cultivo in vitro del tejido vegetal del embrion del frijol presentado por

CULTIVO IN VITRO DEL TEJIDO VEGETAL
DEL EMBRION DEL FRIJOL
PRESENTADO POR:
Jonathan F. Ochoa Bedoya.
Jeison A. Zúñiga Pineda.
Brandon Zúñiga Pineda.
Carlos Ortegón Vergel.
Jorge Castañeda.
PRESENTADO A:
Fabio Morales.
Andrés Sosa.
Dianit Lemus.
Edison Correa.
CURSO:
11-01.
FECHA:
09-11-2011.
INSTITUCION EDUCATIVA DISTRITAL LA AURORA.
PENSAMIENTO EMPRENDEDOR HACIA LA GESTION SOCIAL.
CULTIVO IN VITRO DEL TEJIDO VEGETAL
DEL EMBRION DEL FRIJOL
El frijol común es uno de los cultivos de mayor importancia económica y
alimenticia de los seres humanos. Es la principal fuente de proteína, hierro y
fibra en la dieta de las personas, la producción del frijol se enfrenta a varias
limitaciones, tales como enfermedades causadas por hongos, bacterias y virus,
ataque de insectos, deficiencias nutricionales y la pérdida de tolerancia a
sequías. Para tratar de solucionar estos problemas, es indispensable buscar
alternativas que permitan el mejoramiento de las variedades existentes por
técnicas biotecnológicas. Para tales efectos, es importante desarrollar un
sistema eficiente de cultivo in vitro que permita la regeneración de plantas del
embrión del frijol, para esto tenemos en cuenta a los diversos métodos de
cultivo in vitro. Muy pocos grupos en el mundo han logrado desarrollar
procedimientos exitosos de regeneración de plantas para este cultivo. Así
mismo, a pesar del gran número de investigaciones sobre la regeneración de
plantas in vitro, con métodos de la embriogénesis u organogénesis, en
numerosas especies vegetales, además, este estudio busca optimizar el proceso
de organogénesis y regeneración de plantas del frijol. Esa información es muy
importante, pues se desconoce la respuesta de las variedades del frijol común
que se cultivan, a la aplicación de técnicas de cultivo de tejidos. Estas técnicas
pueden ser de gran utilidad para complementar programas de mejoramiento y
de conocimiento.
PREGUNTA-PROBLEMA
Nuestra pregunta problema es:
¿Cómo conocer las variedades del cultivo in vitro de tejido vegetal del
embrión del frijol y como incrementar con una forma factible la micro
propagación de las plantas del frijol para así determinar su estructura?
RESUMEN
El frijol es uno de los granos de mayor importancia en la dieta alimenticia de
la población en general, especialmente la de escasos recursos económicos, y
nos brinda unas proteínas muy importantes para nuestro crecimiento. El
presente proyecto se realizó dentro de un programa de investigaciones y de
realizaciones de cultivos. Se tuvo como objeto de estudio la variabilidad
genética del frijol, con el fin de seleccionar, caracterizar y conservar los
genotipos que presenten la capacidad de regenerar plantas in vitro del embrión
del frijol. El desarrollo se realizo en tres etapas:
La primera la investigación de todo lo relacionado con los cultivos in vitro.
La segunda fue la realización de diferentes cultivos para tener en cuenta
diferentes resultados.
La tercera fue la revisión de los diferentes cultivos para observar cual salió
mejor y escoger los dos mejores para poder tomar similitudes y diferencias de
los dos cultivos.
En los resultados encontramos que los dos cultivos escogidos fueron muy
buenos, que la micro propagación de estos cultivos fueron excelentes y que
poco a poco pudimos ir descubriendo muchas formas de regeneración de
plantas en un cultivo in vitro.
Pero se hace necesario continuar con los estudios ya que estos procedimientos
no están descubiertos en su totalidad y así podríamos optimizar los resultados.
ABSTRACT
Beans are one of the most important grains in the diet of the general
population, especially low-income, and give us a very good protein.
