Colirio de extracto de celulas madre de cordon umbilical

COLIRIO DE EXTRACTO DE CÉLULAS
MADRE DE CORDÓN UMBILICAL
Corral Aragón, A., Pérez LLorens, L., Corral García-Segura, L., Corral García-Segura, J.
La Botica de Argensola. C/ Argensola 12. 28004 Madrid.
www.farmaciamagistral.com
Abstract:
Concentrated growth factors present at the umbilical cord
stem cells conveniently preparated in eye drop form make a
effective treatment for the regeneration of damaged tissues
on the anterior pole of the eye and cornea due to wounds,
herpethic keratitis, neurotrophic keratitis, alkaline burns and
other pathologies.
Resumen:
Obtención de un colirio a partir de factores de crecimiento
epitelias, citoquinas y proteína presentes en células madre
de cordón umbilical para el tratamiento de enfermedades
graves del polo anterior del ojo como la queratitis herpética,
las queratitis neurotróficas, quemaduras por álcali y otras.
Objetivos:
Preparación por Formulación Magistral de un extracto liofilizado de concentrado de células madre de cordón umbilical con buena
estabilidad para ser utilizado, una vez reconstituido, como colirio en el tratamiento de enfermedades graves de la superficie ocular.
Material y métodos:
Método experimental propio. Las condiciones de preparación son de Alto
Riesgo. El H. U. La Paz de Madrid proporciona los cordones umbilicales
obtenidos de mujeres con cesárea programada a término, descartadas las
enfermedades víricas de transmisión VIH, hepatitis y sífilis, observando un
periodo “ventana” de tres meses y respetando el Protocolo de Helsinki. Los
cordones umbilicales son pinzados en sus extremos y lavados en quirófano
con una solución fisiológica con antibióticos, pasan al banco de tejidos
donde se congelan con nitrógeno líquido. En nuestro laboratorio se
descongelan, se extrae toda la sangre y se diluye con suero salino
fisiológico hasta el 30% dejando coagular durante tres horas. El cordon se
pesa, se añade solución isotónica de manitol hasta que el peso del cordón
suponga el 30% y se muele finamente para romper los tejidos. A
continuación, para romper las células utilizamos un disruptor celular Sonics
VibraCell manteniendo la muestra en baño de hielo para asegurar que no
aumenta la temperatura.
Por centrifugación a 3000rpm durante 10 minutos se extrae el suero de la
sangre que contenía el cordón y por centrifugación a 6000rpm durante 15
minutos separamos los restos celulares
obtenidos en la molienda y
sonicación del cordón umbilical. Pesamos y ajustamos con solución
isotónica de manitol para obtener un extracto al 15% por mililitro.
Repartimos 2ml de la solución obtenida en viales de vidrio topacio de 5ml estériles y pretaponados. Liofilizamos con un enfriamiento
previo a -76ºC durante seis horas y aplicamos el programa de liofilización correspondiente a tejidos.
Para la reconstitución se emplea agua para inyección (API) inyectando en el vial 2ml si queremos obtener un colirio de cordón umbilical al
30% o inyectando 3ml si deseamos un colirio al 20%.
Una vez reconstituido en el vial se toma con jeringa estéril y se trasvasa a envase gotero estéril de colirios con técnica aséptica.
Resultados:
El liofilizado obtenido se reconstituye con 3ml ó 2ml de agua para inyección (API) para obtener un colirio de células madre de cordón
umbilical al 20% o al 30% respectivamente. En estudios posteriores sobre el colirio se ha observado que los factores de crecimiento:
factor de crecimiento epidérmico, nervioso, IGF-1 (insulínico), de keratinocitos, hepatocitarios y fibroblástico básico, vitamina A y
sustancia P, permanecen activos durante al menos 6 meses en el liofilizado y 45 días en el reconstituido. La concentración de factores
de crecimiento varía con la edad gestacional y la edad de la donante.
Conclusiones:
La preparación en Fórmula Magistral de colirio de células madre de cordón umbilical abre unas expectativas prometedoras para el
tratamiento de patologías muy graves de la superficie ocular y córnea. El proceso de obtención del concentrado de factores de
crecimiento y su conservación por liofilización permite la obtención de un medicamento estable y eficaz en las patologías citadas.
BIBLIOGRAFÍA:
1.- Boto de los Bueis, A; Pastora Salvador, N; Del Hierro Zarzuelo, A. Colirio de suero de cordón umbilical y colirio de suero autólogo en el manejo de la ulceración corneal neurotrófica. Comunicación Reunión
Anual de la Sociedad Oftalmológica de Madrid. Diciembre 2008. Madrid