Universidad de Cádiz Laboratorio de Genética FASES DE LA MITOSIS La finalidad de esta práctica es el reconocimiento de las distintas etapas del ciclo celular: Interfase, Profase, Metafase, Anafase y Telofase. Una vez vistas las distintas fases se puede llevar a cabo la estimación del Índice mitótico y el Índice de Fase. Material utilizado: Meristemo de raíces de cebolla. Protocolo de laboratorio 1. Colocar 2 raíces en un Eppendorf que contiene aproximadamente 1 ml de una disolución de HCl 1N durante 10 minutos a 60 ºC. Esto hidroliza las paredes y permite una mejor penetración del colorante y un aplastamiento más fácil a la hora de hacer la preparación. 2. Lavar las raíces en agua, para ello eliminar el HCl y añadir 1 ml de agua. Repetir este lavado 2 veces. 3. Colocar una raíz sobre un portaobjetos y cortar el meristemo, eliminando el resto de la raíz. Sobre el meristemo se añaden 3-4 gotas de colorante (Fucsina básica) y se deja teñir durante 15 minutos. Pasado ese tiempo, se retira el exceso de colorante y se añaden varias gotas de ácido acético y se coloca un cubreobjetos para realizar el aplastamiento (squash). 4. Observar al microscopio a 10X y 40X e identificar las distintas fases. ESTIMACIÓN DE LOS ÍNDICES MITÓTICO Y DE FASE Se cuentan unas 200 células meristemáticas, obteniéndose el índice mitótico como: Índice mitótico = Índice de fase = nº de células en mitosis total de células meristemáticas nº de células en una fase mitótica concreta total de células en mitosis Asignatura Genética y Mejora de la vid