This project was conducted within a research program and accomplishments.
The aim was to study the genetic variability of bean, to select, characterize
and conserve the genotypes showing the ability to regenerate plants in vitro
embryo of the bean.
The development was done in three stages:
The first investigation of all matters relating to in vitro cultures.
The second was the realization of different crops to account for different
results.
The third was to review the different cultures that came to look better and
chose the top two in order to make differences and similarities of them.
The results found that the two selected crops were very good, that the micro
propagation of these crops was very good and little by little we can discover
many things that do not know about these crops of beans embryo.
But it is necessary to continue studies as these procedures are not discovered
all and to optimize the results.
OBJETIVO GENERAL
Nuestro objetivo general es que todos los interesados en implementar las
diversas técnicas de un laboratorio de cultivo in vitro de tejido vegetal, lo
obtengamos a partir de explantes para la multiplicación de las plantas y
observación de su método, encontrando métodos con dichas herramientas para
manipular los tejidos del embrión del frijol y así realizar el cultivo propuesto.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Nuestros objetivos específicos son:
1. Tener conocimiento de los cultivos in vitro de tejidos vegetales del
embrión del frijol.
2. Profundizarnos con los factores de los cultivos in vitro de tejidos
vegetales del embrión del frijol.
3. Aplicar nuestro conocimiento y aprendizaje dentro de los cultivos in
vitro de tejidos vegetales del embrión del frijol.
4. Aplicar la transformación de plantas para así tomar como prueba el
cultivo in vitro de tejidos vegetales del embrión del frijol.
HIPOTESIS
El cultivo in vitro de tejido vegetal del embrión del frijol es una alternativa
que buscamos que sea viable y eficaz para contribuir con la regeneración y
conservación de plantas del frijol, en general de todas las plantas debido a su
bajo potencial. Y dar a conocer las diferentes formas de cultivos para
observar sus factores.
JUSTIFICACION
De acuerdo a los esfuerzos que llevamos a cabo para establecer este
proyecto y sus conservaciones del cultivo in vitro del tejido vegetal del
embrión del frijol, no se ha logrado establecer las causas, los problemas o las
consecuencias de este, debido a esto nace la necesidad de llevar a
cabo estrategias que busquen encontrar de alguna manera la variedad de
tejidos y células de la micro propagación de células del embrión del frijol.
Son muy pocas las investigaciones que hemos realizado para encontrar
resultados sobre esta micro propagación.
Las ventajas que ofrecen las
técnicas de cultivo in vitro del tejido vegetal del embrión del frijol contribuyen
con un conocimiento de este. Este trabajo lo que busca es establecer las
preguntas del cultivo in vitro del tejido vegetal del embrión del frijol y su
germinación con el objetivo de promover la micro propagación masiva de los
tejidos, las bacterias y otras variedades de este cultivo.
MARCO TEORICO
El frijol común es uno de los cultivos más viejos del mundo, y el de mayor
consumo a nivel mundial, pertenece a la familia de las legumbres, se conocen
entre 5 especies de frijol: el frijol común, frijol yearlong, frijol scarlet runner,
frijol terapia y el frijol Lima han sido domesticados, el frijol común se
encuentra entre las especies más cultivadas en el mundo, siendo la legumbre
más importante, el frijol común se consume como grano maduro, grano
inmaduro o como vegetal, la alta calidad nutricional de los frijoles en términos
de porcentaje de proteína es un importante complemento de los alimentos
almidonados, el alto contenido mineral, especialmente hierro y zinc, así como
fuente de fibra, ácido fólico, tiamina, magnesio y potasio, son de gran
importancia en regiones donde hay una alta prevalencia de deficiencias de
micronutrientes, la semilla del frijol contiene entre 20-25% de proteína,
Contiene biotina la cual es un factor esencial para una variedad de carboxílicas
y descarboxilasas establecidas en diversas vías metabólicas de todos los
organismos.
