Miguel Pérez – Garzón.

Bioquímica Experimental
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Miguel Pérez – Garzón.
ANTECEDENTES.
Para la realización de las prácticas de bioquímica se necesita familiarizarse con diversas
herramientas de uso frecuente en cualquier laboratorio.
PROTOCOLO.
El estudiante observara antes de la práctica las fotografías con los equipos y material que se
presentara en la clase.
Durante la práctica cada estudiante usara e identificara cada uno de los materiales y equipos.
OBJETIVO.
Que el estudiante comprenda, identifique y use el material y equipo que usara en las
prácticas de laboratorio.
CARACTERISITICAS DE EQUIPO DE MEDICION
Cualquier herramienta que se use en el laboratorio o en cualquier otra actividad para
medir una magnitud física tiene posibles errores por el propio proceso de medir. Por ejemplo al
medir un kilo de fruta en una balanza, la medición de este kilo se acercara a la realidad del
peso de la fruta en una grado muy cercano pero muy difícilmente será exactamente un kilo.
PRECISION Y EXACTITUD
La precisión es la reproducibilidad de un método analítico. La exactitud define que tan
cerca está el valor determinado del valor real. Una buena analogía es la de una diana. La figura
X muestra la dispersión de resultados que podría obtener alguien con poca habilidad, en
comparación con alguien con buena precisión cuyos resultados están agrupados y cercanos.
Aunque los resultados estén cercanos puede que no estén situados en el centro de la diana.
Por tanto, la exactitud es escasa, como es el punto de mira estuviera desviado. El objetivo de
cualquier método bioquímico es que tenga buena precisión y exactitud.
LIMITE DE DETECCION.
El límite de detección de un procedimiento de medida informa del valor más pequeño de la
magnitud que puede medir dicho procedimiento.
MATERIALES.
En el laboratorio se usa gran cantidad de material fabricados de diferente material. A
continuación se explica brevemente el uso de los materiales de uso mas frecuente en el
laboratorio.
MATERIALES DE VIDRIO.
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A) Tubo de Ensayo
Se utiliza para mezclar sustancias, calentar y ejecutar reacciones.
B) Es un matraz de pared gruesa con una conexión lateral, mediante una manguera que
conecta a una trompa de vació y su función es filtrar sustancias pastosas y sólidos de
tamaño pequeño de partícula.
C) Matraz de fondo plano.
Se utiliza para calentar líquidos.
D) Matraz de fondo redondo.
Se utiliza para medir volúmenes exactos de soluciones.
E) Agitador
Se usa para agitar mezclas reactivos, hay dos tipos magnético y de varilla. El primero
parece una bala la cual se coloca en el interior de la solución, con un electromagneto
se hace girar a velocidades variables. El agitador de varilla, es una alambre metálico
que se hace girar manualmente.
F) Matraz aforado.
Sirve para preparar volúmenes exactos.
G) Pipeta graduada.
Se utiliza para medir pequeños volúmenes de líquidos.
H) Bureta
Son tubos de vidrio calibrados que suelen terminar en una llave y sirven para medir
volúmenes de líquidos con mayor preescisión y exactitud.
MATERIALES DE METAL.
A) Soporte universal
Pieza básica en el montaje de sistemas y aparatos como pinzas y anillos de metal.
B) Rejilla de metal con centro de asbesto
Sirve para calentar indirectamente ya que la llama del mechero se concentra en el anillo.
C) Trípode. Soporte de vaso de precipitado, matraces. etc.
D) Gradilla. Se utiliza para colocar tubos de ensayo
Fig. 1 Se muestra de derecha a izquierda probeta, matraz, vaso precipitado y gradilla con un
tubo de 25 ml.
PIPETAS.
Instrumento de laboratorio que se utiliza para medir o transvasar pequeñas cantidades de
líquido. Es un tubo de vidrio abierto por ambos extremos y más ancho en su parte central. Su
extremo inferior, terminado en punta, se introduce en el líquido; al succionar por su extremo
superior, el líquido asciende por la pipeta.
Los dos tipos de pipeta que se utilizan en los laboratorios con más frecuencia son la pipeta de
Mohr o graduada y la pipeta de vertido. En la primera se pueden medir distintos volúmenes de
líquido, ya que lleva una escala graduada. La pipeta de vertido posee un único enrase circular
en su parte superior, por lo que sólo puede medir un volumen. La capacidad de una pipeta
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oscila entre menos de 1 ml y 100 ml. En ocasiones se utilizan en sustitución de las probetas,
cuando se necesita medir volúmenes de líquidos con más precisión.
Fig2
Fig. 3
Fig. 4
Fig. 2 Las pipetas se comercializan en diferentes capacidades y graduaciones. Las capacidades se
identifican con números arábigos usualmente de 1ml hasta 25 ml. Las gradaciones indica cual es
la mínima cantidad que se puede medir, se indica como 1\10 , 2\25 la primera indica que es una
probeta de 10 ml graduada cada ml. En la segunda tiene una capacidad de 25 ml graduada cada 2
ml. Fig. 3 Al tomar la medida con una pipeta se debe tomar como real el punto mas bajo del
menisco que se forma. Fig. 4 Se puede tomar el volumen requerido haciendo vació con la boca y
ajustado la medida deseada. Esta técnica no se debe con sustancias toxicas como ácidos, álcalis
o oncogénicas.
MICROPIPETAS.
En el laboratorio muchas veces se usan volúmenes muy pequeños como 10 microlitros. Estas
cantidades no son medidles con pipetas por lo que recurrimos a las micropipetas, las cuales se
clasifican según su rango de medición. Las micropipetas también se pueden dividir en fijas y
variables. Según su rango de medición encontramos 0.5 a 5 microlitros, de 5 a 40 microlitros, 40 a
200 microlitros y de 200 a 1000 microlitros. Cada una de estas tiene un botón que gira sobre su
propio eje, cuando se gira este botón hacia la derecha o izquierda se varía el volumen que tomara
la micropipeta. La cantidad elegida se observa en una pequeña ventana colocada en uno de los
lados de micropipeta. En uno de los extremos de la micropipeta se debe colocar la punta de la
micropipeta, la cual esta hecha de plástico esterilizable. Para usar correctamente una micropipeta
se hace presión sobre el botón de ajuste, en este proceso se siente dos topes, el primero indica el
volumen elegido. El fin del segundo paso se usa para expulsar todo el volumen previamente
elegido.
Fig. 5 Al girar el botón de ajuste hacia la izquierda o hacia la derecha
se aumenta o diminuye la cantidad a medir. En la figura se muestra una
cantidad de 500 microlitros.
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