Metodo Il m Reagenti e Componenti del kit Vedere inserto del kit

Mod: Istruzioni
Reference Range
 Blood – Serum (or plasma): Sufficient work is not currently available to provide indications as to the normal
reference range of Free Light Chains in blood.
 Cerebral Spinal Fluid: Free Light Chains are practically absent in the Cerebral Spinal Fluid of a healthy
subject.
 Suggestion: It is suggested that each Laboratory determines its own reference range for both sample
types.
Significant Values
 Blood – Serum (or plasma): Sufficient work is not currently available to provide indications as to the
significant values of Free Light Chains in blood.
 Cerebral Spinal Fluid: Results higher than PBS results (reagent blank, negative control) are to be
considered potentially positive. Double PBS amount can be considered as cut-off.
 Suggestion: It is suggested that each Laboratory determines its own significant values for both sample
types.
Limitations – lack of sample/calibrator parallelism
The Free Light Chains in the sample could be “different” from those in calibrators and therefore they could react
unproportionately; lack of sample/calibrator parallelism. The same occurs with the quantification of serum
monoclonal immunoglobulins (serum Monoclonal Component – MC) by liquid phase ImmunoPrecipitation
(turbidimetry, nephelometry).
Results Interpretation
Calibration Curve
The calibration procedure must be run for the chemistry. The calibration curve must be rerun whenever a new
lot number is used. Results and curves on “BNII” are reported on the back.
Sample
 Serum (or plasma) fresh. Use 0,1% Sodium Azide as preservative.
 Cerebral Spinal Fluid, centrifuged, fresh. Use 0,1% Sodium Azide as preservative.
Assay on samples
Samples must be run with FLC kappa and FLC lambda reagents.
Quality Control
For each set of determinations it is recommended to include:
 Negative Control
PBS (or Saline) = Reagent Blank.
 Calibrator dilution 1:6 - Conc.  1.33 mg/dl (stable for a few hours)
 Positive Control
 As a Positive Control alternative use: Y.UPR.FRK, Y.UPR.FRL;
Y.UPR.FRK.MV-3, Y.UPR.FRK.LV-3, Y.UPR.FRL.MV-3, Y.UPR.FRL.LV-3.
Processing Procedure
The general assay parameters for BNII can be found on the back. The protocol, which is analogous to that for
“BNA”, is for “pre-reaction” and, on BNII, for “interpolation at zero”. For the complete parameters, contact
Customer Services at NSC. For implementation, contact Dade Behring.
Analyser Set up
Due to lack of previsions from the Scientific Committees our “Internal Standardisation” has been applied.
See the relevant leaflet enclosed.
Information re Calibrators / Controls
See kit insert.
Contents
The method applied is based on ImmunoPrecipitation reaction in liquid phase with absorbed antibodies specific
to “hidden” sites of Light Chains of Immunoglobulins.
Method
By using the kits on serum and plasma and Cerebral Spinal Fluid, with the specific application, technically and
analytically excellent results are obtained; however, we must emphasise that the clinical significance of the
determination of the concentration of Free Light Chains in blood and Cerebral Spinal Fluid is currently being
studied and defined. For more information please call Customer Support Service or visit www.newscientific.com.
Free Light Chains in Blood and Cerebral Spinal Fluid
The Free Light Chains BNA Kit, when used in conjunction with Siemens “BN™ series” Analyzers (BNA, BN 100
BNII, ProSpec), is intended for the determination of Free Light Chains (FLC) kappa and lambda in
unconcentrated urine (see kit insert).
In addition, the kit can be used for the determination of Free Light Chains in blood and cerebral spinal fluid, as
per the advice notes below.
Indented Use
English
Rivolgersi al Servizio Clienti o visitare il sito www.newscientific.com.
Informazioni Tecniche e Riferimenti Bibliografici
 Tutti i reagenti vanno utilizzati unicamente in vitro e “solo per ricerca” (RUO = Research use only).
 Per le altre Avvertenze si veda l’inserto generale del kit.