Características del frijol: El frijol es una planta anual, de crecimiento rápido,
el sistema radicular es poco profundo, está constituido por una raíz principal y
gran número de raíces secundarias con elevado grado de ramificación, el tallo
principal es herbáceo, es el eje central de la planta, el cual está formado por
una sucesión de nudos y entrenudos; se origina del meristemo apical del
embrión de la semilla. Las primeras hojas son simples, las demás hojas son
compuestas, trifoliadas y su tamaño cambia según la variedad. La flor presenta
una coloración que varía de blanco al color lila, según la variedad, las
inflorescencias presentan de 4 a 8 flores por racimo, cuyos pedúnculos nacen
en las axilas de las hojas o en las terminales de algunos tallos. El fruto es una
legumbre de color, forma y dimensiones variables, en cuyo interior se
disponen 4-6 semillas.
Distribución: El frijol se cultiva en gran diversidad de climas entre los 0 a
3000 m.s.n.m. y sus mayores rendimientos se obtienen en zonas donde la
temperatura promedio oscila entre los 15 y 27 °C., temperaturas promedio
superiores a 27 °C favorecen el desarrollo vegetativo, pero ocasionan el aborto
y desprendimiento de las flores, reduciendo el número de vainas y de semillas
por planta.
Origen del frijol: Existe duda sobre cuál nombre debe darse a la especie
silvestre cercana, además los fósiles de frijoles, están mal representados en los
registros arqueológicos, como resultado de los métodos de recolección, pues
los agricultores de regiones como México, arrancan las plantas con
crecimiento erecto o arbustivo del suelo cuando maduran y las desgranan en
estelas, por lo tanto, el principal recurso de evidencia disponible para el
análisis de la distribución y orígenes del frijol, comprende semillas y
fragmentos de semillas, las cuales pueden ser carbonizadas por la ausencia del
contacto con la humedad.
Cultivo in vitro de tejidos vegetales: Una amplia variedad de técnicas de
cultivo de tejidos, manipulación genética y biología molecular han sido
desarrolladas en varias especies de plantas, estas técnicas han tenido profunda
repercusión en las prácticas agrícolas y en el mejoramiento de la calidad y
cantidad de alimentos y plantas cultivables de interés comercial. El cultivo de
tejidos consiste esencialmente en aislar una porción de la planta (explante) y
obtener así células, tejidos u órganos, que se cultivan en condiciones asépticas,
en un medio de cultivo de composición química definida y que se colocan en
condiciones ambientales controladas de luz, fotoperíodo, temperatura y
humedad, adecuadas a la fisiología de la planta. Se pueden obtener diferentes
respuestas dependiendo de la metodología y de los medios de cultivo
utilizados. Estos van desde la formación de tejidos organizados
(organogénesis) hasta la obtención de embriones somáticos y células
embrionarias, el cultivo de tejidos vegetales es una técnica que puede ser
aplicada para la obtención y propagación de plantas libres de patógenos; en
estudios de genética, ingeniería genética, fisiología, biología molecular,
fitopatología, en la bioconversión y producción de compuestos útiles; en el
incremento de la variabilidad genética de los cultivos; en la conservación e
intercambio de germoplasma; en la obtención de mutantes y plantas haploides,
el cultivo in vitro de tejidos vegetales es una herramienta poderosa y versátil
para el estudio de problemas básicos y para la solución de problemas
aplicados en el campo de la biotecnología agrícola del frijol.
