3.- Reacciones antígeno – anticuerpo

REACCIONES ANTÍGENO
ANTICUERPO
CONCEPTO DE ANTÍGENO
Características de los determinantes antigénicos
• Concepto
• Inmunopotencia
• Inmunodominancia
• Determinantes inmunogénicos y hapténicos
Inmunogenicidad:
• Carácter extraño al organismo: XenoAg (distinta
especie), AloAg(misma especie)
Antigenicidad Especificidad
CONCEPTO DE ANTICUERPO
• Origen de los anticuerpos
• Estructura de las inmunoglobulinas: cadenas
ligeras (L) y pesadas (H). Regiones C y V
• Tipos de Inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM,
IgD, IgE.
• Propiedades biológicas
REACCIONES DE INMUNOPRECIPITACION
•
CARACTERISTICAS:
•
* Ag solubles
* Ac de clase IgG
* Reacción poco sensible
* Reacción muy específica
* Intervienen Ac policlonales frente a Ag polivalentes
REACCIONES DE INMUNOPRECIPITACION
MODALIDADES:
* INMUNOPRECIPITACION SIMPLE EN TUBO
* INMUNODIFUSION O INMUNOPRECIPITACION
EN MEDIO SOLIDO
- Inmunodifusion simple: En tubo (Oudin)
En placa o radial (Mancini)
- Inmunodifusión doble en placa (Ouchterlony)
- Inmunoelectroforesis (Grabar y Williams)
- Contrainmunoelectroforesis
- Inmunoelectroforesis en "cohete" (Rocket y Laurel)
- Inmunoelectroforesis bidimensional
Ag Suero pac.
Ag Suero pac.
Diagnóstico serológico de las
infecciones fúngicas.
Contrainmunoelectroforesis frente Ag somático
Candida albicans.
Ag hidatídico
Diagnóstico serológico hidatidosis.
Inmunoelectroforesis frente a Ag hidatídico.
Suero paciente
REACCIONES DE AGLUTINACION
•
CARACTERISTICAS:
•
* Ag particulados generalmente poliantigénicos
* Ac de clase IgM e IgG
* Reacción con Ag superficiales
* Reacción bastante sensible
* Reacción relativamente específica (depende de comunidad Ag)
- Reacciones cruzadas
* Intervienen Ac policlonales frente a Ag polivalentes
REACCIONES DE AGLUTINACION
•
MODALIDADES:
•
* AGLUTINACION DIRECTA
- Cualitativa / Cuantitativa
- En tubo / En porta
•
* AGLUTINACION CRUZADA
•
* AGLUTINACION PASIVA
- Prueba de Coombs directa e indirecta. Ac no aglutinantes
- Hemaglutinación pasiva o indirecta
- Pruebas de látex, bentonita, carbón, etc
- Pruebas de coaglutinación
Dilución
1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 …………………
Testigo
Pacientes
Diagnóstico serológico de tularemia.
20/05/07
Microaglutinación de Francisella tularensis.
Evolución serológica de dos pacientes
04/06/07
06/06/07
12/06/07
17/01/07
23/01/07
25/01/07
13/04/07
Pacientes A B
Dilución
Testigo
1/20
1/40
1/80
1/160
Diagnóstico serológico de hidatidosis.
Aglutinación pasiva de hematíes de cordero
revestidos con Ag hidatídico.
1/320
1/640
1/1280
1/2560
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
REACCION DE FIJACION DEL
COMPLEMENTO
REACCION POSITIVA
Ag y Ac se corresponden  se consume el complemento
Hemolisina + hematies  No lisis por no haber C’
REACCION NEGATIVA
Ag y Ac NO se corresponden  NO se consume el C’
Hemolisina + hematies  LISIS al unir el C’ no consumido
REACCIONES Ag-Ac
Inmunofluorescencia, enzimoinmunoensayo,
radioinmunoensayo
IF
EIA
RIA
CONJUGADO
Fluorocromo
Enzima
+
sustrato
Radioisotopo
(I125)
DETECTOR
Microscopio
Fluorescencia
Espectrofot.
Colorímetro
Fluorímetro
Contador gamma
SENSIBILIDAD
++
++++
+++++
ESPECIFICIDAD
++
+++++
+++++
(depende Ag)
(depende Ag)
Directo (Ag
muestras)
Indirecto (Ac)
Sandwich (Ag)
Captura (Ac)
Directo (Ag muestras)
Indirecto (Ac)
Sandwich (Ag)
Captura (Ac
MODALIDADES
Directa (Ag)
Indirecta (Ac)
IF-EIA-RIA DIRECTO
EIA-RIA CAPTURA
IF-EIA-RIA INDIRECTO
1ª INCUBACION
2ª INCUBACION
REVELADO (EIA)
EIA – RIA SANDWICH
• ANTÍGENOS RECOMBINANTES:
– Concepto
– Características
– Utilidad en el diagnóstico
• ANTICUERPOS MONOCLONALES
– Concepto
– Características
– Utilidad en el diagnóstico
TECNICAS SEROLÓGICAS
UTILIDAD:
* Investigación de anticuerpos (Medicina y veterinaria)
- Contacto previo con un Ag (IgG, A, M, E)
- Inmunidad protectora (IgG)
- Diagnóstico de enfermedad actual o reciente (IgM)
* Investigación de antígenos
- Serotipado microbiano
- Detección de Ag microbianos en productos
- Detección de productos microbianos en cultivos
(Vgr cultivos víricos) (Diagnóstico directo)
- Investigación básica y en Biología Molecular
- Medicina Forense
- Alimentación
etc.