Efectos de la saponina sobre el medio Nuno Caiola [email protected] Resumen 1) Detección en el medio de las saponinas comerciales 2) Evaluación de la biodegradabilidad de saponinas comerciales 3) Toxicidad en bivalvos de las saponinas Detección en el medio de las saponinas (Muestreo) 12/02/2014 2 Detección en el medio de las saponinas (Método de análisis) ‒ UPLC-MS (cromatografia líquida de masas de alta performance) – Permite detectar concentraciones de hasta aproximadamente, 3 mg/L. Detección en el medio de las saponinas (Resultados) ‒ No se han detectado saponinas en el medio. ‒ Ésto significa que su concentración en el medio es inferior a 3 mg/L. Biodegradabilidad (Método de análisis) ‒ Se evalúa la degradación del carbono orgánico total (TOC) del compuesto (saponinas comerciales) en un frasco cerrado. ‒ La degradación de la sustancia se mide a partir de la bajada del TOC después de 28 días de incubación. Biodegradabilidad (Resultados) ‒ Los compuestos que presenten más del 60% de bajada de TOC se consideran fácilmente biodegradables, según la normativa oficial de la UE y la EPA (OECD 310/ISO14593). Mostra Carboni orgànic inicial (mg/l) Biodegradació (%) SL 4675 92 ± 0.6 SS 1270 83 ± 2.7 Taula 5. Contingut inicial de carboni de les mostres de saponina líquida (SL) i sòlida (SS) Contenido inicial de carbono de las muestras de saponina líquida i percentatge de biodegradació en 28 dies. (SL) y sólida (SS) y porcentaje de biodegradación en 28 días. % biodegradación Biodegradabilidad (Resultados) Tiempo (días) Toxicidad en bivalvos (Métodos) ‒ Adquisición de ejemplares vivos de mejillón de la bahías (Mytilus galloprovincialis). ‒ Aclimatación de los mejillones a las condiciones experimentales durante una semana. ‒ 40 mejillones en 40 l de agua de mar filtrada ‒ Condiciones semi-estáticas de renovación de agua (cambio de agua diario y alimentación ad libitum). ‒ Los mejillones se expusieron a tres concentraciones de saponina (0.1, 1 y 10 mg/l) y una condición control sin saponina del 10 al 17 de octubre de 2013. ‒ Análisis de la mortalidad ‒ Análisis de biomarcadores a los días 1 y 7 de experimento Toxicidad en bivalvos (Métodos) Toxicidad en bivalvos (Biomarcadores) ‒ Substancias producidas por el organismo. ‒ Una producción atípica de estas sustancias (mayor o menor) indica un estado de estrés. ‒ Los biomarcadores analizados fueron lípidos peroxidados y algunas enzimas antioxidantes: superóxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT), glutatión reducido (GSH) y lactato deshidrogenasa (LDH). Toxicidad en bivalvos (Resultados) Tractaments Mortalitat (%) CONTROL 5 0.1 mg/L 10 1 mg/L 7.5 10mg/L 25 Mortalidad (%) de mejillones expuestos a distintas concentraciones de Taula 6. Mortalitat (%) de musclos exposats a diferents concentracions de saponines. saponina. 1d 7d LDH /nmol/min/mg prot) GST (nmol/min/mg prot) 70 60 50 40 30 20 10 0 CT 0.1 1.0 8 ** 6 4 2 0 10.0 CT Saponina (mg/l) * * SOD (U/mg prot) 25 10.0 Saponina (mg/l) * 20 15 10 5 ** 140 120 100 80 60 40 20 0 0 CT 0.1 1.0 CT 10.0 0.1 1.0 10.0 Saponina (mg/l) Saponina (mg/l) 60 350 * 50 40 30 20 10 0 LPO (nmol MDA/ g ww) GSH (nmol/g ww) 1.0 160 CAT (mol/min/mg prot) 30 0.1 300 250 200 150 100 50 0 CT 0.1 1.0 Saponina (mg/l) 10.0 CT 0.1 1.0 Saponina (mg/l) 10.0 Conclusiones ‒ Las dos formulaciones comerciales son biodegradables. ‒ Los análisis químicos de las muestras de agua del Delta de l’Ebre indican los residuos que la saponina utilizada en 2013 para combatir el caracol manzana no se detecta en el medio (arrozales, canales de drenaje y bahía del Fangar). Ésto se atribuye a la su rápida degradabilidad, baja concentración utilizada en los tratamientos. ‒ Los experimentos de toxicidad con bivalvos evidenciaron efectos tóxicos casi inapreciables de la saponina sólida sólo a la concentración máxima de 10 mg/l. Ésta concentración es superior a la utilizada en el tratamiento en los arrozales. En concentraciones 10 y 100 veces más diluidas no se detectó ningún efecto tóxico. ‒ Estos resultados indican que el riesgo ecotoxicológico de las formulaciones comerciales de saponinas es muy pequeño y marginal. Particularmente su toxicidad en especies de moluscos que es cultivan en las bahías es muy baja debido a su baja toxicidad, gran degradabilidad y dilución.