FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA RED NACIONAL UNIVERSITARIA UNIDAD ACADÉMICA DE SANTA CRUZ FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD BIOQUÍMICA Y FARMACIA QUINTO SEMESTRE SYLLABUS DE LA ASIGNATURA DE MICOLOGÍA Y VIROLOGÍA Elaborado por: Dra. Vilma Torrico Zambrana Gestión Académica I/2013 U N I V E R S I D A D D E A Q 1 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA UDABOL UNIVERSIDAD DE AQUINO-BOLIVIA Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01 VISIÓN DE LA UNIVERSIDAD Ser la universidad líder en calidad educativa. MISIÓN DE LA UNIVERSIDAD Desarrollar la educación superior universitaria con calidad y competitividad al servicio de la sociedad. Estimado(a) estudiante: El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes, quienes han puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de enseñanza para brindarte una educación de la más alta calidad. Este documento te servirá de guía para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo. Aprobado por: Fecha: Marzo, 2013 SELLO Y FIRMA JEFATURA DE CARRERA U N I V E R S I D A D D E A Q 2 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA SYLLABUS ASIGNATURA MICOLOGÍA Y VIROLOGÍA CÓDIGO BCL-521 TOTAL HORAS SEMESTRALES 100 HORAS TEÒRICAS 60 HORAS PRÀCTICAS 40 CRÈDITOS 10 REQUISITOS BCL-421 I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA Estudiar las características de los virus y entender los fundamentos de su mutación. Estudiar el medio ambiente donde se desarrollan los virus, para entender su desarrollo en el ser humano. Analizar el crecimiento y daño que ocasionan los virus, y su relación con los métodos de esterilización, asepsia y antisepsia en Ciencias de la Salud. Identificar los principales virus patógenos, sus características y sus bases inmunológicas. II. PROGRAMA ANALÍTICO DE LA ASIGNATURA. UNIDAD I. INTRODUCCIÓN DE LA VIROLOGÍA TEMA 1. VIROLOGÍA 1.1. Introducción 1.2. Concepto 1.3. Generalidades y características comunes y generales 1.4. Evolución e historia 1.5. Clasificación de los virus TEMA 2. PROPIEDADES DE LOS VIRUS 2.1. Tamaño y estructura 2.2. Diferencia con bacterias, y otros microorganismos 2.3. Composición química. 2.4. Conceptos de simetría 2.5. Tipos de huésped de virus 2.6. Viriones, viroides y priones 2.7. Efectos de agentes físicos y químicos TEMA 3. REPLICACIÓN Y GENÉTICA VIRAL 3.1. Multiplicación de los virus 3.2. Interacción genética entre virus – célula huésped U N I V E R S I D A D D E A Q 3 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TEMA 4. DIAGNÓSTICOS LABORATORIALES DE LAS ENFERMEDADES VIRALES 4.1. Toma de muestra para examen de laboratorio 4.2. Conceptos de métodos de diagnósticos laboratoriales 4.3. Transportes de muestras 4.4. Métodos directos. Aislamientos del virus e inmunoanálisis en fase sólida 4.4.1. Cultivos de virus. Medios generales 4.5. Métodos Indirectos o serológicos 4.5.1. Prueba de neutralización, hemoaglutinación y fijación de complemento 4.5.2. Inmunofluorescencia e inmunoelectroforesis 4.6. Métodos rápidos de diagnóstico virológicos 4.7. Nuevos métodos de diagnósticos virológicos 4.8. Pruebas inmunológicas para enfermedades virales UNIDAD II. PATOGENIA DE LAS INFECCIONES VIRALES Y MECANISMO DE DEFENSA DEL HUÉSPED TEMA 5. PATOGENIA DE LAS INFECCIONES VIRALES 5.1. Puertas de entrada 5.2. Vías de diseminación en el organismo 5.3. Transmisión de virus al exterior del organismo 5.4. Efectos de la infección viral sobre las células 5.5. Mecanismos de lesión celular 5.6. Modelos de infección TEMA 6. MECANISMO DE DEFENSA DEL HUÉSPED 6.1. Inmunidad innata o inespecífica 6.2. Inmunidad adquirida o específica 6.3. Defensa frente a las infecciones virales UNIDAD III. ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR ARTRÓPODOS Y ROEDORES TEMA 7. ARBOVIRUS 7.1. Características de los virus 7.2. Encefalitis. Tipos de encefalitis 7.3. Dengue, Dengue hemorrágico y otros 7.4. Fiebre Amarilla 7.4.1. Virus de la Fiebre Amarilla 7.4.2. Características 7.4.3. Procedimiento de diagnóstico 7.5. Mayaro 7.6. Diagnóstico de laboratorio de las enfermedades producidas por Arbovirus TEMA 8. FAMILIA ARENAVIRIDAE 8.1. Característica de la familia arenaviridae 8.2. Arenavirus del Nuevo Mundo 8.3. Arenavirus del Viejo Mundo 8.4. Otras familias productoras de fiebre hemorrágicas de origen viral U N I V E R S I D A D D E A Q 4 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD IV ESTUDIOS DE LOS VIRUS RESPIRATORIOS Y ENTÉRICOS TEMA 9. FAMILIA PICORNAVIRIDAE 9.1. Picornavirus. Introducción 9.2. Grupo enterovirus 9.2.1. Poliomielitis 9.2.1.1. Virus de la Poliomielitis 9.2.2. Coxsackie 9.2.3. Echovirus 9.3. Rinovirus TEMA 10. FAMILIA PARAMIXOVIRIDAE 10.1. Paramixovirus. Introducción 10.2. Replicación de los paramixovirus 10.3. Virus Parainfluenza 10.4. Virus de Parotiditis epidémica 10.5. Género Morbillivirus. Virus del Sarampión 10.6. Género Pneumovirus. Virus Respiratorio Sincicial 10.7. Características 10.8. Diagnóstico por laboratorio 10.9. Vacunas TEMA 11. FAMILIA TOGAVIRIDAE 11.1. Virus de la Rubéola. Características 11.2. Cuadro clínico y etiopatogenia 11.3. Epidemiología 11.4. Diagnóstico 11.5. Profilaxis y vacunación TEMA 12. FAMILIA POXVIRIDAE 12.1 Poxvirus. Introducción 12.1. Virus de la Viruela 12.2. Características importantes 12.3. Vacunas antivariólitica y sus contraindicaciones TEMA 13. FAMILIA ORTHOMIXOVIRIDAE 13.1. Características de la familia Orthomixoviridae 13.2. Replicación de los Orthomixovirus 13.3. Virus de la Influenza 13.4. Ecología de los virus Influenza 13.5. Variación antigénica del virus Influenza 13.6. Epidemiología 13.7. Diagnóstico 13.8. Tratamiento y profilaxis U N I V E R S I D A D D E A Q 5 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD V. ESTUDIOS DE LOS VIRUS DEL TRACTO GENITAL Y PARENTERAL TEMA 14. FAMILIA RETROVIRIDAE 14.1. Infecciones por transmisión sexual 14.2. Virus del síndrome de inmunodeficiencia 14.3. Ciclo replicativo 14.4. Fisiopatogenia 14.5. Cuadro clínico 14.6. Diagnostico virológico 14.7. Pruebas complementarias para el seguimiento de pacientes positivos 14.8. Epidemiología 14.9. Profilaxis y tratamiento TEMA 15. FAMILIA HERPESVIRIDAE 15.1. Característica y replicación de la familia 15.2. Herpes virus. Herpes simples tipo 1 y 2 15.3. Herpes-Zoster. Características 15.4. Citomegalovirus 15.5. Epstein Barr 15.6. Sarcoma de Kaposi UNIDAD VI ESTUDIOS DE LOS VIRUS DEL SISTEMA NERVIOSO (RHABDOVIRIDAE) TEMA 16. VIRUS DE LA RABIA 16.1. Introducción 16.2. Rabia 16.3. Estructura del virus 16.4. Estructura antigénica 16.5. Acción patógena 16.6. Rabia en humanos 16.7. Rabia en animales 16.9. Tratamiento después de la exposición 16.10. Otros virus del Sistema Nervioso Central 16.11. Virus lentos 16.12. Profilaxis, vacunas y antivirales UNIDAD VII. VIRUS DE LA HEPATITIS VIRALES 17.1. Introducción 17.2. Tipos de Hepatitis virales 17.3. Diagnóstico y tratamiento 17.4. Vacunas UNIDAD VIII. HONGOS DE IMPORTANCIA MÉDICA TEMA 18. PROPIEDADES GENERALES Y CLASIFICACIÓN DE LOS HONGOS 18.1. Introducción a la Micología 18.2. Crecimiento y aislamiento de los hongos U N I V E R S I D A D D E A Q 6 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 18.3. Estructura de los hongos 18.4. Reproducción de los hongos 18.5. Las micosis TEMA 19. MICOSIS SUPERFICIALES 19.1. Micosis superficiales, cutáneas, subcutáneas 19.2. Clínica de los dermatófilos 19.3. Clínica de las candidiasis 19.4. Otras micosis y pseudomicosis superficiales y oportunistas. TEMA 20. MICOSIS PROFUNDA Y SISTÊMICAS 20.1. Micosis cutáneo profundas 20.2. Micosis sistémicas y oportunistas 20.3. Antimicóticos III. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD. Tipo de asignatura Asignatura de especialidad (Tipo A) i. Resumen de los resultados del diagnóstico realizado para la detección de los problemas a resolver en la comunidad. En la temporada de lluvia en el departamento de Santa Cruz, se incrementa la proliferación de mosquitos de diferentes especies produciendo enfermedades con síndromes febriles subclínicos y manifestaciones variadas. Los síndromes que habitualmente se asocian son de origen viral y suelen dividirse en cuatro grupos, según sus manifestaciones pueden ser fiebre y mialgias (Dengue y otras), Artritis y exantema (Mayaro, Chikungunya, Rubéola, otras), Encefalitis (La Crosse, San Luís, del Nilo, otras) y Fiebres hemorrágicas (Dengue, Fiebre Amarilla). Estos mosquitos al transmitir un gran número de enfermedades, algunas de menor importancia, y otras, tal como la Malaria, el Dengue y Mayaro extraen un costo inmenso en vista de pérdidas de vida, incapacitación, sufrimiento, y pérdidas económicas, requiriendo vigilancia epidemiológica intensiva para identificarlas y conocer su ocurrencia y comportamiento clínico específico. ii. Nombre del proyecto al que tributa la asignatura. “Seroprevalencia de Dengue en la población de “La Guardia” de la ciudad de Santa Cruz de la Sierra, durante el Segundo semestre del año 2012” iii. Contribución de la asignatura al proyecto. Diagnosticar la seroprevalencia de la enfermedad de Dengue mediante la técnica de IgM e IgG MAC ELISA, contribuye a la vigilancia epidemiológica, explotando la información en salud para orientar la toma de decisiones y la planificación de estrategias de prevenir y controlar. La descripción de los patrones de ocurrencias de la enfermedad del Dengue y la investigación de sus causas permite identificar los grupos más expuestos o susceptibles. El análisis de la información puede detectar cambios en la tendencia o distribución de los problemas de salud, cuya manifestación mas evidente es una epidemia que puede ser extensa o limitada si es prevenida a tiempo. U N I V E R S I D A D D E A Q 7 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA La participación activa de los estudiantes no solo será en la realización metodológica, sino también esta avocado a realizar conferencias de orientación a la población en general de forma profiláctica iv. proyecto. Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del Trabajo a realizar por Localidad, aula o los estudiantes laboratorio Organización de Aula y localidad “La actividades del proyecto Guardia” e inspecciones a la localidad de “La Guardia” Toma de encuestas y Barrios y Centros de muestras con vacutainer Salud seleccionados para el diagnóstico de IgM e IgG para Mayaro a los pobladores. Separación y codificación de muestra Procesos de Análisis de MAC ELISA Laboratorio de la UDABOL Laboratorio de la U.F. de Inmunología y Biología Molecular CENETROP Análisis estadísticos de datos y entrega de resultados laboratoriales Capacitación y socialización sobre temas de prevención sobre y su impacto en la salud. Elaboración del trabajo final con los datos obtenidos Aulas y lugares asignados previamente por las autoridades de Salud de “La Guardia” U N I V E R S Aula I D A D D E A Q 8 Incidencia social Fecha. Mayor información de los estudiantes sobre la bibliografía existente sobre las epidemias de Mayaro. 15 al 20 de Abril Destreza de los estudiantes para la toma de muestra y orientación de prevención de las enfermedades reemergentes El estudiante separa y codificará las muestras según normas laboratoriales, para ser entregadas al CENETROP y procesar las muestras Estudiantes entregaran los resultados a cada paciente e indicando el tratamiento y la prevención 22 al 30 de Abril Estudiantes mejor preparados en la realización y presentación de informes. 08 al 12 de Junio U I N O B O 05 al 16 de Mayo 19 al 30 de Mayo 03 al 05 de Junio L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA. ● PROCESUAL O FORMATIVA. Las actividades evaluativas, que comprenden la evaluación procesual y de resultados se realizara como sigue: ACTIVIDAD EVALUATIVA Preguntas orales y participación en clases Revisión y resumen bibliográficos de libro PARÁMETROS PONDERACIÓN Conocimiento del tema y participación en aula Originalidad Resolución de work paper TOTAL Conocimiento del tema y mesa redonda Originalidad Repasos orales TOTAL Presentación Originalidad de los conceptos. Exactitud de los conocimientos Destreza en la práctica TOTAL Prácticas de laboratorio FECHA En todas las clases teóricas y prácticas. 25 puntos 25 puntos 50 puntos En todas las clases teóricas y prácticas 25 puntos 25 puntos 50 puntos 10.Puntos En todas las clases prácticas. 10 Puntos 10 Puntos 20 Puntos 50 Puntos El trabajo, la participación y el seguimiento realizado a estos tres tipos de actividades se tomarán como evaluación procesual calificando cada una entre 0 y 50 puntos y promediando el total. La nota procesual o formativa equivale al 50% de la nota de la asignatura. ● DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen parcial o final) Se realizarán 2 evaluaciones parciales con contenido teórico y práctico sobre 50 puntos cada una. El examen final consistirá en un examen escrito con un valor del 75% de la nota y la presentación de los informes y documentos del proyecto con el restante 25%. V. BIBLIOGRAFÍA BIBLIOGRAFÍA BÁSICA. ACKERMAN, Bernand, Atlas clínicos de enfermedades de la piel , 2005 (Signatura topográfica: 616.5Ak36 ) ARENAS, Roberto, Atlas dermatología, 2005 (Signatura topográfica: 616.5Ar33). AGUILERA, Julio C.,Lecciones aprendidas en VIH-SIDA,2000, (Signatura topográfica:616.019 4 Ag93) MUÑOZ, Álvaro, Normas de diagnostico y tratamiento médico de enfermedades tropicales, 2005, (Signatura topográfica: 616M92) U N I V E R S I D A D D E A Q 9 U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VELÁSQUEZ, Gloria, Sida: Enfoque integral, 1996, (Signatura topográfica:616.976 2 V54) FORBES, Betty A, et al. BAILEY y SCOTT. Diagnostico Microbiológico. 11º edicion. Edit. Medica Panamericana.2000. KRIVOSHEM,S. Manual de microbiologia Mèdica. Editorial Mir. Moscù. 2002. PEREA EJ. Enfermedades infecciosas. Editorial Limusa. México. 2002 BIBLIOGRAFÍA COMPLEMENTARIA CARBALLAL, G, OUBIÑA ,J, Virología Médica, Argentina.Tercera Edición MIMS, PLAYFAIR, ROITT, WAKELIN, WILLIANS (eds). Microbiologia Mèdica Mosby. 1º Edicion. Edit. Doyma Libros. 1995. PEREZ ALVA, Simon. Control Microbiológico. Ed. Acácia S.A. Peru. 1989. U N I V E R S I D A D D E 10 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VI. PLAN CALENDARIO SEMANA 1ra. 2da. 3ra. ACTIVIDADES ACADÉMICAS UNIDAD I Tema 1-2-3 UNIDAD I Avance de materia Tema 4 UNIDAD II Avance de materia Tema 5 -6 OBSERVACIONES Avance de materia Avance de materia 5ta. Avance de materia 6ta. Avance de materia UNIDAD III Tema 8 7ma. Avance de materia UNIDAD III Tema 8 Avance de materia 9na. Avance de materia 10ma. Avance de materia Preguntas orales, GIPS UNIDAD III TEMA 7 4ta. 8va. Preguntas orales, GIPS Actividades de Brigadas Preguntas orales, GIPS Primera Evaluación Preguntas orales, GIPS Primera Evaluación UNIDAD IV Tema 9-10-11 Actividades de Brigadas UNIDAD IV Tema -12-13 UNIDAD V Tema 14-15 UNIDAD VI 13ra. Avance de materia Tema 16 UNIDAD VII 14ta. Avance de materia Tema 17 UNIDAD VII 15ta. Avance de materia Tema 17 12da. Avance de materia UNIDAD VIII 17ma. Avance de materia Tema 18-19 UNIDAD VIII 18va. Avance de materia Tema 20 I V E R S UNIDAD VIII Tema 20 I D A D D E 11 Preguntas orales, GIPS Revisión y resumen bibliográficos Preguntas orales, GIPS Segunda Evaluación Preguntas orales, GIPS Segunda Evaluación Preguntas orales, GIPS Preguntas orales, GIPS Preguntas orales, GIPS Preguntas orales, GIPS Examen Final Presentación del proyecto Examen Final Examen de segunda instancia U N Preguntas orales, GIPS Preguntas orales, GIPS 16ta. Avance de materia Actividades de Brigadas 20va Preguntas orales, GIPS Preguntas orales, GIPS 11ra. Avance de materia Actividades de Brigadas 19na. Avance de materia Preguntas orales, GIPS Revisión y resumen bibliográficos Preguntas orales, GIPS A Q U I N O Presentación de Notas B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VII. WORK PAPER’S PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 1 UNIDAD I: Tema 2 TÍTULO: Priones FECHA DE ENTREGA: 3ra. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 4ta semana de clases ENCEFALOPATÍA ESPONGIFORME BOVINA Y CREUTZFEDT JACOB (V) ENFERMEDADES CAUSADAS POR PRIONES. POR: JAIRO E GÓMEZ MERCHÁN. Coordinador Sanidad Animal. U.D.C.A. Artículo I. La Enfermedad de las vacas locas, mejor denominada Encelopatía Espongiforme Bovina (EEB), es una enfermedad emergente neurodegenerativa y letal, que ha desatado desde preocupación y alarma, hasta pánico y emergencia sanitaria y económica, tanto en los países en los que se ha detectado su presencia, como en los países vecinos y hasta en los más remotos destinos de exportación de animales, productos y subproductos. No ha sido ajena la oportuna y cuidadosa reacción de las autoridades de Sanidad Animal y Salud Pública en los países Latinoamericanos desde el momento en que se dispara la alarma por la aparición de la enfermedad en la Gran Bretaña en 1986. Las primeras medidas sanitarias en Sudamérica se remontan a 1988 cuando se restringe o prohíbe el ingreso de productos y animales en pié procedentes de la región afectada hasta ese momento. Con expansión de la enfermedad por el continente Europeo y Asiático, fueron produciéndose nuevas y severas normas de prevención en todos los países bajo la orientación de la organización Mundial de la Salud Animal - oficina Internacional de Epizootias (OIE) y con la cooperación de los países. La enfermedad ha alcanzado los hatos de Europa y ha salido de allí afectando al Japón y recientemente a Canadá y los Estados Unidos, razón por el cual los ganaderos Sudamericanos han manifestado su preocupación y han exigido un control estricto, labor que por fortuna las autoridades ya han iniciado desde tiempo atrás, aunque hay que reconocer que algunos países, particularmente los del cono sur, iniciaron ese trabajo integral algunos años antes. En Colombia se ha pasado de la curiosidad a la preocupación moderada por parte de los ganaderos, y de la prohibición de las importaciones desde la Gran Bretaña (1988) hasta el U N I V E R S I D A D D E 12 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA establecimiento de normas que prohíben la utilización de productos derivados de los bovinos en la fabricación de alimentos y suplementos para la alimentación bovina, y a la vigilancia epidemiológica mediante el examen histopatológico de muestras provenientes de animales sacrificados para el consumo humano, labor enmarcada en un programa nacional por parte de las autoridades. Así mismo, se ha hecho una rápida campaña de difusión de los aspectos más importantes de la enfermedad para capacitar tanto a los veterinarios como a los trabajadores y ganaderos. En esta labor han participado el ICA, algunas Universidades y las Secretarias de Agricultura Ganadería y Desarrollo Rural de la mayoría de los Departamentos. Las Asociaciones de Ganaderos no han dejado de insistir en el tema. En el cebú se han publicado desde 1996 diversos artículos que permiten dar claridad en el tema. No obstante, la defensa nacional indica que no se puede “bajar la guardia”; Es por ello que en esta oportunidad, Aso cebú y la U.D.C.A quieren recordar cuales son las características de la enfermedad, del agente que la causa y cuáles los riesgos de infección para los animales y los humanos. Así mismo, es necesario recordar que hay otras enfermedades y condiciones patológicas que pueden generar confusión por la similitud de los síntomas que producen y que deben ser diferenciadas por el servicio veterinario y reportados por éste al ICA para el correspondiente seguimiento y diagnostico definitivo. Recordando que aún no se conoce todo lo relacionado con el tema, y que por ello aún hay hipótesis no confirmadas se pretende presentar algunas preguntas y respuestas que con frecuencia hacen ganaderos, estudiantes, veterinarios y consumidores sobre el complejo nuevo mundo de los agentes infecciosos no convencionales y sus efectos en la salud humana y animal. CUESTIONARIO DEL WORK PAPER 1.