MEDICIÓN DE POTENCIAL HÍDRICO EN PAPA Uno de los

MEDICIÓN DE POTENCIAL HÍDRICO EN PAPA
Uno de los conceptos más utilizados en la actualidad para entender la relación de
las plantas con el agua tanto en la absorción y transporte como en la pérdida de
agua por transpiración, es el potencial hídrico. El movimiento del agua en las
plantas depende del potencial hídrico de sus tejidos, que al estar determinados por
las características órgano-funcionales de raíces, tallo, hojas
o sus
subcomponentes, adoptan dependiendo de su metabolismo y relaciones con el
entorno, distintos valores de potencial hídrico ().
Para medir el potencial hídrico existen varios métodos (Salisbury y Ross, 1991)
siendo uno de los más accesibles la medición de las variaciones de peso o
volumen en un tejido u órgano determinado, colocándolos en soluciones con
diferentes concentraciones de sacarosa, manitol y polietilenglicol entre otros a
efecto de establecer condiciones de hiper, iso e hipotonicidad donde lo que se
busca es una condición isotónica, es decir, aquella donde la concentración externa
e interna sean aproximadamente iguales y, con esto, una vez transformadas las
concentraciones a unidades de  mediante la ecuación de Van´t Hoff se obtendrá
el  del tejido en cuestión. Se infiere que la condición isotónica corresponderá
aquella donde no haya cambio de estas variables, es decir ganancia o pérdida
neta de agua. En la figura 1 La flecha punteada indica el punto de isotonicidad, es
decir donde no hay ganancia ni pérdida neta de peso.
Figura 1. Gráfica que muestra el método de cambio de peso para
determinación de potencial hídrico.
la
OBJETIVO.
Medir el potencial hídrico de fracciones de papa (Solanum tuberosum L.) mediante
los métodos de cambio de peso, Chardakov y refractométrico.
MATERIAL
7 frascos gerber, 21 tubos de ensayo de 25 ml, gradilla, pipeta Pasteur, pipeta de
10 ml, balanza (precisión de 0.01g), refractómetro para azúcares en grados Brix,
navaja, 2 servitoallas, 50 mL de cada una de las soluciones de sacarosa
siguientes 0.0, 0.10, 0.20, 0.30, 0.40, 0.50, 0.60 molal, piseta con agua destilada,
cutter o sacabocados con un diámetro de 1 cm de luz interior y dos papas
grandes.
MÉTODO
Vierta en tubos de ensayo las cantidades indicadas en la tabla 1 de cada
solución. A la denominada tercera serie de cada uno de las concentraciones,
adicione una gota de rojo neutro.
Soluciones
de sacarosa
(m)
Primera serie
Segunda serie
Tercera serie
Con 1 fracción de
Con 1 fracción de
sin fracción de
papa por tubo de
papa por tubo de
papa (mL).
ensayo donde
ensayo donde
permanecerá 1.5
permanecerá 1.5
horas en cada
horas en cada
concentración (mL)
concentración (mL)
0.0
15
15
15
0.1
15
15
15
0.2
15
15
15
0.3
15
15
15
0.4
15
15
15
0.5
15
15
15
0.6
15
15
15
Tabla 1. Distribución de series de tubos con las distintas concentraciones
necesarias para la determinación de tres métodos de medición de 

