liaison® igf-i (313231) - Annar Diagnóstica Import

DiaSorin S.p.A.
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www.diasorin.com
Modificaciones: § 4, §13.2
Supresiones: §
|
LIAISON ® IGF-I (313231)
1. FINALIDAD DEL ENSAYO
Ensayo in vitro para la determinación cuantitativa de IGF-I (Insulin-like Growth Factor I) en suero humano. El ensayo debe realizarse en la
serie de instrumentos LIAISON® Analyzer.
2. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO
El factor de crecimiento parecido a la insulina (IGF-I, o también llamado somatomedina C o Sm-C), es una proteína monocatenaria de
70 aminoácidos. Es un factor trófico que circula en niveles elevados en la sangre e interviene en muchos, cuando no en la mayoría, de los
efectos de la hormona del crecimiento. Aunque el hígado, un órgano rico en receptores GH, es el principal secretor de IGF-I en suero,
hay también otros muchos tejidos que sintetizan esta proteína y que son sensibles a su acción trófica. El IGF-I y la insulina presentan
estructuras tridimensionales parecidas.
El IGF-I pertenece a una clase de péptidos cuyas concentraciones en el suero son estimuladas principalmente por la hormona del crecimiento
humano (GH) e inhibidas por la malnutrición. En los seres humanos se han identificado 2 péptidos: IGF-I e IGF-II. Gran parte de la actividad
promotora del crecimiento dependiente de GH en sangre es debida aI GF-I. Entre los efectos estimulantes del anabolismo y el crecimiento en
los que intervienen ambos IGF se incluyen la proliferación celular y la síntesis proteínica.
Casi todas las células del cuerpo humano se ven afectadas por IGF-I: las de los músculos, huesos, hígado, riñones, nervios, piel y pulmones.
Además de los efectos similares a los de la insulina, el IGF-I también puede regular el crecimiento y desarrollo celular, especialmente en las
células nerviosas, y la síntesis celular de ADN. El IGF-I es producido a lo largo de toda la vida. Las tasas más elevadas de producción de
IGF-I se dan durante la época de crecimiento en la pubertad. Los niveles más bajos de producción se dan en la infancia y en la vejez.
El IGF-I parece influir sobre la estructura y las funciones neuronales durante toda la vida. En estudios experimentales ha demostrado tener
capacidad de preservar la función de las células neuronales y de fomentar el crecimiento nervioso. Debido a estas propiedades, el IGF-I
humano recombinante se emplea en ensayos clínicos para el tratamiento de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
Recientemente, el IGF-I humano recombinante ha sido introducido en el mercado de los suplementos dietéticos, igual que la hormona del
crecimiento humano recombinante y varios de los llamados secretagogos o liberadores de la hormona del crecimiento.
Los suplementos de IGF-I conllevan actividades anabólicas y lipolíticas de efecto desconocido.
En sangre, los IGF están ligados a transportadores. Las proteínas de unión son, sin lugar a dudas, responsables de las concentraciones
relativamente elevadas de IGF-I en sangre y de la ausencia de fluctuaciones rápidas en sus niveles. Esta relativa estabilidad de las
concentraciones de IGF-I en sangre hace que la determinación de IGF sea un indicador fiable de la secreción de GH, en tanto que los niveles
de esta hormona varían considerablemente y a menudo es preciso realizar una prueba de estimulación para interpretarlos.
Uso como prueba diagnóstica
Los niveles de IGF-I pueden medirse en sangre con un rango de normalidad de 10-1000 ng/mL.
Como los niveles no fluctúan mucho durante el día, los médicos utilizan el IGF-I como una prueba de detección de deficiencia o exceso de la
hormona del crecimiento.
IGF-I como agente terapéutico
IGF-I ha sido evaluado como un posible agente neuroprotector en la lucha contra los efectos adversos de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
Entre los motivos aducidos para suplementar IGF-I se encuentran su acción contra el envejecimiento, la capacidad de aumentar la masa
muscular, una actividad atlética y sexual mejorada, protección de las articulaciones, efectos antidiabéticos y antiateroescleróticos.
