Diversidad y estructura genética en poblaciones Explicada con poblaciones de: Caesalpinia echinata (Lam.) Spreng. Pernambuk, Pau Brasil Zhofre Aguirre Mendoza Existe interés en la conservación y repoblación de esta especie (especie emblemática), debido a aspectos culturales y uso en la fabricación de instrumentos de cuerdas, violín (Carvalho, 1994; Rondon et al, 2003). Para la estrategia de conservación de una especie es importante contar con información sobre: diversidad y estructura genética de las poblaciones de los remanentes (fragmentos), porque las pocas reservas existentes son áreas limitadas y número pequeño de individuos. De acuerdo con Melo et al. (2003), esta condición no es favorable para el mantenimiento de la variabilidad de las especies, ya que son alógamas, autógamas o de reproducción asexual. La conservación de una especie y su uso en el mejoramiento depende de la conservación máxima de la cantidad de germoplasma, por lo que la evaluación de recursos genéticos disponibles es esencial (Brown y Moran, 1981, Moran y Hopper, 1987). En la evaluación de recursos genéticos se debe hacer hincapié en la cantidad y distribución de la variabilidad genética entre y dentro de las poblaciones, así como entre las especies (Hamrick, 1983). ¿Qué es el ADN? ácido desoxirribonucleico El ADN es la sustancia química donde se almacenan las instrucciones que dirigen el desarrollo de un huevo hasta formar un organismo adulto, que mantienen su funcionamiento y que permite la herencia. Es una molécula de longitud gigantesca, que está formada por agregación de tres tipos de sustancias: azúcares, llamados desoxirribosas, el ácido fosfórico, y bases nitrogenadas de cuatro tipos, la adenina, la guanina, la timina y la citosina. Los azúcares y los ácidos fosfóricos se unen lineal y alternativamente, formando dos largas cadenas que se enrollan en hélice. Las bases nitrogenadas se encuentran en el interior de esta doble hélice y forman una estructura similar a los peldaños de una escalera. Se unen a las cadenas mediante un enlace con los azúcares. Cada peldaño está formado por la unión de dos bases, formando los pares de bases anteriormente mencionados; pero estos emparejamientos sólo pueden darse entre la adenina y la timina o entre la citosina y la guanina. Las secuencias - el orden en que se van poniendo- que forman adenina, timina, citosina y guanina a lo largo de la cadena de ADN es lo que determina las instrucciones biológicas que contiene. Constituye el material genético de las células. Que son los genes? Un gen es una secuencia ordenada de nucleótidos en la molécula de ADN (o ARN en el caso de algunos virus), que contiene la información necesaria para la síntesis de una macromolécula con función celular específica, normalmente proteínas. Esta función puede estar vinculada al desarrollo o funcionamiento de una función fisiológica. El gen es considerado como la unidad de almacenamiento de información genética y unidad de herencia al transmitir esa información a la descendencia. Los genes se disponen, pues, a lo largo de ambas cromátidas de los cromosomas ocupando en el cromosoma una posición determinada llamada locus. El conjunto de genes de una especie, y por tanto de los cromosomas que los componen, se denomina genoma. Población Es un conjunto de individuos de la misma especie que viven en un lugar geográfico determinado (nicho ecológico) y que real o potencialmente son capaces de cruzarse entre sí, compartiendo un acervo común de genes (“pool” génico). Genética de Poblaciones, estudia: - La constitución genética de los individuos que componen las poblaciones (frecuencias génicas y genotípicas). - La transmisión de los genes de una generación a la siguiente (gametos=nexos de unión entre una generación y la siguiente). DIVERSIDAD GENÉTICA Es el número total de características genéticas dentro de cada especie. Esta diversidad se reduce cuando hay “cuellos de botella”, es decir, cuando una población disminuye substancialmente y quedan pocos individuos. Mayor diversidad genética, las especies tienen mayores probabilidades de sobrevivir a cambios en el ambiente. Las especies con poca diversidad genética tienen mayor riesgo frente a esos cambios. En general, cuando el tamaño de las Ej. La población de alrededor de 100 poblaciones se reduce, aumenta la cóndores Vultus crispus de los andes reproducción entre organismos del Ecuador, desciende de emparentados (consanguinidad) y hay aproximadamente de 25 sobrevivientes una reducción de la diversidad de la cacería furtiva. La pérdida de genética. diversidad genética de los cóndores del Ecuador ha resultado en problemas La diversidad genética se puede medir