Cuantificación de los niveles teofilina sérica

1409-0090/95/09-03/103-105
Acta Pediátrica Coshu-ricensc
Copyright © 1995, Asociación Costarricense de Pediatría
¡Artículo Originall
Cuantificación de los niveles teofilina sérica vs. saliva mediante
inmunoensayo con fluorescencia y luz polarizada.
Juvenal Feoli-Fonseca (*), José Fernando Chavarría-Milanés (**)
Objetivo: investigar la correlación entre los
niveles de teoJilina en suero yen saliva.
Diseño:
estudio
prospectivo,
controlado,
dependiente.
Sitio: Consulta externa del Servicio de
Alergologla del Hospital Nacional tle Niños de
San José, Costa Rica de marzo a nOl'iembre de
La cuantificación senea de la teofilina está
indicada cn todos los pacicntes en tratamiento con dicha
droga debido al estrecho rango terapéutico de la misma,
o sea que f<ícilmcnte se puede pasar de un nivel
terapéutico a uno tóxico (2).
Además existen
importantes diferencias farmacoquinéticas entrc cada
individuo especialmente en los niíios (3,4).
1994.
Con la intcnción de facilitar el monitoreo de
esta droga, varios investigadores han estudiado la
validcl de su análisis en saliva y han obtenido resullados
contradictorios (5, 6, 7). El muestreo en saliva es menos
trallmálico. más fácil de recolectar e implica un costo
económico mcnor, si se compara con el muestreo en
sangre.
Pacientes: 45 niños con diagnóstico previo de
asma bronquial tratados con teofilina de acción
prolongada por vla oral.
Resultados: A cada niño se le tomó utla muestra
de sangre venosa y otra de saliva después de haber
recibido el medicamento por an período mínimo
de un mes. Los niveles de broncodilatador en
ambos fluidos se cuantificaron por el método de
inmunoensayo con fluorescencia J' luz polarizada
(FPIA). Se analizaron 90 muestras (2 por cada
niño) y se obtuvo una correlación (1') de 0,97
(p<O,OOI).
Conclusión: Este estudio demuestra que los
niveles de teofilina en !iUliva proveen una
estimación fidedigml de los niveles en sangre, lo
que permite un fácil I1wnitoreo a trcn'és de la
saliva en los niños tl.'illuíticos, sin necesidad de la
punción venosa. (Acta Pedicítrica Costarricense
1995;9:103-105).
En este estudio se evalúa la eonfiabilidad de
delerminar los niveles de teofilina en saliva. ulilizando
el mismo método de inmunoensayo con Ouorescencia y
lul. polarizada (FPIA) que se usa para las
dcterminaciones en sangrc.
MATERIALES Y METOnOS
Durante el periodo de csludio se inclu)cron 45
ninos aSlllúlicos atendidos cn el Servicio de Alergologia
del Hospilal Nacional dc Niíios en Sall José. CosIa Rica,
lratactos con teofilina de acción prolongada (tabletas de
3()() mg. Laboratorios Orion. Holanda) por un periodo
mínimo de un mcs. Sc les solicitó salivar Cll tubos
pl<islicos de ::; mi y Cn la misma risita se les tomó una
mueslra dc 2 mi de sangre ,·cnosa. Lú sangre se
centrifugó a 2500 rpm. (Bcckman T56, California)
durantc cinco minutos y se congeló a -20 oC para su
posterior an¡ílisis. La muestra. de saliva también se
cOllgeló a la misma temperatura, sin· ningún
proccdimicllto dc ccntrifugación.
Palabras claves: teofilina, suero, saliva,
fluorescencia y luz polarizada, niño, asma.
En la actualidad la teofilina cs uno de los
mcdicamentos de mayor uso en el trata miellto del asma
bronquial ya quc es un excelente broncodilatador cuando
sc usa correctamente (1).
La teo1)Iina cn sangre. y cn saliva se
cuantificaron. mediantc el método dc inmunocnsayo con
nnOfesccllcia y Inl. polaril.ada (FPIA. _ Laboratorios
Abboll. . l1Iinois, E.. U. A.). En donde, la leofitina
marcada eon cl nuorógcno compite por los sitios activos
del anticucrpo monodollal con la tcofilina presentc en el
SIlCro del pacicnte. La cantidad dc 1111. nuorcscentc
polarizada emitida es inversamente proporcional a la
cantidad de teofilina prcsentc en la muestra.
Los
(e) Miaobiúlogll y ()Uíllli':ll (,Imi.:o. (ee¡ M~di,o l\-¡Iialnt Akrgólogo.
D~I)¡1I1al\lclllo de Mi<:robiologia y Serl"iál de ,\1.:rgologill. lIuspilal
Na.:iollal de Niños "1).-. Carlos Sa~llz lIerh:ra", I\pilltado 165-1·1000,
Sau José, Cllsla Hi.:a.
103
NIVELES UE TEOFILlNA
resultados se calculan con la ayuda de una curva de
calibración previamente establecida. Todas las
determinaciones
de
teofilina
se
realízaron
exclusivamente por uno de los autores.
donde,
1.45 es la pcndie11le o sea, que cualquier
aumento o disminución del nivel sérico se refleja en
1,45 cn saliva.
Análisis estadístico: Los valores obtenidos en
las muestras de sangre y saliva se analizan usando el
coeficiente de correlación de Pcarson y el método de
regresión linear simple. Se aceptó como significativa
una p < 0.05.