- ¿Qué son los Priones? 2.- ¿Qué son los Viriones? 3.- ¿Qué son los Viroides? 4.- ¿Defina que es la Encefalopatía Espongiforme Bovina (EEB)? 5.- ¿Busque un artículo referente a la Encelopatía Espongiforme Bovina (EEB)? 6.- ¿Cómo se diagnostica la EEB? U N I V E R S I D A D D E 13 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 2 UNIDAD III: Tema 7 y 8 TÍTULO: Arbovirus y Arenaviridae FECHA DE ENTREGA: 4ta. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 6ta. semana de clases PERFIL ETIOLÓGICO DEL SÍNDROME FEBRIL EN ÁREAS DE ALTO RIESGO DE TRANSMISIÓN DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS DE IMPACTO EN SALUD PÚBLICA Estudio interinstitucional desarrollado por las instituciones del Ministerio de Salud del Perú 16 ; en colaboración con el Instituto de Investigación de Enfermedades Tropicales de la Marina de los Estados Unidos 7; la Universidad Nacional Mayor de San Marcos 8 y la Universidad Peruana Cayetano Heredia 9 . En los últimos años se ha observado en las América virosis antes desconocidas y enfermedades infecciosas que ya habían sido controladas en décadas anteriores y que han puesto de manifiesto la fragilidad o debilidad de los controles sanitarios o del sistema de vigilancia en salud pública 1. En la mayoría de los casos, la evolución natural de estas enfermedades infecciosas se caracteriza por un cuadro febril asociado con sintomatología inespecífica. En el diagnóstico diferencial de estas enfermedades febriles se encuentran algunas enfermedades de prioridad sanitaria para el país como la malaria y el dengue, pero también existen otras infecciones como leptospirosis, tifus y otras arbovirosis, cuyo conocimiento todavía es limitado y no se conoce su magnitud en la población 2-4. El dengue es en la actualidad la arbovirosis humana de mayor importancia en la salud pública en el mundo, constituyendo la principal causa de hospitalización y muerte entre los niños del sudeste de Asia 5 En nuestro país, el dengue entró a inicios de la década de 1990, por la cuenca amazónica, la cual se ha convertido en una zona altamente endémica (Loreto, San Martín, Ucayali y Madre de Dios)3. En el año 2000 se notificaron alrededor de 5550 casos de dengue clásico procedentes de departamentos fronterizos con el Ecuador y el año 2001 se registró el mayor número de casos de dengue clásico en el Perú (23 304 casos), con importantes brotes en los departamentos de la costa norte (Piura, La Libertad, Tumbes, Cajamarca y Lambayeque). En este año se registraron también los primeros casos de dengue hemorrágico, notificándose 250 casos y tres defunciones (Piura y Tumbes con 99,2% de casos)6. Además, se observó la circulación en el país de los cuatro serotipos del dengue: DEN-1, DEN-2 (variedad americana y asiática), DEN-3 y DEN-4 7. La fiebre amarilla es también una arbovirosis, la cuales conocida en el país desde la época U N I V E R S I D A D D E 14 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA colonial, habiéndose iniciado en las zonas urbanas para luego extenderse a las zonas de la selva. La epidemia más grande notificada, en los últimos 20 años, ocurrió en el año 1995 8. En esta enfermedad entre 30 y 40% de los casos evolucionan como un cuadro icterohemorrágico, mientras que el resto de los casos son difíciles de diferenciar de otras enfermedades febriles. El pronóstico del paciente mejora considerablemente cuando se inicia el tratamiento precoz basado en el diagnóstico de la fase aguda, cuando sólo hay fiebre y síntomas generales 9. La leptospirosis es una enfermedad ampliamente distribuida en el país, desde 1997 se observa un incremento de casos procedentes la mayoría de los departamentos de Lambayeque, Cuzco, Lima, Junín y Piura. Los datos provienen de estudios de seroprevalencia en áreas escogidas por los investigadores o también como resultados de laboratorio que se efectúan al llegar las muestras con síndromes febriles sin diagnóstico etiológico 10,11. Las enfermedades producidas por rickettsias y su distribución en el país actualmente son tema de investigación. Es así que, se han encontrado individuos febriles con anticuerpos para Rickettsias procedentes de zonas no reconocidas anteriormente como es el caso de Piura y Ancash, con lo que se esta dejando de lado el concepto de ser una enfermedad restringida sólo a Cuzco 11. Además queda abierta la posibilidad de la existencia de más de una especie de Rickettsia circulando en el país. Así, en 1999, se identificó la circulación del tifus en los distritos de Lagunas, Unión y Morropón del departamento de Piura, con características epidemiológicas que podrían corresponder al tipo marino 12. En la última década han sido identificados en el Perú otros arbovirus, además del virus del dengue y de la fiebre amarilla, como agentes etiológicos de enfermedades febriles con sintomatología supuestamente característica sobre todo en la Amazonía; estos son el virus de la encefalitis equina venezolana (EEV), el virus Oropuche (ORO) y el virus Mayaro 13-15. Los primeros casos humanos de EEV en el Perú fueron notificados en 1973 en la costa norte del Pacífico (Lambayeque, La Libertad y Piura) 15. Posteriormente, Watts et al. En 1997 16 informaron un brote en pacientes febriles ocurrido en junio de 1994 en la región amazónica de Iquitos, cerca del río Napo, en la frontera con Ecuador. En esa ocasión se estudiaron a 34 soldados a partir de un brote de pacientes febriles. Los resultados del análisis serológico mostraron que todos los pacientes eran negativos a dengue, pero dos de los 26 afebriles presentaban anticuerpos IgM contra EEV y cuatro tenían anticuerpos IgG contra EEV; el subtipo identificado fue EEV ID 17. La fiebre de Mayaro es una enfermedad con un cuadro febril semejante al dengue, producido por un Togavirus el cual ya ha sido aislado en nuestro país 14. Entre abril de 1995 y abril de 1998 se han diagnosticado 27 casos de fiebre de Mayaro, encontrándose distribuidos en las ciudades de Iquitos, Yurimaguas, Tocache, Pucallpa, Huanuco, Quilla bamba y Tumbes. El virus Oropuche (ORO) fue aislado en el Perú por primera vez en 1992 de pacientes febriles de Iquitos. En 1994 este virus causó una epidemia en el sureste de la región amazónica y la infección fue documentada en tropas militares al norte de la región amazónica 16. En Santa Clara, Loreto se encontró en un estudio seroepidemiológico a 1227 pacientes que 33,7% tenía anticuerpos contra el virus ORO 18. Además, el vector urbano del virus ORO en Brasil, el Culicoides paraensis, fue encontrado como el mosquito más común en Iquitos. En 1998, el Instituto Nacional de Salud realizó un estudio retrospectivo con las muestras de suero de pacientes sospechosos de dengue o fiebre amarilla utilizando la técnica de ELISA U N I V E R S I D A D D E 15 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA y el aislamiento viral, así se halló el virus EEV en muestras procedentes de Loreto, Tumbes y Pucallpa; virus Mayaro en Cuzco y virus ORO en Loreto 19. El problema de las enfermedades emergentes y reemergentes es complejo; sus causas están relacionadas tanto con actividades humanas que modifican el medio ambiente debido a la ampliación de la frontera agrícola, en especial por el crecimiento demográfico, como a los fenómenos climáticos y la variación en la distribución de los vectores 5 . Así mismo, las zonas receptoras de emigrantes son especialmente sensibles a la introducción de nuevos agentes. En los últimos años en nuestro país, se ha observado un gran número de pacientes febriles que acuden a los establecimientos de salud que luego de descartar las enfermedades infecciosas comunes tanto bacterianas, virales u otras, se desconoce la etiología de la fiebre. Además, existen nuevos agentes escasamente conocidos que se están diseminando (Oropuche, Mayaro, encefalitis equina venezolana), los cuales debemos incorporar en nuestra vigilancia epidemiológica, debido a que son enfermedades que amenazan en forma latente a la población. CUESTIONARIO DE WORK PAPER 1.- ¿Cuáles son las características morfológicas de los Arbovirus? 2.- ¿Explique detalladamente el ciclo del Aedes aegypti? 3.- ¿Explique detalladamente el ciclo de transmisión del virus del Dengue? 4.