reproductivos y de sobrevivencia. utilizando: la diversidad de genes, la heterocigocidad, el número de alelos por locus. VARIABILIDAD GENÉTICA Es una medida de la tendencia de los genotipos de una población a diferenciarse. Los individuos de una misma especie no son idénticos. Si bien, son reconocibles como pertenecientes a la misma especie, existen muchas diferencias en su forma, función y comportamiento. En cada una de las características que se pueda nombrar de un organismo existirán variaciones dentro de la especie. Por ejemplo, la paja toquilla de Manabí son plantas pequeñas de 2 m en promedio y las plantas del oriente miden hasta 3,5 m y sin embargo son la misma especie Carludovica palmata. ESTRUCTURA GENÉTICA Cantidad y distribución de la variación genética dentro y entre poblaciones de una especie. La estructura genética de una población concreta viene determinada por la historia evolutiva de esa población y va a ser consecuencia de las interacciones entre los 5 factores que condicionan la evolución de las poblaciones: mutación, deriva genética, flujo génico, sistema de reproducción y selección natural. Fuerzas evolutivas de las especies Selección Natural Deriva Genética El movimiento de genes de Reducción, perdida drástica Transferencia diferencial de una población de alelos por reducción de la alelos que permite la eficacia Llegan alelos nuevos, se población. fijan, se combinan reproductiva de una Cuando la frecuencia alélica generando nuevos genotipos es cercana a uno, existe población. y serán heterocigotos, menos variabilidad de la entonces aumenta la especie. Reducción del diversidad porque se número de individuos: incorpora variación a la efecto cuello de botella. población Flujo genético Mutación y Recombinación Sistemas de Reproducción Movimiento e Incorporación de alelos en una población. Se da cuando se reproduce y hay replicaciones del ADN, meiosis aquí se derivan e intercambia el ADN en la células reproductoras. Migración Las proteínas a través de las enzimas separan y van organizando los nucleótidos y en este proceso existe equivocación en la unión y se dan las mutaciones. Las mutaciones dañan la descendencia. Sexual, asexual, hagamica. Influye la diversidad genética Plasticidad fenotípica Endogamia Características morfológicas diferentes, pero del mismo genotipo. Se refiere al cruzamiento entre individuos de una misma raza dentro de una población aislada, tanto geográfica, como genéticamente, que lleva paulatinamente a la consanguinidad. Fecundación entre individuos de la misma especie Ejemplo individuos de una misma especie que vive en rocas, una crece en zonas secas y debe adquirir características que le permitan superar esas condiciones ambientales. La medida que, probablemente, es más útil para estimar la diversidad genética dentro de una población es la heterocigosidad (H), que se define como el porcentaje promedio de loci heterocigóticos por individuo (o de manera equivalente, el porcentaje medio de individuos heterocigóticos por locus). Mejoramiento Genético Es el arte y la ciencia de incrementar el rendimiento o la productividad, la resistencia a agentes abióticos y bióticos adversos, la belleza, la calidad o el rango de adaptación de las especies animales y vegetales por medio de los cambios en el genotipo (la constitución genética) de los individuos. Está basada en las leyes de la herencia, la genética cuantitativa y la genética de poblaciones. Fragmentación Tamaño del fragmento Forma del fragmento Distancia entre fragmentos Matriz adyacente del fragmento Perímetro del fragmento Efecto de Borde - Gradientes ambientales - Gradientes biológicas Conectividad e intercambio genético de los individuos de las poblaciones. Uso del suelo alrededor de los parches Principales Causas Extinción 1. Reducción de la población < Flujo genético < variabilidad genética 2. Aislamiento Provoca: Endogamia—> consanguinidad: deriva genética Categorías de conservación de la IUCN: - Considera tamaño poblacional - Deriva genética METODOLOGÍA Poblaciones: Mata do Tapacura (CAM) Mata de Toro (TOR) Reforestación (REF). Poblaciones en bosques exuberante y protegidos, en una matriz de monocultivos intensivos de caña de azúcar en los alrededores de la estación. Efecto de borde!!! Los dos remanentes naturales: CAM y TOR, separados entre sí por 6 km. La población REF se encuentra a 1 km de la población CAM y, las semillas que dieron origen a REF se recogieron de la población CAM. CONECTIVIDAD !!! Muestreo El muestreo de las poblaciones se realizó al azar en árboles jóvenes y adultos, diámetro a 1,30 superior a 2,50 cm. Se muestrearon tejidos de hojas de 20 individuos de cada población, con un total de 60 muestras. Entre las técnicas disponibles para determinar los patrones de la variabilidad genética, mediante marcadores bioquímicos, sobresale la electroforesis de isoenzimas. Las isoenzimas han sido utilizadas con éxito para caracterizar la diversidad genética, el sistema de cruzamiento y la tasa de endogamia (consanguinidad) en poblaciones de diferentes especies (Hamrick y Loveles, 1986; O'Maley y Bawa, 1987). Electroforesis de isoenzimas Para la extracción de enzimas se utilizaron 0,5 g de tejido de la hoja para 1,5 ml de solución extractora (Alfenas et al., 1991). La solución extraída fue absorbida en papel filtro, aplicados en gel, después se inicio la electroforesis. El medio de cultivo fue almidón maíz (penetrose 30) 13 %. Análisis de los datos La interpretación de zimogramas permitió determinar: - Frecuencias alélicas Heterocigosidad observada Diversidad genética esperada no sesgada Número promedio de alelos por locus, porcentaje de locus polimórficos a 95 % de probabilidad (P) - Índice de fijación de Wright (f^). - Divergencia genética entre las poblaciones. Para estas estimaciones fue empleado el programa Biosys 1 (Swofford y Selander, 1989). Con los datos estimados programa Biosys 1, se hiso una matriz de distancias/similitudes genética, de acuerdo con Nei (1978). RESULTADOS Guilandina echinata (Lam.) Spreng. 1. Frecuencias alélicas Las frecuencias alélicas variaron desde una completa fijación (1), caso del alelo A del sistema Got en las poblaciones REF y TOR de frecuencias muy bajas (0,05) como para alelos B del sistema Po-1 de las poblaciones TOR 2. Índices de diversidad El número de alelos por locus promedio fue alto, oscilando entre 2,0 a 2,6 entre las tres poblaciones. El porcentaje de locus polimórficos fue elevado de 83,3 %, demuestra un alto polimorfismo isoenzimático para C. echinata. 3. Heterocigosidad CAM > heterocigosidad (0,475) > Diversidad genética REF heterocigosidad (0,15): homocigosis Los índices observados en TOR pueden ser atribuidos a la aparición de la deriva genética, debido a la reducción aleatoria del tamaño de la población, asociado al aumento del parentesco de la misma. 4. Índices de fijación alélica Bajo para CAM (- 0,015) Alto para TOR (0,416) Muy alto para REF (0,746) 5. Divergencia Genética La > diversidad genética se encuentra dentro de las poblaciones (0,788), aunque hubo una gran variación entre las poblaciones (FST = 0,212). Estos índices muestran que las poblaciones pueden estar aisladas. 6. Similitud entre las poblaciones CAM y REF son más parecidas (0,858). Este valor está de acuerdo con la historia de las dos poblaciones, CAM esta cerca de la sede de la EET, fue utilizada para recolectar semillas para la producción de los árboles, que dieron origen a REF. CAM y TOR (0,75) de similitud, puede ser considerado bajo, tratándose de poblaciones de una misma especie. Por lo tanto, la distancia genética de 0,25 entre las dos poblaciones muestra la necesidad de conservación de ambas, ya que presentan grandes diferencias en las frecuencias alélicas. Altos niveles de diversidad genética son esperados en especies de amplia distribución geográfica y alta diversidad poblacional como C. echinata. Por lo tanto, la amplia distribución geográfica de la especie explica los altos niveles de la diversidad genética observados. CONCLUSIONES Existen altos niveles de variabilidad genética en las poblaciones naturales (CAM y TOR) y en la población de reforestación (REF). Las tres poblaciones de C. echinata (CAM, TOR y REF), existentes en la EET tienen potencial para recolectar semillas para la producción de plántulas, pero REF es menos indicada por presentar mayor tasa de homocigosis. Para representar la variabilidad de las poblaciones en el programa de producción de plántulas, las semillas deben colectarse en las dos poblaciones naturales, ya que no hay divergencia genética alta entre ellas (28 %). La alta divergencia entre las dos poblaciones naturales sugiere que las dos han pasado por efecto de la deriva genética, ya sea por fundición o unión y/o por el efecto de cuello de botella. Tales eventos pueden haber llevado a la estructura genética observada. Es una METAPOBLACIÓN ? Poblaciones pequeñas de una especie que están distribuidas en diferentes parches aislados, que tienen poco intercambio genético y están en riesgo de extinguirse. GRACIAS “Están dentro de ti y dentro de mí; ellos nos crearon, cuerpo y mente; y su preservación es la última razón de nuestras existencia. Esos replicadores han recorrido un largo camino. Ahora se conocen con el nombre de genes y nosotros somos sus máquinas de sobrevivencia” Richard Dawkins (1941“El Gen Egoísta”, 1976