Avvertenze per l’uso
Conservante: SodioAzide.
Vedi inserto generale del kit
Precauzioni per la sicurezza
Vedi inserto generale del kit
Nota sul Consumo di Reagente
Monoclonalità
Il test non consente di evidenziare se le CLL presenti nel campione siano policlonali, oligoclonali e monoclonali.
Valores de Referencia Normales
 Sangre – Suero (o plasma): No hay disponibles en la actualidad trabajos suficientes para dar indicaciones
sobre los valores de referencia normales de las Cadenas Ligeras Libres en sangre.
 Líquido Cefalorraquídeo: Las Cadenas Ligeras Libres están prácticamente ausentes en el líquido
cefalorraquídeo del sujeto normal.
Resultados e Interpretación
Calibración
Efectuar el procedimiento de calibración para ambas metódicas. Las curvas de calibración deben rehacerse por
lo menos siempre que se use un nuevo lote. Los resultados y las curvas típicas en el “BNII” se relacionan en el
reverso.
Muestras
 Suero (o plasma) fresco. Como conservante usar Azida Sódica 0,1%.
 Líquido Cefalorraquídeo, centrifugado, fresco. Como conservante usar Azida Sódica 0,1%.
Determinación sobre las Muestras
Efectuar la determinación con los reactivos CLL kappa y CLL lambda.
Control de Calidad
Se aconseja la inserción en cada serie analítica de:
 Control Negativo
PBS (o Solución Fisiológica) = Blanco Reactivo
 Calibrador diluido 1:6 – Conc.  1,33 mg/dl (estable sólo unas pocas horas)
 Control Positivo
 Como alternativa usar los Controles positivos: Y.UPR.FRK, Y.UPR.FRL;
Y.UPR.FRK.MV-3, Y.UPR.FRK.LV-3, Y.UPR.FRL.MV-3, Y.UPR.FRL.LV-3.
Procedimiento Operativo
Los parámetros analíticos generales se relacionana en las tablas del reverso. Para las especificaciones de la
aplicación, contactar con el Servicio de Asistencia al Cliente de NSC. Para su implementación dirigirse a Dade
Behring.
Parametrización del Analizador
A falta de indicaciones por parte de Comunidades Científicas se ha procedido por "Estandarización Interna".
Consultar las relativas instrucciones incluidas en el Kit.
Información sobre Calibradores / Controles
Ver las instrucciones del Kit.
Reactivos y Componentes del Kit
El método se basa en la reacción de Inmunoprecipitación en fase líquida con antisueros adsorbidos específicos
para los determinantes “Hidden" (ocultos) de las Cadenas Ligeras de las Inmunoglobulinas.
Método
Los kits usados en suero (o plasma) y en líquido cefalorraquíde, con la metódica específica, dan resultados
técnica y analíticamente excelentes; sin embargo, debemos subrayar que el significado clínico de la
determinación de la concentración de las Cadenas Ligeras Libres en sangre y en líquido cefalorraquíde está en
la actualidad en fase de estudio y definición. Para más información contactar con el Servicio de Asistencia al
Cliente o visitar el sitio www.newscientific.com.
Cadenas Ligeras Libres en sangre y en líquido cefalorraquídeo
El Kit Cadenas Ligeras Libres “BNA”, usado con los analizadores “Serie BN™” (BNA, BN 100, BNII, ProSpec)
de Siemens, tiene por objeto la determinación de las Cadenas Ligeras Libres (CLL) kappa y lambda en orinas
no concentradas (ver las instrucciones del Kit).
Además el Kit puede ser utilizado para la determinación de las Cadenas Ligeras Libres en sangre y en líquido
cefalorraquídeo con las advertencias relacionadas a continuación.
Objeto
Español
Please call Customer Support Service or visit www.newscientific.com.
Technical Information and References
 All reagents are intended for in vitro Research Use Only (RUO).
 Refer to the kit insert for other warnings.
Warnings
Preservative: Sodium Azide.
See the kit leaflet.
Precautions and Hazards
See the kit leaflet.
