Procesado de muestras en el laboratorio de la clínica (I)

12 .prevención
de la salud
Procesado de muestras
en el laboratorio de la
clínica (I)
A lo largo de esta primera parte veremos como realizar un manejo
correcto de las muestras de sangre, orina y líquidos orgánicos. Dejamos
la citología para nuestro próximo número.
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La fiabilidad de un análisis y su interpretación dependen en gran medida
de la calidad de la muestra que se analiza o que se envía al laboratorio.
El manejo adecuado de las muestras desde que se obtienen hasta que
El EDTA es el anticoagulante
de elección para hacer el
hemograma y el frotis sanguíneo
se procesan es muy importante para poder realizar un análisis correcto
y no tener resultados erróneos.
Para poder realizarlo la sangre tiene que conservar sus características
Repasaremos algunas normas de manejo de muestras que son bastan-
quida.
físicas y químicas, es decir no puede coagularse, debe permanecer lítes generales y que nos pueden servir tanto si los análisis se hacen en
la clínica como si se envían fuera, a laboratorios externos.
La muestra que necesitamos es sangre entera recogida en tubos con
anticoagulante EDTA ya que es el anticoagulante que mejor conserva la
morfología de las células sanguíneas.
Análisis de sangre
La primera regla para poder realizar correctamente el hemograma es
Análisis hematológico: hemograma
que la sangre que vamos a echar al tubo con anticoagulante EDTA no
puede tener ningún coágulo.
El hemograma nos proporciona el recuento de glóbulos rojos, blancos
y plaquetas.
La segunda regla a tener en
cuenta es que es muy importante ajustar la cantidad de sangre
que se echa al anticoagulante
que hay en el tubo (los tubos
vienen ya preparados con el anticoagulante).
Normalmente los tubos vienen
con una línea que indica la cantidad de sangre que hay que
adicionar. Es fundamental respetar la recomendación ya que
un defecto o exceso de sangre
según la proporción de anticoagulante del tubo va a producir
alteraciones hematológicas.
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Si hay demasiada sangre y sobrepasa el nivel indicado en el tubo, la
Lo dejamos secar al aire, y luego lo fijamos introduciéndolo en un po-
muestra se coagulará. La muestra no será apta para realizar el análisis
cillo que contenga metanol y después se tiñe. El frotis se examina con
hematológico.
un microscopio, se cuentan los distintos tipos de glóbulos blancos y se
examinan las células. Al observar esta extensión de sangre se buscan
Si hay poca sangre y no llega al nivel indicado se producirán falsos valo-
también posibles parásitos sanguíneos que pudieran aparecer.
res del hematocrito y alteraciones de la morfología de las células.
Los frotis sanguíneos también deberían ser preparados inmediatamente
después de haber obtenido la muestra o como máximo transcurridas 2
La cantidad de sangre que
hay que adiccionar a cada
tubo viene marcada en el
propio tubo. Es muy importante
respetar esa recomendación
para que no haya resultados
erróneos
horas tras la extracción de la sangre. Así se evitan los problemas derivados de que la sangre esté mucho tiempo en el anticoagulante como
el deterioro de las células.
El hemograma se puede realizar en muestras recogidas en tubos con
otros anticoagulantes como la heparina, pero este anticoagulante conserva peor la morfología celular y favorece que las plaquetas formen
grupos (agregación plaquetaria) lo cual altera su contaje.
¿Cómo conservar la muestra de sangre si no se puede hacer el
análisis inmediatamente?
Si no hacemos el hemograma en dos o tres horas la sangre debe ser
refrigerada a 4º C (debe estar en nevera). El recuento de glóbulos rojos,
la hemoglobina y el hematocrito no sufren modificaciones si la sangre
se refrigera durante unas 24 horas.