- ¿Debido a que característica solo el mosquito Hembra transmite el virus del Dengue? 5.- ¿Por qué esta contraindicado el uso de acido acetil salicílico para el tratamiento del Dengue? U N I V E R S I D A D D E 16 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 3 UNIDAD IV: Tema 11 TÍTULO: Rubéola congênita FECHA DE ENTREGA: 8va. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 10ma. semana de clases ESTUDIO DE SEROPREVALENCIA DE RUBÉOLA EN MUJERES EMBARAZADAS DE LA MATERNIDAD PERCY BOLAND DE SANTA CRUZ – BOLIVIA DE 2000- 2004 Yelin Roca1 J. Vargas1; M. Cruz1; N. Velásquez1; E. Galarza1; C. Ávila1; P. Halkyer2; C. Castillo2 1. Centro Nacional de Enfermedades Tropicales (CENETROP) 2. Organización Panamericana de la Salud (OPS) El virus de la Rubéola produce una enfermedad exantemática caracterizada por una serie de síntomas inespecíficos que incluyen la erupción transitoria eritematosa transitoria, linfadenopatia, artralgias, fiebre leve y malestar general. Se reporta que más del 50% de los casos son subclínicos. El periodo de incubación oscila entre 14 y 23 díasi. La infección por el virus de Rubéola provoca una enfermedad autolimitada que generalmente es leve y con pocas complicaciones en niños y adultos. Sin embargo se conoce el efecto teratogénico de este virusii, aunque generalmente es benigna, tiene un interés medico primordial cuando la padece la embarazada, ya que amenaza al feto con la posibilidad de malformaciones congénitas múltiples. En efecto el riesgo de infección fetal es mayor cuando más temprana es la infección materna. El riesgo de rubéola congénita (R.C.), cuando la enfermedad se adquiere en los primeros meses del embarazo, es del 40 al 60%, si bien en niños controlados hasta los 2 años se hallo hasta un 85% de efectos tardíos en el seguimiento. La infección por el virus de rubéola durante el embarazo provoca malformaciones clínicas diversas que pueden ser transitorias, permanentes y de aparición tardía. Debido a la discapacidad asociada a la infección congénita por rubéola, como resultado de la sordera, cardiopatía, cataratas y retardo mental, se generan elevados costos en los servicios de salud y la sociedad en generaliii. Por ello la disponibilidad de una vacuna contra la rubéola de bajo costo y alta efectividad (>95%)iv,v plantea importantes desafíos para la salud publica pues se vislumbra la posibilidad de eliminar la rubéola y el síndrome de rubéola congénita (S.R.C.) en los países del mundo. La infección adquirida de forma natural induce la producción de IgG e IgM; la IgM Desaparece a las pocas semanas, mientras que la IgG proporciona una inmunidad duradera. U N I V E R S I D A D D E 17 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA La reinfección, que suele ser asintomático, puede detectarse serológicamente mediante la demostración de un importante aumento en el título de anticuerpos, principalmente IgG, aunque puede detectarse IgM en algunos casos, pero de forma pasajera y a títulos bajos. La vacunación induce la producción de anticuerpos en menor cantidad que la infección natural. DIAGNÓSTICO No más del 30-40% de los casos de Rubéola son diagnosticados clínicamente. Este diagnóstico no es confiable porque las lesiones pueden ser similares a las de otras infecciones virales. El diagnóstico materno se debe realizar por métodos serológicos como inhibición de la hemoaglutinación, ELISA, RIE o aglutinación pasiva. La detección de IgG es útil para determinar infección reciente cuando se demuestra una seroconversión o aumento significativo de los títulos (cuatro diluciones) iniciales. Sin embargo, esta situación se puede observar también en reinfecciones con bajo riesgo de transmisión al feto. 1. La determinación de IgM anti Rubéola en un plazo de 30 días desde la aparición del exantema es de gran utililidad para confirmar el diagnóstico. EPIDEMIOLOGÍA La rubéola es una enfermedad extendida en todo el mundo. La epidemiología varía según los países y el clima, la densidad de población y las oportunidades para la reintroducción del virus. El único reservorio del virus es el hombre. La mayor incidencia de la enfermedad en nuestro entorno, ocurre a finales de invierno y en primavera y en niños de 3 a 10 años, aunque la introducción de la vacuna ha motivado, en determinadas circunstancias, el incremento de casos en personas adultas, y su generalización ha modificado la epidemiología de la enfermedad, que se ha reducido a brotes esporádicos aislados. A pesar de que la vacuna confiere una protección del 95%, no se ha conseguido eliminar todos los casos. En la actualidad el grado de susceptibilidad a la infección se estima en un 2 ó 3% en las personas adultas. El contagio se produce por gotitas de saliva. La enfermedad es contagiosa 2-3 días antes del exantema, es máxima durante el exantema y disminuye paulatinamente. Los lactantes con Rubéola congénita eliminan virus en las secreciones corporales durante muchos meses. Las personas que han recibido vacuna no transmiten la enfermedad pero se puede aislar el virus en su faringe. Según diferentes estudios realizados en México, Colombia y España, Chaco Boliviano la seroprevalencia en mujeres oscila entre el 5% y el 80% de acuerdo a la edad (0-14 años); a mayor edad menor el porcentaje de susceptibles. A partir de julio 2000 se implementó la vigilancia epidemiológica de la Rubéola en Bolivia, utilizando par ello la ficha epidemiológica integrada Sarampión-Rubéola, información que es procesada en el programa de computación MESS. En los años 2000 y 2001 se ha presentado un incremento importante de casos, 419 y 558 respectivamente, con predominio de Santa Cruz en 2000 y La Paz y Cochabamba en 2001. En 2002 se ha producido un descenso notable con 127 casos, con predominio de Tarija y Oruro, aunque todavía Santa Cruz presentó casos. En 2003 se han presentado 41 casos, de los cuales 46 % estaban en Chuquisaca. En 2004 se han presentado 12 casos, de los cuales 9 estaban en Santa Cruz. Las coberturas de vacunación para el grupo objeto son altas desde 2000, año de introducción de la vacuna SRP, pues superan el 95 % de cobertura, sin embargo el análisis del total de los municipios del país, muestra que existen municipios que no han logrado superar esta meta. U N I V E R S I D A D D E 18 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Tabla 1: Casos de rubéola, por departamentos años 1999- 2004 Bolivia Departamento La Paz Santa Cruz Cochabamba Potosí Oruro Chuquisaca Tarija Beni Pando Bolivia 1999 0 21 5 0 0 9 0 0 0 35 2000 28 199 35 14 13 10 18 56 61 434 2001 256 55 102 16 12 11 98 8 0 558 2002 19 19 7 4 25 10 45 0 0 129 2003 8 4 5 0 3 18 1 0 0 39 2004 1 9 1 0 0 0 1 0 0 12 CUESTIONARIO DEL WORK PAPER 1.- ¿Qué es la rubéola congénita? 2.- ¿Por qué es importante controlar la rubéola congénita? 3.- ¿Cómo se diagnostica la rubéola y rubéola congénita? 4.- ¿Qué se llama la vacuna que se administró en la campaña contra la rubéola en Bolivia? 5.- ¿Usted se ha colocado la vacuna contra la rubéola? (Fotocopie su carnet) 6.- ¿Se vacuna a las mujeres embarazadas? ¿Por qué? 7.- ¿Hasta 2011 cuántos casos positivos existen de rubéola en Bolivia? U N I V E R S I D A D D E 19 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 4 UNIDAD V: Tema 14 y 15 TÍTULO: Enfermedades de transmisión sexual FECHA DE ENTREGA: 12da. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 13ra. semana de clases TRATAMIENTO Y PREVENCIÓN DE LAS ENFERMEDADES DE TRANSMISIÓN SEXUAL Ernesto Calderón-Jaime, M.C., M.S.P. (1) Las enfermedades de transmisión sexual (ETS) representan a un grupo de padecimientos infecciosos que se transmiten predominantemente por contacto sexual. Algunos de éstos son considerados como de notificación obligatoria en la mayoría de los países, y continúan teniendo una frecuencia inaceptablemente alta, fundamentalmente entre gente joven en edad reproductiva y con vida sexual activa.1-9 Las ETS, y sus complicaciones, no están distribuidas uniformemente entre la población, pues sólo algunos grupos específicos son los que se encuentran en riesgo de adquirirlas o transmitirlas; a ellos se les debe reconocer con el fin de incluirlos en los programas de vigilancia y control. Hay también algunos subgrupos de individuos que sufren particularmente las complicaciones; por ejemplo, las mujeres que inician su actividad sexual a edad temprana y que tienen varias parejas en lapsos cortos.5 La mujer embarazada es parte de un grupo especial prioritario para el control de las ETS, ya que estas infecciones pueden llegar a alterar el curso normal del embarazo, el parto, el puerperio y la lactancia, situación que compromete la salud del binomio madre-hijo.10 Las ETS pueden constituirse en un evento intercurrente adverso en el curso del embarazo. Los patógenos transmitidos sexualmente juegan un papel importante en la etiología del embarazo ectópico, el aborto espontáneo, los mortinatos, la prematurez, de las infecciones congénitas, perinatales y neonatales en el producto in útero y en el recién nacido, así como de las infecciones puerperales maternas.1 Los adolescentes son considerados de alto riesgo para adquirir ETS por los motivos siguientes: desarrollan diversas infecciones a temprana edad; tienen relaciones sexuales sin ningún medio de protección; son biológicamente más susceptibles a la infección; tienen mayor posibilidad de contraer infecciones con curso clínico asintomático; son más renuentes