Advice on Reagent usage
Bit Data – Delta Bit
Regular checking of the "Bit Data" - “delta bit” is recommended.
On BNA, BN100 and ProSpec, concentration below the calibration curve minimum (result < x mg/dl) can
correspond to a “delta bit” just below the first point on the calibration curve; such a result could be significant.
Sample dilution
Regular checking of the "Sample Dilution” is recommended.
Antigen Excess
The application on “BNA” and “BN 100” allows a precise assay of a calibrator concentration ten times higher
than the highest set point of the calibration curve. The application on “BNII” and “ProSpec” checks the antigen
excess.
However, Antigen Excess cannot be ruled out.
Monoclonality
This test does not allow highlighting if the Free Light Chains in the sample are polyclonal, oligoclonal or
monoclonal.
\\Server2009\dati\Laboratorio\Laboratorio_2010\Produzione\Linea_FLC\Leaflet\KIT_FLC_DOC\BNA\Validi_Addendum_BldCSF\Add_K_BNA_FRK_FRL_BldCSF_ItEnEs_15_B00113_PerA4.doc - Rev: 9 – SaveDate: 07/02/10 21.25 – PrintDate: 07/02/10
Valori di Riferimento Normali
 Sangue – Siero (o plasma): non sono al momento disponibili lavori sufficienti a fornire indicazioni sui valori
di riferimento normali delle Catene Leggere Libere nel sangue.
 Liquido Cefalo Rachidiano: Le Catene Leggere Libere sono praticamente assenti nel Liquido Cefalo
Rachidiano del soggetto normale.
 Suggerimento: Per entrambi I tipi di campioni si suggerisce che ogni Laboratorio determini i propri valori di
riferimento.
Valori Significativi
 Sangue – Siero (o plasma): non sono al momento disponibili lavori sufficienti a fornire indicazioni sui valori
di riferimento normali delle Catene Leggere Libere nel sangue.
 Liquido Cefalo Rachidiano: Qualsiasi valore superiore a quello del PBS (Bianco Reagente, Controllo
Negativo) è da considerare potenzialmente positivo. Alcuni utilizzano come cut off il doppio del valore del
PBS.
 Suggerimento: Per entrambi I tipi di campioni si suggerisce che ogni Laboratorio determini i propri valori
significativi.
Limitazioni – Mancanza di parallelismo Campione/Calibratore
Le Catene Leggere Libere presenti nel campione e quelle presenti nei Calibratori possono essere "diverse" e
possono perciò reagire in modo non proporzionale; mancanza di parallelismo campione/calibratore. Ciò è
analogo a quanto avviene con la determinazione quantitativa in Turbidimetria e Nefelometria nel caso di
Immunoglobuline Monoclonali nel siero (Componente Monoclonale – CM serica).
Dati in bit – Delta Bit
Si consiglia di controllare sempre i "Dati in Bit" - “delta bit”.
Sul BNA, BN100 e ProSpec, concentrazioni minori del limite inferiore della curva di calibrazione (risultato: < x
mg/dl) possono corrispondere a un “delta bit” appena più basso di quello del primo punto della curva di
calibrazione; un tale risultato potrebbe essere significativo.
Diluizione del Campione
Si consiglia di controllare sempre la “diluizione del campione” su cui viene eseguito il test.
Eccesso di Antigene
L’applicazione su “BNA e BN100” consente la corretta misurazione di una concentrazione di Calibratore 10 volte
più alta del punto di più alto della curva di calibrazione. L’applicazione su “BNII” e “ProSpec” prevede il controllo
automatico dell’eccesso di antigene. Comunque, non è possibile escludere che un Campione vada in "Eccesso
di Antigene".
Risultati e Interpretazione
Calibrazione
Eseguire la procedura di calibrazione per entrambe le chimiche. Le curve di calibrazione devono essere ripetute
almeno al cambio di lotto. I risultati e la curva tipica sul “BNII” è riportata sul retro.
Campione
 Siero (o plasma) fresco. Come conservante usare SodioAzide 0,1%.
