Fassisi® ParCo REG. NO.: FLI-B 508 Test rápido para la detección simultánea de Parvovirus y Coronavirus # C-M02-05-02 Instrucciones La prueba ParCo de Fassisi® se emplea para la detección de ningún patógeno, los anticuerpos marcados con oro coloidal no antígenos específicos de Parvovirus (CPV, FPV) y Coronavirus pueden enlazarse con los anticuerpos inmovilizados en la zona (CCV, FCoV) en muestra fecal. de test y no aparece ninguna línea en la zona de test, siendo negativo el resultado CORONAVIRUS Y PARVOVIRUS El Coronavirus canino (CCV) y el Parvovirus canino de tipo 2 (CPV2) son los agentes causantes de la gastroenteritis. El Coronavirus LA PLACA Las tiras de ensayo se encuentran dentro de la carcasa de plástico. canino (CCV) es la segunda causa de diarrea viral en cachorros1 Los pozos de muestra se encuentran a la derecha y las ventanas mientras que el Parvovirus canino es la causa principal. Según en las que se desarrollan la reacción se encuentran en el centro recientes estudios realizados en Alemania, se calcula que el 10% de la placa. Las zonas de test y de control se encuentran en la de los gatos enfermos están infectados por CPV-2a ó por CPV-2b. ventana de reacción y están identificadas. Por tanto, dichos gatos representan un riesgo potencial de infección para los perros. Tanto el Coronavirus canino (CCV) como el Parvovirus canino se encuentran en la población canina de todo el mundo. El Parvovirus es el virus DNA sin envoltura más Pozo de muestra Para dispensar la muestra pequeño, es muy contagioso y se propaga por todo el mundo. Representa un riesgo importante, a veces letal, para perros no vacunados. El Parvovirus felino se encuentra muy relacionado con el Parvovirus canino y es el patógeno causante de la Ventana de reacción panleucopenia felina (también conocida como moquillo felino). Ésta una enfermedad altamente contagiosa y extendida por todo el mundo, especialmente entre los gatos. El Parvovirus canino (CPV) apareció por primera vez a mediados de los años 70 como Contiene las zonas de test y de control ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD La prueba ParCo de Fassisi® debe almacenarse a temperatura una variante mutada del Parvovirus felino (FPV). El 99 % de las ambiente (2°C - 30°C). Es estable durante 18 meses desde su estructuras de DNA son idénticas en ambos virus ya que difieren fabricación. en unas pocas secuencias de ácidos nucleicos en la proteína de la cápside viral. El Coronavirus canino es uno de los virus más importantes que afectan a los gatos y es muy similar al Coronavirus felino y al agente patógeno de la peritonitis felina infecciosa (FIP). Estudios recientes muestran que el FIP proviene de un virus recombinante de Coronavirus canino y Coronavirus felino. Se estima que más de la mitad de todos las diarreas relacionadas con virus están causadas por Parvovirus y/o Coronavirus. Los síntomas de la infección por Coronavirus y de la infección por Parvovirus son similares. En pacientes para los que se sospecha la presencia de una de las infecciones, es muy útil realizar una PRECAUCIÓN • Sólo para uso profesional veterinario • Las placas son de un solo uso • Tras abrir el envase de la placa, ésta debe emplearse antes de 10 minutos • Emplear la cantidad correcta de muestra • La muestra es potencialmente infecciosa, desecharla adecuadamente. • Evitar el contacto de la muestra con la ventana de reacción • Emplear un tubo de muestra nuevo para cada muestra para evitar • No tocar la ventana de reacción contaminaciones • Emplear únicamente el tampón original del kit. • No utilizar el test si ha caducado prueba simultánea. Si el resultado es positivo, debe iniciarse de • inmediato el tratamiento, después de haber conocido el agente No utilizar el test si el envase está deteriorado • Una vez transcurrido el tiempo de análisis, no leer el resultado causante de la infección. 2 REACTIVOS, MATERIALES E INSTRUMENTOS DESCRIPCIÓN La prueba ParCo de Fassisi® es un inmunoensayo sándwich de I. Contenido: flujo lateral. Se forma un complejo entre los anticuerpos • 5 placas de test con pipeta desechable y secante marcados con oro coloidal, los antígenos de la muestra y los • 5 tubos de muestra con torunda anticuerpos inmovilizados en la zona de test para detectar • 5 tubos con 1 ml de tampón patógenos. La prueba ParCo de Fassisi® detecta de forma simultánea CPV (FPV) y CCV (FCoV) mediante dos tiras de análisis. La prueba ParCo de Fassisi® es capaz de detectar CPV y FPV así como CCV y FCoV mediante las mismas reacciones. La prueba ParCo de Fassisi® es sólo para uso profesional. dispensar la muestra en los pozos de muestra, ésta es absorbida y