También se supone que ayuda a dormir, mejora el sistema inmunológico, es neuroprotector y muchas cosas más. Sin embargo no existe
ninguna evidencia creíble que sustente estas razones para administrar suplementos orales de IGF-I. Los niveles elevados de IGF-I se han
asociado con un mayor riesgo de padecer distintos tipos de cáncer, especialmente de próstata.
Niveles bajos:
Los niveles de IGF-I son sistemáticamente bajos en los niños con deficiencia de GH (insuficiencia adenohipofisaria) y aumentan con
inyecciones de GH. Generalmente, la concentración normal en un niño de baja estatura es una evidencia sólida para descartar una deficiencia
de GH, especialmente si el paciente tiene entre 5-6 años. A esas edades se puede distinguir entre valores anormalmente bajos y normales.
Los niveles en suero pueden ser bajos en niños con deficiencia de GH que tengan un craneofaringioma. A pesar de que un valor normal
sugiere que no existe deficiencia de GH, un valor bajo en un niño con crecimiento retardado no es diagnóstico de insuficiencia adenohipofisaria.
Niveles altos:
Las concentraciones elevadas de IGF-I en suero diagnostican de forma fiable y predecible pacientes con acromegalia y niños con gigantismo
debido al exceso de GH hipofisario.
Es necesario tener cuidado en la interpretación de unos valores elevados de IGF-I en suero en pacientes durante la pubertad porque en esta
etapa sus concentraciones suelen aumentar, superando entre 4-5 veces los niveles en adultos.
El embarazo también está asociado con niveles altos en suero.
Se han descrito enfermedades raras caracterizadas por la incapacidad de producción o respuesta a IGF-I que resultan en una alteración
concreta del crecimiento llamada enanismo de Laron y que no responde bien al tratamiento con la hormona del crecimiento.
3. PRINCIPIO DEL ENSAYO
Para la determinación cuantitativa de IGF-I se realiza un inmunoensayo por quimioluminiscencia (CLIA) de tipo sándwich, de un solo paso,
después de separar el IGF-I de las proteínas de unión. Se emplea un anticuerpo monoclonal para revestir las partículas magnéticas
(fase sólida) y después se enlaza otro anticuerpo monoclonal a un derivado de isoluminol (conjugado de isoluminol-anticuerpo).
Durante la incubación, el IGF-I presente en calibradores, muestras y controles se une con la fase sólida y el conjugado.
Después de la incubación, se elimina el material no enlazado mediante un ciclo de lavado.
A continuación, se añaden los reactivos de cultivo que inducen una reacción de quimioluminiscencia.
La señal luminosa, y por lo tanto la cantidad de conjugado de isoluminol, se mide en un fotomultiplicador como unidades relativas de luz
(RLU, relative light units) e indica la concentración de IGF-I presente en calibradores, muestras y controles.
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4. MATERIALES SUMINISTRADOS
El orden de los reactivos refleja el orden con el que se han ensamblado los contenedores en el integral de reactivos.
Integral de reactivos para 100 determinaciones
2,3 mL [SORB]
Suspensión de partículas magnéticas: con partículas magnéticas recubiertas con anticuerpo anti-IGF-I (6B),
monoclonal (ratón), albúmina sérica bovina (BSA), azida sódica al 0,09%
12,0 mL [CONJ]
Conjugado: con anti-IGF-I (2D 557112), marcado con derivado de isoluminol, monoclonal (ratón),
albúmina sérica bovina (BSA), azida sódica al 0,09%
18,0 mL [BUF|N]
Tampón de neutralización: con IGF-II (humana, recombinante), albúmina sérica bovina (BSA), azida sódica
al 0,09%
28,0 mL [BUF|Ac] Solución de acidificación: con 0,01 moles de HCl
Todos los componentes se suministran listos para usar.
En el integral se incluyen
3
x 1,0 mL
[CAL|1]
3
x 1,0 mL
[CAL|2]
[CAL|1]
Etiqueta con código de barras, pequeña
8 x blanca
[CAL|2]
Etiqueta con código de barras, pequeña
3 x amarilla
[CAL|1]
Etiqueta con código de barras, grande
3 x amarilla
[CAL|2]
Etiqueta con código de barras, grande
8 x amarilla
[CAL|1]
Etiqueta con código de barras, pequeña
8 x amarilla
[CAL|2]
Etiqueta con código de barras, pequeña
Los calibradores se suministran liofilizados.
8
x blanca
Calibrador, nivel bajo: con IGF-I (humana, recombinante) en albúmina
®
sérica bovina, ProClin 300 al 0,1%
Calibrador, nivel alto: con IGF-I (humana, recombinante) en albúmina
sérica bovina, ProClin® 300 al 0,1%
Para etiquetar los tubos con alícuotas de calibrador, para su uso
®
exclusivo en el instrumento LIAISON Analyzer
Para etiquetar los tubos con alícuotas de calibrador, para su uso
®
exclusivo en el instrumento LIAISON Analyzer
Para cubrir la etiqueta del vial [CAL|1], para su uso exclusivo en el
instrumento LIAISON® XL Analyzer
Para cubrir la etiqueta del vial [CAL|2], para su uso exclusivo en el
instrumento LIAISON® XL Analyzer
Para etiquetar los tubos con alícuotas de calibrador, para su uso
exclusivo en el LIAISON® XL Analyzer
Para etiquetar los tubos con alícuotas de calibrador, para su uso
®
exclusivo en el LIAISON XL Analyzer
Materiales requeridos, pero no suministrados (relacionados con el sistema)
®
LIAISON XL Analyzer
®
LIAISON Wash/System Liquid (REF 319100)
LIAISON® XL Waste Bags (REF X0025)
LIAISON® XL Cuvettes (REF X0016)
LIAISON® XL Starter Kit (REF 319200)
LIAISON® XL Disposable Tips (REF X0015)
LIAISON® Analyzer
LIAISON® Wash/System Liquid (REF 319100)
LIAISON® Waste Bags (REF 450003)
LIAISON® Module (REF 319130)
LIAISON® Starter Kit (REF 319102) o LIAISON® XL Starter Kit (REF 319200)
LIAISON® Cleaning Kit (REF 310990)
®
LIAISON Light Check (REF 319101)
Otros materiales requeridos
LIAISON® Control IGF-I (REF 319134)
5. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Solo para uso diagnóstico in vitro.
Sin embargo, como no es posible asegurar la ausencia de agentes patógenos, todo el material de origen humano y animal deberá
considerarse potencialmente infeccioso y manipularse como tal.
6. NORMAS DE SEGURIDAD
No coma, beba, fume ni se maquille en el laboratorio donde se realiza el ensayo.
No pipetee las soluciones con la boca.
Evite el contacto directo con el material potencialmente infeccioso usando batas de laboratorio, gafas de protección y guantes desechables.
Lávese cuidadosamente las manos al terminar el ensayo.
Evite las salpicaduras o la formación de aerosoles. El reactivo vertido debe limpiarse con una solución de hipoclorito sódico al 5%,
y eliminarse como si se tratase de material potencialmente infeccioso.
Todas las muestras, los reactivos biológicos y los materiales usados en el ensayo deben considerarse posibles transmisores de agentes
infecciosos. Por consiguiente, deben eliminarse de conformidad con las disposiciones y normas generales establecidas por las autoridades
con jurisdicción sobre el laboratorio y con las leyes vigentes en cada país.
®
Los reactivos que contienen ProClin 300 están clasificados como irritantes por las directivas europeas aplicables:
R 43 - Puede causar sensibilización por contacto con la piel.
S 24 - Evitar el contacto con la piel.
S 37 - Usar guantes adecuados.
S 60 - Este producto y su envase deben ser eliminados como residuos peligrosos.
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7. PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
7.1. Integral de reactivos
Para manipular los reactivos es preciso adoptar una serie de precauciones importantes:
Resuspensión de las partículas magnéticas
Las partículas magnéticas deben estar completamente resuspendidas antes de colocar el integral en el instrumento. Realice los pasos
indicados a continuación para garantizar la suspensión completa de las partículas:
Antes de quitar el precinto, gire la rueda pequeña del compartimento de partículas magnéticas hasta que la suspensión adopte un color marrón.
Agite horizontalmente el integral de reactivos con delicadeza y sumo cuidado para favorecer la suspensión de las partículas magnéticas (evite la
formación de espuma). Controle visualmente el fondo del vial de partículas magnéticas para cerciorarse de que no hayan quedado partículas
magnéticas sedimentadas. Si es necesario, repita el procedimiento hasta la resuspensión completa de las partículas magnéticas. Después de
quitar el precinto, seque con sumo cuidado la superficie de cada pared para eliminar el líquido residual si fuera necesario.
Formación de espuma en los reactivos
Para garantizar las mejores prestaciones del integral, se recomienda evitar la formación de espuma en los reactivos. Respete las
recomendaciones siguientes:
Antes de usar el integral, controle visualmente los reactivos, especialmente los calibradores, para descartar la presencia de espuma. Si se
observa la presencia de espuma después de la resuspensión de las partículas magnéticas, coloque el integral en el instrumento y deje que se
disuelva la espuma. El integral está listo para el uso una vez que se agita en el instrumento y se disuelve la espuma.
Instalación del integral en el área de reactivos
®
LIAISON Analyzer
Coloque el integral de reactivos en el área de reactivos del analizador con la etiqueta de los códigos de barras orientada a la izquierda y
espere 30 minutos antes de usarlo. Las partículas magnéticas se agitan automáticamente y se resuspenden por completo en el analizador.
Consulte el manual del usuario del analizador para introducir las muestras y comenzar el ensayo.
LIAISON® XL Analyzer
®
El instrumento LIAISON XL Analyzer incorpora un dispositivo magnético de estado sólido que favorece la dispersión de las micropartículas
antes de colocar un integral de reactivos en el área de reactivos del analizador. Consulte los detalles en el manual del usuario del analizador.
Coloque el integral de reactivos en la ranura específica.
Deje el integral de reactivos en el dispositivo magnético de estado sólido durante al menos 30 segundos (varios minutos como máximo). Si es
necesario, repita la operación.
Coloque el integral en el área de reactivos del analizador con la etiqueta orientada a la izquierda y espere 15 minutos antes de utilizarlo.
Las partículas magnéticas se agitan automáticamente y se resuspenden por completo en el analizador.
Consulte el manual del usuario del analizador para introducir las muestras y comenzar el ensayo.
7.2. Calibradores
Los calibradores del kit LIAISON® IGF-I se suministran liofilizados.
Reconstituya con 1,0 mL de agua desionizada o destilada.
Deje los viales durante 10 minutos a aproximadamente 18-25 °C.
Agite delicadamente los viales por inversión. Evite la formación de espuma.
Uso del LIAISON®Analyzer: el calibrador reconstituido está listo para usar (con la etiqueta blanca original).
Uso del LIAISON® XL Analyzer: en el calibrador reconstituido se debe colocar la etiqueta amarilla incluida en el kit. Sitúe el código de barras
de la etiqueta amarilla exactamente encima del código de barras de la etiqueta blanca. En la etiqueta amarilla figura la concentración de
calibrador correcta para el uso en el LIAISON® XL.
En caso necesario, prepare las alícuotas de calibrador según lo indicado en el apartado 8 y etiquete los tubos del modo siguiente:
LIAISON® Analyzer: coloque la etiqueta blanca que se suministra.
®
LIAISON XL Analyzer: coloque la etiqueta amarilla que se suministra.
Consulte el manual de usuario del analizador para obtener detalles sobre el empleo de los calibradores.
Consulte el apartado 8 para conservar los calibradores.
7.3. Controles
Para preparar y manipular los controles correctamente, consulte las instrucciones incluidas con el juego de controles LIAISON® IGF-I.
8. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS
8.1. Integral de reactivos
Sellado: estable a 2-8 °C hasta la fecha de caducidad.
Abierto en el instrumento o a 2-8 °C: estabilidad 2 semanas (consulte § 12).
Después de este intervalo de tiempo, se puede seguir usando el integral de reactivos siempre que los controles permanezcan dentro de los
límites esperados.
®
Use siempre el mismo LIAISON Analyzer con el integral de reactivos ya abierto.
No lo congele.
Mantenga el integral de reactivos en posición vertical mientras esté guardado para garantizar una adecuada resuspensión de las partículas
magnéticas.
Use las gradillas suministradas con la serie de instrumentos LIAISON® Analyzer para guardar el integral de reactivos en posición vertical.
Evite su exposición a luz directa.
8.2. Calibradores
Liofilizados:
Estables a 2-8 °C hasta la fecha de caducidad.
Reconstituidos: Estables durante 1 día en el analizador.
Congelados:
Las alícuotas se pueden conservar a -20 °C durante un mes como máximo.
Inmediatamente después de completar la reconstitución, los calibradores se pueden conservar en alícuotas y congelarse. Tras su
descongelación, los calibradores se deben utilizar dentro del mismo día. El volumen mínimo de una alícuota es 210 µL (60 µL de calibrador
+ 150 µL de volumen muerto).
Cada alícuota solamente se puede congelar y descongelar una vez.
Durante la manipulación de los calibradores, adopte las precauciones necesarias para evitar la contaminación bacteriana.
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9. RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS
El único material de muestra autorizado es el suero humano.
Extraiga el suero conforme a los métodos establecidos. Evite la hemólisis. Antes de realizar la prueba, mezcle las muestras descongeladas y
elimine las burbujas de aire que pudiera haber. Las muestras descongeladas conservadas a 2-8 °C se deben utilizar en 6 horas.
Si la prueba no se realiza el mismo día de la recogida de la muestra, el suero debe separarse del sedimento y conservarse en un tubo
diferente a -20 °C.
No use muestras fuertemente hemolizadas o lipémicas, ni muestras que contengan partículas o presenten evidente contaminación microbiana.
No use muestras coaguladas.
Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación. Elimine el volumen de alícuota sobrante.
El volumen mínimo de muestra necesario para una determinación es 170 µL (20 µL de muestra + 150 µL de volumen muerto).
La solución de acidificación provista en el cartucho integral solo está validada para predilución. No se proporciona diluyente para muestras
con concentraciones superiores al intervalo de ensayo.
10. CALIBRACIÓN
El análisis de los calibradores específicos del ensayo permite ajustar los valores RLU detectados a la curva maestra asignada. Es posible
realizar un máximo de 11 calibraciones (en total).
La recalibración por triplicado es obligatoria siempre que se dé al menos una de las siguientes situaciones:
Se usa un nuevo lote de integral de reactivos o de reactivos de cultivo.
La calibración anterior se realizó hace más de 14 días.
El analizador se ha sometido a una intervención de asistencia técnica.
Los valores de los controles están fuera de los rangos esperados.
®
Serie de instrumentos LIAISON Analyzer: los valores del calibrador se almacenan en los códigos de barras de las etiquetas externas del calibrador.
11. PROCEDIMIENTO OPERATIVO
Para obtener unos resultados analíticos correctos hay que respetar estrictamente las instrucciones del manual del usuario del analizador.
®
LIAISON Analyzer: cada parámetro del ensayo se identifica mediante el código de barras de la etiqueta del integral de reactivos. Si la
etiqueta del código de barras no se puede leer, el cartucho no se debe utilizar y se tiene que tirar. Para obtener información detallada,
consulte el manual del usuario del analizador.
LIAISON® XL Analyzer: cada parámetro del ensayo se identifica mediante la información codificada en la etiqueta del transpondedor de
identificación por radiofrecuencia (RFID) del integral de reactivos. Si la etiqueta RFID no se puede leer, el cartucho no se debe utilizar y se
tiene que tirar. Consulte el manual del usuario del analizador para obtener información detallada.
Si no es posible leer los códigos de barras externos del calibrador, los datos que figuran en las etiquetas externas del calibrador (debajo del
código de barras) se pueden introducir manualmente en la serie de instrumentos LIAISON® Analyzer. Para obtener información detallada,
consulte el manual del usuario del analizador.
El LIAISON® Analyzer realiza las operaciones siguientes:
Tratamiento previo automático (1:20)
1. Dispensa la muestra o los controles en el módulo de reacción
2. Administra la solución de acidificación
3. Dispensa la muestra diluida, los controles diluidos o el calibrador en el módulo de reacción
4. Dispensa las partículas magnéticas revestidas (fase sólida), el tampón de neutralización y el conjugado
5. Incuba
6. Lava con líquido apropiado (Wash/System Liquid)
7. Añade el reactivo de cultivo y mide la luz emitida
®
El LIAISON XL Analyzer realiza las operaciones siguientes:
Tratamiento previo automático (1:20)
1. Dispensa la muestra o los controles en la cubeta de reacción
2. Administra la solución de acidificación
3. Dispensa la muestra diluida, los controles diluidos o el calibrador en la cubeta de reacción
4. Dispensa las partículas magnéticas revestidas (fase sólida), el tampón de neutralización y el conjugado
5. Incuba
6. Lava con líquido apropiado (Wash/System Liquid)
7. Añade el reactivo de cultivo y mide la luz emitida
12. CONTROL DE CALIDAD
®
Los controles LIAISON deben analizarse individualmente para determinar la eficacia del ensayo. El control de calidad puede efectuarse
analizando los sueros de control LIAISON® o controles comerciales específicos:
- por lo menos una vez por cada día de trabajo,
- cuando se usa un nuevo integral de reactivos,
- cuando se calibra el kit,
- cuando se usa un nuevo lote de reactivos de cultivo,
- para evaluar la eficacia del integral de reactivos abierto más de 2 semanas antes,
- o según las normas o los requisitos establecidos en los reglamentos locales o por entidades autorizadas.
Los valores de los controles deben permanecer dentro de los rangos previstos. Cada vez que el valor de uno de los controles no coincida con
el rango esperado, habrá que repetir la calibración y analizar de nuevo los controles. Si los valores de los controles siguen estando fuera de
rango tras una calibración satisfactoria, será preciso repetir el ensayo usando un vial de control sin abrir. Los resultados de los pacientes no
deben notificarse si los valores de control están fuera del rango previsto.
Las prestaciones de otros controles se deben evaluar para asegurar su compatibilidad con este ensayo antes del uso. Es indispensable
establecer rangos de valores adecuados para los materiales empleados en el control de calidad.
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13. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
El analizador calcula automáticamente las concentraciones de IGF-I de las muestras desconocidas y las expresa en ng/mL. Consulte el
manual del usuario del instrumento LIAISON® para obtener información detallada.
®
®
Aunque los calibradores y los controles pueden generar resultados de RLU o dosis distintos en LIAISON y LIAISON XL, los resultados de
los pacientes son equivalentes.
13.1. Intervalo de ensayo:
El analizador calcula automáticamente las concentraciones de IGF-I de hasta 1500 ng/mL.
Factor de conversión:
1
ng/mL x 0,13 =
0,13 nmol/L
1
nmol/L x 7,69 =
7,69 ng/mL
13.2. Estándar de referencia
El ensayo utiliza como referencia el documento “1st WHO International Standard for Insulin-like Growth Factor-I” Código NIBSC: 02/254.
Los resultados se expresan en ng/mL.
700
600
ng / mL
500
F
M
400
300
200
100
0
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Edad
5/8
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Margen de referencia basal en función de la edad y el sexo (n=1682):
MUJERES (F)
º
97,5º
25º
75º
2,5
Valor
Edad
medio
percentil
percentil
percentil
percentil
n
(años)
(ng/mL)
(ng/mL)
(ng/mL)
(ng/mL)
(ng/mL)
1
46
54
11
167
35
93
2
31
64
19
108
41
93
3
47
71
48
164
58
99
4
49
98
51
234
81
131
5
50
135
71
193
103
162
6
64
193
107
281
170
214
7
28
152
89
356
131
179
8
31
185
84
318
154
251
9
52
244
88
627
151
359
10
44
233
69
406
166
289
11
23
315
109
562
190
460
12
19
395
185
495
363
432
13
28
390
140
559
309
470
14
41
377
219
483
342
438
15
16
375
235
481
355
400
16
26
346
237
468
315
365
17
10
405
342
445
356
429
18-21
32
276
206
396
248
323
22-25
38
224
111
330
200
264
26-30
18
190
118
294
181
206
31-35
22
205
103
391
182
221
36-40
12
193
153
322
181
204
41-45
16
151
95
251
130
184
46-50
12
170
156
217
161
193
51-55
22
142
83
242
118
199
56-60
18
159
94
229
133
168
61-80
26
140
29
204
108
172
HOMBRES (M)
º
97,5º
25º
75º
2,5
Valor
Edad
medio
percentil
percentil
percentil
percentil
n
(años)
(ng/mL)
(ng/mL)
(ng/mL)
(ng/mL)
(ng/mL)
1
53
44
19
109
31
57
2
37
56
25
101
41
69
3
61
81
26
149
48
112
4
52
106
33
162
70
120
5
59
136
41
207
104
157
6
77
178
58
267
137
206
7
23
158
62
279
105
191
8
31
197
119
358
145
276
9
44
169
36
379
122
230
10
42
168
60
399
138
239
11
25
185
97
388
150
227
12
45
212
93
462
160
356
13
18
248
93
551
206
315
14
30
331
129
534
229
405
15
16
368
286
578
349
388
16
20
406
246
504
352
432
17
16
312
249
398
279
341
18-21
36
304
147
404
231
334
22-25
28
239
197
333
221
293
26-30
20
188
93
250
131
201
31-35
12
186
113
202
152
196
36-40
24
172
103
221
128
192
41-45
18
171
154
202
165
186
46-50
12
133
94
163
126
152
51-55
18
131
77
224
91
157
56-60
28
136
55
185
119
145
61-80
16
150
20
176
88
170
Cada laboratorio debe establecer su propio intervalo de valores esperados para la población analizada.
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LIAISON® IGF-I (REF 313231)
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14. LIMITACIONES DEL ENSAYO
Los reactivos deben usarse solamente en la serie de instrumentos LIAISON® Analyzer.
Los componentes individuales del integral de reactivos no deben ser separados del integral.
El kit no debe usarse después de la fecha de caducidad que figura en la etiqueta externa.
Para obtener resultados fiables es necesario atenerse estrictamente a las instrucciones y poseer una adecuada técnica manual.
La contaminación bacteriana de las muestras o su inactivación mediante calentamiento pueden modificar los resultados del análisis.
Un resultado no patológico no siempre descarta la posibilidad de la presencia de una disfunción del crecimiento y se debe evaluar junto con
otros procedimientos diagnósticos.
Los resultados del ensayo se muestran de manera cuantitativa. Sin embargo, el diagnóstico de una enfermedad de crecimiento no se debe
formular en base al resultado de una sola prueba, sino a un conjunto de signos y resultados junto con el criterio médico. Cada decisión
terapéutica deberá ser tomada caso por caso.
Aunque se añadan agentes capaces de neutralizar los anticuerpos humanos anti-ratón (HAMA), las concentraciones de HAMA
extremadamente elevadas podrían influir esporádicamente en los resultados del ensayo.
Los integrales no se deben intercambiar entre diferentes tipos de analizadores (LIAISON® y LIAISON® XL). Después de introducir un integral
en un tipo de analizador determinado, deberá usarse siempre en él hasta que se haya acabado. Por motivos de trazabilidad relacionados con
lo antes expuesto, es necesario terminar el seguimiento de los pacientes con el mismo tipo de analizador. En los seguimientos debe utilizarse
®
®
un único tipo de analizador (LIAISON o LIAISON XL).
15. PRESTACIONES METODOLÓGICAS DEL KIT
15.1. Especificidad analítica
La especificidad analítica se define como la capacidad que tiene el ensayo para detectar exactamente el analito ante la presencia de factores
potencialmente interferentes en la matriz de la muestra.
15.2. Interferencia
Estudios controlados de factores potencialmente interferentes han demostrado que la eficacia del ensayo no depende de las concentraciones
de bilirrubina < 0,2 mg/mL, de hemoglobina < 1000 mg/dL o de triglicéridos < 30 mg/mL.
15.3. Reacciones cruzadas
La presencia de las siguientes moléculas que pueden ocasionar reacciones cruzadas no ha mostrado interferencias en el ensayo.
Compuesto
h-LH
h-TSH
h-Insulina
Proinsulina
IGF-II (humana, recombinante)
IGFBP3 (humana, recombinante)
Cantidad añadida a la
muestra
80 mIU/mL
450 mIU/mL
12000 mIU/mL
140000
ng/mL
10000
ng/mL
7500
ng/mL
% reactividad cruzada
no detectable
no detectable
no detectable
no detectable
no detectable
0,3
15.4. Precisión con LIAISON® Analyzer
Para determinar la repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo (es decir las variaciones intra-ensayo e inter-ensayo) se utilizaron muestras
diferentes con distintas concentraciones de IGF-I.
Repetibilidad. 40 réplicas se realizaron en la misma sesión analítica para evaluar la repetibilidad.
Reproducibilidad. 20 réplicas se realizaron en días diferentes con 2 lotes de integrales distintos para evaluar la reproducibilidad.
Variación intra-ensayo
Valor medio
CV (%)
(ng/mL)
71,2
4,40
189,3
4,59
412,7
2,37
* número de determinaciones
n*
40
40
40
Variación inter-ensayo
Valor medio
CV (%)
(ng/mL)
77,5
8,5
202,6
4,3
367,9
3,8
n*
20
20
20
®
15.5. Precisión con LIAISON XL Analyzer
Para determinar la repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo (es decir las variaciones intra-ensayo e inter-ensayo) se utilizaron muestras
diferentes con distintas concentraciones de IGF-I.
Repetibilidad. 20 réplicas se realizaron en la misma sesión analítica para evaluar la repetibilidad.
Reproducibilidad. 20 réplicas se realizaron en días diferentes con 2 lotes de integrales distintos para evaluar la reproducibilidad.
Variación intra-ensayo
Variación inter-ensayo
Valor medio
Valor medio
CV (%)
n*
CV (%)
n*
(ng/mL)
(ng/mL)
69,9
5,1
20
79,7
9,6
20
182,9
3,5
20
186,9
7,1
20
589,5
3,0
20
316,9
5,6
20
* número de determinaciones
Los resultados se refieren a los grupos de muestras investigados; no se trata de prestaciones garantizadas porque pueden existir diferencias
entre los diferentes laboratorios y ubicaciones.
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15.6. Veracidad
La veracidad del ensayo se ha comprobado mediante las pruebas de dilución y recuperación.
15.7. Prueba de dilución
Se han analizado muestras con concentraciones elevadas de IGF-I antes y después de diluirlas en serie con un diluyente de muestras. En el
análisis de las concentraciones medidas de IGF-I frente a las concentraciones esperadas, se ha empleado el modelo de regresión lineal.
Resultados en in ng/mL:
Test de dilución
400
Valor medido
350
300
250
200
150
100
50
0
0
50
100
150
200
250
300
350
Expected Conc.
Y = 1,1223x + 5,86
r = 0,997
15.8. Prueba de recuperación
Para determinar la recuperación del ensayo LIAISON® IGF-I, se analizaron muestras de suero después de haberles añadido IGF-I.
La tabla muestra un ejemplo de recuperación de la cantidad de IGF-I en un suero con presencia de anticuerpos baja después de añadir un
suero con presencia alta.
Dilución
Suero 1: alto
Suero 2: bajo
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,1
0,0
Valor
medido
(ng/mL)
434,8
387,5
335,5
278,7
219,6
183,3
156,7
Valor
esperado
(ng/mL)
379,2
323,6
268,0
212,3
184,5
-
Recuperación
(%)
102
104
104
103
99
-
Dilución
Suero 3: alto
Suero 4: bajo
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,1
0,0
Valor
medido
(ng/mL)
421,2
372,4
349,5
296,5
230,8
209,9
188,6
Valor
esperado
(ng/mL)
374,6
328,1
281,6
235,1
211,8
-
Recuperación
(%)
99
107
105
98
99
-
15.9. Efecto gancho
El efecto gancho por dosis altas (HDH, High-Dose Hook) se determinó añadiendo IGF-I a mezclas de suero humano hasta una concentración
máxima de 11000 ng/mL.
Cuando se ensayen muestras que contengan unas concentraciones de analito sumamente elevadas, se pueden obtener unos niveles
aparentes inferiores al nivel real por el efecto gancho. La presencia de un efecto gancho ha sido evaluada analizando 5 muestras a las que se
ha añadido altas concentraciones de IGF-I. Todas las muestras presentaron valores de concentración por encima del intervalo de medición,
lo que indica que la clasificación de las muestras es correcta.
15.10. Sensibilidad analítica y funcional
Sensibilidad analítica:
La sensibilidad analítica se define como la dosis mínima detectable que puede distinguirse de cero con 2 desviaciones estándar.
Sensibilidad funcional:
La sensibilidad funcional se define como la menor concentración de analito que puede determinarse con un CV inter-ensayo < 20%.
Serie de instrumentos
LIAISON® Analyzer
Sensibilidad analítica
Sensibilidad funcional
3 ng/mL
15 ng/mL
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