Héroes En pocos minutos, el Dräger DrugTest 5000 muestra quién está bajo la influencia de las drogas. Su precisión se basa en ANTICUERPOS ESPECÍFICOS que encajan en los estupefacientes como una llave en la cerradura. Texto: Dr. Hildegard Kaulen 34 REVISTA DRÄGER 12 | 2 / 2015 DETECCIÓN DE DROGAS FOTO : HANS-JÜRGEN KOCH E El consumo de drogas es una realidad social. Muchos ya no pueden ni quieren renunciar a la dosis que altera su estado mental, aunque antes o después les pueda costar la salud. Según un informe actual del Gobierno alemán, uno de cada cuatro alemanes en edad de 18 a 64 años ha consumido ya alguna vez canabis; 319.000 ciudadanos alemanes son dependientes de drogas ilegales. Las cifras de la Oficina Federal de Estadística hablan en términos claros: en 2013, se registraron 3.896 accidentes de tráfico bajo la influencia de las drogas en los que resultaron heridas 1.913 personas, 457 de gravedad. Varias docenas fallecieron porque ellas mismas u otras personas habían consumido drogas poco antes. Cuando los guardianes del orden quieren comprobar si un usuario de la vía pública está en condiciones de conducir, no hay tiempo que perder: la prueba debe informar sobre cómo es la situación REVISTA DRÄGER 12 | 2 / 2015 DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO Canabis sativa es el nombre en latín del cáñamo. Aquí se ve una toma del tallo realizada con microscopia de campo oscuro actual. «La policía tiene que medir el consumo actual de drogas, no uno anterior», dice Rainer Polzius, responsable en Dräger del desarrollo del DrugTest 5000. «No se trata de demostrar si un conductor no estaba en condiciones de ir al volante ayer o la semana pasada, sino ahora». El sistema analiza la saliva, no la sangre ni la orina. Las drogas no permanecen mucho tiempo en la saliva; en la orina se puede demostrar su presencia por mucho más tiempo. El tetrahidrocanabinol (THC), el componente principal del canabis, se puede detectar incluso semanas después de haber sido consumido. En cambio, la saliva se puede obtener fácilmente en un control de tráfico. Además, la muestra no se puede manipular; cualquier tentativa de fraude se notaría inmediatamente. 35 DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO DETECCIÓN DE DROGAS Los anticuerpos son héroes moleculares a la hora de detectar drogas Dräger DrugTest 5000: con anticuerpos específicos se pueden detectar, hoy día, ocho estupefacientes ilegales; entre ellos también el canabis y las anfetaminas, que según el Informe Mundial sobre Las Drogas 2014 son las que más se consumen El test de la saliva se basa en una reacción antígeno-anticuerpo, similar a la de la prueba del embarazo. Por su elevada especificidad, los anticuerpos son un componente esencial del diagnóstico inmunológico. Se los podría calificar de héroes moleculares. El sistema inmunitario se defiende con anticuerpos contra todos los agentes extraños, para ello procede con gran precisión y produce solo los anticuerpos que se adaptan exactamente a los patrones extraños. Si los anticuerpos encuentran un antígeno específico, se produce un complejo inmune. La capacidad de reconocimiento específico es lo que convierte en héroes a los anticuerpos porque es la base de la gran utilidad de esta clase de moléculas. En el diagnóstico de laboratorio, se recurre a los anticuerpos para detectar proteínas, hormonas, sustancias tóxicas o agentes patógenos. En medicina, se tratan las enfermedades inflamatorias crónicas y el cáncer con anticuerpos porque estos consiguen exactamente su objetivo terapéutico. También la eficacia de las vacunas se basa en los anticuerpos: en la inmunización activa se crea una memoria inmunológica a partir de los anticuerpos, en la pasiva, los médicos ayudan en una situación crítica con los anticuerpos adecuados. El hecho heroico consiste siempre en el reconocimiento específico del antígeno. El DrugTest 5000 emplea anticuerpos específicos para detectar más de media docena de drogas: anfetaminas, opiáceos, cocaína, 36 benzodiacepinas, canabis, metadona –el sustituto de la heroína– y ketamina –un narcótico sintético–. El único problema es diferenciar en la saliva entre los restos de un bollo de pan con semillas de amapola y la heroína, algo que químicamente es también muy difícil. Los anticuerpos específicos contra las drogas reaccionan a un grupo de principios activos, de esta forma, se reconocen al mismo tiempo varios agentes de una clase de drogas. El sistema consta de un colector (el casete de la prueba propiamente dicha con las tiras reactivas), un cartucho con disolvente, así como el analizador. El casete