BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
CENTRO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS MICROBIÓLOGICAS
Obtención de la mutante en el gen oppa de yersinia pseudotuberculosis y análisis del fenotipo
mutante.
Tesis profesional para obtener el titulo de Maestro en Ciencias Microbiólogicas
Presenta: Rodea Montealegre, Gerardo Erbey.
Asesor: Martínez Morales, Luis Javier.
Puebla Pue Febrero 2011
Índice
I.- Índice…………………………………………………………………………...2
II.- Introducción……………………………………………………………………4
III.- Antecedentes………………………………………………………………….8
IV.- Justificación…………………………………………………………………...9
V.- Hipótesis………………………………………………………………………10
VI.- Objetivos………………………………………………………………………19
VII.- Esquema de trabajo………………………………………………………….11
VIII.- Material y Métodos………………………………………………………......12
IX.- Resultados…………………………………………………………………….21
X.- Discusión……………………………………………………………………...39
XI.- Conclusión…………………………………………………………………….44
XII.- Perspectivas…………………………………………………………………..45
XIII.- Bibliografía…………………………………………………………………….46
XIV.- Anexos………………………………………………………………………...48
Introducción
El género Yersinia es miembro de la familia Enterobacteriaceae, actualmente se
conocen once especies. Yersinia es un bacteria gram-negativa, anaerobia facultativa,
inmóvil, fermentadora, no esporulada, cocobacilo, con diámetro de 0.5 a 0.8 μm y de un
largo de 1 a 3 μm. Cuando se le tiñe con Giemsa, Wright o Wayson se observa tinción
bipolar. El microorganismo crece a temperaturas de 4 a 40 ºC, aunque la temperatura
óptima es de 28 a 30 ºC. El rango de pH óptimo de crecimiento es de 7.2 a 7.6, sin
embargo tolera pH extremos de 5 a 9.6. El crecimiento de Y. pestis requiere de 24 a 48
horas para la formación de colonias en la mayoría de medios enriquecidos (Brubaker,
1972 y 1991).
Existen 3 especies que son patógenas para el humano; Yersinia pestis, Yersinia
pseudotuberculosis y Yersinia enterocolítica. Las especies patógenas del género Yersinia
causan enfermedades en humanos con síntomas que pueden ir desde enteritis a sepsis y
muerte, principalmente por invasión de los tejidos. En el caso de infecciones por Y.
enterocolítica las manifestaciones clínicas son gastroenteritis con dolor abdominal
eventualmente desencadenan diarrea y apendicitis (Kenneth et al, 2004).
Y. pseudotuberculosis
Es una bacteria enteropatógena que produce enfermedades del tracto digestivo
que varían entre gastroenteritis simple con diarrea y vomito, caracterizadas por lesiones
que varían desde necrosis local e inflamación granulomatosa en ganglios linfáticos, bazo
e hígado. La infección ocurre a través del tubo digestivo en el ser humano, posiblemente
por consumo de alimentos o agua contaminada. Las bacterias invaden las células M de la
placa de Peyer, la colonización de los nódulos linfáticos resulta en la destrucción de las
placas de Peyer. La bacteria migra a los nódulos linfáticos mesentéricos, pudiendo ser
encontrada en lugares más distantes como el hígado y el bazo (Kenneth et al, 2004).
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Características genéticas del género Yersinia
El tamaño del genoma es de 4380±135 kb con un estimado de 46 a 47% en su
contenido de G/C, para Y. pestis (Brubaker, 1991). La mayoría de las cepas de Yersinia
contienen 3 plásmidos de un peso de; 9.5, 70-75 y 100-110 kb. Estos plásmidos son
pPCP1 (activador de pesticina, coagulasa y plasminógeno), pCD1 (dependiente de calcio)
y pMT1 (toxina murina) (Brubaker, 1991). El estimulón de respuesta a baja concentración
de calcio (LCRS) esta codificado en el plásmido pCD1 llamado pCad o pYV, en otras
cepas de Yersinia, como Y. pseudotuberculosis y Y. enterocolítica, incluyen genes
reguladores de la expresión de proteínas de virulencia (virulón Yop) y un sistema de
secreción tipo III, el tamaño del plásmido varia de 68 a 75 kb, pero la región LCRS esta
altamente conservada (figura 1). El plásmido LCRS es necesario para la virulencia de las
tres cepas patógenas de Yersinia en humano (Filipov, 1990).
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