BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA CENTRO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS MICROBIÓLOGICAS

BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA
CENTRO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS MICROBIÓLOGICAS
Obtención de la mutante en el gen oppa de yersinia pseudotuberculosis y análisis del fenotipo
mutante.
Tesis profesional para obtener el titulo de Maestro en Ciencias Microbiólogicas
Presenta: Rodea Montealegre, Gerardo Erbey.
Asesor: Martínez Morales, Luis Javier.
Puebla Pue Febrero 2011
Índice
I.- Índice…………………………………………………………………………...2
II.- Introducción……………………………………………………………………4
III.- Antecedentes………………………………………………………………….8
IV.- Justificación…………………………………………………………………...9
V.- Hipótesis………………………………………………………………………10
VI.- Objetivos………………………………………………………………………19
VII.- Esquema de trabajo………………………………………………………….11
VIII.- Material y Métodos………………………………………………………......12
IX.- Resultados…………………………………………………………………….21
X.- Discusión……………………………………………………………………...39
XI.- Conclusión…………………………………………………………………….44
XII.- Perspectivas…………………………………………………………………..45
XIII.- Bibliografía…………………………………………………………………….46
XIV.- Anexos………………………………………………………………………...48
Introducción
El género Yersinia es miembro de la familia Enterobacteriaceae, actualmente se
conocen once especies. Yersinia es un bacteria gram-negativa, anaerobia facultativa,
inmóvil, fermentadora, no esporulada, cocobacilo, con diámetro de 0.5 a 0.8 μm y de un
largo de 1 a 3 μm. Cuando se le tiñe con Giemsa, Wright o Wayson se observa tinción
bipolar. El microorganismo crece a temperaturas de 4 a 40 ºC, aunque la temperatura
óptima es de 28 a 30 ºC. El rango de pH óptimo de crecimiento es de 7.2 a 7.6, sin
embargo tolera pH extremos de 5 a 9.6. El crecimiento de Y. pestis requiere de 24 a 48
horas para la formación de colonias en la mayoría de medios enriquecidos (Brubaker,
1972 y 1991).
Existen 3 especies que son patógenas para el humano; Yersinia pestis, Yersinia
pseudotuberculosis y Yersinia enterocolítica. Las especies patógenas del género Yersinia
causan enfermedades en humanos con síntomas que pueden ir desde enteritis a sepsis y
muerte, principalmente por invasión de los tejidos. En el caso de infecciones por Y.
enterocolítica las manifestaciones clínicas son gastroenteritis con dolor abdominal
eventualmente desencadenan diarrea y apendicitis (Kenneth et al, 2004).
Y. pseudotuberculosis
Es una bacteria enteropatógena que produce enfermedades del tracto digestivo
que varían entre gastroenteritis simple con diarrea y vomito, caracterizadas por lesiones
que varían desde necrosis local e inflamación granulomatosa en ganglios linfáticos, bazo
e hígado. La infección ocurre a través del tubo digestivo en el ser humano, posiblemente
por consumo de alimentos o agua contaminada. Las bacterias invaden las células M de la
placa de Peyer, la colonización de los nódulos linfáticos resulta en la destrucción de las
placas de Peyer. La bacteria migra a los nódulos linfáticos mesentéricos, pudiendo ser
encontrada en lugares más distantes como el hígado y el bazo (Kenneth et al, 2004).
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Características genéticas del género Yersinia
El tamaño del genoma es de 4380±135 kb con un estimado de 46 a 47% en su
contenido de G/C, para Y. pestis (Brubaker, 1991). La mayoría de las cepas de Yersinia
contienen 3 plásmidos de un peso de; 9.5, 70-75 y 100-110 kb. Estos plásmidos son
pPCP1 (activador de pesticina, coagulasa y plasminógeno), pCD1 (dependiente de calcio)
y pMT1 (toxina murina) (Brubaker, 1991). El estimulón de respuesta a baja concentración
de calcio (LCRS) esta codificado en el plásmido pCD1 llamado pCad o pYV, en otras
cepas de Yersinia, como Y. pseudotuberculosis y Y. enterocolítica, incluyen genes
reguladores de la expresión de proteínas de virulencia (virulón Yop) y un sistema de
secreción tipo III, el tamaño del plásmido varia de 68 a 75 kb, pero la región LCRS esta
altamente conservada (figura 1). El plásmido LCRS es necesario para la virulencia de las
tres cepas patógenas de Yersinia en humano (Filipov, 1990).