 Liquido Cefalo Rachidiano, centrifugato, fresco. Come conservante usare SodioAzide 0,1%.
Determinazione sui Campioni
Eseguire la determinazione con i reagenti CLL kappa e CLL lambda.
Controllo di Qualità
Si consiglia di inserire in ogni serie analitica:
 Controllo Negativo
PBS (o Soluzione fisiologica) = Bianco reagente
 Calibratore diluito 1:6 – Conc.  1,33 mg/dl (stabile per poche ore)
 Controllo Positivo
 In alternativa usare i Controlli positivi: Y.UPR.FRK, Y.UPR.FRL;
Y.UPR.FRK.MV-3, Y.UPR.FRK.LV-3, Y.UPR.FRL.MV-3, Y.UPR.FRL.LV-3.
Procedura Operativa
I parametri analitici generali sono riportati in tabella sul retro. Per le specifiche dell’applicazione, contattare il
Servizio Clienti di NSC. Per l’implementazione rivolgersi alla Dade Behring.
Parametrizzazione dell’analizzatore
In mancanza di indicazioni delle Comunità Scientifiche si è proceduto per "Standardizzazione Interna".
Vedere l’apposito inserto allegato al kit.
Informazioni sui Calibratori / Controlli
Vedere inserto del kit.
Reagenti e Componenti del kit
Il metodo si basa sulla reazione di ImmunoPrecipitazione in fase liquida con antisieri adsorbiti specifici per i
determinanti “hidden" delle Catene Leggere delle Immunoglobuline.
Metodo
I kit usati su siero o plasma e sul Liquido Cefalo Rachidiano, con la specifica applicazione, danno risultati
tecnicamente e analiticamente ineccepibili. D’altra parte sottolineiamo che il significato clinico della
determinazione della concentrazione delle Catene Leggere Libere nel sangue e nel Liquido Cefalo Rachidiano è
attualmente in fase di studio e definizione. Per maggiori informazioni rivolgersi al Servizio Clienti o visitare il sito
www.newscientific.com.
Catene Leggere Libere nel Sangue e Liquido Cefalo Rachidiano
Il kit Catene Leggere Libere “BNA”, usato sugli analizzatori di Siemens “Serie BN™” (BNA, BN 100, BNII,
ProSpec), ha per obiettivo la determinazione delle Catene Leggere Libere (CLL) kappa e lambda nelle urine non
concentrate (vedi inserto generale del kit).
Inoltre il kit può essere utilizzato per la determinazione delle Catene leggere Libere nel sangue e nel Liquido
Cefalo Rachidiano con le avvertenze sotto riportate.
Scopo
Italiano
40
μl
μl
μl
Last Measure
20 μl Measure Type
40 μl
180
Fixed Time
40
μl
μl
μl
Last Measure
20 μl Measure Type
30 μl
180
03/04/2006
Sample Dilution
Mod: Istruzioni
Fixed Time
BNII only
valid revision 03/04/2006
Sample Dilution
1:1
extrapolation at "0" bit
1:2,5
5
1:5
Phone: + 39 031 93 81 32 – Fax: + 39 031 35 20 409 – [email protected]
New Scientific Company S.r.l. – Via Torino, 12 – 22070 Fenegrò (CO) – Italy
Aplicaciones Suero y Líquido Cefalorraquídeo
Kit Cadenas Ligeras Libres – Reactivos Separados
Application Serum and Cerebral Spinal Fluid
Kit Free Light Chains – Separate Reagents
Applicazione Siero e Liquido Cefalo Rachidiano
Kit Catene Leggere Libere – Reagenti Separati
K.BNA.FRK.FRL
ImmunoNefelometria su Analizzatori serie BN™
ImmunoNephelometry on “BN™ series” Analyzers
ImmunoNefelometría para Analizadores Serie BN™
BIOMEDICINA – PATOLOGIA CLINICA - INFORMATICA
\\Server2009\dati\Laboratorio\Laboratorio_2010\Produzione\Linea_FLC\Leaflet\KIT_FLC_DOC\BNA\Validi_Addendum_BldCSF\Add_K_BNA_FRK_FRL_BldCSF_ItEnEs_15_B00113_PerA4.doc - Rev: 9 – SaveDate: 07/02/10 21.25 – PrintDate: 07/02/10
NSC.FLC.AP.BNII cerebral spinal fluid