Por qué el uso de la biotecnología para el mejoramiento del frijol: Existe un
considerable interés mundial por el desarrollo de métodos no convencionales
de mejoramiento genético en la agricultura, tales como la modificación
genética, vía transgénesis o por inducción de mutaciones por irradiación o por
métodos químicos. El objetivo es generar plantas tolerantes a factores de
estrés biótico o abiótico que no pueden ser obtenidas por métodos
tradicionales, los cuales pueden utilizar solamente la variabilidad genética
disponible en los recursos genéticos primarios de la especie, tales como
variedades locales, o especies silvestres relacionadas y reproductivamente
compatibles con ella, el incremento de la producción del frijol se ha debido
principalmente a la alta tasa de compuestos químicos aplicados, a la
mecanización o prácticas de amelioración. Los métodos de producción
tradicional llegan a ser limitados por el bajo potencial de recombinación como
resultado de la autopolinización, la baja capacidad hereditaria de algunas
características importantes y al aborto de embriones en algunos híbridos ínter
específicos. Para utilizar exitosamente la gran variedad de aplicaciones
biotecnológicas disponibles en mejoramiento genético, se requiere contar con
metodologías de regeneración de plantas a partir de células somáticas
generadas por cultivo in vitro. De otra manera, se obtendrían plantas
modificadas genéticamente, pero de naturaleza genéticamente heterogéneas.
La producción de brotes y la regeneración de plantas en el frijol bajo
condiciones de cultivo in vitro ha sido descrita por autores como Malik y
Saxena, sin embargo la frecuencia de brotes obtenidos es aún limitada, 4-8
brotes por explante. Muy pocos laboratorios en el mundo, particularmente en
Brasil, han desarrollado procedimientos exitosos de cultivo in vitro y
regeneración de plantas para variedades de frijol de origen andino.
¿QUE ES EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION DEL
FRIJOL?
Es un método de micro propagación del frijol que se realiza en un laboratorio
a condiciones estériles muy máximas.
¿COMO SE HACE EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION
DEL FRIJOL?
Este cultivo se hace tomando el embrión del frijol, poniéndolo a cultivar en
un tubo de ensayo sobre un medio nutritivo, en condiciones controladas y
estériles con unos materiales especiales para este procedimiento.
¿PARA QUE SE HACE EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL
EMBRION DEL FRIJOL?
Se hace para conocer la conservación de la planta del frijol y las variedades de
esta planta.
AVANCES:
Los avances los veremos en los resultados encontrados después de hacer la
investigación y la práctica del cultivo.
METODOLOGIA
Nuestra metodología consistío en buscar la micro propagación de la planta del
frijol partiendo desde el embrión del frijol para así buscar la multiplicación de
esta planta siguiendo un proceso que se ha llevado a cabo hace mucho tiempo.
A continuación les presentamos los pasos utilizados dentro de este proyecto.
MATERIALES:
Para realizar el cultivo de tejido vegetal del embrión del frijol nos dimos a la
necesidad de utilizar:
AUTOCLAVE: Aquí esterilizamos todo lo que utilizamos durante el proceso
del cultivo. Es como una olla a presión.
CAMARA DE FLUJO LAMINAR: Aquí manipulamos el embrión del frijol
ya que tiene un ambiente estéril.
MEDIO DE CULTIVO: Aquí mantuvimos las proteínas y el agua que le
aplicamos al embrión dentro de un tubo de ensayo.
PLANTA: El embrión del frijol lo extraemos de un frijol normal y lo dejamos
reposando unos días antes para que así le salga el embrión.
CAMARA DE CULTIVO: Este es un lugar en el cual mantuvimos el cultivo
del embrión del frijol a unas condiciones máximas.
BATA: Esta nos sirvió para realizar la prevención de infectar el cultivo.
FUENTE DE CARBONO: Esta nos sirve para que nuestro cultivo coja
nutrientes.
VITAMINAS Y AMINOACIDOS: Estos nos sirvieron para que nuestro
cultivo tenga fuente de crecimiento.
AGENTE GELIFICANTE: Nos sirvió para que se endureciera nuestro
cultivo.
MACRO Y MICRO NUTRIENTES: Nos sirvió para que nuestro cultivo
mantuviera una forma de crecimiento normal dentro de estos van todas las
vitaminas necesarias.
AGUA: Es un nutriente necesario para nuestro cultivo.
MICROSCOPIO: Nos sirvió para observar nuestros cultivos.
BALANZA DE PRESICION: Nos sirvió para pesar los químicos necesarios.
CONDICIONES EL CULTIVO:
En la cámara de flujo laminar no puede entrar ninguna pieza contaminada.
