Versión para imprimir - Universidad del Norte

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De
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OH NORTE
originales
Alteraciones en el perfil electroforético proteico
sérico en individuos alcoholicos crónicos
ARNULFO
GERMAN ANZOLA2
RAMBAL1,
Sobre una muestra
de 48 pacientes
y MARTHA GUERRA DE MUI'iIOZ3
alcohólicos
crónicos,
de la clínica
FUNDAR,
de Bogotá,
se hicie·
ron análisis colorimétricos y electroforéticos de proteínas séricas, comparándose los resultados estadísticamente, según la distribución normal estándar, contra 48 testigos no alcohólicos, con los si·
guientes resultados: a) los valores de proteínas séricas totales son iguales en ambos muestreos; b) los
valores de albúmina son mayores en los alcohólicos crónicos sin sobrepasar los valores de referencia;
e) las globulinas totales son menores en los testigos y por debajo de los valores de referencia; d) la
a: l-globulina,
la O' 2-globulina
y la 'Y -globulina disminuyen en los alcohólicos
de los valores de referencia, mientras la ¡3-globulina no muestra variación.
crónicos
pero dentro
Palabras claves: alcoholismo,
proteínas sanguíneas = proteínas
séricas, albúmina sé rica, electroforcsis de proteínas sanguíneas, globulinas séricas, a:-globulina, ,B-globulina, ')'-globulina.
Introducción
El alcohol ha sido conocido
y utilizado por las
sociedades
humanas desde los tiempos prehistóricos, y su uso y abuso, han influ (do durante mucho tiempo
sobre las costumbres
culturales.
Su
ingestión,
en cantidades
moderadas,
es un hábito
socialmente
aceptado
en muchas partes del mundo; pero ingerido en exceso) no solo es socialmente nocivo, sino que constituye
también un problema de salud pública.
El alcohol
ingerido
en grandes cantidades
convierte en una droga) originando
alteraciones
R'ecibido 24 de ;ulio, 1984. Aceptado
1. M.Sc. Derartamento
de
Barranquilla, Colombia.
Biología,
2. M.Sc. Escuela Militar de' Medicina
veriana. Bogotá. D.E. Colombia.
3. M.Sc.
bia.
©
Pontificia
Universidad
Salud Uninorte.
Universidad
16 de octubre,
Universidad
y Pontifjcia
Javeriana.
Bogotá.
1984.
del Atlántico.
Universidad
(Col.), 1(3): 155 -160,
la-
D.E. Colom-
del Norte
Barranquilla
se
en
la qu (mica corporal semejantes
a las causadas por
otros sedantes,
tales como barbitúricos
y tranquilizantes. Como tal, el alcohol tiene múltiples implicaciones farmacológicas.
Estudios electrofisiológicos
sugieren que el alcohol, al igual que otros anestésicos
generales, tiene su primera acción depresora sobre aquellas partes del cerebro que participan
en las funciones altamente
integradas.
Las estructuras
polisinápticas
del sistema activador
reticular
de algunos sitios
corticales son particularmente
susceptibles,
la corteza queda entonces
liberada de su control integrante, lo que da por resultado
que los diversos
procesos relacionados
con el pensamiento
ocurran
en forma desorganizada
y que se interrumpa
la actividad normal de los procesos motores.
Si la velocidad
de absorción
del alcohol en el
conducto
gastrointestinal
es elevada, puede resultar una concentración
relativamente
grande en la
sangre por la ingestión
de una pequeña cantidad
de alcohol. Lo mismo sc aplica si cs vana su distribución hacia los tejidos (como los músculos).
Quizá por escaso riego sangu (neo. En ambas circuns155
1984
UNIVERSIDAD
BjJ3b!PILcA
DEL NORTI
tancias, pueden producirse
rápidamente
los efectos centrales en virtud de que el encéfalo tiene un
gasto sanguíneo
especialmente
elevado y un gran
coeficiente
de afinidad
por el alcohol y los efectos, en consecuencia,
son de breve duración.
Nuestra investigación
fue la de comparar
los patrones electroforéticos
de los niveles de las diferentes fracciones
proteicas
séricas en individuos
alcohólicos
crónicos e individuos normales, con el
fin de poder predecir en cuales de ellos aparecen
alteraciones
para poderlos relacionar con resulta-
dos encontrados
ciones
o informados
de la misma
Materiales
en otras investiga~
naturaleza.
y métodos:
Este estudio se
cohólicos crónicos
dar" en la ciudad
tuída por hombres
presentaba
edades
llevó a cabo en 48 pacientes alinternados
en la clínica "Funde Bogotá. La muestra, constiy mujeres en igual número,
comprendidas
entre los 16 y 62
años.