a solicitar consulta médica, ya que enfrentan múltiples obstáculos para utilizar los servicios de atención médica y, como agregado, reciben tratamientos empíricos sin una base comprobatoria de la etiología; además, no son sujetos de vigilancia epidemiológica en pareja y, finalmente, son ellos los que sufren las complicaciones tempranas o tardías durante su vida sexual.3 U N I V E R S I D A D D E 20 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA El problema de las ETS no se conoce debidamente en Bolivia; las pocas clínicas especialmente instaladas con ese propósito atienden a un número muy limitado de hombres y trabajadoras sexuales, de tal manera que la información que se desprende de su actividad no es representativa de lo que ocurre en la población. Sin embargo, se ha estimado que la frecuencia de ETS en la población general fluctúa entre 0.1 y 0.5%; en cambio, para la población considerada como de alto riesgo, se calcula una frecuencia que va de 10 a 20%. La población más afectada se encuentra entre los 18 y 24 años de edad, y la relación hombre-mujer es de entre 7 a 10 por uno.2 El propósito de este trabajo es presentar los aspectos más sobresalientes y actualizados del tratamiento y la prevención de las enfermedades adquiridas por contacto sexual; asimismo, se describen las manifestaciones clínicas de las mismas, que son lo suficientemente evidentes como para motivar la consulta médica. Se tomará en cuenta que es el médico general quien tiene el primer contacto con esos pacientes, de tal forma, que se ofrecerán algunos recursos clínicos y de laboratorio que permitan precisar el diagnóstico, respalden el o los esquemas de tratamiento y prevención y, asimismo, faciliten el seguimiento y la vigilancia epidemiológica de la población potencialmente expuesta al riesgo de contacto y transmisión. CUESTIONARIO DEL WORK PAPER 1.- Visitar el programa RED VIDA e informarse que trabajo social realizan. 2.- Dibujar y explicar detalladamente el ciclo del VIH 3.- Cual es el tratamiento que se le proporciona al los pacientes con VIH 4.- Explique detalladamente el mecanismo de acción de los medicamentos antivirales para el VIH U N I V E R S I D A D D E 21 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 5 UNIDAD VII: Tema 17 TÍTULO: Prevalencia del virus de la hepatitis virales A FECHA DE ENTREGA: 13ra. y 14ta. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 15ta. semana de clases PREVALENCIA DE ANTICUERPOS CONTRA HEPATITIS A (Anti-HVA IgG) EN UNA POBLACIÓN DE 01 A 39 AÑOS EN LIMA H. Vildósola*, A. Colichón**, M.P. Rubio***, J. Weil ****. INTRODUCCIÓN La hepatitis A usualmente tiene una forma de presentación leve, sin embargo aproximadamente el 0.15 a 3.7% de los casos mueren de hepatitis fulminante y alrededor del 20 al 30% de todos los casos requieren hospitalización (1, 2,3) la duración de la enfermedad aguda está asociada con la edad (4) y la tasa de casos fatales es más alto en las personas de la tercera edad (3,5). La enfermedad ocurre en todo el mundo, aunque no sabemos con certeza su verdadera incidencia debido a que la mayoría de los casos son leves y no reportados, además de que la expresión clínica de la infección está altamente relacionada a la edad: en niños menores de 6 años sólo el 50% desarrolla algún grado de enfermedad y menos del 10% tienen una enfermedad típica con ictericia (6), en los niños mayores, 40 - 50% desarrolla hepatitis ictérica y entre los adultos 70-80% también hacen enfermedad ictérica (7,8) Está claramente demostrado que la prevalencia de la infección, está marcadamente influenciada por las condiciones sanitarias de la población, ocurriendo esta tempranamente en la vida, cuando las condiciones sanitarias son pobres y existe hacinamiento. En la medida que las condiciones socioeconómicas de un país mejoren, la exposición al virus de hepatitis A se retrasa, dando como resultado un aumento de las personas susceptibles a la enfermedad. Tomando como eje la variable socioeconómica, se han establecidos 5 patrones epidemiológicos: en áreas hiperendémicas la infección ocurre primariamente en niños pequeños (menores de 5 años); en áreas de endemicidad alta la infección afecta al 90% de niños a los 10 años de edad; en áreas de moderada endemicidad el 90% de prevalencia se alcanza en los adultos jóvenes, baja endemicidad se caracteriza por una prevalencia de 10% a los 15 años de edad y que llega a 70% en los adultos mayores; finalmente la áreas hipo endémicas como Suecia, donde sólo el 13% de su población adulta ha sido infectada (9,10) En el Perú desde 1984 se han realizados varios estudios sobre seroprevalencia de hepatitis A, principalmente en población adulta de diferente tipo con 97,8% y 99% de positividad en personal hospitalario de alto riesgo (11,12), 98% en población general adulta, personal U N I V E R S I D A D D E 22 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA hospitalario, personal militar y 82% en niños de 1 a 16 años, con 30% al año de edad y 98% a los 16 años (13) En 1989 se realizó el último estudio nacional de prevalencia de la infección por el virus de hepatitis A en población adulta, (14) obteniéndose un promedio a nivel país de 92% de seropositividad y 98.4% en Lima Metropolitana. Todos estos estudios fueron realizados en los estratos socioeconómicos C y D, excepto un grupo de 466 adultos jóvenes perteneciente al estrato B que alcanzó 76% de positividad, siendo esta cifra la más baja obtenida (13) TRABAJOS DE L WORK PAPER 1.- Buscar un artículo científico en revista médicas o Internet referente al pruebas laboratoriales del virus de la hepatitis C. 2.- ¿En Banco de Sangre Regional qué pruebas serológicas realizan para el tamizaje de Hepatitis virales? 3.- ¿Quiénes deben ser vacunas contra la Hepatitis A y B? U N I V E R S I D A D D E 23 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 6 UNIDAD VIII : Tema 17 TÍTULO: Micosis superficiales y profunda FECHA DE ENTREGA: 17ma y 18va. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 19na. semana de clases MICOSIS: LUCÍA VUELVE Y LOS YUQUIS ALISTAN SU PROYECTO Ayer, Lucia, una de las pacientes de la etnia yuqui, dejó el Hospital Clínico Francisco Viedma tras superar la primera etapa de tratamiento de la tuberculosis pleural que padece. Ella forma parte del grupo de pacientes críticos de la comunidad que llegó a la ciudad para reponerse de enfermedades pulmonares y de la desnutrición. Por ahora, Lucia está fuera de peligro, pero debe seguir un estricto tratamiento médico para derrotar a la tuberculosis, explicó el neumólogo del hospital, Jorge Aguirre. La indígena fue remitida al Programa Tuberculosis del centro de salud de Puerto Villarroel. Ella debe cumplir con las indicaciones médicas y no interrumpir su proceso de recuperación por ningún motivo. De otro modo, puede convertirse en una paciente resistente. La ruptura del tratamiento contra la tuberculosis es uno de los obstáculos contra los que tienen que luchar los servicios de salud, pues, en anteriores ocasiones, los yuquis han abandonado su tratamiento contra la tuberculosis al volver a su comunidad. Ello provocó que la salud de los indígenas se agrave y que el riesgo de contagio aumente. La situación de Lucía refleja lo importante que es para los indígenas aquejados por las enfermedades pulmonares contar y consumir los medicamentos que se les receta. El médico considera que, al margen de seguir con el tratamiento, es vital que los indígenas, como Lucía, mejoren su alimentación. Las enfermedades como la tuberculosis y la micosis (hongo en los pulmones) tienen un terreno favorable en la falta de defensas de los yuquis, pues incluso una vez que superan la tuberculosis están expuestos a que los hongos invadan sus pulmones ya que su organismo no tiene cómo defenderse de los hongos, explicó Aguirre. Aunque Lucía se marchó, aún quedan en el Complejo Hospitalario Viedma tres yuquis, quienes deben recibir atención médica antes de volver a Vía Recuaté, su comunidad. CUESTIONARIO DEL WORK PAPER 1.- Buscar un artículo científico en revista médica o Internet referente a micosis profunda. 2.- Buscar un artículo científico en revista médica o Internet referente a micosis oportunista. 3.- ¿Qué micosis oportunista afecta a las personas con inmunodeficia? 4.- ¿Qué incidencia existe de los Paracoccidiodes en Bolivia? U N I V E R S I D A D D E 24 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRACTICA - GIP # 1 UNIDAD I: Tema 1 TÍTULO: Bioseguridad FECHA DE ENTREGA: 1ª y 2da. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 3ra. semana de clases 1.- FUNDAMENTO TEÓRICO La bioseguridad es un tema generalmente dejado de lado en los Centros de Salud, (por supuesto hay excepciones), ya sea por desconocimiento, por cuestiones presupuestarias a la hora de tener que invertir en equipamiento de seguridad, por falta de un entrenamiento apropiado del personal técnico, y por sobre todo el “a mi no me va a pasar nada”. Las normas de bioseguridad son herramientas probadamente eficaces, para evitar la adquisición accidental de los patógenos contenidos en las muestras, que procesamos a diario dentro de los laboratorios, así como los riesgos a los que estamos expuestos como ser la exposición a agentes químicos, físicos y/o mecánicos. 1.1.