contiene cinco tiras reactivas con dos posiciones cada una para la mostrar los resultados. «Se podrían detectar hasta diez estupefacientes», comenta Rainer Polzius. «Actualmente, hay ocho posiciones asignadas, pero estudiamos constantemente la relevancia y las posibilidades técnicas para detectar nuevas drogas». Prueba basada en el principio de la competencia Las tiras reactivas son de una membrana porosa, la prueba misma funciona automáticamente. Después de meter la muestra de saliva, el casete y el cartucho con el disolvente en el analizador, la temperatura alcanza un valor idóneo y la saliva se mezcla con algo del disolvente. Después las tiras reactivas se sumergen en esa mezcla y, por capilaridad, el líquido fluye sobre las tiras en una dirección. Entonces empieza lo que en la jerga técnica se conoce también como prueba de flujo lateral: poco después del punto de inicio, se encuentran en la membrana los anticuerpos específicos contra las drogas, en el centro de cada tira reactiva hay almacenada una pequeña cantidad de la droga que se desea detectar. Si la mezcla de saliva y disolvente recorre las tiras reactivas, los anticuerpos específicos contra las REVISTA DRÄGER 12 | 2 / 2015 La metanfetamina forma cristales que recuerdan al hielo. La imagen muestra estos cristales al microscopio de luz polarizada Pequeño diccionario de las moléculas Con el sistema inmunitario, los seres vivos se protegen de las sustancias o agentes extraños. Sus protagonistas más importantes sirven también de ayuda en el diagnóstico inmunológico. Anticuerpos = proteínas que se forman por las células B del sistema inmunitario. Reconocen los antígenos y desencadenan una respuesta inmunitaria para combatir los antígenos. Anticuerpos monoclonales se forman a partir de un solo clon de células B y únicamente reconocen un solo epítopo del antígeno. Los anticuerpos monoclonales son idénticos entre sí. Anticuerpos policlonales se forman a partir de varios clones de células B y reconocen varios epítopos del antígeno. Los anticuerpos policlonales son una mezcla de diferentes anticuerpos. Antígeno = sustancia que el sistema inmunitario identifica como extraña y que provoca la formación de anticuerpos. FOTOS: DRÄGERWERK AG & CO. KGAA, DENNIS KUNKEL MICROSCOPY, INC./VISUALS UNLIMITED/CORBIS Células B = células inmunitarias que pertenecen a los leucocitos y forman antígenos. REVISTA DRÄGER 12 | 2 / 2015 Clon de células B = un clon de células B es un grupo de células B idéntico que proceden de la división de una sola célula B. Diagnóstico inmunológico = campo del diagnóstico que reconoce sustancias o moléculas por la alta especificidad de una reacción antígeno-anticuerpo. La detección se realiza mediante marcas en los anticuerpos. Generalmente, se emplean anticuerpos monoclonales. Epítopo = la parte del antígeno que es reconocida por los anticuerpos y a la que se unen específicamente los anticuerpos. Principio de llave y cerradura = principio por el que dos o varias estructuras complementarias cumplen solo su función biológica si encajan exactamente. El reconocimiento de un antígeno por un anticuerpo sigue este principio. 37 DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO DETECCIÓN DE DROGAS Prueba rápida en menos de diez minutos drogas se liberan de la membrana y son arrastrados. Si la saliva contiene drogas, las moléculas se unen inmediatamente al anticuerpo respectivo. Luego, este ya no se puede unir a la sustancia de referencia que hay en el centro, porque ya está ocupado con las moléculas de droga de la saliva. Si no hay drogas en juego, pasa lo siguiente: los anticuerpos se adhieren a las sustancias de referencia en el centro, porque no han reaccionado con las moléculas de droga de la saliva. La prueba se basa, por lo tanto, en el principio de la competencia. La evidencia visible tiene lugar mediante una marca en los anticuerpos específicos contra las drogas. Estas marcas son partículas de oro que emiten luz en una longitud de onda determinada tan pronto como son iluminadas. Si el analizador registra una señal luminosa, es que el anticuerpo se ha unido a la droga en el centro de la tira reactiva. Eso significa que no hay moléculas de drogas en la saliva. De no haber una señal luminosa, la presencia de drogas es casi segura. Hay, por lo tanto, una relación inversa entre la concentración de drogas en la saliva y la intensidad de la señal a través de los anticuerpos unidos en el centro de la tira reactiva. Tras cinco minutos se obtiene el resultado para siete drogas, hasta para el canabis. Para detectar el tetrahidrocanabinol se requieren aproximadamente