Paralelamente,
se estudió un grupo control integrado por 48 personas sanas, mitad de sexo femenino y mitad. de sexo masculino,
en iguales
condiciones
nutricionales
y ambientales,
La muestra utilizada
fue sangre venosa no estancada (5,0 mi), Se tomó, estando los integrantes
de los dos grupos en ayunas de 12 horas y se separó rápidamente
del suero (evitando hemólisis) por
centrifigación,
Inmediatamente
después, se procesaron diferentes parámetros
a estudiar.
La determinación
de proteínas
totales se realizó d.c acuerdo con el método
de Biuret (1). En
esencia, el fundamento
se basa en lo siguiente:
las
prote ínas y los péptidos,
al contrario
que otros
compuestos
nitrogenados
(creatinina,
urea, ácido
úrico), dan en solución alcalina con iones de cobre un compuesto
de color violeta debido al complejo que se forma entre el ión cúprico y dos enlaces peptídicos
(1),
La valoración de albúmina se basa en el método
escrito por Dumas, B,T, Watson, W.A, y Biggs, H.
G. (1) cuyo principio es: la albúmina en una solución "tamponada"
reacciona con el verde de bro·
mocresol,
formando
una reacción de enlace con
el tinte.
Las globulinas
totales se calcularon
mediante la
diferencia
entre las concentraciones
de las proteínas totales y las albúminas,
Las determinaciones
de las diferentes fracciones
protéicas se realizaron
156
mediante electroforesis
Seprahore),
de Gelman
en acetato
Sciences).
celulosa
(Super
El "buffer"
utilizado
fue barbitol
sódico, pH
8.8 (High
resolution
Buffer, Tris -Bartital
50dium, Barbital de Gelman Sciences).
Las fracciones proteicas obtenidas
se revelaron con Ponceau
S, (Ponceau General Protein Stain 0.5%w/v
Ponceau S, in 7,5/ w/v Tricholoroacetic
Acid in water,
de Gelman
Sciences),
La cuantificación
de las
mismas,
se hizo en un densitómetro
Gelman
DCD-16,
El proceso de selección de ambos grupos se hizo utilizando
un protocolo
elaborado con anterioridad, En cada una de las determinaciones
realizadas se hizo control de calidad utilizando
soluciones stándares
en un suero control de referencia de
concentraciones
conocidas
(Precinorum
y Precipath S, de laboratorios
Boehringer
Mannheim
S, A.),
Se hizo, además, comprobación
de calibración
apropiada
de los equipos empleados,
El análisis estad ístico incluyó comparación
de promedios
basados en la distribución
normal estándar,
dado que
el tamaño de la muestra era mayor de 30 pacientes y 30 testigos,
Resultados:
A 48 pacientes
alcohólicos
cronlCOS, no natados, se le hicieron determinaciones
de proteínas
totales y deferenciadas
utilizando
métodos químicos y electroforéticos,
con el objeto de evaluar
las posibles modificaciones
inducidas en la síntesis proteica
ocasionada
por la ingesta prolongada
de etanol (Fig, 1), Paralelamente
a ese estudio, se
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Fig. 1. Proteinogramaelectroforético
alcohólico crónico.
Salud Uninorte.
Barranquilla
sérico de un individuo
(Col.), 1(3): 155 -160,
1984
determinó los niveles de perfil proteico en 48 individuos sanos: para ello se hicieron las mismas mediciones del grupo en estudio (Fig. 2). En la figura 3
se muestra los niveles de proteínas totales, albúmina y globulinas totales, analizada en los individuos alcohólicos crónicos. Encontramos que hay
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Fig. 4. Valores promedios de las diferentes fracciones proteicas de los dos grupos en estudio.
I
En la literatura médica consultada, encontramos que paciente cirróticos
post-alcohólicos,
muestran un cuadro proteinográmico de hipoproteinemas acompañado de hipoalbuminemia
e hipergamaglubul inem ia .
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Fig. 2. Proteinograma electroforético
duo testigo
sérico de un indivi·
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Albúmina
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Alcohólicos
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Glubulinas
totales
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P'ot.totales
Albúmina
GlobuLtoul.,
Fig. 3. Niveles de proteínas totales. Albúmina y globulina
totales de los dos grupos en estudio.
un ligero aumento en las proteínas séricas totales,
hay un aumento en la albúmina sérica y las globulinas totales exhiben disminución. La figura 4 presenta los diferentes patrones electroforéticos
en
los individuos alcohólicos crónicos y se puede observar que la o: - 1 globulina: se encontró disminuída, lo mismo que la o: - 2 globulina; la ~-globulina
no mostró variación, pero la 'Y-globulina presentó
una disminución (ver tabla 1).
