Evaluación del Número de Polimorfonucleares Neutrófilos en el

Evaluación del Número de Polimorfonucleares Neutrófilos
en el Fluido Crevicular de Pacientes Fumadores
Quiroz, Silvia V. - Rosa, Guillermo M. - Lucas, Gabriela V. - Lucas, Oscar N.
Facultad de Odontología. Fisiología Humana. U.N.N.E.
Sargento Cabral 2001 - (3500) Corrientes - Argentina.
Tel./Fax: +54 (03722) 33638 - E-mail [email protected]
ANTECEDENTES
Uno de los problemas que se le presenta habitualmente al odontólogo, específicamente al periodoncista, es el
tratamiento de los tejidos periodontales, en aquellos pacientes que tienen el hábito de usar tabaco. Numerosos
estudios se han realizado tratando de determinar el efecto del mismo sobre la salud periodontal; si bien existe
evidencia de un alto porcentaje de enfermedad periodontal atribuido al hábito del tabaco (1,2), dichos estudios
no son muy claros con respecto a la incidencia y severidad de la misma.(3)
En el organismo existe un equilibrio entre el huésped y la microflora presente, que mantiene la salud
periodontal, cuando este se pierde se pueden iniciar procesos que desencadenen la destrucción de los tejidos
de soporte del diente (4). El fumar, se encuentra asociado a un marcado deterioro en la salud periodontal, de
allí la importancia de su estudio para evitar este riesgo adicional y prevenir así la pérdida de piezas
dentarias.
El accionar del tabaco sobre el periodonto, puede ser en forma directa o indirecta. Directa, por acción de sus
mecanismos físicos, que irritan los tejidos gingivales y dañan los tejidos sanos. Indirecta, por acción de sus
componentes químicos que actúan a nivel sistémico, impidiendo la neutralización de la infección y alterando
la respuesta del huésped.(5)
La presencia de nicotina y cotinina en el fluido crevicular (FC), en concentraciones cinco a seis veces más
elevadas que en saliva, explicaría una de las causas de susceptibilidad a la destrucción de los tejidos
periodontales en pacientes fumadores.(6)
El fluido crevicular, presente en el surco gingival, juega un rol muy importante en la defensa de los tejidos
periodontales, siendo de valor para evaluar los cambios clínicos, correlacionando la cantidad de fluido
crevicular con la inflamación gingival presente. Se puede definir al fluido crevicular como un exudado
inflamatorio que proviene del tejido conectivo gingival, que fluye a la cavidad oral a través del surco
gingival, su acción de defensa estaría determinada por la acción de arrastre mecánico, dilución de toxinas
bacterianas, componentes antibacterianos y células defensivas como los leucocitos polimorfonucleares
neutrófilos (PMN). Sus componentes provienen de células, suero y tejidos del huésped, y de células
bacterianas. (7-10)
Ante la presencia de tabaco, la producción de anticuerpos, específicamente los anticuerpos salivales (IgA,
IgG e IgM), se encuentra afectada, junto con una reducción en el número de leucocitos y macrófagos. La
adhesión, quimiotaxis y fagocitosis de los PMNs, a nivel de los tejidos periodontales, se ven deprimidas, lo
que lleva a una disminución en la liberación de enzimas lisosomales, alterando así la respuesta inflamatoria.
La pérdida de la función o la cantidad de leucocitos polimorfonucleares, tienen consecuencias negativas
sobre la salud y específicamente en los tejidos periodontales.(11-14)
M ATERIALES Y MÉTODOS
Los sujetos experimentales fueron 20 (veinte) alumnos de segundo año de la Facultad de Odontología, con una
edad promedio de 20 años. Previo consentimiento, se les realizó una detallada historia clínica, un minucioso
examen de la cavidad bucal, toma de fluido crevicular y recuento de PMN. Conjuntamente se les realizó un
cuestionario, en donde se consignaba, la cantidad de cigarrillos fumados por día y la duración del hábito.
Fueron excluidos de este estudio todos los pacientes con patologías sistémicas, que pudieran afectar la actividad
o curso de la salud periodontal; o que requirieran profilaxis con antibióticos previa a cualquier maniobra
odontológica, o que por su condición médica requiriesen tratamiento con administración de antibióticos,
corticoides o DAINES.