-BIOSEGURIDAD La bioseguridad es un concepto amplio, que implica una serie de medidas preventivas orientadas a reducir o eliminar los riesgos a los que están expuestos el personal de laboratorio, los pacientes y el medio ambiente que pueden ser afectados por el resultado de la actividad del laboratorio. Es primordial emplear medidas de bioseguridad para proteger al personal del laboratorio ante la exposición de microorganismos, prevenir la diseminación de estos al medio ambiente y evitar la contaminación de las muestras produciendo resultados falsos. 1.2.- NORMAS DE BIOSEGURIDAD Artículo II. NORMAS BÁSICAS El personal debe presentarse al trabajo en condiciones de higiene satisfactorias. El personal debe utilizar vestimenta de uso exclusivo adecuada al área de trabajo, mantenida en buenas condiciones de limpieza y uso. El laboratorio debe estar pulcro, ordenado y limpio, y se debe minimizar el almacenamiento de materiales innecesarios para el trabajo. El personal debe lavarse las manos prolijamente, antes y después de desarrollar cualquier actividad que se sabe o sospecha que es contaminante y desinfectarla cuando corresponda; también antes de colocarse y después de quitarse los guantes y antes de salir de laboratorio. Se prohíbe contestar el teléfono así como abrir las puertas con guantes. U N I V E R S I D A D D E 25 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA El personal que usa cabello largo deben protegerlo con un gorro apropiado al área de trabajo, no se extiende a todas las actividades, sino a las que se requieran. (áreas estériles). No se utilizarán en el área de trabajo: collares largos, brazaletes, relojes y todo lo que pueda ser un riesgo potencial para el manejo de equipos, muestras, etc. Antes de iniciar la tarea diaria asegúrese que la piel de sus manos no presente cortes, raspones y otras lesiones, en caso que así sea; cubrir la herida de manera conveniente antes de colocarse los guantes. El mandil no se guardará junto a la ropa de calle. Utilizar guantes en todo trabajo que demande contacto con material infeccioso. El personal debe utilizar zapatos cerrados y no así zapatos abiertos en el área de trabajo. Las puertas del laboratorio deben estar cerradas y el acceso al mismo deberá estar restringido mientras se lleven a cabo trabajos con materiales biológicos. El personal no debe salir de su área de trabajo con la vestimenta de uso exclusivo del laboratorio. En lo posible se debe evitar la presencia de libros, revistas y documento en las áreas de trabajo de los laboratorios, estos se encontraran en el área destinada a la lectura de manuales u otra información relacionada con el trabajo que desempeña. Se prohíbe la entrada a personas ajenas al laboratorio así como también a niños. La puerta deberá portar emblemas que digan: "Prohibido pasar – Peligro biológico". El personal debe evitar llevarse las manos a la boca, nariz, ojos, y cabello durante el desarrollo de sus actividades Ej. Llevarse bolígrafos a la boca. Los artículos de uso personal deben guardarse en lugares destinados para ellos y en ningún caso en los laboratorios se debe realizar las siguientes actividades como: FUMAR, COMER, BEBER, PREPARAR ALIMENTOS, HIGIENE BUCAL, MAQUILLARSE, estas actividades deben realizarse exclusivamente en áreas apropiadas. Todos los procedimientos deberán ser realizados de manera tal que sea nula la creación de aerosoles, gotas, salpicaduras, etc. Bajo ninguna circunstancia se pipeteará sustancia alguna con la boca, para ello se usarán pipeteadores automáticos Superficies del área de trabajo deberán ser descontaminadas cuando se termine la tarea diaria. Usando para tal efecto una solución de hipoclorito de sodio en concentración adecuada. El recipiente para descontaminar especimenes deberá contar con tapa de seguridad para todo traslado fuera del lugar de trabajo. En ese caso el exterior del recipiente deberá ser mantenido libre de toda contaminación con sangre usando solución descontaminaste. El desecho de los fluidos orgánicos puede efectuarse por las cañerías habituales una vez que estos hayan sido convenientemente descontaminados. Informar al responsable de laboratorio de cualquier accidente o exposición a material infeccioso que ocurra dentro de los ambientes de laboratorios. II. PRÁCTICA OBJETIVOS: Conocer la importancia de implementar medidas de Bioseguridad en el laboratorio de Virología. Exigir implementos de protección a las personas que permanecen en el laboratorio de Virología. Mantener el área de trabajo en condiciones de asepsia. U N I V E R S I D A D D E 26 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Utilizar señalización en áreas de riesgo biológico en el Laboratorio Manejar todas las muestras como potencialmente patógenas para disminuir riesgos de contaminación MATERIAL. Pizarra. Marcadores acrílicos Video de Bioseguridad Multimedia III TRABAJO EN GRUPOS DE LABORATORIO Realizar un póster de serigrafía de las norma de Bioseguridad para Virología y Micología y colocar a los diferentes laboratorios de la Universidad RESULTADOS CONCLUSIÓN EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. Agregue por lo menos cinco medidas de bioseguridad aparte de las mencionadas en el informe 2. Coleccione y realice las diferentes señalizaciones utilizadas en los laboratorios tanto clínicos como industriales. 3. ¿Qué diferencia existe entre desinfectante y antiséptico, mencione tres ejemplos de cada uno? 4. Realice todas las medidas de información de seguridad al personal de trabajo 5. ¿Cómo se realizaría el desecho de materiales y reactivos en cuanto a los insumos que se utilizarán en la materia? 6. ¿Qué vacunas deben colocarse los trabajadores en salud? 7. Explique el Sistema Triple Básico para el envío de muestra a un laboratorio de Referencia BIBLIOGRAFÍA Carvallar Guadalupe – Oubiña José: Virología Medica Tercera Edición CENETROP. Manual de Bioseguridad U N I V E R S I D A D D E 27 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRACTICA - GIP # 2 UNIDAD I y III: Tema 4 y 7 TÍTULO: Toma de muestra con jeringa y vacutainer FECHA DE ENTREGA: 3ra, 4ta, 5ta, y 6ta. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 7ma. semana de clases FUNDAMENTO TEÓRICO INTRODUCCIÓN La sangre para poder ser estudiada debe extraerse del organismo y en ocasiones fraccionarse en sus componentes fundamentales: plasma o suero y células. La extracción sanguínea puede realizarse por diversos métodos, siendo el más empleado la punción venosa. Otro aspecto importante es que todo el proceso debe ser realizado bajo normas de bioseguridad y las muestras deben ser recibidas en frascos estériles e identificados cuidadosamente para su conservación y/o envío al laboratorio de referencia. MUESTRAS En el caso de sospecha de síndromes febriles la muestra que se utilizan para la pruebas de diagnóstico serológico o virológico es el SUERO sanguíneo. En caso de fallecimiento del paciente, además de muestra de sangre obtenida por punción cardiaca, se debe realizar Necropsia de vísceras (hígado, bazo, riñón o pulmón). Estas muestras SIEMPRE deben estar acompañadas de una ficha de investigación de caso (ficha epidemiológica) que contenga como mínimo los siguientes datos: Nombre(s) y apellidos Edad, sexo Dirección completa, teléfono Síntomas y fecha de comienzo de síntomas Fecha de toma de muestra Antecedentes de vacuna Impresión diagnóstica Tipo de muestra recolectada (aguda o convaleciente) Otros, como datos epidemiológicos del caso (viajes, contactos, etc.), resumen de la historia clínica, otros exámenes realizados, etc. En caso de fallecimiento: fecha de defunción Las muestras de sangre (para obtener el suero) deben ser tomadas SIN anticoagulante mediante punción venosa, con un volumen de 7-10 ml para pacientes mayores, y en niños 1 ml por edad. U N I V E R S I D A D D E 28 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TIPO DE MUESTRA Y MOMENTO DE TOMA: PUNCIÓN VENOSA La punción venosa llamada también venopunción o flebotomía constituye el tipo de extracción sanguínea mas comúnmente empleado para la mayoría de los exámenes hematológicos. El lugar de elección es generalmente el pliegue anterior de codo ya que a este nivel existe una piel fina y móvil, y las venas son de grueso calibre y relativamente superficiales. Otro lugar donde se puede obtener una muestra sanguínea es el dorso de la mano. II. PRÁCTICA OBJETIVOS: Reconocer la importancia de la toma de muestra con jeringa. Reconocer la importancia de la toma de muestra con Vacutainer Reconocer la importancia de cómo enviar las muestra a un laboratorio de referencia. Manejar todas las muestras como potencialmente patógenas para disminuir riesgos de contaminación TOMA DE MUESTRA CON JERINGA La punción debe realizarse siempre con jeringa estéril y descartable, procurando limpiar previamente el área elegida mediante un algodón empapado en alcohol etílico al 70%. La sangre se aspira mediante el embolo de la jeringa cuya capacidad varia según las necesidades. MATERIALES Jeringa descartables de 10 ml con tapa Tubos de ensayo estéril de 15 ml SIN anticoagulante Torniquete Marcador Guantes descartables Frasco de desecho de materiales punzo-cortantes Gradilla Algodón y alcohol al 70 % PROCEDIMIENTO DE TOMA MUESTRA CON JERINGA TOMA DE MUESTRA CON VACUTAINER MATERIALES Tubos Vacutainer (sistema de vacío) de 10 ml SIN anticoagulante ni otro aditivo. Adaptador plástico Aguja para Vacutainer Torniquete U N I V E R S I D A D D E 29 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Marcador Guantes descartables Frasco de desecho de materiales punzo-cortantes Gradilla Algodón y alcohol al 70 % Procedimiento TRANSPORTE DE MUESTRAS Con el objetivo de evitar riesgos innecesarios y asegurar un buen diagnóstico existen requerimientos de embalaje, envío y transporte de las muestras al Laboratorio de Referencia. A continuación se describe el Sistema Triple Básico para embalaje recomendado por la Organización Mundial de la Salud. Sistema Triple Básico para embalaje RESULTADOS CONCLUSIÓN EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Indicar cómo tomar una muestra con jeringa? 