Salud Uninorte. Barranquilla (CoL), 1(3): 155 ·160, 1984
Alcohólicos
No
Alcohólicos
Valores de
referencia
6.84854
0.950301
6.81479
0.353674
6.5 - 8.5
4.7048
0.81149
4.02396
0.30047
3.5· 5.0
2.143958
0.50401258
2.780208
0.31723868
0.223958
0.199795
0.2639586
0.101682
0.1 - 0.4
0.546042
0.276903
0.66106
0.112737
0.2 - 1.2
0.7475
0.229268
0.72638
0.1247506
0.5 - 1.1
0.626625
0.28085353
1.110833
0.196358696
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1:
1:
j
I
2.5 - 3.5
0.5 - 1.6
TABLA 1. Relación de los diferentes valores promedios
de proteínas totales, albúmina y globulinas totales de individuos alcohólicos crónicos e individuos testigos.
En vista de que nuestros pacientes presentaron
un resultado diferente, decidimos estudiar 10 pacientes ci rróticos post-alcohól icos de diferentes
centros hospitalarios de la ciudad, diagnosticados
mediante
pruebas de laboratorio y de patología
(Biopsia hepática), encontrando
que al analizar
las proteínas totales y diferenciadas, éstas se ajustaban a los parámetros descritos como Ilcirrosis"
(ver tablas 2, 3 Y 4).
157
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TABLA 2. Promedios totales de los valores obtenidos en
proteínas totales, albúminas y globulinas totales, en 10
pacientes cirróticos alcohólicos estudiados.
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TABLA 3. Valores promedios de las fracciones protéicasen
los pacientes cirróticos estudiados.
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2.11
TABLA 4. Valores máximos y mínimos de proteínas séricas en individuos alcohólicos crónicos y no alcohólicos.
Discusión
Las diferentes investigaciones realizadas sobre
el efecto del etanol en la s(ntesis de prote(nas.
Muestran como, en los alcohólicos, se observa algunas alteraciones relacionadas con la nutrición
celular.
Es lógico pensar que una disminución en la s(ntesis de una prote(na alterará las diferentes reacciones metabólicas celulares; según sea ésta, el
efecto será diferencial para el célula y si las alteraciones permanecen, muchas células se comprometen y pueden ser afectadas, originando daño en un
órgano con implicaciones a nivel del organismo
total.
158
No se debe desconocer que, en la actualidad, es
contra sentido el efecto del etanol sobre la s(ntesis proteica, todo ello basado en los diferentes métodos de estudio. En teor(a, los experimentos metabólicos sobre ensayos del efecto del etanol sobre s(ntesis de prote(nas, debeda llevarse a cabo
bajo condiciones
completamente
normales, lo
cual se da pocas veces. Cuando organismos (ntegramente normales, la cond ición nutricional, por
lo tanto, los efectos directos del etanol sobre un
aspecto espedfico del metabolismo, son con frecuencia diti'ciles de precisar. Se ha documentado
que el etanol afecta muchos sistemas al mismo
tiempo, considerando que estos sistemas funcionan de una manera integrada. Un cambio producido en un sistema cualquiera trata de ser compensado por la adaptación de otros sistemas.
Muchos sistemas se han caracterizado por analizar si la función de un órgano determ inado y por
otro lado los resultados a nivel de s(ntesis de protdnas presentan resultados antagónicos, es decir,
organismos
alcohólicos
presentan
alteraciones
(inhibiciones) en la s(ntesis de la albúmina como
se ha reportado que ocurre en hígado de conejillos de Indias, mas no la incorporación de aminoácidos en las protdnas del corazón (7).
También se ha observado, que, al alimentar animales de experimentación con etanol, por 4 semanas, se presenta una disminución en el contenido
de proteínas del corazón.
Debe tenerse en cuenta, al analizar los efectos
metabólicos, no solamente la posible acción del
etanol, sino también los intermediarios generados
durante su oxidación ya que la producción de acetaldehido, afecta la síntesis proteica (8).
Las anteriores consideraciones pueden analizarse teniendo el cuenta el siguiente aspecto: las enzimas, como proteínas que son, juegan un papel
importante en el metabolismo por catalizar muchas reacciones bioqu ímicas; por lo tanto, la síntesis proteica alterada como consecuencia de la ingesta crónica de etanol, puede ser causa de una
deficiencia a nivel enzimático. Es de suponer que
los efectos metabólicos del etanol están dirigidos
fundamentalmente
a aquellos órganos que lo metabolizan; de hecho, el más importante es el hígado, considerando sus múltiples funciones: desintoxicación de diferentes tipos de productos provenientes del metabolismo del amoníaco de la ingesta diaria. La formación de bilis, regulación de los
niveles de glucosa sangu ínea y s(ntesis de muchas
Salud Uninorte.