En la autoclave no podemos meter sustancias como medicamentos, vitaminas,
etc.
El vidrio que cubre el cultivo debe ser muy duro y grueso para que en no deje
meter ninguna clase de contaminación.
Los ayudantes al crecimiento deben obligatorios ya que sin ellos no puede
crecer el medio de cultivo.
El pH debe ser entre 5 y 6.
Se necesita agar-agar obligatorio para endurecer el cultivo.
El cultivo debe llevar agua, azúcar y reguladores de crecimiento.
Según el medio de cultivo que sea puede tener diferente momento para
prepararse.
En la cámara de cultivo debemos aplicar diferentes grados de calor.
PROCESOS:
PRIMERA ETAPA
INVESTIGACION DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO: Lo
primero que realizamos fue investigar todo sobre los cultivos in vitro.
Dentro de ello encontramos técnicas como; la micro propagación, la
organogénesis, la embriogénesis, las suspensiones celulares, el cultivo de
anteras y polen y el cultivo de protoplastos entre otros. Después de este paso
nos encargamos en conseguir los embriones del frijol e investigamos como los
obtendríamos. Así de igual forma obtuvimos factores de un cultivo vegetal in
vitro de un embrión de un frijol.
MICRO PROPAGACION: Este es el proceso de la multiplicación de plantas
cultivadas y producidas vegetativamente a gran escala, producidas por la
reproducción asexual.
ORGANOGENESIS: Este es el proceso de diferenciación de órganos como
raíces, brotes o tallos y se forman directa o indirectamente a partir de otros
tejidos.
EMBRIOGENESIS: Este proceso es el que sucede después de tener
embriones zigoticos y sexuales inmaduros los cuales inician la formación del
embrión.
SUSPENCIONES CELULARES: Este proceso se utiliza en medios líquidos a
partir de tallos los cuales se dispersan.
CULTIVO DE ANTERAS Y POLEN: Este proceso es empleado para obtener
mutaciones de especies.
CULTIVO DE PROTOPLASTOS: Este proceso es empleado para obtener
unas mismas especies.
FASES DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:
Se desinfecta el embrión en alcohol se flamea.
Se separa el embrión de la semilla del frijol.
Se introduce dentro del tubo.
A la primera semana se puede ir reconociendo la planta.
Se va dejando crecer y se va pasando por los procesos a seguir.
VENTAJAS DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:
Permite obtener plantas libres de enfermedades hongos, bacterias, virus. La
micro propagación vegetal nos permite propagar masivamente material
vegetal en cualquier época del año y en corto tiempo conservando su potencial
genético y calidad sanitaria. Permite optimizar el uso de factores ambientales
y nutricionales. Facilita el cultivo de un gran número de plantas en una
superficie pequeña. Puede conservar material biológico por periodo de tiempo
prolongados. Además mediante este método de propagación se puede incluir
aspectos de fito mejoramiento.
DESVENTAJAS DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:
Requiere de personal especializado, requiere de infraestructura
equipamiento, los productos químicos son de elevado costo.
y
SEGUNDA ETAPA
REALIZACION DEL CULTIVO: Lo segundo realizado fue empezar el
proceso del laboratorio.
La realización del laboratorio del cultivo se llevo a cabo en el laboratorio del
colegio la aurora y en laboratorio de la universidad nacional con la ayuda de
profesores especializados en el tema, el cual nos sirvieron de guías y a esto le
sumamos los aprovechamientos que tuvimos los años pasados.
1. OBTENCION DEL EXPLANTE DEL EMBRION DEL FRIJOL:
Dejamos unos cuantos frijoles en agua por unos días a los cuales les
nace el embrión, obteniendo el embrión del frijol procedimos a
desinfectarlo con hipoclorito de sodio y alcohol reuniendo un setenta
por ciento (70%) de solución antes de introducirlo al medio de cultivo
bajo unas condiciones de asepsia.
