(Estudios in vivo y estudios in vitro) •IN VIVO: es la experimentación con un todo, que viven organismos en comparación. Ensayos con animales y ensayos clínicos son dos formas de investigación in vivo. Los ensayos in vivo son empleados más a menudo en in vitro, ya que es más adecuado para la observación de los efectos globales de un experimento sobre un tema de vida. •IN VITRO: es un conjunto de fenómenos observados en el laboratorio a partir de productos biológicos vivos. Método para mantener en vida diversos organismos vivos como son: células, espermatozoides, óvulos, virus, etc. In vivo ( latín: dentro de lo vivo) significa “que ocurre o tiene lugar dentro de g g un organismo”. En ciencia se refiere a experimentación hecha dentro o en el tejido vivo de un organismo vivo, por oposición a uno parcial o muerto. Pruebas con animales y los ensayos clínicos son formas de investigación in vivo vivo. Es a menudo más apropiado para la observación de efectos finales y totales para un experimento en el sujeto viviente. Aunque en la biología molecular, in vivo se refiere a experimentación a nivel celular, donde estas pueden ser rotas y analizadas. También puede ser referencia a cualquier tipo de experimentación por oposición aquella que se hace in vitro, por ejemplo, los experimentos de propagación de plantas que se hacen en viveros se consideran in vivo, contrario a lo que sucede cuando se propagan plantas en tubos de ensayo, que se considera in vitro. En ambos casos el sujeto de experimentación esta vivo. i In vitro (latín: dentro del vidrio) se refiere a una técnica para realizar un determinado experimento en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente determinado experimento en un tubo de ensayo, o generalmente en un ambiente controlado fuera del organismo vivo. Muchos experimentos en biología celular son llevados a cabo fuera del organismo, en células. Porque las condiciones a veces pueden no corresponder a las condiciones dentro del organismo, los experimentos in vitro pueden ser poco exactos. Este tipo de investigación apunta a describir los efectos de una variable experimental en un subconjunto de las partes constitutivas de un organismo. Tiende a enfocarse en órganos, tejidos, células, componentes celulares, proteínas y/o biomoléculas. Es más apropiada para deducir un mecanismo de acción, con / bi lé l E á i d d d i i d ió menos variables y reacciones amplificadas. La principal ventaja de trabajar en vitro es que permite un enorme nivel de la simplificación del sistema bajo estudio, por lo que el investigador puede centrarse en un pequeño número de componentes. Por ejemplo, la identidad de las proteínas de la sistema inmune (por ejemplo, anticuerpos), y el mecanismo por el cual se reconocen y se unen a los antígenos extraños, seguiría siendo muy oscuro si no fuera por el uso extensivo de el trabajo in vitro para aislar las proteínas, identificar las células y los genes que las producen, el estudio de la física propiedades de su interacción con los antígenos e identificar cómo las interacciones conducen a las interacción con los antígenos, e identificar cómo las interacciones conducen a las señales celulares que activan otros componentes del sistema inmune. La principal desventaja de los estudios experimentales in vitro es que a veces puede ser muy difícil extrapolar a partir de los resultados de df l l d l l d d ensayos in vitro de trabajo de d b d nuevo a la biología del organismo intacto. Los investigadores hacen en el trabajo in vitro debe ser cuidadoso para evitar la mala interpretación de sus resultados, a veces puede llevar a conclusiones erróneas acerca de organismos y biología de sistemas. En experimentos in vivo que dar más información de lo que realmente está d f d l l pasando dentro de la célula (propiedades fisicoquímicas son diferentes a la de soluciones acuosas diluidas, lo que puede haber un problema con los estudios in vitro ya que las constantes estimadas in vitro pueden ser muy diferentes a la real in vivo). Todas las células contienen varios tipos de maquinaria y pequeñas moléculas que pueden ayudar a su experimento. Al mismo tiempo esto es una desventaja porque tiene demasiados parámetros que no se pueden d t j ti d i d á t d controlar bien. Por lo tanto no podría ser capaz de darse cuenta (por lo menos correcta o completamente) por lo que esta observando. Por otra p parte los organismos vivos exhiben una gran variabilidad, incluso con el g g , tiempo, que no puede ser realmente controlada. •Reacción en cadena de polimerasa: es un método de replicación selectiva d l ADN y secuencias del i específicas ífi d ARN en ell tubo de b de d ensayo. •Purificación de proteínas: implica el aislamiento de una proteína específica p de interés a p partir de una mezcla compleja p j de p proteínas,, a menudo se obtienen a partir de células o tejidos homogeneizados. •La fertilización in vitro: se utiliza para permitir espermatozoides para f tili fertilizar l huevos los h en un plato l t de d cultivo lti antes t de d implantar i l t ell embrión b ió resultante o embriones en el útero de la futura madre. •Diagnóstico g in vitro: se refiere a una amplia p gama de p g pruebas de laboratorio médicos y veterinarios que se utilizan para diagnosticar enfermedades y supervisar el estado clínico de los pacientes con muestras de sangre, las células o tejidos obtenidos de un paciente. La fecundación in vitro (FIV o IVF por sus siglas en inglés) es una técnica por la cual la l l l fecundación f d ió de los d l ovocitos it por los espermatozoides l t id se realiza li fuera del cuerpo de la madre. La FIV es el principal tratamiento para la esterilidad cuando otros métodos de reproducción asistida no han tenido éxito. El proceso implica el control hormonal del proceso ovulatorio, p p p , extrayendo los ovocitos de los ovarios maternos, para permitir que sean fecundados por los espermatozoides en un medio líquido. El ovocito fecundado (el cigoto) se transfiere entonces al útero de la hembra con la intención de iniciar un embarazo. intención de iniciar un embarazo La interpretación de los resultados de estudios in vitro de metabolización representa la etapa más delicada y requiere la consideración de diversos parámetros en el análisis. Entre estos parámetros necesarios se incluyen, entre otros, la presencia de metabolitos activos, la existencia de vías metabólicas accesorias y el polimorfismo genético. Esta información debe, a su vez, complementarse con datos obtenidos en seres humanos, como la determinación de la concentración circulante del medicamento y sus metabolitos, las concentraciones de enzimas hepáticas, las vías de eliminación del medicamento y su índice terapéutico. XENOBIOTICOS EN EL METABOLISMO Todos los organismos se encuentran constantemente expuestos a compuestos y elementos químicos que no pueden utilizar como p y q q p alimento y y serían dañinos si se acumularan en sus células, ya que no tendrían una función metabólica. Estos compuestos potencialmente dañinos son llamados xenobioricos .Los xenobióticos como las drogas sintéticas, los venenos naturales y los antibióticos son detoxificados por un conjunto de enzimas xenobióticas‐metabolizadoras. En los humanos, esto incluye a las citocromo oxidasas P450, las UDP‐glucuroniltransferasas y las glutatión‐S‐transferasas Un ejemplo de metabolismo xenobiótico es la depuración de los fármacos por parte del hígado, como puede verse en el diagrama adjunto p p g p g j