se mezcla con los anticuerpos marcados con oro coloidal. La mezcla migra a lo largo de las tiras por capilaridad atravesando las zonas de test y de control. La línea de control siempre debe confirmar que • Cronómetro Para asegurar el correcto funcionamiento del equipo, deben Las tiras de análisis contienen distintos componentes. Al para Instrucciones II. Material no incluido pero necesario CONTROL DE CALIDAD EXPLICACIÓN DEL ANÁLISIS aparecer • la prueba se ha realizado correctamente. Si la muestra contiene el patógeno, aparecerá la línea de test de la tira correspondiente. Las líneas de test se forman entre los anticuerpos marcados con oro coloidal de la zona del conjugado, el antígeno de la muestra y los anticuerpos inmovilizados en la zona de test. Si la muestra no contiene emplearse controles externos (controles negativo y positivo con mínimo contenido de analito). PREPARACIÓN DE LA MUESTRA La muestra debe analizarse en cuanto es recogida. Si debe almacenarse hasta su análisis, puede conservarse a 2°C - 8°C hasta 24 horas. Si debe conservarse por más tiempo, es imprescindible congelarla a -20°C. Hay que asegurarse de que la muestra no se contamina con soluciones de formaldehido o derivados. ATENCIÓN: Las muestras y el resto de materiales deben tratarse como potencialmente infecciosos. Fassisi, Gesellschaft für Veterinärdiagnostik und Umweltanalysen mbH Marie-Curie-Straße 7 • D-37079 Göttingen Telefon +49(0) 551 500 88 40 • Telefax +49(0) 551 500 88 43 0 • eMail: [email protected] Fassisi® ParCo REG. NO.: FLI-B 508 Test rápido para la detección simultánea de Parvovirus y Coronavirus # C-M02-05-02 Instrucciones TOMA DE MUESTRA Resultado Negativo: la muestra que queda adherida en el extremo de la torunda, tal (C). Abrir el tubo y tomar la muestra con la torunda. Es suficiente con como indica la ilustración. La prueba es negativa si sólo se ve la línea de control Las líneas test no son visibles, por tanto no se han detectado Parvovirus ni Coronavirus. Resultado no válido: Si no aparece la línea de control, el resultado de la prueba no es válido. Debe realizarse una nueva prueba. Las causas pueden ser una realización incorrecta de la Importante: no debe tomarse un exceso de muestra porque puede afectar al funcionamiento del test, pudiendo impedir la migración si hay un exceso de partículas. prueba, la utilización de un test caducado o que la placa ha estado expuesta al aire demasiado tiempo. . Tras la toma de muestra, seguir con el procedimiento de análisis. PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS 1) Todo el material empleado en el análisis debe estar a temperatura ambiente. 2) Abrir un tubo que contenga tampón. Abrir el tubo de muestra, ATENCION: No leer el resultado de la prueba pasados 30 minutos del inicio del análisis. tomar el hisopo y sumergirlo en el tampón (Imagen 1). 3) Asegurarse de que el contenido del hisopo se suspende en la solución tampón. 4) Cerrar bien el tubo y agitarlo para homogeneizar su contenido durante unos segundos. (Imagen 2) RESIDUOS Se recomienda desechar adecuadamente los residuos según la normativa vigente. Las muestras y las placas de test deben recogerse en bolsas plásticas selladas. 5) Abrir una placa de ensayo. 6) Tomar el tubo con la muestra y romper la punta del tapón. (Imagen 3) 7) Invertir el tubo y dispensar 3 gotas en cada pozo de muestra. CARACTERISTICAS DE FUNCIONAMIENTO Sensibilidad y Especificidad en muestras fecales Fassisi® ParCo (Imagen 4) ELISA Sensibilidad Especificidad Parvovirus 92,31 % 95,65 % Coronavirus 96,15 % 95,65 % International test study 10-2010 BIBLIOGRAFÍA 1) Masato Nakamura et al: ”Monoclonal Antibodies That Distinguish Antigenic Variants of Canine Parvovirus”, Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, p. 1085-1089, Vol. 10, No. 6, November 2003 2) Ishiwata K, Minagawa T, Kajimoto T: “Clinical effects of the recombinant feline interferon-omega on experimental parvovirus infection in beagle dogs.” in:J Vet Med Sci. 1998 Aug;60(8):911-7. SÍMBOLOS EMPLEADOS RESULTADOS Los resultados de la prueba se pueden leer a los 5-10 minutos de haber iniciado el análisis. Rev.: 2011-08 Resultado Positivo: El resultado es positivo si aparecen las líneas de control (C) y de test (T), tal como se indica en el ejemplo (positivo para parvovirus). Una línea test débil también indica un resultado positivo. La intensidad de la línea de test depende de la concentración del patógeno presente en la muestra. Fassisi, Gesellschaft für Veterinärdiagnostik und Umweltanalysen mbH Marie-Curie-Straße 7 • D-37079 Göttingen Telefon +49(0) 551 500 88 40 • Telefax +49(0) 551 500 88 43 0 • eMail: [email protected]