Barranquilta
(Col.). 1(3); 155 -160,
1984
proteínas plasmáticas, incluyendo factores de coagulación; procesos éstos que requieren de gran número de enzimas, sintetizadas en el propio hígado, nos pemite decir que el funcionamiento
del
hígado depende del mantenimiento
equilibrado
de la síntesis de prote ínas.
Se ha demostrado, en ratas, que el consumo de
etanol disminuye la síntesis de albúmina (5, 6).
Existen evidencias de que la disminución de
ciertas proteínas plasmáticas, corresponde a una
disminución
en su secreción, lógicamente,
esto
nos muestra un efecto marcado sobre el equilibrio
interno, pero no explica las modificaciones en la
síntesis de proteínas al interior del hígado (45).
La importancia de los sistemas generadores de
energía, deben ser tenidos en cuenta, pues los
efectos del etanol sobre la función mitocondrial
son conocidos (1. 2. 4).
'
Alteraciones en las enzimas microsomáticas dada su característica de ser inducibles, explicaríatambién muchas alteraciones en procesos metabólicos, si no descartamos el papel que puede tener
el sistema microsomático sobre la oxidación del
etano., podemos pensar que una deficiencia en la
actividad de este sistema, dejarr'a moderadas concentraciones del etanol circulante, en busca de ser
degradado, obligatoriamente,
por parte del sistema de la alcohol deshidrogenasa.
- Modificaciones
inducidas
por la deficiencia
de
enzimas.
- Fundamentales
en la síntesis proteica.
- Alteración en la incorporación de aminoácidos,
por modificación de factores o enzimas que determinan el proceso.
- Alteración en la incorporación de aminoácidos,
por modificación de factores o enzimas que determinan el proceso.
- Alteraciones a nivel mitocondrial, al ser estas la
principal fuente de energía, lo cual induciría
por deficiencia energética, alteración en la síntesis proteica.
- Modificación de proteínas plasmáticas por alteración en los procesos de permeabilidad celular
para las mismas.
Conclusiones
1. Los valores de proteínas séricas totales, cuantificadas en individuos alcohólicos crónicos son
iguales a los de los individuos del grupo testigo
y todos los valores se encuentran dentro del
rango de referencia.
2. Los valores de albúmina, son mayores en los individuos alcohólicos crónicos que en los individuos testigos, pero se localizan dentro de los
valores de referencia.
Toda discusión o apreciación teórica sobre los
efectos del etanol, en la síntesis de proteínas, debe considerar los modelos experimentales que se
utilicen en las condiciones totales del organismo
afectado. Los efectos del etanol en animales de
experimentación,
dependen de la dosis suministrada de los métodos de administración,
del estado
nutricional y del estado orgánico, lo cual tiene validez especial en nuestro caso.
4. La 1 -globulina presenta una disminución en los
individuos alcohólicos crónicos con relación a
la misma en los individuos testigos, pero dentro
de los valores de referencia.
Las interrelaciones entre nutrición y enfermedad alcohólica, no ha sido ampliamente estudiada
y tal vez este ser ía un campo para continuar esta
línea de investigación.
5. La 2-globulina tiene una disminución en los individuos alcohólicos crónicos con relación a los
individuos testigos, pero dentro de los valores
de referencia.
La tendencia de los resultados obtenidos en
nuestros experimentos están de acuerdo con los
informados en la literatura, es decir, que existen
evidencias suficientes para indicar que hay modificaciones en los niveles de proteínas plasmáticas en
los organismos tratados crónicamente con etanol;
las posibles explicaciones
para ello, podríamos
centrarlas desde los siguientes puntos de vista:
6. Los valores de la -globulina no esperimenta variación con relación a los valores de la misma
en los individuos testigos y los valores de refe-
Salud Uninorte. Barranquilla (CoL), 1(3): 155 -160,
1984
3. Los valores de las globulinas totales, son menores en los individuos testigos y además, están
por debajo de los valores de referencia.
rencIa.
7. La -globulina tiene una disminución en los individuos alcohólicos crónicos, con relación a la
misma en los individuos testigos, pero se encuentra dentro de los valores de referencia.
159
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Salud Uninorte.
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11
Barranquilla
en alcohóli-
(Col.), 1{3): 155 -160,
1984