Calibration
reaction Set Points (Levels)
sec 1.800 sec First dilution
pre reaction
Measurement Parameters
Note Complete BNII assay parametres are on document code:
(*) = N reaction buffer
180
Buffer (*)
Reagent
20
pre reaction reaction
Reaction Volumes
Sample
valid revision
BNII only
5
1:2,5
extrapolation at "0" bit
Assay Parameters set up on BNII - ProSpec - CSF
NSC.FLC.AP.BNII serum
Calibration
reaction Set Points (Levels)
sec 1.800 sec First dilution
pre reaction
Measurement Parameters
Note Complete BNII assay parametres are on document code:
(*) = N reaction buffer
180
Buffer (*)
15
Reagent
Sample
pre reaction reaction
Reaction Volumes
Assay Parameters set up on BNII - ProSpec - Serum
Contactar con el Servicio de Asistencia al Cliente o consultar www.newscientific.com.
Informaciones Técnicas y Referencias Bibliográficas
 Todos los reactivos deben emplearse únicamente In Vitro y “sólo para investigación” (RUO = Research Use
Only).
 Para las demás Advertencias ver las instrucciones del Kit.
Advertencias para el Uso
Conservante: Azida Sódica.
Ver las instrucciones del Kit.
Precauciones para la Seguridad
Ver las instrucciones del Kit.
Nota sobre el Consumo de Reactivo
 Sugerencia: Para ambos tipos de muestras se sugiere que cada Laboratorio determine sus propios
valores de referencia.
Valores Significativos
 Sangre – Suero (o plasma): No hay disponibles en la actualidad trabajos suficientes para dar indicaciones
sobre los valores significativos de las Cadenas Ligeras Libres en sangre.
 Líquido Cefalorraquídeo: Cualquier valor superior al obtenido con el PBS (Blanco Reactivo, Control
Negativo) debe considerarse potencialmente positivo. Algunos emplean como Cut-Off el doble del valor
del PBS.
 Sugerencia: Para ambos tipos de muestras se sugiere que cada Laboratorio determine sus propios
valores significativos.
Limitaciones – Falta de Paralelismo Muestra/Calibrador
Las Cadenas Ligeras Libres presentes en la muestra y las presentes en los Calibradores pueden ser "distintas"
y pueden por ello reaccionar de manera no proporcional; falta de paralelismo muestra/calibrador. Ello es
análogo a lo que ocurre con la determinación cuantitativa por Inmunoprecipitación en fase líquida
(Turbidimetría/Nefelometría) en el caso de Inmunoglobulinas Monoclonales en el suero (Componente
Monoclonal – CM sérico).
Datos en Bit – Delta Bit
Se aconseja controlar siempre los "Datos en Bit" - “Delta Bit”.
En el BNA, BN100 y ProSpec, concentraciones menores que el límite inferior de la curva de calibración
(resultado: < x mg/dl) pueden corresponder a un “Delta Bit” sólo un poco más bajo que el del primer punto de la
curva de calibración; tal resultado podría ser significativo.
Dilución de la Muestra
Se aconseja controlar siempre la “dilución de la muestra” sobre la que se ha efectuado el test.
Exceso de Antígeno
La aplicación del “BNA" y "BN100” permite la correcta medida de una concentración de Calibrador 10 veces
más alta que la del punto más alto de la curva de calibración. Las aplicaciones del “BNII” y “ProSpec” prevén el
control automático del exceso de antígeno. De cualquier modo, no es posible excluir que una Muestra vaya en
"Exceso de Antígeno".
Monoclonalidad
El test no permite evidenciar si las CLL presentes en la muestra son policlonales, oligoclonales o monoclonales.