Los sujetos fueron separados en dos grupos: 10 (diez) pacientes del grupo control y 10 (diez) del grupo
experimental. El grupo control constituido por aquellos que nunca han fumado y el grupo experimental por
aquellos que fumaron como mínimo 10 cigarrillos por día y una duración del hábito de dos años al menos.
Toma de Fluido crevicular: previa a la obtención de la muestra, se solicitó a los pacientes no cepillarse y no
ingerir alimentos durante 1 hora antes.
Se obtuvo la muestra, una vez realizado el aislamiento relativo de la zona elegida, a fin de evitar la
contaminación del líquido crevicular con saliva, la placa bacteriana supragingival se removió con una cureta
periodontal, teniendo mucho cuidado de no tocar la encía y el secado se llevó a cabo con una suave corriente
de aire por 15". Inmediatamente se insertaron papeles absorbentes estandarizados (Periopapers, Ora Flow Inc.,
Plainview New York) de 6 x 2 mm, aproximadamente a 2 mm de profundidad del surco crevicular, sin ejercer
presión, durante 60", en el área mesial de la cara vestibular de las siguientes piezas dentarias: primer molar
superior derecho, primer molar inferior izquierdo e incisivo central inferior derecho. Se utilizó el siguiente
criterio de exclusión: pieza con destrucción coronaria; con caries o restauración gingival y con restauración
coronaria total. En caso de ausencia de la pieza dentaria índice o de estar entre los criterios de exclusión, se
tomó la pieza del mismo grupo más próxima. Los papeles absorbentes se retiraron y fueron colocados en
placas de petri, para luego ser medidos en unidades de periotrón (u.p.) con el Periotrón 8000 (Ora Flow I.D.E.
Interstate, Amytiville, New York), todas aquellas muestras contaminadas con saliva o sangre se descartaron y
se tomaron nuevas.
Recuento de PMN: el periopaper , conteniendo el FC, es introducido en un cono de Ependorf con 40µl de
sol. Fisiológica, el cual es agitado durante 30", a fin de liberar los PMN del papel de filtro. 20µl de esta
solución son teñidos con 10µl de violeta de gensiana y llevados a la cámara de Neubauer para su recuento con
microscopio óptico. . La cuantificación se realizó en las 2(dos) áreas de la cámara que hacen un total de 9
mm² + 9 mm² de cada superficie medida.
DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS
La Figura 1 representa la cantidad de Fluido Crevicular, obtenida en los 10 (diez) pacientes evaluados en cada
uno de los grupos. En el grupo fumadores este valor fue 237 u.p., con un término medio de 7.9 ± 2.59 E.S.M,
mientras en el grupo no fumadores, fue de 506 u.p., con un término medio de 16.86 ± 2.27 E.S.M.
Cuantificación de FC en Pacientes Fumadores
y no Fumadores
506
Volumen de FC
Unidades de Periotrón
600
500
400
300
237
200
100
0
Fumadores
No fumadores
Fig. 1
Al igual que con el FC, la cantidad de Polimorfonucleares Neutrófilos observada, fue menor en el grupo
fumadores que en el no fumadores. La Fig.2 representa la cantidad de PMN totales obtenidas en cada uno de
los grupos. En el grupo fumadores se observaron 72 PMN, con un término medio de 2.4 ± 1.28 E.S.M., en
tanto que en los no fumadores este valor fue de 337 PMN, con un término medio de 11.23 ± 2.33 E.S.M
Cuantificación de PMN en Pacientes Fumadores y
no Fumadores
337
Número de PMN
350
300
250
200
150
72
100
50
0
Fumadores
No fumadores
Fig.2
En pacientes fumadores, la presencia de PMN , se evidenció a partir de valores de 26 u.p. de FC. A valores
inferiores su observación fue escasa, a excepción de 5 PMN, presentes en 5 u.p. de FC, como se observa en la
Fig.3
En los pacientes no fumadores, la presencia de PMN, se observa a partir de 10 u.p de FC, alcanzando el pico
máximo a los 27 u.p de FC, como se puede apreciar en la Fig.4.
