LA INCUBACIÓN DE CÉLULAS HELA A 15ºC INDUCE LA FORMACIÓN DE ESTRUCTURAS TUBULARES DINÁMICAS EN EL COMPARTIMENTO INTERMEDIO M. Tomás, E. Martínez-Alonso, J. Ballesta, J.A. Martínez-Menárguez. Departamento Biología Celular, Facultad Medicina, Universidad de Murcia. [email protected] La incubación de células a 15ºC produce un bloqueo del transporte a nivel del compartimento intermedio (ERGIC) y es por ello utilizado como modelo experimental para el estudio del tráfico intracelular. Estudios previos de nuestro grupo de investigación han demostrado que esta temperatura induce la formación de túbulos derivados del aparato de Golgi (1, 2) que podrían ser representantes de los intermediarios que median en el transporte intra-Golgi. En este trabajo hemos analizado si la baja temperatura también induce tubulación a nivel del ERGIC. Para ello hemos analizado la distribución y dinámica in vivo de YFP-P58, marcador del ERGIC, mediante microscopia confocal en células cultivadas a 15ºC y a 37ºC. Los estudios in vivo han demostrado que la baja temperatura produce la formación de estructuras tubulares en el ERGIC de comportamiento muy dinámico y máxima expresión en el rango de 40-50 minutos tras la incubación, estructuras que no se aprecian en condiciones fisiológicas. Interesantemente, este patrón observado en el ERGIC es muy similar al observado tras el tratamiento con BFA a tiempos más cortos (10 min). Estos resultados nos permiten postular que la formación de estos túbulos podría ser consecuencia de la disociación de las cubiertas COPI ya que tanto el tratamiento con BFA como la baja temperatura (1) inducen la disociación de este complejo de las membranas. También, hemos analizado mediante microscopía de fluorescencia y crioinmunocitoquímica ultraestructural la distribución de otros marcadores de compartimento intermedio. Hemos observado que la baja temperatura también induce la disociación de las cubiertas tipo COPII desde las membranas a zonas electrodensas del citosol, lo que podría explicar la ralentización del transporte desde el RE hasta el compartimento intermedio observado a 15ºC. (1) Martinez-Alonso E, Egea G, Ballesta J, and Martinez-Menarguez JA. Traffic 2005; 6:32-44. (2) Martinez-Alonso E, Ballesta J, and Martinez-Menarguez. Traffic 2007; 8:359-368. Indique área temática en la que incluiría su comunicación: señale con el número 1 o 2 las casillas correspondientes según su preferencia: Sesión I: Nuevas Tecnologías Sesión II: Proliferación, muerte celular diferenciación Sesión III: Ciclo celular y cáncer Sesión IV: Neurobiología celular y molecular Sesión V: Citoesqueleto y tráfico intracelular Sesión VI: Patología celular y molecular Sesión VII: Inmunobiología y Sesión VIII: Núcleo y expresión génica Sesión IX: Señalización y transducción de señales Sesión X: Células troncales y terapia celular Sesión XI: Biología de la reproducción y el desarrollo