.0 10 fe b0 2 m ar 02 ju l0 1 oc t0 1 di c0 1 en e0 2 ab r0 1 fe b0 1 m ar 01 en e0 1 S A L T O G R A N D E F IT O _ T O T= -9 6 9 4 .+ 9 1 2 .7 7 *T R C o rre la tio n : r= .6 3 2 5 8 1 .4 e 5 1 .2 e 5 1 e 5 8 0 0 0 0 6 0 0 0 0 FITO_TOT Floraciones algales correlacionadas con TR se di c t0 0 00 0 4 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 -2 0 0 0 0 -1 0 0 1 0 2 0 3 0 T R 4 0 5 0 6 0 7 0 8 0 R e g re s s io n 9 5 % c o n fid . ¿ CUAL HA SIDO EL PROCESO DE CONOCIMIENTO SOBRE LAS FLORACIONES DE CIANOBACTERIAS POTENCIALMENTE TÓXICAS EN URUGUAY? MONITOREO CAPACITACION BASE DE DATOS ALERTA TEMPRANA MODELOS Y PREVISION CONOCIMIENTO PREVIO FUNCIONAMIENTO DEL SISTEMA Características físicas Características químicas FLORACIONES ALGALES Especies dominantes Características biológicas Actividades en la cuenca Toxicidad Condiciones ambientales Condiciones controladoras MEDIDAS PREVENTIVAS Floración Sin análisis toxicidad Fuentes de agua potable R. del BONETE Toxicidad comprobada BAYGORRIA PALMAR DESCONOCIMIENTO TEMOR MEDIDAS ERRONEAS CAPACITACIÓN PARA LA GESTIÓN Y LA INFORMACIÓN PÚBLICA FUNCIONAMIENTO DEL SISTEMA COMUNIDAD ALGAL RECOMENDACIONES PLANES DE PREVENCIÓN Y/O CONTINGENCIA RESULTADOS DE LA COLABORACIÓN INTERINSTITUCIONAL 1er. ENCUENTRO NACIONAL DE CIANOBACTERIAS: DEL CONOCIMIENTO A LA GESTIÓN LATU- FACULTAD DE CIENCIAS- FACULTAD DE QUIMICA– DINAMA -OSE ¿ CUALES SON LOS PASOS A SEGUIR? Desde nuestro lugar de participación ¡MUCHAS GRACIAS!