2. MEDIO DE CULTIVO DEL EMBRION DEL FRIJOL: El embrión fue
encubado a una temperatura de veinte cuatro grados centígrados (24°)
para que fuera mantenido el embrión y no tuviera problemas de
climatización.
3. SUSTANCIAS UTILIZADAS EN EL EMBRION DEL FRIJOL:
Thiamina.
Vitaminas.
Sacarosa.
Agar Agar.
PH.
Adenina.
Macro elementos y Micro elementos.
Auxinas.
Cito quininas.
Geberelinas.
Azucares.
4. CLIMATIZACION DEL EMBRION DEL FRIJOL: El embrión lo
adaptamos a una condición esterilizada para mantenerlo a una
temperatura variada entre veinte y venti cinco grados centígrados,(20 y
25º).
5. MULTIPLICACION DE BROTES A PARTIR DEL EMBRION DEL
FRIJOL: En esta parte nos fue necesaria el azúcar, los aminoácidos y
las vitaminas para regular el crecimiento de nuestro cultivo y así el
embrión se esparciera alrededor del tubo.
6. ENRAIZAMIENTO DEL EMBRION DEL FRIJOL: Nos fue necesario
transferir el cultivo a un medio que contenía reguladores especialmente
introducimos auxinas y así nuestros cultivos fueron madurando y
cogiendo su forma.
7. ENDURECIMIENTO DEL EMBRION DEL FRIJOL: Nos fue
necesario para que el cultivo nos quedara listo ya por último en
condiciones húmedas y gelatinosas aumentamos un poco de agar agar y
quedo listo.
8. Por último procedemos a observar su crecimiento y maduración.
TERCERA ETAPA
REVISION DEL CULTIVO: Lo tercero que realizamos fue observar el
crecimiento y la transformación que se obtuvieron de los cultivos:
Durante los primeros días el cultivo estuvo endurecido normalmente se fue y
le iban saliendo raíces por todos los lados del embrión.
A las dos semanas el cultivo ya tuvo sus primeros resultados ya se veía la
planta, así fue creciendo y reproduciéndose.
Observamos que dentro de los cultivos no hayamos tenido ninguna clase de
contaminación ya que nos encontraremos en la necesidad de volver a repetir el
cultivo. Si hubiera contaminación era grave y hay una reacción que se llama
vitrificación el cual la planta se ve como un vidrio, si esto pasar nos hubiera
tocado sacar los pedacitos buenos y volver a hacer un sub cultivo.
Para analizar nuestros cultivos del embrión del frijol observamos las
diferencias y las similitudes que tienen entre los dos y se examina todo el
cultivo y así observamos que alguno de los dos tuvo que salir mejor que el
otro aunque no sea perfecto tiene algo más que el otro.
RESULTADOS
PRIMERA ETAPA
En esta primera etapa encontramos en la investigación muchos factores
empleados de un cultivo in vitro los cuales nos sirven para diferentes formas
de cultivo. Investigando todo sobre los cultivos in vitro encontramos que a
pesar de que es difícil encontrar resultados de este procedimos a partir de lo
investigado nos basamos en la micro propagación de un cultivo el cual tenía
un proceso fácil, y la realización de este nos resulto mejor que todas ya que
hicimos el intento con las otras formas de cultivo este fue el más fácil y
además de eso era el que mas sabíamos.
SEGUNDA ETAPA
En esta segunda etapa realizamos diferentes cultivos del embrión del frijol con
la intención de tener diferentes muestras para saber cual salió más viable
haciendo la prueba y escogiendo las dos mejores de ellos, al escoger los dos
cultivos mejores. Analizamos los dos salieron muy bien y muy similares, claro
que con algunas diferencias las cuales uno se diferencio de otro por las
diferencias y ese fue el que dejamos como muestra.
En la contaminación de los cultivos se realizo una prueba de los dos para
examinar cual estaba más contaminado, y el resultado fue que los dos
estaban contaminados; pero en su totalidad solo uno estaba contaminado
totalmente, el otro solo mas o menos la quinta parte más o menos.