Cuantificación de PMN en FC
de Pacientes no Fumadores
60
40
35
30
25
20
15
10
5
0
50
Número de PMN
Número de PMN
Cuantificación de PMN en FC
de Pacientes Fumadores
40
30
20
10
2
3
4
5
6
8
10
13
Cuantificación de FC
26
52
63
0
1 2 5 6 10 13 15 16 17 18 19 20 21 22 26 27 33 37 47 50
Cuantificación de FC
Fig. 3
Fig.4
Estos resultados indican que los pacientes fumadores poseen menor cantidad de FC y PMN comparativamente
con los no fumadores.
La disminución en el FC, así como en el número de PMN en pacientes fumadores, tienen como resultado una
deficiencia en la respuesta del huésped, debido a las alteraciones en la microcirculación, que incluyen
cambios morfológicos en los capilares y vasoconstricción a nivel gingival.(16)
CONCLUSIÓN
Estos resultados indican: 1) los pacientes fumadores presentan una menor cantidad de FC en comparación con
los pacientes no fumadores; 2) se observa menor cantidad de PMN en el FC de fumadores y 3) la presencia de
PMN en no fumadores se evidenció en cantidades inferiores de FC.
BIBLIOGRAFÍA
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
Akef, J.; Weine, F.S.; Weissman, D.P.: The Role of Smoking in the Progression of Periodontal Disease:
A Literature Review .Compend.Contin.Educ.Dent., 6:526-531; 1992.
Bergstrom, J.; Eliasson, S.; Dock, J.: The Beneficial Effect of Smoking Cessation on Periodontal Status.
J.Dent.Res. (Special Issue) 75:47; 1996.
Haber, J.; Wattles, J.; Croxyley, M.; Mandell, R.; Joshipura, K.; Kent, R.: Evidence for Cigarette
Smoking as a Major Risk Factor for Periodontitis. J. Periodontology. 64:16-23; 1993.
Rivera-Hidalgo, F.: Smoking and Periodontal Disease. A Review of the Literature. J.Periodontology
57:617-623; 1986.
Feldman, R.S.; Bravacos, J.S.; Rose, C.L.: Association Between Smoking Different Tobacco Products
and Periodontal Disease Indexes. J.Periodontology 54:481-487; 1983.
Mc Guire, J.R.; Mc Quade, M.J.; Rossmann, J.A.; Garnick, J.J.; Sutherland, D.E.; Scheidt, M.J.; Van
Dyke, T.E.: Cotinine in Saliva and Gingival Crevicular Fluid of Smokers with Periodontal Disease.
J.Periodontology 60:176-181; 1981.
Carranza, F.A.: Periodontología Clínica de Glickman. 4 ed. Edit. Interamenricana; 1990.
Embery G.; Waddington: Gingival Crevicular Fluid: Biomarkers of Periodontal Tissue Activity. Adv.
Res. 7:329-336; 1994.
Brills, N.: The Gingival Pocket Fluid Studies of Its Ocurrence, Composition and Effect. Acta
Odont.Scand., 20: Suppl.32; 1962.
Weinsteing, E.; Mandel, I.D.; Oshraim, H.I. et al. Studies of Gingival Fluid. Periodontics 5:161-166;
1967.
Babu, J.P.; Waring, M.B.; Tipton, D.A.; Pabst, M.J.: Tobacco Extract Impair Oral Cavity Defensive
Functions Against Infection. J.Dent.Res. (Special Issue) 71:155; 1992
Seow, W.K.; Mac Farlane, G.D.; Thong, Y.H.; Herzberg, M.C.: Nicotine Effects on PMN Chemotaxis
and Phagocitosis. J.Dent.Res. (Special Issue) 71:178; 1992.
Ryder, M.: Alterations in PMN Functions by Nicotine and Cotinine. J.Dent.Res. (Special Issue) 71:178;
1992.
Periodontitis, Polimorphonuclear Leukocyte Phagocytosis, and Smoking. Compend Contin. Educ.Dent.
2:232; 1993.
Mc Laughlin, W.S.; Lovat, F.M.; Mac Gregor, I.D.M.; Kelly, P.J.: The Inmediate Effects of Smoking on
Gingival Flow. Journal of Clinical Periodontology. 20:448-451, 1993.
Sato, S.; Kamoj, H.; Hiyonobu, K.; Numabe, Y.; Kamol, K.: Changes in Gingival Blood Flow After
Smoking and Passive Smoking. J.Dent.Res. (Special Issue) 73:257; 1994.