2. ¿Indicar cómo tomar una muestra con Vacutainer? 3. ¿Qué diferencia existe entre toma de muestra con jeringa y Vacutainer? 4. ¿Cómo se debe enviar las muestras a un laboratorio de referencia? 5. ¿Cómo se realizaría el desecho de materiales infeccioso y no infeccioso? 6. ¿La bioseguridad es importante tanto para la toma de muestra y envío, por qué? BIBLIOGRAFÍA Confederación Latinoamericana de Bioquímica Clínica. 1998. Mejoría continúa de la calidad. Editorial Panamericana, México. Organización Panamericana de la Salud, 1980. Manual de técnicas básicas para un laboratorio de salud. Publicación científica Nº 439. Serie PALTEX para técnicos medios y auxiliares. Washington, EE.UU. U N I V E R S I D A D D E 30 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRACTICA - GIP # 3 UNIDAD: I y III TÍTULO: Diluciones directas y seriadas FECHA DE ENTREGA: 7ma, 8va y 9va. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 10ma. semana de clases I. FUNDAMENTO TEÓRICO La investigación básica de un laboratorio requiere que los laboratoristas reciban una buena instrucción en lo que respeta a la preparación de soluciones y muestras, previo a las pruebas concretas. Obviamente, si se quiere que una prueba tenga desempeño óptimo y produzca resultados precisos, los reactivos y las muestras deben prepararse correctamente. Además, las muestras de suero deben diluirse casi siempre antes de las pruebas. Para preparar una dilución, mece un volumen específico del espécimen con un cierto volumen de un amortiguador o diluyente, En un caso simple, una parte de suero y una parte igual de diluyente producirán una dilución de 1:2. La expresión “1:2” representa la relación de la cantidad de partes d e suero con el numero total de partes. Igualmente, una dilución de 1:100 puede prepararse mezclando 1 parte de suero con 99 parte de diluyente, por ejemplo 1ml + 99ml (total de partes: 100). Las diluciones seriadas incluyen mezclar y transferir un volumen constante de suero sucesivos tubos que contienen diluyente. Cuando se trabaja con diluciones, es expresar todas las diluciones en términos de fracciones. Esto hace que resolver problema de diluciones seriadas se convierta en una cuestión de multiplicación fracciones. en útil un de Las diluciones seriadas en dos es una dilución en la que un volumen fijo de suero se mezcla y se traspasa en sucesivos tubos conteniendo idéntico volumen de diluyente. Esta dilución doble puede expresarse así: 1 2 = II PRÁCTICA OBJETIVOS MATERIAL parte transferida Dilución en dos totales de partes Realizar diluciones simples Realizar diluciones seriadas 1. Pipetas de 2, 5, 10 ml 2. Micro pipetas de 10, 50, 200,1000ul 3. Punteras de 200,1000ul U N I V E R S I D A D D E 31 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 4. 5. 6. 7. Matraces Tubos de ensayos de 5 y 10 ml Agua destilada Colorantes MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1. Explicación y orientación inicial por el docente 2. Revisión del estudiante de las pruebas 3. Realizar esquemáticamente las diluciones 4. Realizar en forma practica las diluciones U N I V E R S I D A D D E 32 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PLANILLA DE DILUCIONES EN PLACA NOMBRE FECHA GRUPO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 A 12 - Dil. 1: 5 - Dispensar a cada uno: 50 ul B C - Dil. 1: 10 - Dispensar a cada uno: 100 ul D E - Dil. 1: 100 - Dispensar a cada uno: 150 ul F G - Dil. 1: 20 - Dispensar a cada uno: 350 ul HC CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la importancia de las diluciones simples y seriadas? 2. Realizar las siguientes diluciones : Volumen de 1000 ml. Dilución 1:25. En un tubo agrego 10000ul de diluyente y 50ul de concentrado, a que dilución se encuentra la solución. 3. Hallar el volumen del concentrado y diluyente para cada uno de los factores de dilución. Trabajar con un volumen final de 20 ul 1/5, 1/10,1/100,1/500,1/5000,1/10000 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, 1: 128, 1:256, 1:512, 1:1028 BIBLIOGRAFÍA Carballal Guadalupe – Oubiña José. Virología Médica. Tercera Edición U N I V E R S I D A D D E 33 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA – GIP # 4 UNIDAD III : Tema 7 TÍTULO: Inoculación del virus del Dengue en ratones lactantes FECHA DE ENTREGA: 10. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 12da. semana de clases I. FUNDAMENTO TEÓRICO Cuando un paciente es afectado por una enfermedad viral, el diagnóstico microbiológico puede llevarse a cabo directamente por identificación del virus y para ello la recolección de muestras debe garantizar que esta sea representativa y tomada en el momento adecuado en que puedan estar presente los elementos que se pretenden buscar, El diagnóstico de las enfermedades virales parte del reconocimiento de los síndromes clínicos y los elementos epidemiológicos que acompañan a la virosis. Un diagnóstico presuntivo bien orientado ahorrará tiempo y recursos para la toma y procesamiento virológico de las muestras, que deberán ser apropiadamente indicadas y representativas del proceso patológico. El diagnóstico virológico rápido es un arma de mucho valor en situaciones de urgencia, ya sea mediante técnicas para detección de Ags o para detección de Acs. Muchos virus son susceptibles de ser cultivados en uno o mas de los sistemas biológicos que se emplean para aislamiento viral: cultivo celular, huevos embrionados y animales de experimentación. En los mismos, la multiplicación viral puede detectarse a partir de diversas técnicas fijación de complemento, inhibición de hemoaglutinación (IH), Inmunofluorescencia (IF), análisis inmunoenzimático y neutralización NT. Por otra parte, la detección de Acs. Específicos y sus títulos en sueros (monosueros o sueros pares), aporta información sobre el tipo de infección y muchas veces, sobre la etapa en que se encuentra. Entre las serológicas más importantes se incluyen: inhibición de la hemoaglutinación, neutralización, Inmunofluorescencia indirecta, ELISA, y Western blot. En las últimas décadas la biología molecular ha abierto nuevos y más específicos métodos diagnósticos para la virología: análisis con enzimas de restricción (ER), reacción en cadena de la polimerasa (PCR), hibridación y secuenciación de ácidos nucleicos virales. II PRÁCTICA OBJETIVO Obtener cerebro de ratones lactantes infectados FUNDAMENTO Por medio de la aspiración se obtiene cerebro de ratón lactante infectado con virus PRECAUCIONES Manipular todo el material infeccioso con toda norma de bioseguridad U N I V E R S I D A D D E 34 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Utilizar material estéril Utilizar ratones no más de 3 días de nacidos MUESTRA. Semilla obtenida de cerebro de ratón lactante o de cultivo celular MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS (A) MATERIAL /EQUIPO Campana Freezer homogenizador mecánico Jeringas de 5 ml descartable Agujas No 18 Agujas No 19 Viales Medio H-MEM Mantener (2 - 8ºC) Recipiente con Hipoclorito de sodio (B) ESPECIFICACIONES Con flujo laminar 70ºC y –20ºC Vidrio Plásticos OBS. Descartable Descartable Plásticos Con L-glutamina –1% de ATB Cat.-112-016-101 Descarta material infectado PROCEDIMIENTO INOCULACIÓN A LOS RATONES 1. Inocular por vía intracraneal los ratones lactantes de 1-2 días de nacidos con 0.02 ml de la semilla viral con algunos serotipos en cuestión Esta semilla se prepara 1/50 con medio base o 199 u otros. 2. Examinar los ratones inoculados a partir del 3er día en adelante post inoculación dependiendo del virus se busca los signos de la enfermedad. 3. Cuando los ratones estén enfermos deben congelarse a – 70º o –20ºC hasta su uso. EXTRACCIÓN DEL CEREBRO 1. Los ratones se desinfectan con alcohol a; 70% y se dejan secar. El tejido cerebral se saca con jeringa ALMACENAMIENTO 1. guarda a -70ºC y servirán como virus (Semilla) para el pase en ratones y mantenimiento del virus. 2. Para preparar el antígeno pueden utilizarse los cerebros previamente extraídos o guardados a -70ºC. EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Qué es un aislamiento viral? 2. ¿Qué detectamos con el aislamiento viral? 3. ¿Qué pruebas se realizan para dar un buen diagnóstico para dengue? 