En la obtención del explante nos fue fácil sacar cada embrión de cada frijol
con utilización de una tijeritas prácticas para esta práctica.
Dentro de los medios de cultivo los embriones tuvieron un cincuenta por
ciento (50 %) de respuesta buena pero decidimos realizarlos dentro de otro
subcultivo el cual fue mucho mejor la respuesta.
Las sustancias utilizadas fueron suficientes para que nuestro cultivo tuviera un
crecimiento y desarrollo muy bueno.
La climatización fue muy alta y el cultivo se iba descomponiendo nos toco
bajarle los grados centígrados a veinte grados centígrados (20 °) e ir
programándolo entre veinte y veinte cinco por ciento (20 y 25%) para que el
cultivo nos diera un resultado como debía ser y ahí si fue lo necesario para el
cultivo.
En la multiplicación del embrión no fue fácil encontrar la diferencia entre los
dos cultivos ya que los tejidos eran muy parecidos. Se realizaron dos siembras
mas con las mismas cualidades y después de este intento encontramos muchas
diferencias entre ellos.
En el enraizamiento los dos cultivos fueron muy buenos con las mismas
condiciones nos fue muy bien en dos semanas ya veíamos resultados y estos
fueron capaces de desarrollar una gran mayoría de raíces.
En el endurecimiento dentro de los dos cultivos nos fue muy bien, los dos
cultivos a pesar de tantos inconvenientes se endurecieron lo mínimo que
debían endurecersen y tuvieron su proceso de formación dentro del tubo muy
bueno.
Dentro de los resultados damos a conocer que los cultivos tuvieron su proceso
de etapas de maduración bueno, sin embargo al comparar los dos cultivos se
notaron las diferencias de ambos y se obtuvo una variabilidad en tiempo y
control de cultivos.
TERCERA ETAPA
En esta tercera etapa logramos revisar los dos cultivos y observamos las
similitudes y diferencias de los dos cultivos y encontrándolas definimos cual
de los dos fue el mejor en la maduración que era lo más importante dentro del
proyecto.
DISCUSION DE DATOS Y DE RESULTADOS
En lo referente que se obtiene del cultivo vegetal in vitro del embrión del frijol
se puede dar a conocer que en un cincuenta por ciento (50%) de lo realizado
fue obtenido lo mejor de los dos cultivos escogidos dentro de todos los
realizados y teniendo dificultades con algunos de ellos estos dos fueron los
dos mejores cultivos realizados en las practicas.
En la contaminación podemos mencionar que de los dos cultivos escogidos
uno totalmente estaba contaminado y el otro en una quinta parte más o
menos, esto debido a que algún contaminante extraído por cualquier
contaminación producida en la práctica, por esto es necesario tener en cuenta
las medidas que debemos optar por tener unas buenas condiciones de asepsia,
es decir realizando la desinfección y esterilización de todos los objetos de
manejo dentro de la práctica y así evitaremos las contaminaciones de los
cultivos.
Los que es la obtención de explante del embrión del frijol al cabo de 15 días
después de dejarlo en agua para que el embrión del frijol saliera a la luz,
logramos obtener unos pocos, el medio de cultivo le ayudo al embrión a
desarrollarse por las condiciones ambientales.
Respecto a las sustancias utilizadas estuvieron a favor ya que fueron las
necesarias para obtener un buen cultivo y con las condiciones climáticas
fueron beneficiarias en los cultivos.
Para la multiplicación se mencionan entre uno y dos meses aunque dentro de
dos semana ya iba dandi a luz ciertas raíces y plantas y después de esto se
obtuvo resultados buenos, esto nos indica que el factor de brotes y desarrollo
de formación de enraizamiento con ayuda de fitohormonas.
Sobre el endurecimiento del embrión del frijol es claro decir que el agar-agar
lo ayudo en un noventa por ciento (90%) y así el embrión coge su dureza
normalmente, sobre el crecimiento del embrión se obtuvo un crecimiento
bueno y nos demuestra que los nutrientes tuvieron la reacción necesaria sobre
ellos.