Los coeficientes de variación, muestran que el
método FPIA posec una excelcnte precisión intra c interensayo cuando se rC<lliza en nuestro laboratorio (cuadro
/).
DISCUSION
RESULTADOS
Desde que Ko)'sooko et al (8), introdujeron en
1974, la cuantificación de teofilina en saliva, algunos
<lutores han descrito poca (9-10) Y otros muy bucna
(8.11) correlación. L<ls difcrencias podrían atribuirse a
los diferentes diseños de investigación. Hendeles y col
(9). quien encolllró poca correlación, utilizó en su
estudio a pacientes con cardiopatías crónicas qUlcncs per
se presentan problemas en la absorción, distribución y
eliminación de la drogH. Boobis y Lena (10,12)
recolectaron las muestras de los pacientes a diferentes
tiempos despues de In administración del medicamento.
Sus resultados demostraron que no se puede utilizar un
promedio de la relación de tcofilina suero-saliva cuando
las muestras h:1Il sido tomadas a diferente tiempo.
Se incluyeron 45 nifios para el estudio. 23
fueron varones y 22 fueron mujeres. La edad media de
los pacientes fué 8.8 (DS 5.5) afios. Cada uno aportó dos
muestras para la deterrninaición de teo1ilina, por lo que
se recolectaron 90 muestras en total.
Cr.adro 1: PrecisiólI de las delermú'llcwlIU de teofllina ell mero J'
solivll por FPIA.
lnlra-ensayo (n~ I O)
Medill (OS)
CV (%)*
SUERO
SALIVA
9.5 (0.2)
6.2 (0.12)
Inler-ensayo (n~tO)
Medía (OS)
CV (~ot
/.05
9.6 (3.9)
3.9
1.12
6.S (S.2)
5.2
"r·.. '.'. ,
CV: coeficiente de variación .p = NS
r=
y= 0.04 + 1.45)(
..
".=.0
/"
/"
::f
/.:""
I
'1/" .
o
Debido a estas diferenci<ls, algunos autores
sugieren el uso de saliva estimulada por mecanismos
como: cristalcs de ácido cítrico, algodón y Parafilm®
( 14).
Estc cstudio realizado con saliva no estimulada
demuestra que la cuantificación de teofilina en saliva es
válida para determinar los niveles de este medicamcnto
en sHugre. Si se toma eJ\ ClIcnta que el rango terapéutico
establecido para esta droga es de 4 a 12 ~g/ml en el
suero; mediantc la ccuación de regresión se obticne que
esos valores correspondcn a 2.8 y 8,3 ~glml en saliva.
Por lo tanto podemos inferir de esa detcrminación si el
paciente está con niveles sub o supraterapeúticos, y así
tcner Illl mayor control dc la tcrapéutica del paciente por
un período prolongado, COII poco trauma para el niño y
menos costo económico.
0.97
2
4
6
8
10
I
12
14
16
18
20
SALIVA (ug/mll
GráfICO 1: Corre/adJII elltre los IIÍ1'e/es de tellJllúla ell slI/l,re ."
sa/il'a, media"'e FPIA.
En todas las muestras tomadas se logró
determinar un coeficiente de correlación (r) dc 0.97
(p<O,OO 1). Esto implica que los valores de tcofilina en
sangre y en saliva están <lsociados positivamente, es
decir que un aumento o disminución en las mediciones
de sangre hace que las de sali\'<I Humenten o disminuyan
simultáneamente. La significancia estadística de esta
correlación nos permite utilizar una ecuación de
regresión que lenga valor prcdiclivo. De acuerdo a la
regresión linear simple establecida para la correlación
entre las muestras de saliva y suero:
y
La cuantificación de tcolilina en saliva nos
permite una más fácil oblCllción dc la mucstra. De esta
manera el niíio y la familia estarún IIIÚS anuentes a quc
se moniloreen los niveles terapéuticos dc la droga.
REFERENCIAS
l.
2
= 0,04 + 1.45 x
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Abstract:
Serum vs saliva tlreophy/line levels /lS;"1: jluorescence
polarized inmunoussuy.
Objective: 1'0 determine the corre/atiulI betlt'een the
theophyl/ine serie leve/s versus salil'a using
jluorescence polarized inlllunoassay.
Design: PrO!.pective, control/el! stUl(V.
Si/e: Allergolugy outpatient clillic, Natiolla/ (,hiltlren's
flo.spital in San José, Costa Rica. Tertim:v eare center.
Palients: Belween Atarch a/lll NOI'l'mber J9Y-I, 45
children aJl ages, \Vilo lVere tllklllg slult' re/eased
lheophyl/ine, lI'ere enrolled.
Results: Levels uf theophyl/ine in serllm al/(I salil'l/ \l'ere
compared lIsing Fluorescence polarized i/1/l/lIJ/lias.\'l1Y
(FPIA). We jiJll/1d a correlation M vf V.Y7 (p' IJ.UO/)
jór both samples.
Conclusiol/: Theophyl/ine levels in .\'IIlil'l1 are ill gouc/
corre/alíon with seric levels. This correlation alioli' the
easier 11I0nitoring 01 this broncodillltor ill astll/I/atic
chile/ren, without venous puncture.
Cita bibliográfica de revista: (Recordar que si son m:ís de 6 autores se dcben escribir los tres primeros
seguido de "et al." cj:
2. Pereira P, Pérez U, Román T. Efectos de la USI)irinll sobre el resfrilldo común. J Allcrg 1995;45:345-47.
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