Análisis de superficies mediante la técnica del hisopo

ANALISIS BACTERIOLOGICO DE
SUPERFICIES MEDIANTE EL METODO
DEL HISOPO
El objetivo de esta práctica es comprobar el estado higiénico del lugar de
trabajo ó poner de manifiesto la presencia de microorganismos en algún
tipo de superficie de cualquier tipo.
Existen varios métodos para llevar a cabo este tipo de análisis, y aquí
vamos a realizar el método del hisopo, el cual es apropiado para cualquier
tipo de superficie, sea plana ó no.
Este método es el mas antiguo de los utilizado en el análisis microbiológico
de superficies, sobre todo de aparatos y utensilios. Esta especialmente
recomendado para estudiar superficies muy contaminadas, ya que permite
realizar diluciones decimales de la muestra. El procedimiento a seguir es el
siguiente:
• Delimitar la superficie que se va a analizar mediante una plantilla de
papel de aluminio esteril, con una abertura de dimensiones conocidas
(por ejemplo 9cm2).
• Humedecer el hisopo estéril en un tubo de solución salina con 4.5 ml
estéril y restregar varias veces por la superficie delimitada de la
plantilla.
• Introducir de nuevo el hisopo en el tubo de solución salina y dejar en
reposo el hisopo dentro del tubo entre 15-30 minutos de manera que
los microorganismos se liberen del algodón al líquido.
• Sembrar 0.1 ml del liquido en una placa con medio TSA.
• Incubar la placa a 37 ºC durante 24-48 h y realizar el recuento,
expresándolo como UFC por unidad de superficie.
Si lo que se quiere es conocer los diferentes tipos de microorganismos
presentes en una superficie determinada (por ejemplo la piel o las mucosas
humanas) bastara con tomar el hisopo estéril sin humedecer y tocar en la
zona de estudio. A continuación, se siembra una placa de TSA haciendo
estrías con el hisopo directamente sobre la superficie del agar y se llevara a
incubar a 37ºC durante 24-48 horas.
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