Además de realizar los recuentos celulares, para completar un análisis
hematológico debemos realizar también un frotis sanguíneo. Hay que
extender una pequeña gota de sangre sobre una lámina de vidrio (portaobjetos) para formar una película delgada (frotis sanguíneo).
prevención de la salud.15
tubos a 2500-3000 rpm (5-10 min) para
Si el frotis, una vez hecho, no puede teñirse
inmediatamente, es importante por lo menos
fijarlo sumergiéndolo en metanol durante dos
minutos. Las células fijadas se conservan durante mucho tiempo.
ferentemente de vidrio, en el que no se ha pues-
separar el suero del coágulo. Esta separación
to anticoagulante y después centrifugando.
conviene realizarla dentro de las 2 horas después de la toma de muestras para evitar el
El plasma se obtiene tras centrifugar la sangre
intercambio de compuestos entre las células y
que se ha introducido en un tubo con anti-
el suero y que la muestra se deteriore.
coagulante
Para obtener el plasma, las muestras se han
Análisis bioquímicos
La mayoría de las pruebas bioquímicas que
de recoger en tubos que contengan heparina,
se hacen en el laboratorio de análisis clínicos
preferentemente de litio, ya que este anticoa-
pueden realizarse en muestras de suero.
gulante interfiere en muy pocas determinacio-
Recordemos que la sangre es un tejido líqui-
nes bioquímicas. Igual que para hacer el he-
do, formado por dos partes, las células y el
Muchas de estas determinaciones pueden
líquido en el que sobrenadan, el plasma.
mograma es muy importante adicionar al tubo
realizase también en muestras de plasma te-
el volumen de sangre indicado en el mismo.
niendo en cuenta que el anticoagulante que
El plasma se obtiene tras centrifugar la sangre
usemos no interfiera en la prueba.
introducida en un tubo con anticoagulante. Contiene factores de la coagulación (fibrinógeno).
Como hemos dicho para obtener suero para
hacer las pruebas bioquímicas la muestra de
Si ponemos sangre en un tubo de ensayo sin
sangre debe introducirse en un tubo seco sin
anticoagulante y dejamos pasar unos minutos
anticoagulante.
se forma un coágulo. Posteriormente, el coágulo se contrae y se separa de un líquido am-
Las muestras así obtenidas se dejan a tem-
barino y transparente, el suero sanguíneo.
peratura ambiente en posición vertical hasta
que se coagulen y se inicie la retracción del
El suero se obtiene dejando que se produzca la
coágulo (30-40 minutos después de obtener
coagulación espontáneamente en un tubo, pre-
la muestra). Posteriormente se centrifugan los
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•
congelar el suero/plasma a -20º C: hay muy pocos compuestos que
no son estables a esta temperatura durante largo tiempo
Análisis de orina
Las muestras de orina se han de recoger en recipientes limpios, secos y
estériles. Es preciso conocer y apuntar la técnica de obtención (micción
espontánea, sondaje uretral, cistocentesis) ya que los valores de referencia del sedimento difieren en los distintos tipos de técnicas.
También es importante realizar el análisis cuanto antes, pues muchos
componentes se alteran desde que la orina sale al exterior, especialmente bajo temperaturas de almacenamiento elevadas, pH alcalino y en las
orinas muy diluidas.
Las muestras de orina se conserva correctamente:
•
30 minutos a temperatura ambiente
•
12 horas a 4º C
Líquidos orgánicos
Cuando tenemos un líquido orgánico (pleural, peritoneal, pericárdico,
El plasma se obtiene centrifugando la muestra a 2500-3000 rpm
sinovial, cefalorraquídeo) las muestras se han de recoger en distintos
(5-10 min). Al igual que el suero, conviene separar el plasma de las célu-
tubos dependiendo de las pruebas que queramos hacer:
las dentro de las 2 horas después de la toma de muestras.
Tubo con anticoagulante EDTA:
Conservación suero/plasma
•
Si las determinaciones no se realizan inmediatamente después de ha-
Tubo sin anticoagulante o con anticoagulante heparina de litio:
ber obtenido el suero o plasma:
•
•
conservar el suero/plasma a 4º C: la mayoría de los compuestos se
Tubo estéril sin anticoagulante:
conservan bien a esta temperatura al menos durante 3 días.
•
recuento de células nucleadas y estudio citológico
parámetros bioquímicos
cultivo microbiológico.