tres minutos más. El DrugTest 5000 es un aparato de análisis previo, que predice con gran probabilidad el consumo actual de drogas. Las cantidades y la calidad de la droga consumida se tienen que comprobar en el laboratorio, pues ya un bollo de pan con semillas de amapola o un jarabe para la tos pueden contener rastros de opiáceos. por ejemplo, camioneros, pilotos, conductores de carretillas elevadoras y grúas, o en sectores como el de la energía nuclear o petroquímica. «Las pruebas de drogas en Alemania son voluntarias o están reguladas claramente por un acuerdo empresarial», comenta Rainer Polzius. «No obstante, tras una sentencia del Tribunal de Trabajo de Hamburgo, se pueden realizar controles sin haber sospecha cuando la actividad esté asociada a un riesgo considerable y cuando no es posible determinar de otra manera la capacidad de trabajar en el preciso momento». En Estados Unidos, Australia y otros países europeos es diferente. En estos países, la seguridad prevalece sobre el derecho a la intimidad de los trabajadores. Al fin y al cabo, a la mayoría de las personas no se les nota que consumen drogas porque no cumplen el cliché habitual de un yonqui. Riesgo: nuevas drogas Con la prueba de saliva no solo se puede comprobar si un conductor está en condiciones de ir al volante, sino también el consumo de drogas en el puesto de trabajo o en la prisión. En Alemania, las pruebas de drogas en el puesto de trabajo son poco frecuentes porque infringen contra el derecho a la intimidad de los trabajadores. Pero hay muchas profesiones con un elevado riesgo de accidente en las que el consumo de drogas puede tener consecuencias fatídicas como, 38 FOTO : STAR-MEDIA Pruebas de drogas en el puesto de trabajo El mercado de las drogas es invadido constantemente por nuevas sustancias psicoactivas: «Las nuevas sustancias psicoactivas son derivados de medicamentos homologados, productos naturales o compuestos que la industria farmacéutica ha sintetizado alguna vez y que ha vuelto a descartar. Ninguno de los productos fue rigurosamente probado. Los efectos secundarios, su toxicidad y distribución en el organismo van saliendo paulatinamente a la luz de los expedientes de urgencias o de los informes de autopsias de la medicina forense. La venta y posesión de las nuevas drogas es ilegal si están recogidas en la ley de estupefacientes. Este no es el caso de muchas drogas. Bien porque ni siquiera se conocen o porque el proceso lleva su tiempo. Tan pronto como las sustancias se incluyen en la ley de estupefacientes, los cocineros de drogas modifican la fórmula básica química eludiendo así la ley. Todo es como una carrera entre el conejo y el erizo, en la que casi siempre los creadores de drogas llevan la delantera. Cada semana salen al mercado de una a dos drogas de diseño nuevas. REVISTA DRÄGER 12 | 2 / 2015 DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO Tiempos de detección de drogas El tiempo que duran los estupefacientes en la sangre, saliva y orina varían según las drogas. Las barras muestran la duración en horas. Si el consumo es periódico, el THC-COOH se puede detectar incluso semanas después mediante una muestra de orina. Anfetaminas Sangre 46 20–50 Saliva 24–72 Orina Metanfetaminas 48 24 87 (+/-51) VISTA DEL CASETE DE PRUEBA Tetrahidrocanabinol 5 4–16 10 Tetrahidrocanabinol-COOH (ácido carboxílico) 36 34–87 Cocaína 12 5–12 Benzodiacepinas 48 12–24 48–72 Morfina 20 12–24 11–54 24 horas 48 horas 72 horas 96 horas Contiene cinco tiras contiguas para detectar drogas. En los extremos libres se absorbe la mezcla de saliva y disolvente. En esta figura, la dirección es de arriba abajo. Los campos en azul oscuro indican los anticuerpos específicos contra las drogas. Las líneas en azul claro muestran las sustancias de referencia que compiten con las drogas en la saliva por los anticuerpos marcados. Resultado negativo Señal Negativo 2 Resultado positivo 1 Flujo de la muestra LED 2 REVISTA DRÄGER 12 | 2 / 2015 Detector Señal Positivo Las drogas en la saliva se unen al anticuerpo marcado impidiendo que se acople en el centro. La falta de señal indica que el resultado de la prueba de drogas es positivo. Cocaína – Opiáceos Detector Benzodiacepinas LED Si no hay drogas en la saliva, el anticuerpo marcado se une a la sustancia de referencia en el centro. La señal indica que el resultado de la prueba de drogas es negativo. Tetrahidrocanabinol Flujo de la muestra Metanfetaminas 1 Anfetaminas FUENTE: A. VERSTRAETE, THER DRUG MONIT, VOL.26, NR. 2, APRIL 2005, 200FF; *S. NIEDBALLA ET AL., J ANAL TOXICOL 2001, 25: 289-303 DETECCIÓN DE DROGAS 39