Con ayuda de un cutter o sacabocados obtenga 14 fracciones de 3 cm de largo X
0.5 cm de diámetro.
Inmediatamente después de obtener las fracciones de papa péselas en una
balanza con una precisión mínima de 0.01 g colóquelas en la solución que le
corresponda y espere 1.5 horas.
Mientras transcurre el tiempo de espera, elabore con ayuda del refractómetro una
curva de calibración (Grados Brix vs MPa correspondientes a cada concentración
de sacarosa) con las soluciones de la serie 3.
Una vez elaborada la curva de calibración, agregue dos o tres gotas de colorante
(safranina) a cada tubo de la serie 3.
Transcurridas las 1.5 horas de incubación, saque las fracciones de cada solución
(con ayuda de los frascos gerber), séquelas ligeramente con una servitoalla y
péselas nuevamente. Repita este procedimiento con todas las fracciones
incubadas en las soluciones en el orden cronológico en que fueron inicialmente
colocadas, sin desechar las soluciones de donde las extrajo.
Calcule el porcentaje de cambio de peso utilizando la fórmula siguiente:
peso final - peso inicial
% cambio de peso = ------------------------------- x 100
peso inicial
Construya una gráfica con el porcentaje de cambio peso (en el eje de las
ordenadas) contra la equivalencia en MPa de cada concentración de sacarosa (eje
de las abscisas).
= - miRT
donde: m = molalidad de la solución
i = constante de ionización
R= constante de los gases (0.0083 MPa Kg-1 mol-1°K-1)
T= temperatura absoluta (°K)
Con los datos del % de cambio de peso determine por interpolación en la gráfica la
concentración en la cual no haya ocurrido un cambio de peso neto en las
fracciones de papa.
Método de medición de  por refractometría. Con una gota de cada una de las
soluciones que contuvieron las fracciones de papa (serie 1), realice las lecturas
con el refractómetro e interpole en la curva de calibración original que realizó
previamente con los datos de la serie 3.
Método de medición de  Chardakov. Ordene la tercer serie de soluciones que
tiño con rojo neutro junto con las soluciones restantes de la serie 2.
0.0 m
0.0 m
Tubos sin rojo neutro (Serie 2)
0.1 m
0.2 m
0.3 m
0.4 m
0.5 m
Tubos con una gota de rojo neutro (Serie 3)
0.1m
0.2 m
0.3 m
0.4 m
0.5 m
0.6 m
0.6 m
Tabla 2. Preparación y distribución de tubos con y sin rojo neutro para la medición
del en fracciones de papa.
Con una pipeta Pasteur tome un pequeño volumen de cada solución teñida con
rojo neutro e introduzca la punta de la misma con la gota, sin soltarla, hasta la
mitad del tubo que contuvo la fracción de papa y libere una gota sin “empujarla” y
anote si su desplazamiento es ascendente, descendente o estático (Figura 2).
Figura 2. Método de Chardakov.
Serie 1.
Soluciones de  Peso Peso % Cambio de
sacarosa (mL) MPa Inicial Final
peso
g
g
[Sacarosa]
Grados Brix
Chardakov
Ascensodescenso
de gotas teñidas
[Sacarosa]
Grados Brix
Chardakov
Ascensodescenso
de gotas teñidas
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
Serie 2.
Soluciones de  Peso Peso % Cambio de
sacarosa (mL) MPa Inicial Final
peso
g
g
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
Tabla 3. Resultados obtenidos en los tres métodos de medición de en
fracciones de papa

Discuta respecto a las diferencias o coincidencias entre estos métodos.


Cuestionario
1. ¿Cuál es el fundamento de los métodos de medición de potencial hídrico
utilizados en ésta práctica?
2 ¿Cómo mediría el potencial hídrico de un exudado de floema?
3. Describa un método para la medición de potencial hídrico en epidermis de
cebolla.
4. La expresión siguiente: “ solución de sacarosa =  solución de sacarosa” ¿es correcta o
incorrecta. Justifique su respuesta?
REFERENCIAS
Azcón-Bieto, J. y Talón, M. 2000. Fundamentos de Fisiología Vegetal.
Interamericana-McGraw-Hill, Madrid.
Moore, T.C.1974. Research experiences in plant physiology. A laboratory manual.
Springer-Verlag. New York. pp 20-23.Redwood City, California.
Salisbury, F.B. y Ross, C.W. 1991. Plant Physiology. Wadsworth Publishing.
California.
Taiz, l. y Zeiger, E. 2006. Plant Physiology. Sinauer Associates, Sunderland, MA,
USA. Web: http://www.plantphys.net