4. ¿Cuántas clases de cultivos celulares conoces? U N I V E R S I D A D D E 35 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA – GIP # 5 UNIDAD VII: Tema 17 TÍTULO: Hepatitis viral (AgHBs) FECHA DE ENTREGA: 11ra y 12ra. semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 15ta. semana de clases I. FUNDAMENTO TEÓRICO La prevalencia de portadores del VHB puede determinarse midiendo la proteína viral de superficie en la sangre. En las áreas donde la infección por VHB es endémica, como el sudeste de Asia y África, hay una mayor incidencia en niños. La proteína de la nucleocápside corresponde al antígeno de la cápside (núcleo) de la hepatitis B (HBcAg) también está relacionado con la proteína de la cápside. La nucleocápside está rodeada de una envoltura que tiene el antígeno de superficie de la hepatitis B (HBeAg) El período de incubación varía de 45 a 180 días, con un promedio de 120. Entre los síntomas iniciales están la fatiga, malestar, nausea, vomito, anorexia y dolor en el cuadrante superior derecho. La infección aguda de hepatitis B generalmente no se distingue clínicamente de otras causas de hepatitis viral. Sin embargo algunos síntomas extrahepaticos presente e la hepatitis B no se observan en otras hepatitis virales agudas. II. PRÁCTICA Determinación del diagnóstico de Antígeno de Superficie para Hepatitis B OBJETIVOS Determinar la presencia de AgHBs en suero de paciente, Manipular muestras positivas y negativas para Hepatitis B Diagnosticar e Interpretar los resultados. MATERIAL 1. 2. 3. 4. 5. Kit d Elisa para Aghbs Pipetas Micro pipetas Frasco de Vidrios Punteras U N I V E R S I D A D D E 36 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1. Explicación y orientación inicial por el docente 2. Realizar la prueba con todos los cuidados de Bioseguridad 3. Saber interpretar los resultados CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1.- ¿Cuáles son los marcadores de la Hepatitis B? 2.- ¿Cuál es el primer marcador para una infección aguda? 3.- ¿Graficar los marcadores para la Hepatitis B para una infección aguda? 4.- ¿Graficar los marcadores de la Hepatitis B para una infección crónica? U N I V E R S I D A D D E 37 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 6 UNIDAD VIII : Tema 18 TÍTULO: Medio Sabouraud Ordinario FECHA DE ENTREGA: 14ta y 15ta semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 17ta semana de clases I FUNDAMENTO TEÓRICO El medio sólido de Sabouraud ordinario es utilizado en la siembra de todas las muestras micológicas para la obtención de los cultivos primarios (primocultivos), rutinariamente se emplea un tubo de Sabouraud ordinario y otro con Sabouraud con antibióticos. II PRÁCTICAS PREPARACIÓN DEL MEDIO DE SABOURAUD ORDINARIO Material tubos de ensayo con tapones de algodón. Reactivos. Matraz de erlenmeyer o balón de 1 litro. Probeta. Balanza analítica. Calentador o estufa eléctrica con agitador magnético. Distribuidor o dispensador automático. Tambor metálico para esterilización. Autoclave. Fórmula Glucosa o dextrosa Neopeptona Agar Agua corriente Preparación 20 gr. 10 gr. 20 gr. 1000 ml. 1. Pesar separadamente los componentes sólidos en un abalanza analítica, luego vaciarlo en un matraz erlenmeyer o en un balón. 2. Medir el agua en la probeta y añadirla sobre los componentes sólidos. 3. Disolver y mezclar los componentes del medio en una estufa eléctrica, con la ayuda de un agitador magnético, hasta principios de ebullición. 4. Repartir en los tubos de ensayo provistos de tapones de algodón a razón de 8 ml. por tubo. 5. Colocar los tubos en un tambor metálico y esterilizar el medio en autoclave a 120 grados C durante 15 minutos. U N I V E R S I D A D D E 38 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 6. Enfriar los tubos inclinados en pico de flauta con base de 1,5 a 2 centímetros. 7. Conservar en refrigerador o heladera. CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1.- ¿Qué diferencia existen entre micosis superficial y profunda? 2.- ¿Qué otros tipos de medios de cultivo se puede utilizar para micología? 3.- Describe cada micosis superficial con su agente etiológicos BIBLIOGRAFÍA Koneman E., Roberts G, Micología, práctica de laboratorio, tercera edición 1987 Lacaz da silva C. Porto E., Costa Matins J.E.Micología Médica. Sarvier, editora São Paulo Brasil, séptima edición, 1984. U N I V E R S I D A D D E 39 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA – GIP #7 UNIDAD VII: Tema 19 TÍTULO Examen directo micológico FECHA DE ENTREGA: 15 ta 16ta y 17ta semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN: 19na. semana de clases I FUNDAMENTO TEÓRICO NORMAS PARA LA TOMA DE MUESTRAS MICOLÓGICAS Para alcanzar éxito en el diagnóstico laboratorial micológico es fundamental realizar adecuadamente la toma de la muestra, su transporte y procesamiento, realizar el examen microscópico directo, la siembra de la misma en los medios idóneos y la incubación a la temperatura adecuada, así como la identificación e interpretación correcta de los aislamientos. El diagnóstico de las micosis comienza con su sospecha clínica, por lo que una adecuada obtención de la muestra, a partir de la lesión, y su correcta manipulación, para mantener la viabilidad del agente etiológico y evitar posibles contaminaciones, son aspectos fundamentales que siempre deben tenerse en cuenta para la realización de un correcto diagnóstico micológico, a pesar de lo expuesto, los riesgos de no aislar el agente etiológico son muy altos, en el examen directo podemos tener resultados falso negativos y finalmente en el cultivo un aislamiento equivocado. Por tales motivos la recolección de estas muestras debe ser tarea de personal con conocimiento y experiencia necesarios para no cometer los errores antes mencionados. MUESTRAS DE LESIONES SUPERFICIALES 1) escamas epidérmicas 2) pelos y cabellos 3) Uñas 4) Muestras subcutáneas MUESTRAS DE ÓRGANOS PROFUNDOS 1) Esputo 2) Orina 3) Líquido cefalorraquídeo (LCR.) 4) Exudados, trasudados y sangre 5) Heces fecales 6) Biopsias de tejidos U N I V E R S I D A D D E 40 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA II PRÁCTICAS EXAMEN DIRECTO MICOLÓGICO OBJETIVO Se llama también examen en fresco; el micelio o filamento, las esporas y otras estructuras que presentan los hongos durante su vida parasitaria, son fácilmente evidenciables con el microscopio común mediante el examen directo de las muestras clínicas usando líquidos aclarantes. Todas las micosis superficiales y gran parte de las micosis cutáneo profundas y sistémicas son diagnosticadas mediante el examen directo, cuyo resultado requiere algunas horas, máximo 24 horas, esto permite al médico que solicitó el estudio comenzar el tratamiento específico prácticamente al otro día de la toma de la muestra. 2) Líquidos aclarantes Son los siguientes: 1. Hidróxido de potasio (KOH) solución acuosa variando la concentración del 20 al 40 %, tiene la propiedad de aclarar y ablandar las muestras sólidas. 2. KOH al 20 % más glicerina al 20 %, mezclada en partes iguales, esta combinación evita que la preparación se seque rápidamente y aparezcan cristales, fenómeno que ocurre cuando se usa solución de KOH pura. 3. KOH al 20 %, a 20 ml se añade algunas gotas de tinta azul Parker, esta combinación permite colorear las estructuras fúngicas y una mejor visualización. 4. Clorolactofenol (Ácido fenico 1 gr. Ácido láctico 1 gr. Hidrato de cloral 2 gr.), tiene la propiedad de aclarar pero no ablandar, se usa para escamas finas y pelos en general. 3) Técnica Se colocan una o dos gotas de líquido aclarante elegido sobre el porta objeto, luego la muestra sólida a estudiar (escamas, costras, fragmentos de uñas, pelos, etc.) y finalmente el cubre objeto, antes de la observación microscópica se puede calentar la preparación sin llegar a la ebullición para acelerar el aclaramiento y ablandamiento de las muestras, o bien se espera 15 a 20 minutos que es el tiempo que se requiere para ablandar y aclarar sin calentar la preparación, antes de observar se realiza una leve presión del cubre objetos con el fin de extender la muestra. En general se utiliza los objetivos 10, 25 y 40 aumentos. En las muestras líquidas y semilíquidas (esputo, secreción, exudado, pus, etc.), el examen directo se realiza directamente colocando sobre el porta objeto una pequeña cantidad de la muestra y encima el cubre objeto, en el caso de la orina y el LCR se deben centrifugar previamente y observar el sedimento. Esporádicamente durante la realización del examen directo se requiere de coloraciones especiales, las más usadas son: la tinción de Gram. Para levaduras y actinomiceto, la coloración de Ziehl Nielsen para actinomiceto, la coloración de Kinjoun para detección de especies del género Nocardia, la coloración de Giemsa para Histoplasmas capsulatum y la utilización de la tinta china para visualizar Cryptococcus neoformans. OBJETIVOS Reconocer las estructura de los hongos, Tomar muestras para un examen directo micológico MATERIAL 1. Hojas de bisturí 2. Pinzas pequeñas 3. Pinzas saca cutículas U N I V E R S I D A D D E 41 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 4. Asas de platino 5. Hisopos de algodón estériles 6. Láminas de vidrio-portaobjetos 7. Lupa 8. Guantes 9. Microscopio óptico 10. KOH al 30% MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS OBSERVACIÓN Micelio Levaduras CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1.- ¿Qué es un hongo? 2.- ¿Cómo se clasifica las micosis? 3.- ¿Cómo se realiza la toma de muestra para cada una de las micosis superficiales y profundas? 4.- ¿Cuáles son las estructuras de los hongos que observamos en un examen directo? BIBLIOGRAFÍA Koneman E., Roberts G, Micología, práctica de laboratorio. tercera edición 1987 Lacaz da silva C. Porto E., Costa Matins J.E. Micología Médica,Sarvier, editora São Paulo Brasil, séptima edición, 1984 U N I V E R S I D A D D E 42 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA U N I V E R S I D A D D E 43 A Q U I N O B O L I V I A