Fth ghj gh - Universidad de Murcia

LA INCUBACIÓN DE CÉLULAS HELA A 15ºC INDUCE LA
FORMACIÓN DE ESTRUCTURAS TUBULARES
DINÁMICAS EN EL COMPARTIMENTO INTERMEDIO
M. Tomás, E. Martínez-Alonso, J. Ballesta, J.A. Martínez-Menárguez.
Departamento Biología Celular, Facultad Medicina, Universidad de
Murcia. [email protected]
La incubación de células a 15ºC produce un bloqueo del transporte a
nivel del compartimento intermedio (ERGIC) y es por ello utilizado como
modelo experimental para el estudio del tráfico intracelular. Estudios
previos de nuestro grupo de investigación han demostrado que esta
temperatura induce la formación de túbulos derivados del aparato de
Golgi (1, 2) que podrían ser representantes de los intermediarios que
median en el transporte intra-Golgi. En este trabajo hemos analizado si la
baja temperatura también induce tubulación a nivel del ERGIC. Para ello
hemos analizado la distribución y dinámica in vivo de YFP-P58, marcador
del ERGIC, mediante microscopia confocal en células cultivadas a 15ºC y
a 37ºC. Los estudios in vivo han demostrado que la baja temperatura
produce la formación de estructuras tubulares en el ERGIC de
comportamiento muy dinámico y máxima expresión en el rango de 40-50
minutos tras la incubación, estructuras que no se aprecian en condiciones
fisiológicas. Interesantemente, este patrón observado en el ERGIC es
muy similar al observado tras el tratamiento con BFA a tiempos más
cortos (10 min). Estos resultados nos permiten postular que la formación
de estos túbulos podría ser consecuencia de la disociación de las
cubiertas COPI ya que tanto el tratamiento con BFA como la baja
temperatura (1) inducen la disociación de este complejo de las
membranas. También, hemos analizado mediante microscopía de
fluorescencia y crioinmunocitoquímica ultraestructural la distribución de
otros marcadores de compartimento intermedio. Hemos observado que la
baja temperatura también induce la disociación de las cubiertas tipo
COPII desde las membranas a zonas electrodensas del citosol, lo que
podría explicar la ralentización del transporte desde el RE hasta el
compartimento intermedio observado a 15ºC.
(1) Martinez-Alonso E, Egea G, Ballesta J, and Martinez-Menarguez JA. Traffic
2005; 6:32-44. (2) Martinez-Alonso E, Ballesta J, and Martinez-Menarguez. Traffic
2007; 8:359-368.
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