Referente al cultivo se obtuvo de un cien por ciento (100%) un ochenta por
ciento (80%) de lo necesario de un cultivo contando con las sustancias y las
demás cosas que se tuvieron en cuenta para el cultivo.
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados, llegamos a las conclusiones que es posible la
regeneración in vitro de plantas del embrión del frijol, la regeneración se dá
cuando se transfiere el embrión a medios de cultivos. La multiplicación del
embrión del frijol está relacionada con el frijol y sus orígenes, de tal forma
que explantes provenientes de la semilla del frijol sean multiplicados bajo el
proceso de un cultivo. El resultado aquí descrito muestra una mejor respuesta
organogénica con el uso de ejes embrionarios, además este protocolo puede
adaptarse a otros medios de cultivo. Este procedimiento es reproducible, lo
que lleva al desarrollo de plantas completas partiendo de un pequeño embrión.
Finalmente este proceso es una transformación de cualquier cultivo para el
mejoramiento de las plantas. De este trabajo se deben destacar los siguientes
aspectos fundamentales: Que la vinculación entre las instancias productoras de
cultivos, puede lograrsen en la medida en que se establezcan las formas de
apoyo. Los resultados obtenidos permitirán en el futuro aplicar esta
metodología a otras comunidades con problemas de marginación con lo cual
se contribuirá por una parte a la creación de empleos y por otra a impulsar
fuertemente la actividad de cultivos, produciendo plantas ornamentales de
calidad para ser más competitivos en esta área.
RECOMENDACIONES
Para la regeneración del cultivo de tejido vegetal in vitro del embrión del
frijol utilizar de base el protocolo desarrollado en el presente proyecto de
investigación y de prácticas.
Observando esto hay que continuar con estudios que tiendan a optimizar estos
procedimientos para así ampliar nuestro conocimiento.
Tener en cuenta los materiales y os elementos utilizados para obtener un mejor
cultivo.
BIBLIOGRAFIA
Profesores colegio la aurora:
Fabio Morales, Edison Correa y Luz Mary Ballestero. J.M Y J.T. 2011.
Profesor universidad nacional instituto de biotecnología. 2011.
Allavena, A y Rossetti L Efforts in somatic embryogenesis of Phaseolus
vulgaris. Act Horticulturae. 1983.
Biotecnologías en el sector Forestal. Loewe, V. Chile Forestal. 1995.
HURTADO, D, MERINO, M. Cultivo de tejidos vegetales. Editorial Trillas.
2000.
ANEXOS
TABLAS:
Composición de medios de cultivo para células vegetales:
Componentes
Agua destilada
Fuente de
carbono
Sustancias
inorgánicas
Vitaminas
Hormonas y
reguladores del
crecimiento
Mezclas de
sustancias poco
definidas
Características y ejemplos
Representa el 95% del medio nutriente.
Generalmente se usa sacarosa. La fuente de carbono se
necesita porque los explantos no son completamente
autótrofos, y no pueden cubrir sus necesidades con la
fotosíntesis que pueden realizar in Vitro.
Macro elementos (N, P, K, Ca, Mg, S) y micro
elementos (Fe, Co, zn, Ni, B, Al, Mn, Mo, Cu, I), en
una proporción adecuada para la planta elegida.
Vitaminas B1, B2, B6, vitamina H, vitamina E, ácido
fólico, ácido nicotínico, entre otras.
Auxinas: promueven la elongación celular, la
formación de callos y raíces adventicias, inhiben la
formación de brotes axilares adventicios y, a veces,
inhiben la embriogénesis.
Cito quininas: promueven la división celular, regulan el
crecimiento y el desarrollo de los tejidos vegetales
Otras: giberelinas, ácido absícico, etileno.
Ejemplos: extracto de levadura, extractos vegetales.
Materiales inertes
Usados como soporte. Incluyen agar, azarosa, otros
polisacáridos, lana de vidrio, papel de filtro, arena.
IMÁGENES: