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DIAGNÓSTICO PRENATAL
CITOGENÉTICO
Carolina Cruz – Maricel Cuello
Centro Nacional de Genética Médica
DIAGNÓSTICO PRENATAL
“Todas aquellas acciones prenatales que
tienen por objeto diagnosticar la
ocurrencia de un defecto congénito,
entendiendo por tal toda anomalía del
desarrollo
morfológica,
estructural,
funcional o molecular presente al nacer o
de comienzo tardío, externa o interna,
familiar o esporádica, hereditaria o no,
única o múltiple” - O.M.S.
Técnicas de diagnóstico prenatal
TÉCNICAS NO INVASIVAS:
1-Tamizaje Bioquímico de Cromosomopatías:
a) Triple Marcador (AFP, HCG, Estriol).
b) Marcadores de primer Trimestre.
2-Tamizaje Ecográfico:
a) Eco 10-14 semanas.
b) Eco 18-22 semanas.
c) Eco Tridimensional.
3-Células fetales en sangre materna.
TÉCNICAS INVASIVAS:
a) Biopsia de Vellosidades Coriales
b) Amniocentesis Temprana
c) Amniocentesis Clásica
d) Cordocentesis
e) Embriofetoscopía
f) Cardiocentesis
g) Biopsia fetal
Indicación de DNP citogenético
Edad Materna Avanzada (>35 años).
Hijo previo con Anomalía Cromosómica.
Padres portadores de ACE balanceadas.
Hallazgos ecográficos patológicos.
Screening bioquímico patológico.
Antecedentes de abortos a repetición,
subfertilidad o muertes perinatales sin
diagnóstico.
Antecedentes de enfermedades monogénicas.
Biopsia de Vellosidades Coriales
Permite obtener tejido del corion frondoso, que
contiene células en activa división mitótica.
Semana 10-12 de gestación
Aproximadamente entre 15-25 mg
Aumenta 0.8% el riesgo de AE con respecto a la
amniocentesis
Falsos (+): 1-3%
Falsos (-): 0.1%
Incidencia de mosaicismo del 1.5-2%
Punción Transcervical
Punción Transabdominal
Biopsia de vellosidades coriales
Posibilidades
diagnósticas
blastocito
Macizo celular interno
Tejidos extraembrionarios
feto
Amnios y saco vitelino
Core mesenquimatoso
de la vellosidad corial
Cultivo a
largo termino
trofoblasto
citotrofoblasto
directo
Método
directo
Complicaciones debidas a la BVC
Sangrado vaginal (1.3 % - 1.9 %)
Hematoma subcoriónico ( 0.3%)
Pérdida de Líquido Amniótico (0.5%)
Infecciones 0.03 % (vía TA)
Reacción peritoneal
Hemorragia fetomaterna
Complicaciones perinatales
Análisis citogenético de vellosidades
coriales
Interpretación de los resultados:
Cariotipo normal: 46,XX; 46,XY
Trisomías autosómicas:47,XX+21; 47,XY,+18; 47,XX,+13
Triploidías:69,XXX o 69,XXY
Trisomías sexuales: 47,XXY
Monosomías:45,X (con hallazgos ecográficos)
Rearreglos estructurales balanceados o desbalanceados,
heredados o de novo.
Mosaico Confinado a Placenta
Mosaico cromosómico: Presencia de 2 o más
líneas celulares en un individuo.
Los mosaicismos confinados a placenta
(CPM,confined placental mosaicism)
Se definen como la discrepancia entre la
constitución cromosómica de la placenta con los
tejidos embrionarios/fetales.
Fueron reportados por Kalouseck en 1983, como
discrepancias numéricas entre el cariotipado de
células de la placenta y el feto.
0,8-2% de los embarazos viables estudiados por
biopsia de córion presentan MCP.
0,1% o menos , en amniocentesis.
Mecanismos de producción de
mosaicos en vellosidades coriales
Los mosaicos confinados a placenta se originan por
un evento de no disyunción temprana, que ocurren
durante la embriogénesis y generan la presencia de
células aneuploídes en los tejidos extraembrionarios.
Rescate de una cigota trisómica.
Células provenientes de un mellizo muerto.
Tipos de mosaicos placentarios
Los mosaicos placentarios más comunes
son:
Mosaico de trisomías no comunes
Mosaico de cromosomas sexuales
Mosaico de trisomías comunes (13,18,21)
Mosaico de marcadores
Mosaico de anomalías estructurales
Consecuencias del mosaicismo
confinado al corion
Retardo de crecimiento intrauterino
Pérdida del embarazo
Aumento de peso corporal
Muerte intrauterina
Resultados que necesitan estudios
complementarios (líquido amniótico o sangre
fetal)
Mos.T13,18,21.Alrededor de un 30% de ellas
presentan anomalía fetal.Confirmar con LA.
Anomalías de los cromosomas sexuales en línea
pura: son genuinas (más 95%)
Mosaico de los cromosomas sexuales: 45,X/46,XX o
45,X/46,XY son fetos normales. Confirmar con LA
Monosomía X: Ante este hallazgo en
preparaciones directas, sin anomalía ecográfica
en el feto, se sugiere LA, a pesar que hay fuerte
evidencia que el mismo será normal.
Mosaico de anomalías estructurales: LA para
confirmar
AMN IOCENTESIS
MONITOREO
ECOGRÁFICO
Estudio citogenético de LA
Amniocentesis Clásica :
Toma demuestra a partir de semana 16
a la 20.
Cultivos de largo término.
Vía TA.
Aproximadamente 20-30 ml.
Aspecto (líq.claro y cristalino).
Características bioquímicas.
Punción transabdominal
Punción transabdominal
Complicaciones debidas a la
Amniocentesis
Riesgos Fetales:
Pérdida fetal 1/200-300 (0.2-0.3%)
dependientes de:
1) La experiencia del operador
2) Características de la muestra estudiada
3) Calidad de la evaluación ecográfica.
4) El motivo de indicación del procedimiento
5) Evolución del embarazo
Complicaciones debidas a la
Amniocentesis
Riesgos Maternos:
Amnionitis 1/1000
Hemorragia abdominal
Injuria de vísceras abdominales
Sensibilización Rh
Sangrado vaginal
Pérdidas de líquido amniótico
Oligoamnios
Contracciones
Tipos celulares en cultivo de liquido
amniotico y sus características
Morfología
epiteliales
intermedias
fibroblastos
Origen
Vejiga, piel fetal Mb fetal,
trofoblasto
Tej. conectivo
fibroso
Proporción
20%
>70%
<10%
Carac. de
crecimiento
Pequeñas
colonias
Perdida de
malla intercel.
Líneas paralelas
de células
Eficiencia de
clonado
pobre
intermedia
excelente
Mitosis
rara
mod / frec
frecuente
Tripsinización
resisten
intermedia
Sub cultivos
Cel.
multinucleadas
algunas
intermedia
raras
¿Cuantas metafases analizar?
Para cultivos tripsinizados:
Analizar al menos dos cultivos primarios con técnicas
de bandeo.
Contar 20 metafases (10 metafases en cada frasco).
Interpretación de los resultados
46,XX y 46,XY.
Trisomías 13, 18, 21 y trisomías que
involucran a los cromosomas sexuales
son diagnostico genuino de anomalía
cromosómica fetal.
Rearreglos estructurales balanceados o
desbalanceados, heredados o de novo.
¿Qué hacer cuando se detecta una
anomalía en mosaico?
Un mosaico diagnosticado en un cultivo celular
puede estar presente en el feto y/o tejidos
extrafetales (mosaico verdadero) o ser un
artefacto de laboratorio no presente en el feto
(pseudomosaico).
Mosaico de nivel III: hallado en al menos dos
cultivos independientes. Suele corresponder a
los mosaicos verdaderos.
Mosaico de nivel II: hallado en un único cultivo o
colonia, suele corresponder a pseudomosaicos.
Mosaico nivel I: hallado en una única célula,
generalmente es un artefacto de laboratorio.
Si la anomalía ha sido observada en dos cultivos
independientes debe considerarse como un
mosaicismo verdadero.
Si la anomalía ha sido observada en un solo
cultivo:
Indicación
Una o varias cel. en un solo
cultivo con trisomia, 9, 12, 13, 14,
15,18, 20, 21 y 22.
Tipo de estudio
Estudio Intensivo
Analizar 10 células del 2do frasco
y 20 mas del tercer frasco.
Varias cel. con reorganización
estructural desbalanceada.
Cromosoma sexual extra.
Estudio moderado
Trisomía autosómica 1, 3, 7, 10, Analizar 10 células mas en el
11,17 y 19.
primer frasco donde se
encontró la anomalía
45, X, o monosomias que no
sean 45,X
Rearreglo estructural balanceado.
45,X (una cel).
Rearreglo estructural
desbalanceado (una cel)
Rearreglo estructural balanceado
(una cel).
Rotura cromosómica con perdida
de brazo.
Estudio estándar
No realizar estudios adicionales.
20 metafases pertenecientes a dos
cultivos independientes, (10 en
cada uno).
Caso Nº1: CENAGEM año 2006
Motivo: 2 AE y EMA.
Muestra: VC en
embarazo de 15
semanas de gestación.
Feto de sexo femenino
portadora de
translocación
balanceada.
Cariotipo: 46,XX,
t(1;8)(p32;p21.1).
No se asocia con
manifestaciones
fenotipícas.
der (8)
der (1)
1
8
Estudio parental.
Cariotipo en sangre
periférica.
Padre: 46,XY
Madre: 46,XX,
t(1;8)(p32;p21.1)
Incremento de riesgo de
tener descendencia
afectada por RM y/o
malformaciones del 5.5%.
8
1
der (8)
der (1)
Caso Nº2: CENAGEM año 2006
Motivo: 2 AE del 1t e hijo
fallecido malformado sin
diagnostico.
Estudio: Cariotipo en
sangre periférica.
Padre:46,XY
Madre: 46,XX,
t(11;22)(q24;q11.2).
Incremento del riesgo de
tener descendencia
afectada por RM y/o
malformaciones del 4%.
der (11)
22
11
der (22)
Muestra: VC en
embarazo de 16
semanas.
Feto de sexo femenino
portador de la
traslocación balanceada
de origen materno.
Cariotipo: 46,XX,
t(11;22)(q24;q11.2)mat.
No se asocia con
manifestaciones
fenotípicas.
der(22)
22
11
der(11)
Conclusiones
Material
Vellosidad corial
Líquido amniótico
Semanas de
gestación
10 a 12
16 a 20
Riesgo de
aborto
1-2%
0,5%
Técnica
Directa. Cultivo de corto
término (citotrofoblasto)
Cultivo: mesénquima.
Cultivo a largo
término
Mosaico confinado
0,8%-2%
0,1-0,3%
Contaminación con
células maternas:
En cultivo:0,2%
0,15-0,24%
Contaminación de la
muestra
En el cultivo
En el cultivo
Número de metafases
analizadas
12 a 15
15 a 20 de # frascos
Mosaico verdadero
1%
0,2%
Desafíos Futuros
Desarrollo de técnicas
menos invasivas, más
precoces, más específicas y
accesibles
MUCHAS GRACIAS